Nghiên cứu vi khuẩn sinh bacteriocin từ thực phẩm lên men

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU

1.1. Mục đích

1.2. Yêu cầu

2. PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Tổng quan về vi khuẩn lactic (Lactic Acid Bacteria - LAB)

2.2. Đặc điểm hình thái của vi khuẩn lactic

2.3. Đặc điểm di truyền của vi khuẩn lactic

2.4. Tổng quan về bacteriocin

2.4.1. Lịch sử nghiên cứu và phát triển

2.4.2. Giới thiệu về bacteriocin

2.4.3. Phân loại bacteriocin được sinh tổng hợp bởi LAB

2.4.4. Các tính chất của bacteriocin

2.4.5. Cơ chế tổng hợp bacteriocin

2.4.6. Cơ chế hoạt động của bacteriocin

2.4.7. Ứng dụng của bacteriocin

2.4.8. Thực trạng nghiên cứu về bacteriocin trên thế giới

2.4.9. Thực trạng nghiên cứu về bacteriocin tại Việt Nam

3. PHẦN III: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu

3.2. Đối tượng nghiên cứu

3.3. Dụng cụ, thiết bị và hóa chất

3.4. Môi trường sử dụng trong nghiên cứu

3.5. Nội dung nghiên cứu

3.6. Phương pháp nghiên cứu

3.6.1. Phương pháp thu thập mẫu

3.6.2. Phương pháp phân lập

3.6.3. Phương pháp giữ giống vi khuẩn (Lương Đức Phẩm, 2015)

3.6.4. Phương pháp khảo sát khả năng sinh bacteriocin đối kháng với vi khuẩn kiểm định

3.6.5. Phương pháp xác định bản chất yếu tố kháng khuẩn (Marwa et al.)

3.6.6. Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm của các chủng vi khuẩn được chọn lọc

3.6.7. Phương pháp xử lý số liệu

4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1. Phân lập các chủng vi khuẩn lactic

4.2. Đánh giá khả năng sinh bacteriocin đối kháng với vi khuẩn kiểm định

4.3. Xác định cơ chế đối kháng

4.4. Xử lý với enzyme proteinase K

4.5. Đánh giá độ bền nhiệt của bacteriocin

4.6. Nghiên cứu một số đặc điểm của các chủng vi khuẩn được chọn lọc

4.7. Đánh giá khả năng di động

4.8. Đánh giá khả năng sinh acid lactic

4.9. Ảnh hưởng của thành phần môi trường nuôi cấy đến khả năng sản xuất bacteriocin của các chủng vi khuẩn

5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về nghiên cứu vi khuẩn sinh bacteriocin từ thực phẩm lên men

Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn lactic có khả năng sinh bacteriocin từ thực phẩm lên men. Bacteriocin là các peptide hoặc protein kháng khuẩn được tổng hợp bởi vi khuẩn, có tiềm năng ứng dụng trong bảo quản thực phẩm. Mục tiêu của nghiên cứu là giảm thiểu tổn thất sau thu hoạch và cải thiện chất lượng thực phẩm thông qua việc sử dụng các chất bảo quản tự nhiên. Nghiên cứu được thực hiện tại Học viện Nông nghiệp Việt Nam, với sự hướng dẫn của các chuyên gia trong lĩnh vực công nghệ sinh học.

1.1. Mục đích và yêu cầu của nghiên cứu

Mục đích chính của nghiên cứu là phân lập các chủng vi khuẩn lactic từ thực phẩm lên men có khả năng sinh bacteriocin, hướng tới ứng dụng trong bảo quản thực phẩm. Yêu cầu cụ thể bao gồm việc phân lập từ 10-15 chủng vi khuẩn và tuyển chọn 2-3 chủng có khả năng sinh bacteriocin hiệu quả. Nghiên cứu này nhằm đáp ứng nhu cầu cấp thiết trong việc tìm kiếm các chất bảo quản tự nhiên, an toàn cho sức khỏe con người.

II. Tổng quan về vi khuẩn lactic và bacteriocin

Vi khuẩn lactic (LAB) là nhóm vi khuẩn quan trọng trong quá trình lên men thực phẩm, sản xuất acid lactic và các hợp chất kháng khuẩn như bacteriocin. Bacteriocin là các peptide kháng khuẩn được tổng hợp bởi vi khuẩn, có khả năng ức chế sự phát triển của các vi khuẩn gây bệnh. Nghiên cứu này tập trung vào việc khai thác tiềm năng của bacteriocin trong việc bảo quản thực phẩm, thay thế các chất bảo quản hóa học độc hại.

2.1. Đặc điểm hình thái và di truyền của vi khuẩn lactic

Vi khuẩn lactic bao gồm các chi như Lactobacillus, Streptococcus, và Leuconostoc, với đặc điểm chung là Gram dương, không hình thành bào tử và kỵ khí tùy ý. Chúng có khả năng lên men carbohydrate để sản xuất acid lactic và các sản phẩm phụ khác. Bộ gen của vi khuẩn lactic có hàm lượng GC thấp và chứa các gen mã hóa cho các enzyme liên quan đến quá trình lên men và sản xuất bacteriocin.

2.2. Cơ chế tổng hợp và hoạt động của bacteriocin

Bacteriocin được tổng hợp trong giai đoạn đầu phát triển của vi khuẩn, thông qua các cụm operon trong bộ gen hoặc plasmid. Cơ chế hoạt động của bacteriocin bao gồm việc gây rối loạn màng tế bào của vi khuẩn đích, dẫn đến sự mất cân bằng ion và tiêu diệt tế bào. Bacteriocin có phổ kháng khuẩn rộng, từ các vi khuẩn cùng loài đến các chi khác nhau, làm cho chúng trở thành ứng cử viên tiềm năng trong bảo quản thực phẩm.

III. Phương pháp nghiên cứu và kết quả

Nghiên cứu được thực hiện bằng cách phân lập các chủng vi khuẩn lactic từ 12 mẫu thực phẩm lên men như cà, cải bẹ, và cải thảo. Các chủng vi khuẩn được đánh giá khả năng sinh bacteriocin thông qua các phương pháp như xử lý với enzyme proteinase K và đánh giá độ bền nhiệt. Kết quả cho thấy 12 chủng có khả năng đối kháng với Salmonella và Escherichia coli, trong đó 5 chủng được xác định có khả năng sinh bacteriocin.

3.1. Phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn

Quá trình phân lập được thực hiện trên môi trường MRS agar bổ sung CaCO3, thu được 18 chủng vi khuẩn lactic. Các chủng này được đánh giá khả năng đối kháng với vi khuẩn kiểm định, và 12 chủng cho thấy hoạt tính kháng khuẩn. Sau khi xử lý với proteinase K, 5 chủng được xác định có khả năng sinh bacteriocin.

3.2. Đánh giá hoạt tính bacteriocin

Hoạt tính bacteriocin được đánh giá dưới các điều kiện nhiệt độ khác nhau (30°C đến 100°C). Kết quả cho thấy chủng DD2.1 có hoạt tính ổn định và cao nhất. Chủng này cũng được đánh giá khả năng sản xuất bacteriocin trong các điều kiện môi trường nuôi cấy khác nhau, cho thấy tiềm năng ứng dụng trong bảo quản thực phẩm.

IV. Kết luận và kiến nghị

Nghiên cứu đã thành công trong việc phân lập và tuyển chọn các chủng vi khuẩn lactic có khả năng sinh bacteriocin từ thực phẩm lên men. Các chủng này có tiềm năng ứng dụng trong bảo quản thực phẩm, giảm thiểu tổn thất sau thu hoạch và cải thiện chất lượng thực phẩm. Nghiên cứu cũng đề xuất các hướng phát triển tiếp theo, bao gồm việc tối ưu hóa quy trình sản xuất bacteriocin và ứng dụng thực tế trong ngành công nghiệp thực phẩm.

Khóa luận tốt nghiệp: Phân lập và tuyển chọn vi khuẩn sinh bacteriocin từ thực phẩm lên men