Nguyễn Quang Tùng: Xác định Atropin và Scopolamin trong thực phẩm chức năng bằng kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ

• Tác giả: Nguyễn Quang Tùng
• Người hướng dẫn: ThS. Bùi Cao Tiến
• Trường học: Trường Đại học Dược Hà Nội
• Chuyên ngành: Hóa phân tích và Kiểm nghiệm thuốc
• Đề tài: Xác định Atropin và Scopolamin trong thực phẩm, thực phẩm chức năng bằng kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ
• Loại tài liệu: Khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2023
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CẢM ƠN
• 1. ĐẶT VẤN ĐỀ
• 2. TỔNG QUAN VỀ ATROPIN VÀ SCOPOLAMIN
• 2.1. Giới thiệu chung
• 2.2. Định danh và tính chất vật lý hóa học
• 2.3. Các quy định hiện hành về ngưỡng cho phép của TA
• 2.4. Các phương pháp phân tích xác định atropin và scopolamin
• 2.4.1. Các nghiên cứu xác định atropin và scopolamin trên thế giới
• 2.4.2. Tổng quan về phương pháp LC-MS/MS
• 3. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Đối tượng nghiên cứu
• 3.2. Nguyên vật liệu, thiết bị sử dụng trong nghiên cứu
• 3.2.1. Chất chuẩn, hóa chất và thiết bị
• 3.2.2. Thiết bị và dụng cụ
• 3.3. Nội dung nghiên cứu
• 3.3.1. Các dung dịch chuẩn và thử dùng trong phân tích
• 3.3.2. Khảo sát các điều kiện LC – MS/MS
• 3.3.3. Khảo sát quy trình xử lý mẫu
• 3.3.4. Khảo sát ảnh hưởng của nền
• 3.3.5. Thẩm định phương pháp
• 3.3.6. Áp dụng phương pháp phân tích các mẫu thực trên thị trường
• 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 4.1. Xây dựng quy trình phân tích bằng LC – MS/MS
• 4.1.1. Khảo sát điều kiện phân tích
• 4.1.2. Khảo sát quy trình xử lý mẫu
• 4.1.3. Đánh giá ảnh hưởng của nền mẫu
• 4.2. Thẩm định phương pháp phân tích
• 4.2.1. Độ phù hợp hệ thống
• 4.2.2. Giới hạn định lượng, giới hạn phát hiện
• 4.2.3. Đường chuẩn và khoảng tuyến tính
• 4.2.4. Độ chụm và độ đúng
• 4.3. Kết quả phân tích mẫu thực
• 4.3.1. Về xây dựng quy trình phân tích
• 4.3.2. Về thẩm định phương pháp
• 4.3.3. Về kết quả phân tích
• 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC
• A1. DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
• A2. DANH MỤC CÁC BẢNG
• A3. DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ

I. Giới thiệu về Atropin và Scopolamin

Atropin và Scopolamin là hai hợp chất thuộc nhóm Tropan alcaloid, thường được tìm thấy trong các loại thực vật thuộc họ Solanaceae. Chúng có cấu trúc hóa học đặc trưng với vòng tropan, gồm vòng pyrrolidin và piperidin. Cả hai chất này đều có tác dụng dược lý mạnh, đặc biệt là khả năng ức chế hệ thần kinh phó giao cảm. Atropin thường được sử dụng trong y học để điều trị các bệnh liên quan đến tim mạch và hô hấp, trong khi Scopolamin có tác dụng an thần và chống nôn. Tuy nhiên, việc sử dụng quá liều có thể gây ra các triệu chứng ngộ độc nghiêm trọng, bao gồm mê sảng, ảo giác và thậm chí tử vong.

1.1. Cấu trúc hóa học

Cấu trúc hóa học của Atropin và Scopolamin bao gồm vòng tropan, với các nhóm chức khác nhau quyết định tính chất dược lý của chúng. Atropin là một este của acid tropic và tropin, trong khi Scopolamin có thêm một vòng epoxide, làm tăng tính ổn định và khả năng thẩm thấu qua hàng rào máu não.

1.2. Tác dụng dược lý

Cả Atropin và Scopolamin đều có tác dụng kháng cholinergic, ức chế thụ thể muscarinic. Atropin gây giãn đồng tử, tăng nhịp tim và giảm tiết dịch, trong khi Scopolamin có tác dụng an thần và chống nôn. Tuy nhiên, liều cao có thể gây ra các triệu chứng ngộ độc nghiêm trọng, đặc biệt là trên hệ thần kinh trung ương.

II. Phương pháp xác định Atropin và Scopolamin

Phương pháp xác định Atropin và Scopolamin trong thực phẩm chức năng bằng sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS) là một kỹ thuật hiện đại và chính xác. Phương pháp này cho phép phân tách và định lượng các hợp chất này với độ nhạy cao, ngay cả ở nồng độ thấp. LC-MS/MS kết hợp khả năng tách chất của sắc ký lỏng với độ chính xác của khối phổ, giúp loại bỏ các tạp chất và xác định chính xác hàm lượng Atropin và Scopolamin trong mẫu thực phẩm.

2.1. Quy trình phân tích

Quy trình phân tích bao gồm các bước chuẩn bị mẫu, chiết xuất và làm sạch mẫu. Mẫu thực phẩm được chiết xuất bằng dung môi thích hợp, sau đó làm sạch bằng kỹ thuật QuEChERS để loại bỏ các tạp chất. Mẫu sau đó được đưa vào hệ thống LC-MS/MS để phân tích. Phương pháp này đảm bảo độ chính xác và độ lặp lại cao, phù hợp với yêu cầu kiểm soát chất lượng thực phẩm.

2.2. Thẩm định phương pháp

Phương pháp LC-MS/MS được thẩm định về độ chính xác, độ nhạy, giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ). Kết quả thẩm định cho thấy phương pháp này có độ nhạy cao, với LOD và LOQ đạt mức microgram trên kilogram (µg/kg), đáp ứng yêu cầu phân tích các hợp chất độc hại trong thực phẩm.

III. Ứng dụng thực tiễn

Việc xác định Atropin và Scopolamin trong thực phẩm chức năng bằng LC-MS/MS có ý nghĩa quan trọng trong việc đảm bảo an toàn thực phẩm. Phương pháp này giúp phát hiện và kiểm soát các hợp chất độc hại trong thực phẩm, đặc biệt là các sản phẩm dành cho trẻ em và người già. Kết quả phân tích có thể được sử dụng để đánh giá mức độ an toàn của sản phẩm và đưa ra các khuyến cáo phù hợp cho người tiêu dùng.

3.1. Kiểm soát chất lượng thực phẩm

Phương pháp LC-MS/MS được áp dụng rộng rãi trong kiểm soát chất lượng thực phẩm, đặc biệt là các sản phẩm có nguy cơ nhiễm Atropin và Scopolamin. Kết quả phân tích giúp các cơ quan quản lý đưa ra các quy định về ngưỡng an toàn và thực hiện các biện pháp kiểm soát hiệu quả.

3.2. Bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng

Việc phát hiện và kiểm soát các hợp chất độc hại trong thực phẩm giúp bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng, đặc biệt là các đối tượng nhạy cảm như trẻ em và người già. Phương pháp LC-MS/MS cung cấp dữ liệu chính xác và đáng tin cậy, hỗ trợ các quyết định liên quan đến an toàn thực phẩm.