Phân Lập và Sàng Lọc Hoạt Tính Probiotic Kiểm Soát Vibrio parahaemolyticus Gây Bệnh trên Tôm Thẻ Chân Trắng

• Tác giả: Trần Hồng Ngọc Huyền
• Người hướng dẫn: ThS. Nguyễn Văn Minh
• Trường học: Trường Đại Học Mở Thành Phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Công Nghệ Sinh Học
• Đề tài: Phân Lập, Sàng Lọc Hoạt Tính Probiotic Và Khả Năng Kiểm Soát Sinh Học Vibrio parahaemolyticus Gây Bệnh Hoại Tử Gan Tụy Cấp Trên Tôm Thẻ Chân Trắng (Litopenaeus vannamei) Của Các Dòng Vi Khuẩn Bacillus Thu Thập Tại Ao Nuôi Tôm Tỉnh Trà Vinh
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2021
• Địa điểm: Thành Phố Hồ Chí Minh

• LỜI CẢM ƠN
• 1. PHẦN 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Tổng quan về ngành nuôi tôm
• 1.2. Tình hình nuôi tôm
• 1.3. Tình hình dịch bệnh tôm
• 1.4. Sơ lược về tôm Thẻ Chân Trắng
• 1.5. Bệnh hoại tử gan tụy trên tôm Thẻ Chân Trắng
• 1.6. Đặc điểm sinh học của vi khuẩn Bacillus
• 1.7. Đặc điểm sinh học của Vibrio
• 1.8. Đặc điểm nuôi cấy
• 1.9. Sơ lược về probiotic
• 1.10. Khái niệm và định nghĩa
• 1.11. Chọn lọc vi sinh vật làm probiotic cho tôm
• 1.12. Tình hình nghiên cứu
• 1.13. Tình hình nghiên cứu trong nước
• 1.14. Tình hình nghiên cứu ngoài nước
• 1.15. Định danh vi sinh vật bằng kỹ thuật giải trình tự
• 1.16. Nguyên lý chung của PCR
• 1.17. Phần mềm phân tích trình tự DNA
• 2. PHẦN 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Địa điểm nghiên cứu
• 2.2. Vật liệu nghiên cứu
• 2.3. Đối tượng nghiên cứu
• 2.4. Môi trường – hóa chất
• 2.5. Thiết bị - dụng cụ
• 2.6. Phương pháp nghiên cứu chính
• 2.7. Bố trí thí nghiệm
• 2.8. Phân lập vi khuẩn Bacillus và làm thuần
• 2.9. Kiểm tra đặc tính sinh hóa
• 2.10. Sàng lọc Bacillus cereus
• 2.11. Khảo sát khả năng sinh enzyme ngoại bào
• 2.12. Khả năng đối kháng với Vibrio parahaemolyticus
• 2.13. Khảo sát khả năng chịu mặn
• 2.14. Khảo sát khả năng chịu pH
• 2.15. Khả năng tương thích giữa các chủng tuyển chọn
• 2.16. Định danh các dòng vi khuẩn đã chọn lọc bằng phương pháp giải trình tự 16S rRNA
• 2.17. Phương pháp xử lí số liệu
• 3. PHẦN 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Kết quả phân lập
• 3.2. Kiểm tra đặc tính sinh hóa
• 3.3. Đánh giá sơ bộ tính an toàn của chủng vi khuẩn phân lập được
• 3.4. Khả năng sinh enzyme ngoại bào
• 3.5. Kết quả khảo sát khả năng đối kháng của các chủng phân lập được với Vibrio parahaemolyticus
• 3.6. Kết quả khả năng tương thích của hai chủng tuyển chọn
• 3.7. Kết quả khảo sát khả năng chịu mặn
• 3.8. Kết quả khảo sát khả năng chịu pH
• 3.9. Kết quả định danh bằng phương pháp sinh học phân tử
• 4. PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

I. Tổng quan về Nghiên Cứu Hoạt Tính Probiotic cho Tôm

Nghiên cứu về hoạt tính probiotic và khả năng kiểm soát sinh học của các dòng vi khuẩn Bacillus đối với Vibrio parahaemolyticus trên tôm Thẻ Chân Trắng (Litopenaeus vannamei) đang trở thành một lĩnh vực quan trọng trong ngành nuôi trồng thủy sản. Tôm Thẻ Chân Trắng là một trong những loài tôm có giá trị kinh tế cao, nhưng cũng dễ mắc bệnh, đặc biệt là bệnh hoại tử gan tụy cấp (AHPND) do Vibrio parahaemolyticus gây ra. Việc sử dụng probiotic như một giải pháp sinh học để kiểm soát bệnh tôm đang được nghiên cứu và áp dụng rộng rãi.

1.1. Tầm quan trọng của Probiotic trong Nuôi Tôm

Probiotic có vai trò quan trọng trong việc cải thiện sức khỏe và tăng trưởng của tôm. Chúng giúp cân bằng hệ vi sinh vật trong môi trường nuôi, giảm thiểu sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh như Vibrio parahaemolyticus.

1.2. Các Dòng Vi Khuẩn Bacillus và Tác Động của Chúng

Các dòng vi khuẩn Bacillus được biết đến với khả năng tiết ra enzyme và kháng sinh tự nhiên, giúp ức chế sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh. Nghiên cứu cho thấy Bacillus có thể cải thiện sức khỏe tôm và tăng cường khả năng kháng bệnh.

II. Vấn Đề và Thách Thức trong Nuôi Tôm Thẻ Chân Trắng

Ngành nuôi tôm Thẻ Chân Trắng đang đối mặt với nhiều thách thức, đặc biệt là sự bùng phát của các bệnh do vi khuẩn như Vibrio parahaemolyticus. Bệnh hoại tử gan tụy cấp (AHPND) đã gây thiệt hại lớn cho ngành nuôi tôm, ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng sản phẩm. Việc lạm dụng kháng sinh trong nuôi tôm cũng dẫn đến tình trạng kháng thuốc, làm tăng nguy cơ dịch bệnh.

2.1. Tình Hình Dịch Bệnh Tôm Hiện Nay

Tình hình dịch bệnh tôm đang ngày càng nghiêm trọng, với nhiều trường hợp mắc bệnh hoại tử gan tụy cấp. Các triệu chứng như tôm bỏ ăn, bơi chậm và tỷ lệ chết cao đã được ghi nhận.

2.2. Nguyên Nhân Gây Ra Bệnh Hoại Tử Gan Tụy

Nguyên nhân chính gây ra bệnh hoại tử gan tụy là do vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus. Vi khuẩn này xâm nhập vào đường tiêu hóa của tôm và sản sinh độc tố, gây tổn thương nghiêm trọng đến gan tụy.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Hoạt Tính Probiotic cho Tôm

Nghiên cứu này sử dụng các phương pháp phân lập và sàng lọc các dòng vi khuẩn Bacillus từ môi trường nuôi tôm. Các chủng vi khuẩn được kiểm tra khả năng sinh enzyme và khả năng kháng lại Vibrio parahaemolyticus. Phương pháp PCR cũng được áp dụng để định danh các chủng vi khuẩn đã chọn lọc.

3.1. Phân Lập và Sàng Lọc Các Dòng Bacillus

Quá trình phân lập các dòng Bacillus từ mẫu nước và trầm tích ao nuôi tôm được thực hiện để tìm ra các chủng có khả năng probiotic tốt nhất.

3.2. Kiểm Tra Khả Năng Sinh Enzyme và Kháng Bệnh

Các chủng Bacillus được kiểm tra khả năng sinh enzyme như protease, amylase và cellulase, cũng như khả năng kháng lại Vibrio parahaemolyticus để đánh giá tiềm năng ứng dụng trong nuôi tôm.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu và Ứng Dụng Thực Tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy một số dòng Bacillus có khả năng kháng lại Vibrio parahaemolyticus và có thể được sử dụng làm probiotic cho tôm Thẻ Chân Trắng. Việc ứng dụng các dòng vi khuẩn này trong nuôi tôm có thể giúp cải thiện sức khỏe tôm và giảm thiểu thiệt hại do bệnh tật.

4.1. Đánh Giá Khả Năng Kháng Bệnh của Các Dòng Bacillus

Các dòng Bacillus được sàng lọc cho thấy khả năng kháng lại Vibrio parahaemolyticus cao, cho thấy tiềm năng ứng dụng trong nuôi tôm.

4.2. Ứng Dụng Probiotic trong Nuôi Tôm

Việc sử dụng probiotic từ các dòng Bacillus có thể giúp cải thiện sức khỏe tôm, tăng trưởng nhanh hơn và giảm thiểu thiệt hại do bệnh tật.

V. Kết Luận và Tương Lai của Nghiên Cứu Probiotic cho Tôm

Nghiên cứu về hoạt tính probiotic và khả năng kiểm soát sinh học của các dòng Bacillus đối với Vibrio parahaemolyticus trên tôm Thẻ Chân Trắng mở ra hướng đi mới trong việc phát triển bền vững ngành nuôi tôm. Việc áp dụng các giải pháp sinh học như probiotic có thể giúp giảm thiểu sự phụ thuộc vào kháng sinh và cải thiện sức khỏe tôm.

5.1. Tương Lai của Nghiên Cứu Probiotic

Nghiên cứu sẽ tiếp tục mở rộng để tìm kiếm thêm các dòng vi khuẩn có lợi khác, nhằm đa dạng hóa nguồn probiotic cho tôm.

5.2. Hướng Đi Mới trong Nuôi Tôm Bền Vững

Việc áp dụng probiotic trong nuôi tôm không chỉ giúp cải thiện sức khỏe tôm mà còn góp phần bảo vệ môi trường và phát triển bền vững ngành nuôi trồng thủy sản.