DAI hOc QUOc GIA hA TOI TTƠ|ỜIG ĐẠI hỌc Kh0A hỌc TỰ HhIÊN TTẢIH DANG TUAN HGHIÊNH cỨU XÁc ĐỊNh 0XALAT TT0IG MẪU ThỰc PhÄM bAIIG PhŒ|ƠIG PhÁP ĐIỆN DI MA0 QUẢI SỬ DỤNG DETEcT0T Ð0 ĐỘ DÂN KhÔNG TIẾP Xúc LUẬN VĂN ThẠc SĨ Kh0A hỌc Hà Nội —- 2015 DAI hOc QUOc GIA hA TOI TTƠ|ỜIG ĐẠI hỌc Kh0A hỌc TỰ HhIÊN TTẢIH DANG TUAN HGHIÊNH cỨU XÁc ĐỊNh 0XALAT TT0IG MẪU ThỰc PhÄM bAIIG PhŒ|ƠIG PhÁP ĐIỆN DI MA0 QUẢI SỬ DỤNG DETEcT0T Ð0 ĐỘ DÂN KhÔNG TIẾP Xúc chuyên ngành: hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN ThẠc SĨ Kh0A hỌc TIGG|OI hG|GMG DATI KHOA Oc: TS. IIGUYETI Th] Ath hG|OIIG Hà Nội —- 2015 LỜI cẢM ƠI Sau mội thời gian nghiên cứu và học lập lôi đã h0àn thành luận văn ca0 học của mình với đề tài: -Ighiên cứu xác định 0xalale Ong mau thực phẩm bằng phơiơng pháp điện đi ma0 quản sử dụng delecl0r đ0 độ dẫn không liếp xúc| đojới sự hojớng dẫn của TS. Hguyễn Thị Ánh hơjờng và các thầy cô, anh chị, đạn lr0ng bộ môn hóa phân lích. Với lòng kính lrọng và siết ơn sâu sắc lôi xin chân thành cảm ơn TS.
Hguyễn Thị Ánh hơjờng ngơời đã gia0 đề lài và lận lình chỉ dẫn lôi lr0ng quá trình h0àn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn công †y 3Sanalysis và đối tác lại Kh0a hóa học, Trơiờng Đại học basel, Thụy sĩ đã thiết kế lắp dit và hỗ trợ các trang thiết sị cũng nho loi vẫn kỹ thuật tr0ng quá trình thực hiện nghiên cứu này. Tôi xin chân thành cảm ơn các Thầy cô lr0ng bộ môn hóa Phân lích nói riêng và lr0ng kh0a hóa học nói chung đã dạy dỗ, chỉ :ả0 và động viên lôi lr0ng thời gian học lập lại trolòng Đại học Kh0a học Tự nhiên hà lội. Tôi xin cảm ơn sinh viên IIguyễn Thị Minh hòa, lớp k57T Tài năng hóa, sinh viên IIguyễn Thị Liên, lớp K56A hóa học đã hỗ trợ lôi Ong qua tinh nghiên cứu.
cuối cùng, lôi xin gửi lời cảm ơn gia đình, các sạn học viên và sinh viên sộ môn hóa phân lích đã giúp đỡ lôi tr0ng thời gian học lập và nghiên cứu này. hà lội, ngày 24 tháng 10 năm 2015 học viên Trần Đăng Tuấn 90527100075 .Ò 1 chŒ|ƠIIG 1: TỎIIG QUAII.2-2£©2©++2EE++2EE++2EEE+2EE+vEEEveEExrerrrrerrerrrkx 2 1. _ Giới thiệu chung về các chất phụ gia thực phẩm. Giới thiệu chung về phụ gia thực phẩm.
Phân lUại phụ gia thực phẩm. Phân lOại the0 ngu gỐC. ¿5+ 552 2SS2kEEEE21,E2121112112211211 211 xe 2 1. Phân 10d: He 146 MUNG.
«5 kg HH nghi 2 1. Lợi ích và lác hại qia phụ gia thực phẩm. Thông ln chung về 0xalate, larirale và cÏlrale. Ứng dụng và lác hại của các 0xalale, larlrale và cilrale.
Van dé sir dung Oxalate, tartrate va citrate trén thé gidi va 6 Viét am. Vấn đề sử dụng Oxalate, lazlzale và dizale tzên thế giới. Vấn đề sử dụng (0xalale ở Việt ÏÏAim. các phơJơng pháp xác định 0xalale, larirale và cilrale.
Phưương pháp sắc ký lỏng hiệu năng œ0 (hPL©). Phương pháp Phưgơng pháp sắc ký khí khối phổ (Ge-MS). Phưyơng pháp sắc ký Ì(ÚH. đácphơJơng pháp điện di HA) QUẲNH.
PhơJơng pháp điện di ma0 quản 12 J7. nan hố ốố. Dung dịch đệm ph và pha động te0ng phưong pháp điện di ma0 quản. Iguỗn điện thỂ đa(.
Kỹ thuậi sơm mẫu l20ng phagơng pháp điện di ma( quản. Phojơng pháp điện di ma0 quản sử dụng delecl0r đ0 độ dẫn không liếp xúc. 17 chd|ƠIIG 2: ThỰc IIGhIỆM. Mục liêu và nội dung nghiên cứu 19 2.
Mục liêu HghiÊH CỨU. 5-5 << nh HH HH ghen 19 2. Hội dung nghiÊH CứU. 5-5 Ăn HH HH HH ngan gen 19 2.
PhơJơng pháp xử lý mẫu 19 2. hóa chất và thiết pi 20 DBD. hóa chải dung môi. 52-552 SSeSCk2SEkEEkE2122122111211211211211 211 Xe 20 2.
chuẩn oj đác dụng dịch hóa chái.-osccccc c2 se 21 by ng an nhanh". các lhông số đánh giá độ lin cậy của phơiơng pháp phân lích. Giới hạn phát hiện và giới hạn định ldiợng qia phơJơng pháp phân tích 23 2. Độ chụm của phoJơng p hái/).
Độ đúng da phoJơng p hú,/).--«- <5 << ng nghe rg 24 chd|ƠNG 3: KÉT QUÁ VÀ ThẢ0 LUẬTH. IIghiên cứu kbả0 sá!1ối ơịu điều kiện phân ích:. Khá0 sát ảnh hoyởng đủa hệ đệm. Khá0 sát ảnh hoéng aia thoi gian vom mau va chiéu ca0 vom mau.
Khá0 sát ảnh hoyởng da thế lách. Khá0 sát aíc chất ảnh hdjởng. Đánh giá phơJơng pháp phân lích 32 3. Lập đoyờng ChuẨh.ce-ccseccceeecxetErketErketErketkrittriikrkiirrkrsrkrsrkerske 32 Giới hạn L0D, L0Q đủa phoJơng pháp.
«55c ‡seseeeeseseeeesesee 36 Đánh giá độ chụm (độ lặp lại) độ đóng (độ thu hồi). 37 Phân ích mẫu thực lễ 4I Phân lích mẫu bia.---------ccccees<SSEEE+eeeittkkEkkiiiirrkiririie 4I Phân lích mẫu mì gÓi.-cccccceecxetErketErkettrtettriittriittriisrkrrrkrsrkerske 45 Phân tích mẫu tà túi lọc lipl0n (lsà lái đây, vị dâu).----e-e-s 46 Phân tích mẫu ngiớc lsà khô vỉa hè .-cccsccceeressereeserkererkerrre 46 Phân lích đối chứng phơiơng pháp cE-c*D với phơjơng pháp hPLc.47 DAITh MỤCc TÀI LIỆU ThAM KhhẢO.- 2-5-5552 E£EE2EE+EEeEEEeEEerkerrerrxee 50 DAHh MỤCc cÁc bẢIG bảng L. cic chat thqong ding lam pha déng t20ng cE va gid tei pK aia ching.1 KếI quả khảO sái ảnh hgéng aia ph dén dién lich pic (Spid va thoi gian di chuyén (Lac) Ua 0xalale, laeleale và GiÌ2@Ï@.--- << + ++++V++sVE+s+s+zx+s 28 bảng 3.2 KếI quả khả0 sái ảnh haéng aia thé dién di dén dién ich pic (Spid va thoi gian di chuyén (lac) Cha Oxalate, tazt2abe VA điÌ2qÏe. Sự phụ thuộc diện lích pic và0 nông d6 Oxalate, taeleate, cileate.
Phaơng taình đgòng chuẩn đa 0xalale, lazleale và đlale. Kél quả s0 sánh giữa gid tzi a v6i gid tzi 0 aia phqong teinh dqong chuẩn 0xalale, laelzale, đl2ql@. 5c St St SE E111 xe. Giới hạn phái hiện 0xalale, laelzale và dleale sằng phương pháp điện di ma0 quản €E-CÍT.ccct ctSx+rtvhrHHTHHHH 22211111111 ree 36 bảng 3.
Giá leị khUảng luyễn tinh va LOD, LOQ cua Oxalate, taelzate, cilzate. Kél qua xdc dinh dé lap lai aia phqong phdp cE-CD te0ng dinh lqgong Bang 3. Kél qua xác định độ lặp lại đa phương phdp cE-c'D te0ng dinh lqong ÍI2Ì2QÏ€. HT HT TH TT TH Tà TH HT TH TT HT TT TT TT TT TH 38 bảng 3.
Kết quả xác định độ lặp lại aia phqjong phdp cE-CD lz0ng dinh Iqong Ï2QÏ€. SÁT HH TH HH TH HT TH TH TT TH TT TT TH TT TH TT HT HH0 it 38 bảng 3. Kết qua khd0 sdt dé ding aia phqong pháp dựa lên thêm chuẩn 0xalale bảng 3. Kết quả kháO sái độ đúng qìa phaơng pháp dựa lên thêm chuẩn ÍI2Ì2QÏ€.
HT HT TH TT TH Tà TH HT TH TT HT TT TT TT TT TH 40 Bang 3. Kél qua kha0 sdt dé ding aia phqong phdp dya tzén thém chuẩn dizale bảng 3. Thông lin va dc diém aia beng lO: Bid oeeceesscesscesseesssesssessessessssssesssee 41 Bang 3. Két qua xde dinh ham lqong aic chal Oxalate, dlzale le0ng mội số mẫu bia bảng 3.
S0 sánh kết quả phân lích đối chứng hàm lgợng 0xalale, dleale và lazleale LeOng Ma My TOM eessecsssescssscsssescssessssessssecsssssssesssssssssessssecsssessecessecesseees 48 DAHh MỤC cÁc hillh hình 1.1 Sơ đồ phân lích hệ điện di ma0 quản .2 Mặt cắt ngang của ma quản.3 Lớp điện tích kép trên sề mặt ma0 quản.4 Ảnh hojởng của dòng E0F đến lóc độ của các i0n tr0ng quá trình điện di 14hình I.5 các kĩ thuật cơm mẫu lr0ng phơjơng pháp điện đi ma0 quản .6 Iguyên lý h0ại động của cảm siến đ0 độ dẫn không liếp xúc.7 So dé siêu diễn cấu trúc (A) và mạch điện lotơng đoJơng (b) của cảm biến đ0 độ dẫn không liẾp XÚC .-- 2: 22:©22222++22EEE2EEEEEEEEEEEEEExrrrkrerrrrerrvee 18 hình 2.1 hệ thiết sị điện di ma0 quản cE-cˆD tự chế, sán tự động.1 Điện di đồ khả0 sát ảnh hojởng của thành phần đệm.2 Điện di đồ khả0 sát ảnh hojởng của chất h0ạ! hóa bề mặt.3 Điện di đồ khả0 sát ảnh hơiởng của ph.4 Điện di đồ khả0 sá! thời gian sơm mẫu.5 Điện di đồ khả0 sát chiều ca0 bơm mẫu.-- 2-2 2 s22 £+£xe£Ee2ceeẻ 30 hình 3.6 Điện di đồ khả0 sát thế điện di.---- ¿22 s+x+EE+EEeEEt+Exerkerrerkee 31 hình 3.7 Điện di đồ khả0 sát chất ảnh hơjởng.8 Đơjờng chuẩn của 0xalale the0 diện lích pic.-----cccc-ccsc2 34 hình 3.9 Đơiờng chuẩn của larirale †he0 diện lích pic.-----:--¿-©c5cc5sc2 34 hình 3.10 Đojờng chuân của cilrale the0 diện lích pic.----:--¿©25cc5sc2 34 hình 3.11 Điện di đồ phân ích I-0xalale, 2-larirale, 3-cilrale lr0ng mẫu sia chai hà Hội và mẫu sia l0n hà Hiội. 22: ©222cc22E2E%2t2EEEE1E1222211111222211E2222Eecrez 43 hình 3.12 Điện di đồ phân tich 1-Oxalate, 2-tartrate, 3-citrate trOng mau bia 10n halida va mau bia Chai Sai Gor Special .13 Điện di đồ phân tích 1-Oxalate, 2-tartrate, 3-citrate trOng mẫu bia lŨn Talker oe.14 Điện di đồ phân tích I-0xalale, 2-tartrate, 3-citrate trOng mau my tôm hả0 hả0 và mẫu mỳ tôm ba Min.- 2: 2£ SE 2E 2EE2EEC2EX22212221222xze, 46 hình 3.15 Điện di đồ phân tích 1-Oxalate, 2-tartrate, 3-citrate trOng mau trà lúi lọc Lipl0n và mẫu trà khô vỉa hè. 47 DAHh MỤCc bÁIIG VIẾT TAT Tên viết tắt Tên đầy đủ Ace Acetic Arg L- arginine cD Delecl0r đ0 độ dẫn kết nối kiểu tụ điện cE Phojơng pháp điện di ma0 quản chES AxIl 2-(cycl0hexylamin0) ethanesunlf0mic cTAb cetyl trimethyl amOnium br0mide EOF Dòng điện di thâm thấu Gc Sắc ký khí his histidine hPLc Sắc ký lỏng hiệu năng ca0 Lạ chiều dài hiệu dụng của ma0 quản Làm Tổng chiều dài ma0 quản L0D Giới hạn phái hiện L0Q Giới hạn dinh lojong Me0h Methan0Il MEKc Điện di ma0 quản điện động học Mixen MES axil 2-(II-m0rph0nlin0)e†hane sulf0ric PGTP Phụ gia thực phẩm %I'SD % độ lệch chuẩn loJơng đối SD Độ lệch chuẩn UPLc Sắc ký lỏng siêu hiệu năng TAPS Axit IT- [ris(hydr0xylmetyl)metyl]- 3- amin0pr0pansunph0mIc MO DAU hiện nay, lnh hình an 10am vé sith thyc pham 6 nojéc ta dang rat đojợc quan lâm, với nhiều vụ ngộ độc lập thể xảy ra hàng l0ạ† và ở nhiều khu vực khác nhau. có nhiều nguyên nhân dẫn đến mắt an 10àn thực phẩm, lr0ng đó có nguyên nhân xuất phát lừ việc sử dụng các chất phụ gia thực phẩm.
Gần đây, doi luận đặc biệt quan lâm đến sự xuất hiện của 0xalale lr0ng một số sản phẩm †hực phẩm nhơi bia, mỳ lôm,.gây ảnh hojởng xấu lới sức khỏe ngojời sử dụng. The0 các nghiên cứu, 0xalale là một lr0ng những lác nhân chính gây nên bệnh sỏi thận [12, 23] dO lạ0 kết tủa với các i0n kim lOại nho magie, canxi. cong voi Oxalate, axi† lojơng ứng của larlrale, cirale là những chất phụ gia thực phẩm †thojờng xuất hiện đồng thời tr0ng nhiều l0ại thực phẩm. Sự xuất hiện của cirale đồng thời với 0xalale sẽ làm giảm nguy cơ hình thành sỏi thận d0 citrate có khả năng ức chế quá trình kết linh hình thành canxi Oxlate [13].
Vì vậy, ng0ài việc phân tich, kiém tra ham long Oxalate, quy trimh sé két hop phan tich, kiểm tra xác định đồng thời hàm lojong cua tartrate va citrate trOng mau thu pham. có nhiều phoJơng pháp khác nhau đề xác định hàm lojợng các chất 0xalale, tartrate, citrate mho: sac kí lỏng hiệu năng ca0 (hPLc), phojơng pháp sắc ký khối phổ (Gc-MS), sắc ký i0n [13, 15],.