Khảo Sát Thành Phần Hóa Học Của Lá Cây Chùm Ruột (Phyllanthus Acidus) Tại Bình Thuận

Nghiên cứu thành phần hóa học và sinh trưởng của lá cây chùm ruột Phyllanthus acidus tại Bình Thuận, tập trung vào b-d cao n-butanol.

• Tác giả: Trần Đình Thông
• Người hướng dẫn: TS. Bùi Xuân Hào
• Trường học: Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Hóa hữu cơ
• Đề tài: Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Từ Lá Cây Chùm Ruột Tại Bình Thuận
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỞ ĐẦU
• 2. TỔNG QUAN
• 2.1. Giới thiệu về chi Phyllanthus
• 2.2. Mô tả về cây chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.))
• 2.3. Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây Chùm ruột
• 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Khảo sát cấu trúc hợp chất PA
• 4. KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Lá Chùm Ruột 55 ký tự

Cùng với sự phát triển của ngành công nghiệp dược, việc tìm kiếm các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao ngày càng trở nên quan trọng. Cây chùm ruột (Phyllanthus acidus) là một loài cây phổ biến ở Việt Nam và nhiều nước nhiệt đới châu Á. Trong y học cổ truyền, lá chùm ruột đã được sử dụng để điều trị nhiều bệnh như lở ngứa, mề đay và các bệnh ngoài da khác. Tuy nhiên, các nghiên cứu về thành phần hóa học của lá chùm ruột còn hạn chế, đặc biệt là ở Việt Nam. Nghiên cứu này tập trung vào việc khảo sát thành phần hóa học của các phân đoạn B-D cao n-butanol từ lá cây chùm ruột thu hái tại Bình Thuận, với hy vọng tìm kiếm các hợp chất mới có tiềm năng ứng dụng trong lĩnh vực dược phẩm. Nghiên cứu trước đây chỉ tập trung vào các bộ phận như vỏ thân, rễ cây, riêng thành phần hóa học của lá cây Chùm Ruột chưa được nghiên cứu sâu. Nghiên cứu này nhằm mục đích xác định cấu trúc hóa học của các hợp chất phân lập được bằng các phương pháp phổ nghiệm (1D, 2D-NMR).

1.1. Giới thiệu chi tiết về cây chùm ruột Phyllanthus acidus

Cây chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae), là một loài cây nhỏ, thân mộc, cao tới 5 mét hoặc hơn. Lá mọc so le, hình trứng, mềm, mỏng, mặt trên màu xanh lục đậm hơn mặt dưới. Cây có nguồn gốc từ Madagascar và đã du nhập vào nhiều nước ở châu Á và châu Phi. Tại Việt Nam, chùm ruột được trồng phổ biến ở các tỉnh phía Nam để lấy bóng mát, làm cảnh và lấy quả. Quả chùm ruột có vị chua, giòn, có thể ăn sống hoặc chế biến thành mứt, siro. Cây chùm ruột còn có nhiều tên gọi khác như tam ruột, chùm giuột, tam duột, mak nhôm. Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) [7] mô tả chi tiết về đặc điểm hình thái và phân bố của cây chùm ruột.

1.2. Công dụng dược liệu lá chùm ruột trong y học cổ truyền

Trong y học cổ truyền, lá chùm ruột được sử dụng để điều trị nhiều bệnh. Lá tươi được nấu nước tắm để chữa lở ngứa, mề đay và các bệnh ngoài da khác. Vỏ thân được dùng để tiêu hạch độc, ung nhọt, tiêu đờm trừ tích ở phổi. Bột vỏ thân ngâm giấm được uống để chữa trĩ. Quả chùm ruột có vị chua, tính mát, được dùng để ăn sống hoặc nấu canh có tác dụng thanh nhiệt, giải độc. Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) [1] đã tổng hợp các bài thuốc dân gian sử dụng lá chùm ruột.

II. Thách Thức Tại Sao Cần Nghiên Cứu Lá Chùm Ruột Bình Thuận 57 ký tự

Mặc dù cây chùm ruột có nhiều công dụng trong y học cổ truyền, nhưng các nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của lá chùm ruột còn hạn chế, đặc biệt là ở Việt Nam. Các nghiên cứu trước đây chủ yếu tập trung vào các bộ phận khác của cây như vỏ thân, rễ. Bên cạnh đó, thành phần hóa học của cây có thể khác nhau tùy thuộc vào điều kiện địa lý, thổ nhưỡng và khí hậu. Do đó, việc nghiên cứu thành phần hóa học của lá chùm ruột ở một vùng cụ thể như Bình Thuận là cần thiết để đánh giá tiềm năng dược liệu của cây tại địa phương này. Việc nghiên cứu này không chỉ góp phần làm phong phú thêm cơ sở dữ liệu về các hợp chất tự nhiên có nguồn gốc từ thực vật mà còn mở ra hướng đi mới trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu có giá trị từ dược liệu Bình Thuận.

2.1. Sự khác biệt thành phần hóa học do yếu tố địa lý

Thành phần hóa học của cây chùm ruột có thể thay đổi đáng kể tùy thuộc vào điều kiện địa lý, thổ nhưỡng và khí hậu của vùng sinh trưởng. Cây chùm ruột sinh trưởng ở Bình Thuận, với điều kiện khí hậu khô hạn, có thể có thành phần hóa học khác biệt so với cây chùm ruột sinh trưởng ở các vùng khác có khí hậu ẩm ướt hơn. Do đó, việc nghiên cứu thành phần hóa học của lá chùm ruột ở Bình Thuận là cần thiết để xác định các hợp chất đặc trưng có trong cây tại vùng này.

2.2. Thiếu hụt nghiên cứu chuyên sâu về lá chùm ruột

Hầu hết các nghiên cứu trước đây về cây chùm ruột tập trung vào các bộ phận khác như vỏ thân, rễ, quả. Nghiên cứu về thành phần hóa học lá chùm ruột còn hạn chế, đặc biệt là ở Việt Nam. Điều này tạo ra một khoảng trống kiến thức cần được lấp đầy để khai thác tối đa tiềm năng dược liệu của lá chùm ruột. Việc nghiên cứu này sẽ cung cấp thông tin chi tiết về các hợp chất có trong lá chùm ruột, từ đó mở ra cơ hội phát triển các sản phẩm dược liệu mới.

III. Phương Pháp Chiết Xuất Hợp Chất Từ Lá Chùm Ruột 58 ký tự

Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) đã sử dụng phương pháp chiết xuất lỏng-lỏng để phân lập các hợp chất từ lá chùm ruột. Đầu tiên, lá chùm ruột được ngâm với dung môi methanol để thu được cao thô. Sau đó, cao thô được chiết lỏng-lỏng với các dung môi khác nhau như n-hexane, chloroform, ethyl acetate và n-butanol để thu được các phân đoạn tương ứng. Các phân đoạn này sau đó được phân tích bằng các phương pháp sắc ký để phân lập và xác định cấu trúc của các hợp chất. Các phương pháp sắc ký được sử dụng bao gồm sắc ký cột silica gel, sắc ký lớp mỏng và sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Cấu trúc của các hợp chất được xác định bằng các phương pháp phổ nghiệm như NMR và MS.

3.1. Quy trình chiết xuất và phân lập các hợp chất

Quy trình chiết xuất và phân lập các hợp chất từ lá chùm ruột bao gồm nhiều bước. Bước đầu tiên là ngâm lá chùm ruột với dung môi methanol để thu được cao thô. Sau đó, cao thô được chiết lỏng-lỏng với các dung môi khác nhau để thu được các phân đoạn tương ứng. Các phân đoạn này sau đó được phân tích bằng các phương pháp sắc ký để phân lập và xác định cấu trúc của các hợp chất. Các phương pháp sắc ký được sử dụng bao gồm sắc ký cột silica gel, sắc ký lớp mỏng và HPLC.

3.2. Các kỹ thuật sắc ký sử dụng trong nghiên cứu

Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) đã sử dụng nhiều kỹ thuật sắc ký khác nhau để phân lập các hợp chất từ lá chùm ruột. Sắc ký cột silica gel được sử dụng để phân tách các hợp chất dựa trên sự khác biệt về độ phân cực của chúng. Sắc ký lớp mỏng được sử dụng để kiểm tra độ tinh khiết của các hợp chất và để theo dõi quá trình phân lập. HPLC được sử dụng để phân tích định lượng các hợp chất.

3.3. Phương pháp định danh hợp chất bằng phổ nghiệm NMR và MS

Sau khi các hợp chất được phân lập, cấu trúc của chúng được xác định bằng các phương pháp phổ nghiệm như NMR và MS. NMR cung cấp thông tin về cấu trúc phân tử của các hợp chất, bao gồm cả số lượng và vị trí của các nguyên tử khác nhau. MS cung cấp thông tin về khối lượng phân tử của các hợp chất.

IV. Kết Quả Phân Tích Hóa Học Lá Chùm Ruột Bình Thuận 56 ký tự

Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) đã phân lập và xác định cấu trúc của nhiều hợp chất từ lá chùm ruột thu hái tại Bình Thuận. Các hợp chất này thuộc nhiều nhóm khác nhau, bao gồm flavonoid, terpenoid, và các hợp chất phenolic. Trong đó, một số hợp chất đã được biết đến từ trước, nhưng một số hợp chất là mới và chưa được báo cáo trước đây. Kết quả phân tích hóa thực vật chùm ruột cho thấy lá chùm ruột là một nguồn giàu các hợp chất có hoạt tính sinh học tiềm năng. Các kết quả nghiên cứu cũng được so sánh với dữ liệu phổ NMR và MS đã được công bố trước đó để xác nhận cấu trúc của các hợp chất phân lập được.

4.1. Nhận dạng các nhóm hợp chất chính trong lá chùm ruột

Phân tích lá chùm ruột đã xác định sự hiện diện của nhiều nhóm hợp chất chính, bao gồm flavonoid, terpenoid, và các hợp chất phenolic. Các flavonoid là nhóm hợp chất phổ biến trong thực vật và có nhiều hoạt tính sinh học, bao gồm cả hoạt tính chống oxy hóa và chống viêm. Terpenoid là một nhóm lớn các hợp chất tự nhiên có cấu trúc đa dạng và cũng có nhiều hoạt tính sinh học. Các hợp chất phenolic cũng có hoạt tính chống oxy hóa và có thể có các hoạt tính sinh học khác.

4.2. Phát hiện các hợp chất mới và tiềm năng

Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) đã phát hiện một số hợp chất mới chưa được báo cáo trước đây trong lá chùm ruột. Các hợp chất này có thể có các hoạt tính sinh học độc đáo và có tiềm năng ứng dụng trong lĩnh vực dược phẩm. Cần có thêm các nghiên cứu để xác định cấu trúc chính xác và đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất này.

4.3. So sánh thành phần hóa học với các nghiên cứu trước đây

Kết quả phân tích thành phần hóa học của lá chùm ruột Bình Thuận được so sánh với các nghiên cứu trước đây về cây chùm ruột từ các vùng khác. So sánh này giúp xác định sự khác biệt về thành phần hóa học do các yếu tố địa lý và môi trường, từ đó đánh giá tiềm năng dược liệu của cây chùm ruột tại Bình Thuận một cách chính xác hơn.

V. Ứng Dụng Tiềm Năng Dược Lý Lá Chùm Ruột Ra Sao 54 ký tự

Các hợp chất phân lập được từ lá chùm ruột có nhiều tiềm năng ứng dụng trong lĩnh vực dược phẩm. Nhiều hợp chất có hoạt tính chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và chống ung thư. Lá chùm ruột có thể được sử dụng để phát triển các sản phẩm chăm sóc sức khỏe, dược phẩm, và mỹ phẩm. Hơn nữa, tác dụng dược lý lá chùm ruột có thể được sử dụng trong việc điều trị các bệnh liên quan đến oxy hóa, viêm nhiễm, nhiễm trùng và ung thư. Các nghiên cứu về độc tính và an toàn của lá chùm ruột cũng cần được thực hiện để đảm bảo an toàn khi sử dụng.

5.1. Hoạt tính sinh học của chiết xuất lá chùm ruột

Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng chiết xuất lá chùm ruột có nhiều hoạt tính sinh học tiềm năng. Hoạt tính chống oxy hóa giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương do các gốc tự do. Hoạt tính chống viêm giúp giảm sưng và đau. Hoạt tính kháng khuẩn giúp chống lại các vi khuẩn gây bệnh. Hoạt tính chống ung thư có thể giúp ngăn chặn sự phát triển của các tế bào ung thư. Nghiên cứu sâu hơn là cần thiết để xác định các hoạt tính sinh học cụ thể của các hợp chất phân lập được.

5.2. Ứng dụng trong dược phẩm thực phẩm chức năng và mỹ phẩm

Lá chùm ruột có thể được sử dụng để phát triển nhiều sản phẩm khác nhau, bao gồm dược phẩm, thực phẩm chức năng và mỹ phẩm. Trong dược phẩm, các hợp chất từ lá chùm ruột có thể được sử dụng để điều trị các bệnh liên quan đến oxy hóa, viêm nhiễm, nhiễm trùng và ung thư. Trong thực phẩm chức năng, lá chùm ruột có thể được sử dụng như một nguồn chất chống oxy hóa tự nhiên. Trong mỹ phẩm, chiết xuất lá chùm ruột có thể được sử dụng để làm chậm quá trình lão hóa da.

VI. Kết Luận Hướng Nghiên Cứu Phát Triển Cây Chùm Ruột 53 ký tự

Nghiên cứu của Trần Đình Thông (2022) đã cung cấp thông tin quan trọng về thành phần hóa học của lá chùm ruột thu hái tại Bình Thuận. Các kết quả này mở ra hướng đi mới trong việc khai thác tiềm năng dược liệu của cây chùm ruột. Cần có thêm các nghiên cứu để xác định cấu trúc chính xác và đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất mới được phát hiện. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu về độc tính và an toàn của lá chùm ruột để đảm bảo an toàn khi sử dụng. Nghiên cứu này đã khảo sát thành phần hóa học các phân đoạn B-D cao n-butanol của lá cây chùm ruột. Tuy nhiên, lá cây chùm ruột còn rất nhiều chất có hoạt tính sinh học mang tính ứng dụng cao có thể đóng góp một phần nhỏ bé của mình trong công cuộc phòng bệnh và chữa bệnh của con người. Đây là tiền đề quan trọng cho các nghiên cứu tiếp theo về lá chùm ruột.

6.1. Đánh giá tiềm năng phát triển các sản phẩm từ lá chùm ruột

Kết quả nghiên cứu cho thấy lá chùm ruột có tiềm năng phát triển nhiều sản phẩm khác nhau. Cần có các nghiên cứu thị trường để đánh giá nhu cầu và khả năng chấp nhận của người tiêu dùng đối với các sản phẩm này. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu về quy trình sản xuất để đảm bảo chất lượng và hiệu quả của các sản phẩm.

6.2. Nghiên cứu chuyên sâu về hoạt tính sinh học và độc tính

Các nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào việc xác định hoạt tính sinh học cụ thể của các hợp chất phân lập được từ lá chùm ruột. Cần có các thử nghiệm in vitro và in vivo để đánh giá hiệu quả và an toàn của các hợp chất này. Ngoài ra, cần có các nghiên cứu về độc tính của lá chùm ruột để đảm bảo an toàn khi sử dụng.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Cây chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) là một loài thực vật phổ biến ở vùng nhiệt đới châu Á, trong đó có Việt Nam, đặc biệt sinh trưởng tại tỉnh Bình Thuận. Theo ước tính, cây này đã được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền với nhiều công dụng chữa bệnh như trị lở ngứa, tiêu độc, bảo vệ gan và kháng khuẩn. Tuy nhiên, các nghiên cứu về thành phần hóa học của lá cây chùm ruột, đặc biệt là các phân đoạn cao n-butanol, vẫn còn hạn chế. Mục tiêu của luận văn là khảo sát thành phần hóa học các phân đoạn B-D của cao n-butanol chiết xuất từ lá cây chùm ruột sinh trưởng ở Bình Thuận, nhằm xác định cấu trúc các hợp chất phân lập được và góp phần làm phong phú thêm danh mục các hợp chất có hoạt tính sinh học trong cây. Nghiên cứu được thực hiện trên mẫu lá thu hái vào tháng 3 năm 2018 tại huyện Hàm Thuận Bắc, tỉnh Bình Thuận. Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu từ cây chùm ruột, đồng thời hỗ trợ cho công tác bảo tồn và khai thác nguồn tài nguyên thiên nhiên tại địa phương.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Luận văn dựa trên các lý thuyết và mô hình nghiên cứu về hóa hữu cơ thiên nhiên, đặc biệt tập trung vào các hợp chất flavonoid và các dẫn xuất phenolic trong thực vật. Hai lý thuyết chính được áp dụng gồm:

• Lý thuyết cấu trúc flavonoid: Giúp xác định cấu trúc các hợp chất flavonoid dựa trên phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) và phổ khối (MS).
• Mô hình chiết xuất và phân lập hợp chất tự nhiên: Sử dụng các phương pháp sắc ký cột silica gel pha thường và pha đảo RP-18 kết hợp sắc ký lớp mỏng (TLC) để phân tách các phân đoạn cao n-butanol.

Các khái niệm chính bao gồm: flavonoid, kaempferol, quercetin, phân đoạn cao n-butanol, phổ NMR (^1H-NMR, ^13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC), và phổ khối (LC-MS).

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu chính là lá cây chùm ruột thu hái tại Bình Thuận, được xử lý bằng phương pháp ngâm chiết với methanol, sau đó chiết lỏng-lỏng với các dung môi n-hexane, chloroform, ethyl acetate và n-butanol để thu cao tương ứng. Cỡ mẫu là 25 kg bột lá khô, thu được 991 g cao methanol thô và 68,45 g cao n-butanol.

Phân lập các hợp chất được thực hiện bằng sắc ký cột silica gel pha thường và pha đảo RP-18, theo dõi bằng sắc ký lớp mỏng và phát hiện vết bằng đèn UV bước sóng 254 nm hoặc dung dịch H_2SO_4 15%. Cấu trúc các hợp chất được xác định bằng các phương pháp phổ hiện đại: phổ cộng hưởng từ hạt nhân (^1H-NMR, ^13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC) và phổ khối (LC-MS).

Thời gian nghiên cứu kéo dài từ tháng 3 năm 2018 đến năm 2022, bao gồm các giai đoạn thu thập mẫu, chiết xuất, phân lập, xác định cấu trúc và phân tích dữ liệu.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Phân lập thành công 6 hợp chất flavonoid chính từ các phân đoạn B-D của cao n-butanol lá chùm ruột, gồm PA.01 (quercetin), PA.02 (kaempferol), PA.04 (kaempferol 3-O-(2-a-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucuronopyranosyl methyl ester), PA.05 (kaempferol 3-neohesperidoside), PA.06 (kaempferol 3-O-a-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-galactopyranoside) và một hợp chất chưa được đặt tên chi tiết. Mỗi hợp chất được xác định cấu trúc rõ ràng qua phổ NMR và LC-MS với độ chính xác cao.

2. Hàm lượng cao n-butanol thu được là 68,45 g từ 25 kg bột lá khô, tương đương khoảng 0,27% khối lượng nguyên liệu, cho thấy hiệu suất chiết xuất phù hợp với các nghiên cứu tương tự về flavonoid trong thực vật.

3. Phổ ^1H-NMR và ^13C-NMR cho thấy các tín hiệu đặc trưng của flavonoid với các proton nhân thơm ghép cặp meta và ortho, cùng các tín hiệu của các đơn vị đường như rhamnose, glucopyranose và galactopyranose, chứng tỏ các hợp chất phân lập là các glycoside flavonoid phức tạp.

4. So sánh dữ liệu phổ với các hợp chất chuẩn như quercetin và kaempferol cho thấy sự tương đồng cao, xác nhận cấu trúc các hợp chất phân lập. Ví dụ, hợp chất PA.01 có cấu trúc tương tự quercetin với 15 carbon và các nhóm hydroxyl đặc trưng.

Thảo luận kết quả

Nguyên nhân của sự đa dạng các hợp chất flavonoid trong lá chùm ruột có thể do đặc điểm sinh trưởng và điều kiện môi trường tại Bình Thuận, nơi có khí hậu nhiệt đới thích hợp cho sự tổng hợp các hợp chất phenolic. Kết quả phù hợp với các nghiên cứu trước đây về flavonoid trong chi Phyllanthus, đồng thời mở rộng thêm kiến thức về thành phần hóa học của lá chùm ruột, vốn trước đây chủ yếu tập trung vào vỏ thân và rễ.

So với các nghiên cứu quốc tế, việc phân lập thành công các glycoside flavonoid phức tạp như kaempferol 3-O-(2-a-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucuronopyranosyl methyl ester là bước tiến quan trọng, góp phần làm rõ cơ chế hoạt động sinh học của cây. Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ phổ NMR và bảng so sánh dữ liệu phổ ^1H-NMR, ^13C-NMR giữa các hợp chất phân lập và chuẩn, giúp minh họa rõ ràng sự tương đồng và khác biệt cấu trúc.

Kết quả này cũng có ý nghĩa trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu từ lá chùm ruột, đặc biệt là các sản phẩm có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm và bảo vệ gan, dựa trên các hợp chất flavonoid đã được xác định.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Tăng cường nghiên cứu hoạt tính sinh học của các hợp chất flavonoid phân lập được nhằm đánh giá tiềm năng ứng dụng trong điều trị các bệnh lý như viêm, ung thư và bệnh gan. Thời gian thực hiện: 1-2 năm; chủ thể: các viện nghiên cứu dược liệu và trường đại học.

2. Phát triển quy trình chiết xuất và tinh chế flavonoid từ lá chùm ruột quy mô công nghiệp để tạo nguồn nguyên liệu ổn định cho sản xuất dược phẩm và thực phẩm chức năng. Thời gian: 2-3 năm; chủ thể: doanh nghiệp dược liệu và viện công nghệ sinh học.

3. Khuyến khích bảo tồn và phát triển nguồn nguyên liệu cây chùm ruột tại Bình Thuận thông qua các chương trình trồng trọt bền vững, nhằm đảm bảo nguồn cung nguyên liệu chất lượng cao. Thời gian: liên tục; chủ thể: chính quyền địa phương và các tổ chức nông nghiệp.

4. Tổ chức các hội thảo khoa học và đào tạo chuyên sâu về hóa học thiên nhiên và kỹ thuật phân lập hợp chất cho cán bộ nghiên cứu và sinh viên nhằm nâng cao năng lực nghiên cứu trong lĩnh vực này. Thời gian: hàng năm; chủ thể: các trường đại học và viện nghiên cứu.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu hóa học thiên nhiên và dược liệu: Luận văn cung cấp dữ liệu chi tiết về cấu trúc flavonoid trong lá chùm ruột, hỗ trợ nghiên cứu phát triển thuốc từ thiên nhiên.

2. Doanh nghiệp sản xuất dược phẩm và thực phẩm chức năng: Thông tin về quy trình chiết xuất và phân lập hợp chất giúp tối ưu hóa công nghệ sản xuất nguyên liệu chất lượng.

3. Sinh viên và giảng viên chuyên ngành hóa hữu cơ, dược học: Tài liệu tham khảo quý giá về phương pháp phân tích cấu trúc hợp chất tự nhiên bằng phổ NMR và LC-MS.

4. Chính quyền địa phương và tổ chức bảo tồn tài nguyên thiên nhiên: Cung cấp cơ sở khoa học cho việc bảo tồn và phát triển nguồn nguyên liệu cây chùm ruột tại Bình Thuận.

Câu hỏi thường gặp

1. Tại sao chọn lá cây chùm ruột để nghiên cứu thay vì các bộ phận khác?
   Lá cây chùm ruột chưa được nghiên cứu sâu về thành phần hóa học so với vỏ thân và rễ, trong khi lá là bộ phận dễ thu hái và có tiềm năng chứa nhiều hợp chất flavonoid có hoạt tính sinh học.

2. Phương pháp chiết xuất cao n-butanol có ưu điểm gì?
   Phương pháp chiết xuất bằng n-butanol giúp tách được các hợp chất flavonoid phân cực vừa phải, giữ được hoạt tính sinh học và dễ dàng phân lập các hợp chất glycoside.

3. Các hợp chất flavonoid phân lập được có ứng dụng gì trong y học?
   Flavonoid có tác dụng chống oxy hóa, kháng viêm, bảo vệ gan và chống ung thư, do đó các hợp chất phân lập có thể phát triển thành nguyên liệu cho thuốc và thực phẩm chức năng.

4. Làm thế nào để xác định cấu trúc các hợp chất phân lập?
   Sử dụng phổ cộng hưởng từ hạt nhân (^1H-NMR, ^13C-NMR, COSY, HSQC, HMBC) kết hợp phổ khối (LC-MS) để xác định cấu trúc phân tử và các nhóm chức trong hợp chất.

5. Nghiên cứu này có thể mở rộng như thế nào trong tương lai?
   Có thể mở rộng nghiên cứu sang đánh giá hoạt tính sinh học in vitro và in vivo, phát triển quy trình chiết xuất công nghiệp, cũng như khảo sát các bộ phận khác của cây chùm ruột.

Kết luận

• Đã phân lập và xác định cấu trúc thành công 6 hợp chất flavonoid chính từ phân đoạn B-D cao n-butanol lá cây chùm ruột sinh trưởng ở Bình Thuận.
• Các hợp chất chủ yếu là các glycoside flavonoid phức tạp, tương đồng với các hợp chất chuẩn như quercetin và kaempferol.
• Nghiên cứu góp phần làm phong phú thêm danh mục các hợp chất hóa học trong cây chùm ruột, mở ra hướng phát triển dược liệu từ lá cây.
• Kết quả có ý nghĩa trong phát triển sản phẩm dược liệu, bảo tồn nguồn nguyên liệu và nâng cao năng lực nghiên cứu hóa học thiên nhiên tại Việt Nam.
• Đề xuất các bước tiếp theo bao gồm nghiên cứu hoạt tính sinh học, phát triển quy trình chiết xuất công nghiệp và bảo tồn nguồn nguyên liệu bền vững.

Quý độc giả và các nhà nghiên cứu được khuyến khích tiếp tục khai thác và ứng dụng các kết quả này nhằm phát triển các sản phẩm có giá trị cao từ cây chùm ruột.

Trích đoạn nội dung tài liệu

Trần Đình Thông KHAO SÁT THÀNH PHAN HÓA HỌC CAC PHAN DOAN B-D CAO n-BUTANOL CUA LA CAY CHUM RUOT (PHYLLANTHUS ACIDUS (L.) SKEELS) SINH TRUONG O BINH THUAN LUAN VAN THAC Si KHOA HOC VAT CHAT Thành pho Hồ Chí Minh — 2022 Trần Đình Thông KHAO SÁT THÀNH PHAN HÓA HỌC CAC PHAN DOAN B-D CAO n-BUTANOL CUA LA CAY CHUM RUOT (PHYLLANTHUS ACIDUS (L.) SKEELS) SINH TRUONG O BINH THUAN Chuyên ngành : Hóa hữu cơ Mã số : 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VAT CHAT NGƯỜI HƯỚNG DÁN KHOA HỌC: TS. BÙI XUÂN HÀO Thành phố Hồ Chí Minh — 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi: Tràn Đình Thông là học viên cao học chuyên ngành hóa hữu cơ khóa 30. Tôi xin cam đoan luận văn: “Khao sát thành phan hóa học các phan đoạn B-D cao n-butanol của lá cây chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) sinh trưởng ở Bình Thuận" đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi dưới sự hướng dẫn của TS. Bui Xuân Hào.

Tat cá các số liệu và kết quả phân tích trong luận văn Thạc sĩ này là trung thực và chưa được ai công bồ trong bat kỳ công trình nghiên cứu nào. TpHCM, ngày 28 tháng 04 năm 2022 Tác giả luận văn TRÀN ĐÌNH THÔNG LỜI CẢM ƠN Dé có được kết quả học tập ngày hôm nay, tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn đến quý Thay Cô trong phòng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên nói riêng cũng như quý Thay Cô khóa Hóa - trường Đại học Sư phạm Thành phố Hỗ Chi Minh đã tận tâm giảng day, truyền thụ cho tôi nhiều kiến thức khoa học quý báu trong suốt thời gian học tập tại trường. Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Phòng Sau Đại học - trường Đại học Sư phạm Thành phố H6 Chi Minh đã tạo điều kiện thuận lợi và hỗ trợ cho tôi trong quá trình học tập tại trường. Đặc biệt, tôi xin bảy tỏ lòng biết ơn sâu sắc và chân thành tới TS.

Bùi Xuân Hào, người đã tận tình hướng dẫn tôi hoàn thành công trình nghiên cứu khoa học. Thay không những giúp tôi có thêm kiến thức khoa học mà còn giúp tôi ve tỉnh than trong suốt quá trình nghiên cứu khoa học bằng những kinh nghiệm quý báu và những lời nói đã động viên một cách chân thành. Tôi cũng xin cảm ơn các bạn trong phòng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên — trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh cũng như các ban cùng khóa 30.2 đã luôn hỗ trợ, giúp đỡ và động viên tôi mỗi khi tôi gặp khó khăn trong suốt quá trình làm đề tài nghiên cứu khoa học này. Tôi xin cảm ơn quý Thay Cô phán biện đã dành thời gian đọc và đóng góp ¥ kiến cho bải nghiên cứu khoa học nảy.

Mặc dù đã cô gắng rất nhiều trong quá trình làm luận văn nhưng chắc chắn không tránh khỏi những sai sót, kính mong quý Thầy C6 tan tinh chi bao. Cuối cùng xin cảm ơn đến gia đình đã luôn đồng hành va là nguồn động viên to lớn trong suốt quá trình học tập TpHCM, ngày 28 tháng 04 năm 2022 Học viên cao học TRÀN ĐÌNH THÔNG MỤC LỤC Trang phụ bìa EGU CAM GGAM ;¿z:2621221162511221211254112213351012353251946332913983533318553885g869183551351353353959584493335353g58 i SGU COMO oscsscsscsssscarsesscasessersessessssscsssscasssssesesesssscssesssecssoesascesseeveocesearseasseseseerieessssesse il MIG IÌJJE:cscccccccseccscrracccaczsscrcscioogstesioga20200125105511665188365853655556668ã68858566883388888858838568585588ãa0 lil Danh mục các ký hiệu va chữ viết tắt.-- 2-52 S2 s2 E333 vs V Danh mục các bảng. con Họ Họ Họ TH. Tá ng 080080908500 vỉ IPni0in11/s1e31111.ốốỐốỐốỐỐỐốỐốốỐốốốốẽẽếẽ Vil Danh muc so ee Vill Doane PNG siscsscasssasscassecscsasccnassncssccsssnsarcassasesscssaasueansensaransancsssesasassaaaeansnanssaeis ix MƠ ĐẤU ssccnsneneinrininisniiniitiitodiit010001016106100838063010301005880310881085818311058188308833085886 I CRp0upffL TONG QUAN iirercccecireeinananamannenaninnnvamnnanan 3 1.

Giới thiệu về chỉ Phyllanthus ccccccccccsccsssscssesssesssesssssessesssesssessesseesessecsseavesseeeeees 3 1. Mô tả về cây chùm ruột (Phyllanthus acidus (L. Giới thiệu chung về cây Phyllanthus acidus (L. Mô ta về cây Phyllanthus acidus (L.

Nghiên cứu thành phan hóa học va hoạt tính sinh học của cây Chùm ¡60 3. 5 Deg THšnẴH0han008 1P son: sccesazzcsezzcsrccsaseccicoscscnssecncsesssavssssvseussrsessrsssseesciencss 5 13:2; Công GUNG c¡:::ccccccoooniiiiniisiioegii251256112615591585516515833556158555868365158865553388585665 10 BS).THUG NGHI Gueeanaaannneaoinoooinorooioaoooioaoooaoooooooo: 12 2. Hóa chat, thiết bị, phương phap .--¿-55: 25c 25c csccrxerrscrrrcrrrcrrecrrrce 12 DADA MG Hi ace TT TT 0070000000000 0000107070 0007 100/77 T10 12 2;:2:Ì DU OW httiniiiisstist1101461143110353955555651863565158853835898358555835655695585539839855885885668 12 2. Phương pháp tiền hành.

Quy trình phân lập các hợp chat từ cao z-butanol. Điều chế cao phân đoạn ø-butanoll.- c se nngeereesrrrsrree 13 2:23) Quy trìnhiphân ÏẬB:‹::::::-::--::::c:cscccscccosizsssisssassa253352255583552555555583555255 555556 134 iv Chương 3. KET QUA VÀ THẢO LUẬN. 20 3,1, Khảo sắt cầu tFÚC.

Khảo sát cầu trúc hợp chất PA.2: Khảo sắt cầu trúc hợp chất PALO2. Khảo sát cấu trúc hop chất PA. si cv 1c rsxrrssrreee 25 3. Khảo sát câu trúc hợp chất P.

Khao sát cầu trúc hop chất PA. Khảo sát cầu trúc hop chất PA. ¿5c 2s vsc2tvcrrverrsrrrscrrreee 40 Chương 4. KET LUẬN — KIÊN NGHỊ,.- 2-22 ©2sStc2S2E2cEEcExcxrrrsrrcee 45 II] EHINIBI,.

cưng hưng hy g11111 11 1111171911x1111129173301e 116k. 46 TÀI LIEU THAM KHẢO. PLI DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VA CHU VIET TAT Ac Acetone br Broad Bu n-butanol Cc Chloroform 3C-NMR Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance COSY Correlation Spectroscopy Doublet dd Doublet of doublet DMSO Dimethyl sulfoxide EA Ethyl acetate H n-hexane 'H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance HMBC Heteronuclear multiple-bond correlation spectroscopy HSQC Heteronuclear single-quantum correlation spectroscopy Hz Hertz ICso Inhibitory Concentration 50% J Coupling constant m- Meta m Multiplet Me Methanol Ortho p- Para Singlet SKC Sắc ky cột SKLM Sắc ký lớp mỏng Triplet HO Chemical shift vi DANH MUC CAC BANG Bang 2. Kết qua sắc ký cột silica gel cao n-butanol.

Kết qua sắc ký cột silica gel phân đoạn Bo. Kết quả sắc ký cột silica gel phân đoạn €.-------cc-cccscccce 15 Bang 2. Kết quả sắc ký cột silica gel phân đoạn C4. Kết quả sắc ký cột silica gel phân đoạn D.

Kết quả sắc ký cột silica gel phân đoạn DS. So sánh dữ liệu phô 'H-NMR va “C-NMR của PA.OL và QUẾFC€U:cngzngengtsstisssi1251505105511555155315351588358555855156513681588158558555563153556538858 21 Bang 3. So sánh dit liệu phô 'H-NMR va “C-NMR của PA.02 với Kaempferol và PÁ:ÔÍ::::::::::::::¿zciccccccicp2sic2n25220225225225512251275555655825155588Ÿ55 23 Bang 3. So sánh liệu phô 'H-NMR và C-NMR của PA.04 và kaempferol 3-O-(2-œ-L-rhamnopyranosyl)-B-D-glucuronopyranosyl methyl Bang 3.

So sánh di liệu phd 'H-NMR và C-NMR của PA.OS và kaempferol 3-neohesperidOside. So sánh di liệu phd ‘H-NMR va “C-NMR của PA.06 và kaempferol 3-O-a-L-rhamnopyranosyl-{1—>2)-}-D- SALA CTO VLONOSMC sas sac saccssesiccsssescessesscnsnesasanssaanessenssusanaizeaiaeassnazssaciannsaesi 38 Bang 3. So sánh dữ liệu phổ 'H-NMR va C-NMR của PA.07 va kaempferol 3-O-J-D-(27”-O-ơ-D-rhamnopyranosyl)- ølucuronopyFanOSIỞE. - - ccnntnnnnhnnn nHh nh HH nvrce 43 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hinh 1.

Lá và quả cây Chùm ruột mọc ở Binh Thuận. Một số hợp chất được phân lập từ cây Chùm ruột. Một số hợp chất được phân lập từ cây Chùm ruột (tiếp theo). Một số hợp chất được phân lập từ cây Chùm ruột (tiếp theo).

Cau trúc hóa học của hợp chất PA.- 2-©22©csz xccssrzsvrrevrsece 20 Hình 3. Một số tương quan HMBC của hợp chất PA. Cau trúc hóa học của hợp chất P. Cau trúc hóa học của hợp chất P.

Tương quan HMBC va COSY của hợp chất PA.6, Cau trúc hóa học của hợp chất PA. Tương quan HMBC và COSY của hợp chat P. Cấu trúc hóa học của hợp chất PA.- 2-6 vs ccveccxrrzsercee 37 Hình 3. Tương quan HMBC và COSY của hợp chất PA.

Cau trúc hóa học của hợp chất PA. Tương quan HMBC va COSY cua hợp chất PA.-c--ccsc: 42 vill DANH MUC SO DO Sơ đỗ 2. Điều chế cao n-butanol từ lá cây chùm MUGE. Quy trình phân lập các hợp chat từ cao n-butanol lá cây chùm ruột.

18 ix DANH MUC PHU LUC Phụ luc 1a. Phé ‘H-NMR của PA. ene PLI Phụ lục 1b. Pho 'H-NMR của PA.PL2 Phụ lục 2a.

Phô 'C-NMR của PA.01 trong Aceton-, PL3 Phụ lục 2b. Phô C-NMR của PA.PL4 Phụ lục 3. PhO HMBC của PA.PLŠS Phụ lục 4. Pho HSQC của PA.PL6 Phụ lục Sa.

Phô 'H-NMR của PA.02 trong Methanol-d, PL7 Phụ lục Sb. Phô 'H-NMR của PA. PL8 Phu luc 6. Pho °C-NMR của PA.PL9 Phu lục 7a.

Phô Mass của PA. Phé Mass của PA. Ul Phụ lục 8a. Phô ‘H-NMR của PA.04 trong Methanol-ds --.

Phô 'H-NMR của PA.04 trong Methanoledy ___ PLI3 Phụ lục 8c. Pho 'H-NMR của PA.04 trong Methano-b, LÔ ooo o PLI4 Phụ lục 9a. Phô 'C-NMR của PA. __ PLI§ Phụ lục 9b.

Pho “C-NMR của PA.04 trong Methanol-ds PL16 Phụ lục 10a. Phé COSY của PA.04 trong Methanol-, PLI7 Phụ lục 10b. Pho COSY của PA.04 trong Methanoleds ee PLS Phụ lục 10c. Phô COSY của PA.04 trong Methanol-dy a PLI9 Phụ lục 11a.

Pho HMBC của PA.04 trong Methanol-, PL20 Phụ lục 11b. PhO HMBC của PA. PL2I Phụ lục 11c. Ph6 HMBC của PA.

PL22 Phụ lục 12a. Phố HSQC của PA.04 trong Methanol-dy. „PL23 Phụ lục 12b. Phô HSQC của PA.04 trong Methanol-dy PL24 Phụ lục 12c.

Pho HSQC của PA.PL2§ Phụ lục 13a. Pho Mass clta PADS ˆ .PL26 Phụ lục 13b. Pho Mass của PA.PL27 Phụ lục 13c. Phô Mass của PA.

i Ni i8i0ieii0iteiieicesIEF e0 Phụ lục 14a. Pho 'H-NMR của PA. PL29 Phụ lục 14b. Pho 'H-NMR của PA.05 trong Methanol-¿; PL30 Phụ lục 14¢.

Phô 'H-NMR của PA.OS trong Methanoledy. PL3I Phụ lục 15a. Phô !*C-NMR của PA.OS trong Methanol-dy. Pho C-NMR của PA.OS trong Methanol-d¿.

Phô !C-NMR của PA. Phô DEPT của PA.OS trong Methanol-d,. Phỏ COSY của PA.OS trong Methanol-d¿. Pho COSY của PA.05 trong Methanol-ds Phụ lục 17c.

Phô COSY của PA.0§ trong Methanol-d; Phụ lục 18a. Phô HMBC của PA.05 trong Methanol-dy Phụ lục 18b. PhO HMBC của PA. Phô HMBC của PA.

Phô HSQC của PA.OS trong Methanol-d¿. PhO HSQC của PA.05 trong Methanol-ds Phụ lục 19c. Ph6 HSQC của PA.05 trong Methanol-d; Phụ lục 20a. Phỏ Mass của PA.

Pho Mass của PA. Pho Mass của PAc — Ằằš Phụ lục 21a. Phô 'H-NMR của PA.06 trong Methanol-¿¿ Phụ lục 21b. Pho 'H-NMR của PA.

Phô ‘H-NMR của PA. Phô !?C-NMR của PA. Pho "C-NMR của PA. Phô DEPT của PA.06 trong Methanol-d; Phụ lục 24a.

Pho COSY của PA.06 trong Methanol-ở; Phụ lục 24b. Pho COSY của PA. Pho HMBC của PA. PhO HMBC của PA.

Phô HSQC của PA.06 trong Methanol-da. Pho HSQC của PA.06 trong Methanol-dy, Phụ lục 27a. Pho Mass của PA. Pho Mass của PA.

Phô 'H-NMR của PA. Pho 'H-NMR của PA. Phô "C-NMR của PA. Phô COSY của PA.

xi Phụ lục 30b. Pho COSY của PA. PL66 Phụ lục 31a. Phô HMBC của PA.PL67 Phụ lục 31b.

Pho HMBC của PA. PL68 Phụ lục 32a. Pho HSQC của PA.PL69 Phụ lục 32b. Pho HSQC của PA.PL70 MỞ ĐÀU 1.

Lí do chọn đề tài Củng với sự bùng nỗ của cách mạng công nghiệp. ngành công nghiệp dược cũng phát triển không ngừng dé phục vụ cho nhu cau phòng - chữa bệnh ngày càng cao của con người. Tuy nhiên, bên cạnh những lợi ích to lớn mà thuốc hoá dược mang lại, vẫn còn tồn tại khá nhiều những tác dụng phụ. những tương tác, những tác dụng có hại.

của thuốc mà con người cần phải khắc phục. Chính vì thể, những năm gan day, con người bat đầu có xu hướng quay lại với những bài thuốc y học cô truyền, với đông dược. bởi nhận thức được công dụng, tác dụng to lớn mà thảo dược mang lại cho nhu cầu phỏng — trị bệnh của con người. Cây Chùm ruột (Phyllanthus acidus) rất pho biến ở Việt Nam cũng như các nước ở vùng nhiệt đới châu Á.