Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPR/Cas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03 và GmGOLS19 trên cây đậu tương nhằm giảm lượng đường raffinose

Chuyên ngành

Công nghệ sinh học

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

Luận án tiến sĩ

2022

119
0
0

Phí lưu trữ

30.000 VNĐ

Mục lục chi tiết

LỜI CAM ĐOAN

1. MỞ ĐẦU

1.1. Tính cấp thiết của đề tài

1.2. Mục tiêu của đề tài

1.3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài

1.4. Những đóng góp mới của luận án

2. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Vật liệu nghiên cứu

2.2. Nội dung nghiên cứu

2.3. Phương pháp nghiên cứu

2.3.1. Thiết kế vector chuyển gen mang hệ thống CRISPR/Cas9

2.3.2. Cảm ứng rễ tơ thông qua vi khuẩn A.

2.3.3. Kiểm tra sự có mặt và biểu hiện của gen chỉ thị và gen chọn lọc trong rễ tơ đậu tương

2.3.4. Xác định và phân tích đột biến định hướng trên các gen đích của các dòng rễ tơ đậu tương

2.3.5. Chuyển gen tạo cây đậu tương mang cấu trúc CRISPR/Cas9

2.3.6. Phương pháp trồng và chăm sóc cây đậu tương trong điều kiện nhà lưới

2.3.7. Phân tích sự di truyền của đột biến định hướng và gen chuyển các dòng đậu tương chỉnh sửa gen

2.3.8. Kiểm tra độ nảy mầm của hạt

2.3.9. Xác định thành phần hạt

2.3.10. Phân tích các đột biến ngoài mục tiêu (off target)

2.3.11. Phân tích thống kê

3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1. Thiết kế hệ thống chỉnh sửa CRISPR/Cas9 nhằm gây tạo đột biến các gen GmGOLS trên đậu tương

3.2. Kiểm tra hoạt động của cấu trúc chuyển gen và chỉnh sửa gen CRISPR/Cas9 thông qua hệ thống cảm ứng rễ tơ

3.2.1. Phát triển hệ thống cảm ứng tạo rễ tơ trong điều kiện in vitro trên một số giống đậu tương

3.2.2. Kiểm tra hoạt động của cấu trúc chỉnh sửa gen CRISPR/Cas9 trên các dòng rễ tơ

3.3. Tạo cây đậu tương đột biến gen mã hóa Galactinol synthase

3.3.1. Tạo cây đậu tương chuyển gen thông qua vi khuẩn A.

3.3.2. Sàng lọc cây chuyển gen bằng phết thuốc diệt cỏ và PCR

3.3.3. Xác định và phân tích các đột biến gen thu được trên cây đậu tương chuyển gen T0

3.3.4. Sàng lọc các dòng đậu tương chỉnh sửa gen qua các thế hệ T1 và T2

3.3.4.1. của giống Marverick

3.3.5. Phân tích sinh trưởng phát triển và thành phần hạt của các dòng đậu tương mang đột biến định hướng

3.3.5.1. Phân tích sinh trưởng, phát triển và hình thái của các dòng đậu tương mang đột biến
3.3.5.2. Phân tích khả năng nảy mầm của các dòng đột biến gen
3.3.5.3. Phân tích thành phần của hạt của các dòng đậu tương mang đột biến

3.4. Kiểm tra đột biến ngoài định hướng và lựa chọn dòng đột biến tiềm năng không mang gen chuyển

3.4.1. Phân tích đột biến ngoài mục tiêu (off target)

3.4.2. Xác định các đột biến đồng hợp tử không mang gen chuyển

3.5. Hiệu quả của hệ thống cảm ứng tạo rễ tơ trên các giống đậu tương Việt Nam

3.6. Chọn trình tự mục tiêu trong thiết kế cấu trúc chỉnh sửa gen trên đậu tương

3.7. Khả năng xuất hiện đột biến định hướng muộn thông qua hệ thống chỉnh sửa gen CRISPR/Cas9

3.8. Đột biến gen GmGOLS và sự nảy mầm của hạt đậu tương

3.9. Đột biến gen GmGOLS ảnh hưởng đến sự thay đổi của hàm lượng cacbohydrat có trong hạt

3.10. Tiềm năng trong chọn tạo giống đậu tương thông qua hệ thống chỉnh sửa hệ gen

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

Luận án tiến sĩ nghiên cứu ứng dụng công nghệ crispr cas9 trong tạo đột biến gen gmgols03 gmgols19 trên cây đậu tương glycine max l merrill nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt

Bạn đang xem trước tài liệu:

Luận án tiến sĩ nghiên cứu ứng dụng công nghệ crispr cas9 trong tạo đột biến gen gmgols03 gmgols19 trên cây đậu tương glycine max l merrill nhằm giảm lượng đường họ raffinose trong hạt

Tài liệu "Nghiên cứu ứng dụng công nghệ CRISPR/Cas9 trong tạo đột biến gen GmGOLS03 và GmGOLS19 trên cây đậu tương để giảm đường raffinose" trình bày một nghiên cứu quan trọng về việc ứng dụng công nghệ chỉnh sửa gen CRISPR/Cas9 nhằm tạo ra các đột biến gen trong cây đậu tương. Mục tiêu chính của nghiên cứu là giảm hàm lượng đường raffinose, một loại đường có thể gây khó khăn cho tiêu hóa ở người và động vật. Việc giảm đường raffinose không chỉ giúp cải thiện giá trị dinh dưỡng của cây đậu tương mà còn nâng cao khả năng tiêu thụ của sản phẩm này trên thị trường.

Nghiên cứu này mang lại nhiều lợi ích cho độc giả, đặc biệt là những ai quan tâm đến công nghệ sinh học và nông nghiệp hiện đại. Nó mở ra hướng đi mới trong việc cải thiện giống cây trồng, đồng thời cung cấp kiến thức về ứng dụng công nghệ gen trong sản xuất nông nghiệp.

Nếu bạn muốn tìm hiểu thêm về các ứng dụng công nghệ sinh học trong nông nghiệp, hãy tham khảo các tài liệu liên quan như Luận văn thạc sĩ nghiên cứu ứng dụng chế phẩm sinh học pseudomonas trong sản xuất hồ tiêu tại tân sơn thành phố pleiku tỉnh gia lai, nơi nghiên cứu về chế phẩm sinh học trong sản xuất nông sản, hoặc Luận án nghiên cứu sử dụng chế phẩm vi khuẩn có ích bacillus trong sản xuất lạc ở quảng nam, tài liệu này cung cấp cái nhìn sâu sắc về việc ứng dụng vi khuẩn có ích trong nông nghiệp. Bạn cũng có thể tham khảo Luận văn thạc sĩ nghiên cứu khả năng tái sinh in vitro của một số giống đậu dải cowpea vigna unguiculata l phục vụ cho tạo giống mới để hiểu thêm về các phương pháp nhân giống cây trồng hiện đại. Những tài liệu này sẽ giúp bạn mở rộng kiến thức và khám phá thêm nhiều khía cạnh thú vị trong lĩnh vực nông nghiệp và công nghệ sinh học.