Nghiên Cứu Khả Năng Kháng Bệnh Héo Rũ Gốc Mốc Trắng Của Cây Lạc (Arachis hypogaea L.) Được Chuyển Gen Chi42

Trường đại học

Đại học Huế

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

Luận án tiến sĩ

2023

163
1
0

Phí lưu trữ

30 Point

Mục lục chi tiết

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. MỞ ĐẦU

1.1. LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI

1.2. Mục tiêu nghiên cứu

1.3. Nội dung nghiên cứu

1.4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

1.5. Những đóng góp mới của luận án

2. TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU

2.1. Bệnh héo rũ gốc mốc trắng do nấm Sclerotium rolfsii gây ra và biện pháp phòng trừ

2.1.1. Các bệnh hại do nấm gây ra ở cây lạc

2.1.2. Bệnh héo rũ gốc mốc trắng do nấm S.

2.1.3. Cơ chế kháng nấm bệnh của cây lạc

2.1.4. Tình hình nghiên cứu các biện pháp phòng trừ bệnh do S. rolfsii gây ra ở cây lạc trên thế giới và Việt Nam

2.2. Sự phân bố chitinase trong tự nhiên

2.3. Phân loại chitinase

2.4. Cơ chế phản ứng của chitinase

2.5. Tình hình nghiên cứu chitinase từ Trichoderma

2.6. Cải thiện khả năng kháng nấm của cây lạc bằng kỹ thuật chuyển gen

2.6.1. Hệ thống vector trong biến nạp gen thông qua A.

2.6.2. Các promoter sử dụng trong chuyển gen thực vật

2.6.3. Tình hình nghiên cứu về promoter đặc hiệu rễ

2.6.4. Thay đổi mã di truyền của gen đích cho phù hợp với hệ thống biểu hiện

2.6.5. Ứng dụng kỹ thuật chuyển gen nhằm tăng cường khả năng kháng nấm ở cây lạc

2.6.6. Hệ thống tái sinh và quy trình chuyển gen ở cây lạc

2.6.7. Tình hình nghiên cứu chuyển gen chitinase vào cây lạc nhằm nâng cao khả năng kháng nấm

3. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1. Nguyên liệu nghiên cứu

3.1.1. Nguyên liệu thực vật

3.1.2. Các vector, chủng vi khuẩn và vi nấm

3.2. Phương pháp nghiên cứu

3.2.1. Hoàn thiện hệ thống tái sinh in vitro giống lạc L14

3.2.2. Tối ưu hóa trình tự gen Chi42

3.2.3. Sản xuất kháng thể đa dòng kháng chitinase 42 kDa

3.2.4. Xác định hoạt tính và đặc điểm của Ta-CHI42

3.2.5. Tạo dòng gen chitinase và promoter Asy trong vector biểu hiện thực vật

3.2.6. Chuyển gen chitinase bằng kỹ thuật thấm nhập

3.2.7. Biến nạp gen chitinase thông qua Agrobacterium

3.2.8. Nhận dạng và phân tích biểu hiện của gen chuyển

3.2.9. Thử nghiệm hoạt tính kháng nấm của chitinase thực vật

3.2.10. Đặc điểm sinh lý và hóa sinh của cây lạc chuyển gen in vivo

3.2.11. Xử lý thống kê

3.2.12. Thời gian và địa điểm nghiên cứu

4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

4.1. Hoàn thiện hệ thống tái sinh in vitro ở cây lạc

4.1.1. Ảnh hưởng của điều kiện khử trùng đến khả năng nảy mầm in vitro của hạt

4.1.2. Ảnh hưởng của phương thức nảy mầm

4.1.3. Khả năng tái sinh chồi từ các bộ phận khác nhau của cây lạc in vitro

4.1.4. Ảnh hưởng của BAP lên tái sinh chồi in vitro từ trụ trên lá mầm

4.1.5. Ảnh hưởng của BAP lên tái sinh chồi in vitro từ lá mầm

4.1.6. Ảnh hưởng của NAA và IBA lên khả năng tạo rễ của chồi in vitro

4.2. Sản xuất kháng thể đa dòng kháng chitinase ở chuột

4.3. Tổng hợp các gen chitinase

4.4. Tạo dòng các gen chitinase trong vector biểu hiện E.

4.5. Biểu hiện các gen chitinase trong E.

4.6. Sản xuất kháng thể đa dòng kháng Ta-CHI42

4.7. Hoạt tính thủy phân chitin của Ta-CHI42

4.8. Đặc điểm của enzyme Ta-CHI42

4.9. Hoạt tính kháng nấm in vitro của Ta-CHI42

4.10. Thiết kế các cấu trúc biểu hiện chitinase ở thực vật

4.11. Tạo dòng gen chitinase vào vector pMYV719

4.12. Tạo dòng gen chitinase và promoter Asy vào vector pMYV719

4.13. Tạo vi khuẩn A. tumefaciens LBA4404 mang gen chitinase

4.14. Biểu hiện của các gen chitinase

4.15. Hoạt tính thủy phân chitin của Ta-CHI42

4.16. Hoạt tính kháng nấm của enzyme Ta-CHI42 trong điều kiện in vitro

4.17. Ảnh hưởng của một số yếu tố lên hiệu quả chuyển gen chitinase vào cây lạc qua trung gian A.

4.17.1. Ảnh hưởng của thời gian tiền nuôi cấy

4.17.2. Ảnh hưởng của mật độ vi khuẩn

4.17.3. Ảnh hưởng của thời gian lây nhiễm

4.17.4. Ảnh hưởng của thời gian đồng nuôi cấy

4.17.5. Ảnh hưởng của nồng độ acetosyringone

4.17.6. Ảnh hưởng của nồng độ kanamycin

4.17.7. Ảnh hưởng của nồng độ cefotaxime

4.18. Biến nạp gen chitinase vào cây lạc thông qua A.

4.19. Chuyển gen chitinase vào cây lạc

4.20. Sàng lọc các cây lạc chuyển gen bằng PCR

4.21. Biểu hiện các gen chitinase trong cây lạc

4.22. Hoạt tính thủy phân chitin của chitinase

4.23. Hoạt tính kháng nấm của các dòng lạc chuyển gen

4.24. Đặc điểm sinh lý và hóa sinh của cây lạc chuyển gen sinh trưởng in vivo

4.24.1. Chọn giá thể thích hợp

4.24.2. Đặc điểm sinh lý

4.24.3. Đặc điểm hóa sinh

5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

Nghiên cứu khả năng kháng bệnh héo rũ gốc mốc trắng của cây lạc arachis hypogaea l được chuyển gen chi42

Tài liệu "Nghiên Cứu Khả Năng Kháng Bệnh Héo Rũ Gốc Mốc Trắng Của Cây Lạc Được Chuyển Gen Chi42" tập trung vào việc cải thiện khả năng kháng bệnh cho cây lạc thông qua công nghệ chuyển gen. Nghiên cứu này không chỉ giúp nâng cao năng suất và chất lượng cây lạc mà còn góp phần bảo vệ môi trường bằng cách giảm thiểu việc sử dụng thuốc trừ sâu. Độc giả sẽ tìm thấy những thông tin quý giá về phương pháp nghiên cứu, kết quả đạt được và tiềm năng ứng dụng trong thực tiễn nông nghiệp.

Để mở rộng kiến thức về các nghiên cứu liên quan đến cây trồng và công nghệ sinh học, bạn có thể tham khảo thêm tài liệu Luận văn nghiên cứu ảnh hưởng của một số tổ hợp npk đến sinh trưởng và năng suất của khoai lang trồng vụ xuân năm 2015 tại trường đại học nông lâm thái nguyên, nơi nghiên cứu ảnh hưởng của phân bón đến sự phát triển của cây trồng. Bên cạnh đó, tài liệu Luận văn tốt nghiệp nghiên cứu nhân giống cây chuối đỏ dacca musa acuminata bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro sẽ cung cấp cái nhìn sâu sắc về kỹ thuật nhân giống cây trồng hiện đại. Cuối cùng, bạn cũng có thể tìm hiểu về Luận án tiến sĩ nghiên cứu một số đặc tính chịu hạn và ảnh hưởng của phân bón đến sinh trưởng phát triển cây mạch môn ophiopogon japonicus l f ker gawl, giúp bạn hiểu rõ hơn về khả năng chịu hạn của các loại cây trồng khác. Những tài liệu này sẽ giúp bạn có cái nhìn toàn diện hơn về lĩnh vực nông nghiệp và công nghệ sinh học.