BOÄ GIAÙO DUÏC & ÑAØO TAÏO TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC MÔÛ – BAÙN COÂNG TPHCM KHOA COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC Ñeà taøi: KHAÛO SAÙT KHAÛ NAÊNG PHAÂN GIAÛI MOÄT SOÁ CHAÁT HÖÕU CÔ CUÛA VI KHUAÅN GIOÁNG Bacillus VAØ NAÁM MOÁC (Aspergillus oryzae) PHAÂN LAÄP ÑÖÔÏC TRONG CHEÁ PHAÅM BRF – 2 AQUAKIT SO SAÙNH MÖÙC ÑOÄ LAØM SAÏCH MOÂI TRÖÔØNG AO NUOÂI TOÂM KHI SÖÛ DUÏNG CHEÁ PHAÅM. LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP CÖÛ NHAÂN KHOA HOÏC CHUYEÂN NGHAØNH VI SINH GIAÛNG VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN : Thaïc syõ. PHAN KIM NGOÏC SINH VIEÂN THÖÏC HIEÄN : NGUYEÃN VUÕ VIEÄT MAÕ SOÁ SINH VIEÂN : 30000489 KHOAÙ HOÏC : 2000 - 2004 LÔØI CAÛM ÔN Voâ cuøng bieát ôn tôùi Ba Meï, nhöõng ngöôøi ñaõ daønh nhieàu thôøi gian vaø coâng söùc cho con trong suoát thôøi gian hoïc. Em xin chaân thaønh caûm ôn quyù Thaày Coâ Tröôøng Ñaïi Hoïc Môû-Baùn Coâng Thaønh Phoá Hoà Chí Minh ñaõ truyeàn ñaït cho em nhöõng voán kieán thöùc quyù baùu trong suoát thôøi gian ngoài treân gheá nhaø tröôøng.
Chaân thaønh ghi ôn: Thaày Phan Kim Ngoïc, ngöôøi ñaõ taän tình chæ baûo, höôùng daãn vaø taïo cho em moïi ñieàu kieän ñeå hoaøn thaønh ñeà taøi toát nghieäp. Coâ Toâ Minh Chaâu, ngöôøi ñaõ giuùp ñôõ em trong suoát quaù trình thöïc hieän ñeà taøi toát nghieäp. Cuoái cuøng toâi xin caûm ôn tôùi nhöõng ngöôøi baïn thaân, nhöõng ngöôùi ñaõ giuùp ñôõ, ñoäng vieân vaø chia seû cuøng toâi nhöõng buoàn vui trong cuoäc soáng vaø trong hoïc taäp.HCM, ngaøy 15 – 11 – 2004 Nguyeãn Vuõ Vieät LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP MUÏC LUÏC Trang PHAÀN I:ÑAËT VAÁN ÑEÀ. 1 PHAÀN II: TOÅNG QUAN.
TIEÀM NAÊNG PHAÙT TRIEÅN VAØ NUOÂI TROÀNG THUÛY SAÛN. Nguoàn lôïi gioáng loaøi thuûy saûn. Khí haäu vaø thôøi tieát. ÑAÏI CÖÔNG VEÀ LOAØI TOÂM.
Vò trí phaân loaïi. Ñaëc ñieåm sinh lyù. Ñaëc ñieåm hình thaùi. ÑAÏI CÖÔNG VEÀ BEÄNH TOÂM.
Ñieàu kieän phaùt sinh beänh. Quaù trình nhieãm beänh treân toâm. Nhaän bieát beänh. Phoøng trò beänh toâm .Phoøng beänh .Trò beänh.
Caùc loaïi beänh gaëp ôû toâm nuoâi. Beänh do nhieàu sinh vaät cuøng gaây ra. Beänh do vi khuaån. Beänh do virus gaây ra.
Beänh do dinh döôõng, ñoäc chaát vaø moâi tröôøng. HOAÏT ÑOÄNG NUOÂI TOÂM VAØ NHÖÕNG NGUY HAÏI DO OÂ NHIEÃM MOÂI TRÖÔØNG. OÂ nhieãm lieân quan ñeán ao nuoâi toâm. OÂ nhieãm do vieäc söû duïng thuoác vaø caùc hoaù chaát trong nuoâi toâm.
SÖÛ DUÏNG CHEÁ PHAÅM SINH HOÏC TRONG NUOÂI TOÂM. 21 PHAÀN III: VAÄT LIEÄU – PHÖÔNG PHAÙP NGHIEÂN CÖÙU. 25 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 1. Duïng cuï – thieát bò.
Cheá phaåm vi sinh. PHÖÔNG PHAÙP NGHIEÂN CÖÙU. Caùc moâi tröôøng söû duïng. Moâi tröôøng nuoâi giöõ gioáng Vibrio (TCBS).
Moâi tröôøng nuoâi giöõ gioáng Pseudomonas. Moâi tröôøng phaân giaûi ñaïm höõu cô. Moâi tröôøng phaân giaûi tinh boät. Moâi tröôøng phaân giaûi CMC (Cellulose).
Moâi tröôøng kieåm tra noàng ñoä muoái. Moâi tröôøng nuoâi vaø phaân laäp vi khuaån trong cheá phaåm. Moâi tröôøng thöû nghieäm tính ñoái khaùng vôùi caùc chuûng gaây beänh. Phöông phaùp pha cheá moâi tröôøng.
Caân vaø hoaø tan moâi tröôøng. Phaân phoái vaø thanh truøng. Phaàn kieåm tra vi sinh. Phöông phaùp phaân laäp VSV.
Phöông phaùp xaùc ñònh khaû naêng phaân giaûi ñaïm höõu cô. Phöông phaùp xaùc ñònh khaû naêng phaân giaûi tinh boät. Phöông phaùp xaùc ñònh khaû naêng phaân giaûi CMC (Cellulose). Phöông phaùp xaùc ñònh khaû naêng chòu noàng ñoä muoái.
Phaàn kieåm tra caùc chæ tieâu moâi tröôøng. Phöông phaùp xaùc ñònh nhu caàu oxy hoaù hoïc (COD). Phöông phaùp xaùc ñònh nhu caàu oxy sinh hoaù (BOD5). Phöông phaùp xaùc ñònh haøm löôïng oxy hoaø tan trong nöôùc (DO).
Phöông phaùp xaùc ñònh haøm löôïng caùc chaát raén lô löûng (SS). Phöông phaùp xaùc ñònh chæ soá pH. 36 PHAÀN IV: KEÁT QUAÛ VAØ THAÛO LUAÄN. PHAÀN KIEÅM TRA VI SINH.
Phaân laäp gioáng töø cheá phaåm. 37 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 1. Hình thaùi khuaån laïc. Hình daïng teá baøo.
Ñaëc ñieåm sinh lyù cuûa caùc chuûng vi sinh vaät trong cheá phaåm. Khaû naêng phaân giaûi moät soá chaát höõu cô cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm. Xaùc ñònh tính ñoái khaùng cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm BRF-2 Aquakit vôùi caùc chuûng Vibrio vaø Pseudomonas. Nhu caàu oxygen cuûa caùc chuûng Vibrio vaø Pseudomonas.
Khaû naêng chòu noàng ñoä muoái cuûa caùc chuûng Vibrio vaø Pseudomonas sp. Khaû naêng ñoái khaùng cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm BRF-2 Aquakit vôùi chuûng Vibrio vaø Pseudomonas sp. PHAÀN KIEÅM TRA CAÙC CHÆ TIEÂU MOÂI TRÖÔØNG. Chæ tieâu COD.
Chæ tieâu BOD5. Chæ tieâu DO. Chæ tieâu SS. 60 PHAÀN V: KEÁT LUAÄN VAØ TOÀN TAÏI.
62 PHAÀN VI: TAØI LIEÄU THAM KHAÛO. 63 PHAÀN VII: PHUÏ LUÏC. 64 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP DANH MUÏC BAÛNG – BIEÅU ÑOÀ – HÌNH AÛNH Trang Baûng 1.1: Ñaëc ñieåm hình thaùi khuaån laïc.2: Hình daïng teá baøo caùc vi sinh vaät phaân laäp töø cheá phaåm.3: Khaû naêng chòu noàng ñoä muoái cuûa caùc chuûng vi sinh trong cheá phaåm.4: Khaû naêng phaân giaûi ñaïm höõu cô cuûa caùc chuûng (bieåu hieän baèng söï phaùt trieån soá löôïng cuûa caùc chuûng ).5: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm.6: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm.7: Khaû naêng chòu noàng ñoä muoái cuûa caùc chuûng Vibrio vaø Pseudomonas sp.8: Khaû naêng ñoái khaùng cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm vôùi vi khuaån Vibrio vaø Pseudomonas sp.1: Nhu caàu oxy hoùa hoïc (COD).2: Nhu caàu oxy sinh hoùa.3: Haøm löôïng oxy hoaø tan.4: Haøm löôïng chaát raén lô löûng. 60 Baûng phuï luïc: Danh muïc caùc gioáng loaøi vi sinh vaät vaø enzym thöôøng duøng saûn xuaát cheá phaåm sinh hoïc.
64 Baûng phuï luïc: Toùm löôïc lôïi ích cuûa cheá phaåm BRF ñoái vôùi tính chaát nöôùc ao nuoâi toâm.1: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng A. 45 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Bieåu ñoà 1.2: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng B.3: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng C.4: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng D.5: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng E.6: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuûa chuûng O.7: Söï töông quan veà ñöôøng kính ngoaøi giöõa caùc chuûng treân MT4.8: Söï töông quan veà ñöôøng kính trong giöõa caùc chuûng treân MT4.9: Söï töông quan veà ñöôøng kính thuûy phaân giöõa caùc chuûng treân MT4.10: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa chuûng A.11: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa chuûng B.12: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa chuûng D.13: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa chuûng E.14: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuûa chuûng O.15: Söï töông quan veà ñöôøng kính ngoaøi giöõa caùc chuûng treân MT5.16: Söï töông quan veà ñöôøng kính trong giöõa caùc chuûng treân MT5.17: Söï töông quan veà ñöôøng kính thuûy phaân giöõa caùc chuûng treân MT5.1: Söï bieán ñoåi haøm löôïng COD trong ao nuoâi.2: Söï bieán ñoåi haøm löôïng BOD5 trong ao nuoâi.3: Söï bieán ñoåi haøm löôïng DO trong ao nuoâi.4: Söï bieán ñoåi haøm löôïng SS trong ao nuoâi.1: Sô ñoà töông taùc phaùt sinh beänh ôû toâm.1: Caùc chuûng vi khuaån phaân laäp töø cheá phaåm.2: Khuaån laïc naám moác Aspergillus Oryzae treân moâi tröôøng Crapeck.66 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Hình 1.3: Cuoáng sinh baøo töû vaø sôïi tô naám moác Aspergillus oryzare.4: Caùc chuûng vi khuaån löu giöõ trong oáng nghieäm.5: Khaû naêng phaân giaûi tinh boät cuaû caùc chuûng.6: Khaû naêng phaân giaûi Cellulose cuaû caùc chuûng.7: Khaû naêng öùc cheá cuaû caùc chuûng trong cheá phaåm ñoái vôùi Pseudomonas sp.8: Khaû naêng öùc cheá cuûa caùc chuûng trong cheá phaåm ñoái vôùi Vibrio vulnificus.9: Vi khuaån Vibrio parahaemolyticus treân moâi tröôøng TCBS.10: Vi khuaån Vibrio harveyi treân moâi tröôøng chuyeân bieät.11: Vi khuaån Pseudomonas sp. treân moâi tröôøng.12: Toâm bò nhieãm vi khuaån Vibrio parahaemolyticus. 71 SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP PHAÀN I:ÑAËT VAÁN ÑEÀ Tröôùc söï phaùt trieån quaù nhanh dieän tích nuoâi toâm nhöng laïi khoâng baét kòp vôùi kyõ thuaät nuoâi môùi, neân khi chuyeån töø nuoâi toâm quaûng canh sang nuoâi toâm baùn thaâm canh vaø nuoâi toâm thaâm canh thì vieäc quaûn lyù moâi tröôøng ao nuoâi ngaøy caøng khoù khaên hôn vì vaán ñeà moâi tröôøng bò oâ nhieãm vaø dòch beänh.
Chaát löôïng moâi tröôøng ao nuoâi ñöôïc ñònh höôùng baèng nhieàu yeáu toá nhö yeáu toá vaät lyù, hoaù hoïc vaø sinh hoïc. Coù raát nhieàu thoâng soá veà moâi tröôøng trong ao nuoâi vaø noù bieán ñoåi khoâng ngöøng theo thôøi gian. Söï bieán ñoåi naøy phuï thuoäc vaøo nhieàu nhaân toá nhö khí haäu, nguoàn nöôùc söû duïng, tính chaát thoå nhöôõng trong ao vaø taùc ñoäng tröïc tieáp cuûa con ngöôøi. Ñieàu khieån vaø quaûn lyù ñöôïc caùc yeáu toá moâi tröôøng laø moät trong nhöõng vaán ñeà then choát ñeå daãn ñeán thaønh coâng cuûa vuï nuoâi.
Söï oâ nhieãm moâi tröôøng trong ao nuoâi ñöôïc hình thaønh töø lôùp buøn caën baõ höõu cô dô baån tích tuï laâu ngaøy ôû ñaùy ao, coù nguoàn goác töø caùc loaïi thöùc aên thöøa, caùc chaát thaûi cuûa toâm (voû toâm, xaùc toâm, ueá chaát…) vaø caùc ueá chaát höõu cô khaùc coù trong ao nuoâi. Chính nhöõng lôùp buøn dô baån naøy laø nguoàn chöùa ñuû moïi loaïi vi sinh vaät gaây beänh vaø caùc khí ñoäc haïi. Neáu trong ao nuoâi toâm coù nhieàu chaát caën baõ höõu cô hay thöïc phaåm dö thöøa thì caùc loaïi vi khuaån gaây beänh ñieån hình nhö Vibrio, Aeromonas, Pseudomonas…seõ coù ñieàu kieän sinh soâi naûy nôû vaø sôùm coäng höôûng gieát cheát toâm trong ao nuoâi. Cuõng töø lôùp buøn tích tuï naøy seõ gaây ra nhöõng aûnh höôûng nguy haïi cho toâm, cho söï hoaït ñoäng cuûa toaøn boä ao nuoâi vaø raát ñoäc vì chöùa nhieàu chaát nhö : Ammonia, Nitrite, Hydrogen sulfua.
Vaäy söùc khoeû cuûa toâm seõ bò aûnh höôûng nghieâm troïng khi ñaùy ao khoâng ñöôïc kieåm soaùt trieät ñeå. Söï aûnh höôûng cuûa moâi tröôøng trong thôøi gian ngaén seõ kích thích thaàn kinh moät caùch ñoàng loaït coøn trong thôøi gian daøi seõ laøm taêng stress ôû toâm. Ñoù cuõng laø nguyeân nhaân daãn ñeán vieäc tieâu thuï thöùc aên keùm vaø tæ leä taêng tröôûng thaáp. Maët khaùc, aûnh SVTH: NGUYEÃN VUÕ VIEÄT Trang 1 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP höôûng trong thôøi gian daøi coøn laøm taêng tính maãn caûm cuûa toâm ñoái vôùi moät soá beänh do virus vaø vi khuaån gaây ra.
Tröôùc thöïc traïng treân, trong nhöõng naêm gaàn ñaây döôùi söï phaùt trieån maïnh meõ cuûa coâng ngheä sinh hoïc nhaát laø coâng ngheä vi sinh, ngöôøi ta ñaõ taïo ra ñöôïc nhieàu chuûng vi sinh vaät coù khaû naêng phaân huûy ñöôïc caùc hôïp chaát phöùc taïp maø caùc chuûng vi sinh vaät coù saün trong töï nhieân khoù laøm ñöôïc.