Nghiên Cứu Định Lượng Paraquat Trong Huyết Tương Bằng Phương Pháp Điện Di Mao Quản

Paraquat (PQ) có tên khoa học là 1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridilium, thuộc nhóm amin bậc 4. Nó thường được sử dụng dưới dạng muối dichloride, là tinh thể màu trắng. Paraquat ổn định trong môi trường acid hoặc trung tính, tan tốt trong nước nhưng ít tan trong dung môi hữu cơ. Nó dễ bị phân hủy dưới ánh sáng UV và mất hoạt tính khi tiếp xúc với đất. Dung dịch paraquat đậm đặc có thể ăn mòn kim loại.

Mặc dù nhiều quốc gia đã cấm sử dụng paraquat, Việt Nam vẫn sử dụng rộng rãi loại thuốc diệt cỏ này. Năm 2013, Việt Nam nhập khẩu gần 10.000 lít paraquat thành phẩm. Đến năm 2017, Bộ NN&PTNT mới ban hành thông tư loại bỏ paraquat khỏi danh mục thuốc bảo vệ thực vật được phép sử dụng. Tuy nhiên, lượng tồn dư vẫn còn nhiều, nguy cơ ngộ độc vẫn còn cao. Cần có các biện pháp kiểm soát chất lượng và quản lý chặt chẽ hơn.

Cơ chế gây độc của paraquat liên quan đến chu trình oxy hóa khử liên tục, tạo ra các gốc tự do như superoxid và hydroxyl. Các gốc tự do này gây tổn thương tế bào bằng cách phá hủy lipid màng, DNA và protein. Điều này dẫn đến cạn kiệt NADPH và gây chết tế bào. Do đó, cơ chế độc tính paraquat là một quá trình phức tạp và nguy hiểm.

Các phương pháp như sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS), sắc ký khí khối phổ (GC-MS), và sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) đều có thể được sử dụng để phân tích paraquat. Tuy nhiên, mỗi phương pháp có ưu và nhược điểm riêng về độ nhạy, độ chính xác và chi phí. Việc lựa chọn phương pháp phù hợp phụ thuộc vào điều kiện trang thiết bị và yêu cầu về thời gian phân tích.

Phương pháp HPLC đòi hỏi thiết bị đắt tiền và quy trình vận hành phức tạp, gây khó khăn cho các bệnh viện tuyến địa phương. Do đó, cần có một phương pháp thay thế với chi phí thấp hơn nhưng vẫn đảm bảo độ chính xác và tin cậy để định lượng paraquat trong mẫu huyết tương.

Việc định lượng paraquat sớm trong huyết tương là yếu tố then chốt để đánh giá mức độ nghiêm trọng của ngộ độc và đưa ra phác đồ điều trị kịp thời. Điều này đặc biệt quan trọng trong việc quyết định có nên tiến hành lọc máu hấp phụ hay không, nhằm cải thiện tiên lượng sống cho bệnh nhân.

Kỹ thuật điện di mao quản (CE) có nhiều ưu điểm so với các phương pháp khác, bao gồm chi phí thiết bị thấp, khả năng phân tích nhanh, và yêu cầu lượng mẫu nhỏ. CE cũng có thể được sử dụng để phân tích nhiều loại chất khác nhau, làm cho nó trở thành một công cụ hữu ích trong phòng thí nghiệm.

Detector độ dẫn không tiếp xúc (C4D) là một loại detector được sử dụng trong điện di mao quản để phát hiện các chất dựa trên độ dẫn điện của chúng. C4D có ưu điểm là không cần tiếp xúc trực tiếp với dung dịch, giảm thiểu nguy cơ nhiễm bẩn và ăn mòn điện cực.

Nghiên cứu này tập trung vào việc phát triển phương pháp điện di mao quản sử dụng detector C4D để định lượng paraquat trong huyết tương. Quá trình này bao gồm tối ưu hóa các điều kiện phân tích, đánh giá độ tin cậy của phương pháp, và so sánh kết quả với phương pháp HPLC.

Quá trình này bao gồm khảo sát ảnh hưởng của hệ đệm, các cation ảnh hưởng đến quá trình phân tách paraquat. Mục tiêu là tìm ra điều kiện phân tích tốt nhất để đạt được độ phân giải cao và độ nhạy tối ưu.

Phương pháp chiết pha rắn (SPE) được sử dụng để tách paraquat từ mẫu huyết tương. Quá trình này bao gồm khảo sát khả năng loại bỏ cation của cột C18, sử dụng EDTA để cải thiện hiệu quả tách chiết, và tối ưu hóa thành phần dung dịch rửa giải.

Các thông số như độ chính xác, độ đúng, giới hạn phát hiện (LOD), và giới hạn định lượng (LOQ) được đánh giá để xác định độ tin cậy của phương pháp điện di mao quản. Kết quả này sẽ cho biết phương pháp có đủ tin cậy để sử dụng trong thực tế hay không.

Việc xây dựng đường chuẩn paraquat trên nền mẫu huyết tương là rất quan trọng để đảm bảo độ chính xác của phương pháp. Đường chuẩn này được sử dụng để định lượng nồng độ paraquat trong các mẫu thực tế.

Kết quả phân tích mẫu thực tế bằng phương pháp CE-C4D được so sánh với kết quả từ phương pháp HPLC để đánh giá độ chính xác và độ tin cậy của phương pháp mới. Sự tương đồng giữa hai phương pháp sẽ chứng minh tính khả thi của việc sử dụng CE-C4D trong ứng dụng lâm sàng.

Phương pháp CE-C4D được sử dụng để định lượng nồng độ paraquat trong mẫu huyết tương của bệnh nhân ngộ độc. Kết quả này cung cấp thông tin quan trọng để đánh giá mức độ nghiêm trọng của ngộ độc và đưa ra quyết định điều trị phù hợp.

Phương pháp CE-C4D có tiềm năng lớn trong ứng dụng lâm sàng để định lượng paraquat trong huyết tương. Với chi phí thấp và quy trình đơn giản, phương pháp này có thể được triển khai rộng rãi tại các bệnh viện tuyến địa phương.

Trong tương lai, phương pháp điện di mao quản có thể được cải tiến hơn nữa bằng cách kết hợp với các kỹ thuật khác như điện di mao quản kết hợp khối phổ (CE-MS) để tăng độ nhạy và độ đặc hiệu. Ngoài ra, việc phát triển các quy trình xử lý mẫu đơn giản và nhanh chóng hơn cũng là một hướng đi quan trọng.

Việc triển khai rộng rãi phương pháp điện di mao quản để định lượng paraquat sẽ giúp các bác sĩ chẩn đoán sớm và điều trị kịp thời cho bệnh nhân ngộ độc. Điều này có thể góp phần quan trọng vào việc giảm tỷ lệ tử vong do ngộ độc paraquat.