Nghiên Cứu Đặc Điểm Thực Vật và Tác Dụng Sinh Học của Cây Tầm Bóp (Physalis angulata L.)

Cây Tầm Bóp (Physalis angulata L.) là một loài thực vật thuộc họ Cà (Solanaceae), nổi bật với nhiều đặc điểm sinh học… 168 trang · Đại học Dược Hà Nội · 2023.

• Tác giả: NCS. Hoàng Thái Hòa
• Người hướng dẫn: PGS. Trần Thị Oanh
• Trường học: Đại học Dược Hà Nội
• Chuyên ngành: Dược liệu - Dược học cổ truyền
• Đề tài: Nghiên Cứu Đặc Điểm và Tác Dụng Sinh Học của Cây Tầm Bóp (Physalis angulata L.)
• Loại tài liệu: luận án tiến sĩ dược học
• Năm xuất bản: 2023
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• MỤC LỤC
• DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC HÌNH
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. THỰC VẬT HỌC
• 1.1.1. Vị trí phân loại
• 1.1.2. Đặc điểm thực vật
• 1.1.3. Phân bố và sinh thái
• 1.2. CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHÍNH
• 1.2.1. Nhóm hợp chất phi phenolic
• 1.2.1.1. Withanolid
• 1.2.2. Nhóm hợp chất phenolic
• 1.3. TÁC DỤNG SINH HỌC
• 1.3.1. Hoạt tính kháng viêm
• 1.3.2. Hoạt tính giảm đau
• 1.3.3. Hoạt tính gây độc tế bào ung thư
• 1.3.4. Hoạt tính điều hòa miễn dịch
• 1.3.5. Hoạt tính chống đái tháo đường
• 1.3.6. Hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm
• 1.3.7. Hoạt tính kháng ký sinh trùng
• 1.3.8. Hoạt tính diệt nhuyễn thể
• 1.3.9. Hoạt tính chống hen suyễn
• 1.3.10. Hoạt tính lợi tiểu
• 1.4. CÔNG DỤNG TRONG Y HỌC CỔ TRUYỀN
• 1.4.1. Công dụng trong y học cổ truyền thế giới
• 1.4.2. Công dụng trong y học cổ truyền Việt Nam
• 2. CHƯƠNG 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, TRANG THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
• 2.1.1. Nguyên liệu nghiên cứu
• 2.1.2. Động vật thí nghiệm
• 2.1.3. Thuốc thử, hóa chất, dung môi và dòng tế bào
• 2.2. TRANG THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU
• 2.3. ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
• 2.3.1. Địa điểm nghiên cứu thực vật
• 2.3.2. Địa điểm nghiên cứu thành phần hóa học
• 2.3.3. Địa điểm nghiên cứu một số tác dụng sinh học
• 2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.4.1. Phương pháp nghiên cứu thực vật
• 2.4.2. Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học
• 2.4.3. Phương pháp nghiên cứu một số tác dụng sinh học
• 2.5. XỬ LÝ SỐ LIỆU
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 3.1. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT CỦA TẦM BÓP
• 3.1.1. Mô tả đặc điểm hình thái và giám định tên khoa học của Tầm bóp
• 3.1.2. Đặc điểm vi học
• 3.1.3. Đặc điểm bột dược liệu
• 3.2. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA TẦM BÓP
• 3.2.1. Chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc của các hợp chất
• 3.3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA TẦM BÓP
• 3.3.1. Hoạt tính kháng viêm
• 3.3.2. Tác dụng giảm đau
• 3.3.3. Tác dụng trên chuyển hóa acid béo và glucose trong tế bào gan HepG2
• 3.3.4. Tác dụng gây độc trên một số dòng tế bào ung thư
• 4. CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN
• 4.1. VỀ THỰC VẬT
• 4.2. VỀ TÁC DỤNG SINH HỌC
• 4.2.1. Hoạt tính kháng viêm
• 4.2.2. Tác dụng giảm đau
• 4.2.3. Tác dụng trên chuyển hóa acid béo và glucose trong tế bào gan HepG2
• 4.2.4. Tác dụng gây độc trên một số dòng tế bào ung thư in vitro
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về Nghiên cứu Cây Tầm Bóp Physalis angulata L

Cây Tầm Bóp (Physalis angulata L.) là một loài thực vật thuộc họ Cà (Solanaceae), nổi bật với nhiều đặc điểm sinh học và hóa học độc đáo. Nghiên cứu về cây này không chỉ giúp hiểu rõ hơn về đặc điểm thực vật mà còn mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng trong y học cổ truyền. Cây Tầm Bóp được biết đến với nhiều tác dụng sinh học, từ kháng viêm đến điều hòa miễn dịch, làm cho nó trở thành một đối tượng nghiên cứu hấp dẫn trong lĩnh vực dược liệu.

1.1. Đặc điểm thực vật của Cây Tầm Bóp

Cây Tầm Bóp là cây thảo, sống hằng năm, cao tới 1 m. Thân cây nhẵn, có góc cạnh và phân cành nhiều. Lá mọc so le, hình trái xoan, có chiều dài từ 3 đến 5,5 cm. Hoa của cây có màu vàng tươi hoặc trắng nhạt, thường mọc đơn độc ở kẽ lá.

1.2. Phân bố và sinh thái của Cây Tầm Bóp

Cây Tầm Bóp có nguồn gốc từ châu Mỹ nhiệt đới và hiện nay đã được phân bố rộng rãi ở nhiều vùng nhiệt đới khác nhau. Ở Việt Nam, cây thường mọc ở các vùng đồng bằng và núi cao, ưa sáng và có thể chịu bóng nhẹ.

II. Vấn đề và Thách thức trong Nghiên cứu Cây Tầm Bóp

Mặc dù Cây Tầm Bóp có nhiều tiềm năng trong y học, nhưng vẫn còn nhiều thách thức trong việc nghiên cứu và ứng dụng. Việc thiếu thông tin về thành phần hóa học và tác dụng sinh học của cây đã hạn chế khả năng khai thác và ứng dụng của nó trong thực tiễn.

2.1. Thiếu thông tin về thành phần hóa học

Nhiều nghiên cứu trước đây chưa cung cấp đầy đủ thông tin về các hợp chất hóa học có trong Cây Tầm Bóp, điều này gây khó khăn trong việc xác định các tác dụng sinh học cụ thể của nó.

2.2. Khó khăn trong việc ứng dụng thực tiễn

Mặc dù có nhiều tác dụng sinh học được ghi nhận, nhưng việc ứng dụng Cây Tầm Bóp trong y học cổ truyền vẫn chưa được phổ biến, do thiếu sự công nhận và nghiên cứu sâu rộng.

III. Phương pháp Nghiên cứu Đặc điểm và Tác dụng Sinh học của Cây Tầm Bóp

Nghiên cứu về Cây Tầm Bóp được thực hiện thông qua nhiều phương pháp khác nhau, từ phân tích hình thái đến chiết xuất và xác định thành phần hóa học. Các phương pháp này giúp làm rõ hơn về đặc điểm sinh học và tác dụng của cây.

3.1. Phương pháp nghiên cứu thực vật

Nghiên cứu hình thái và vi học của Cây Tầm Bóp được thực hiện thông qua việc thu thập mẫu và phân tích dưới kính hiển vi, giúp xác định các đặc điểm hình thái và cấu trúc tế bào.

3.2. Phương pháp chiết xuất và phân lập hợp chất

Các hợp chất hóa học trong Cây Tầm Bóp được chiết xuất bằng nhiều phương pháp khác nhau như sắc ký lỏng và sắc ký khí, giúp xác định các thành phần chính có trong cây.

IV. Kết quả Nghiên cứu về Tác dụng Sinh học của Cây Tầm Bóp

Kết quả nghiên cứu cho thấy Cây Tầm Bóp có nhiều tác dụng sinh học đáng chú ý, bao gồm hoạt tính kháng viêm, giảm đau và điều hòa miễn dịch. Những kết quả này mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng cây trong y học.

4.1. Hoạt tính kháng viêm của Cây Tầm Bóp

Nghiên cứu cho thấy chiết xuất từ Cây Tầm Bóp có khả năng ức chế viêm hiệu quả, điều này có thể được giải thích bởi sự hiện diện của các hợp chất sinh học như withanolid.

4.2. Tác dụng giảm đau và điều hòa miễn dịch

Cây Tầm Bóp cũng cho thấy khả năng giảm đau và điều hòa miễn dịch, điều này có thể mở ra cơ hội cho việc phát triển các sản phẩm dược phẩm mới từ cây.

V. Kết luận và Tương lai của Nghiên cứu Cây Tầm Bóp

Nghiên cứu về Cây Tầm Bóp không chỉ giúp làm rõ các đặc điểm sinh học mà còn mở ra nhiều cơ hội ứng dụng trong y học. Tương lai của nghiên cứu này cần được tiếp tục khai thác để phát triển các sản phẩm dược liệu hiệu quả.

5.1. Tầm quan trọng của Cây Tầm Bóp trong y học

Cây Tầm Bóp có tiềm năng lớn trong việc phát triển các sản phẩm dược liệu, nhờ vào các tác dụng sinh học đa dạng của nó.

5.2. Hướng nghiên cứu trong tương lai

Cần có thêm nhiều nghiên cứu sâu hơn về thành phần hóa học và tác dụng sinh học của Cây Tầm Bóp để khai thác tối đa giá trị của nó trong y học cổ truyền và hiện đại.

Nội dung chính

Tổng quan luận án

Cây Tầm bóp (Physalis angulata L., họ Cà - Solanaceae) là loài thực vật phân bố phổ biến ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới. Tại Việt Nam, Tầm bóp mọc hoang dại ở nhiều vùng sinh thái từ đồng bằng đến vùng núi cao, thường được nhân dân sử dụng theo kinh nghiệm dân gian để tắm trị rôm sảy, mẩn ngứa, mụn nhọt hoặc sắc uống chữa cảm sốt, ho đờm, viêm khớp và đau nhức. Trên thế giới, nhiều công trình khoa học đã ghi nhận các chiết xuất và hoạt chất tinh khiết từ loài này có hoạt tính sinh học đa dạng như kháng viêm, giảm đau, độc tế bào ung thư, điều hòa miễn dịch, hạ đường huyết và kháng khuẩn. Tuy nhiên, tại Việt Nam, cây Tầm bóp chủ yếu vẫn bị coi là cỏ dại; các nghiên cứu trong nước trước đây chỉ mới dừng lại ở quy mô khảo sát sơ bộ, chưa có hệ thống dữ liệu toàn diện về đặc điểm thực vật học chuẩn hóa, thành phần hóa học chi tiết và các tác dụng sinh học thực nghiệm chuyên sâu trên chuyển hóa và tế bào học.

Khoảng trống nghiên cứu này đặt ra yêu cầu phải có một công trình nghiên cứu đầy đủ, khoa học nhằm làm sáng tỏ các đặc điểm thực vật, vi học, cấu trúc hóa học của các hợp chất tinh khiết và cơ chế tác dụng sinh học của Tầm bóp thu hái tại Việt Nam.

Luận án tiến sĩ dược học của nghiên cứu sinh Hoàng Thái Hòa với đề tài "Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Tầm bóp (Physalis angulata L.), họ Cà (Solanaceae)", thực hiện tại Viện Dược liệu dưới sự hướng dẫn khoa học của PGS. Trần Thị Oanh và PGS. Nguyễn Thượng Dong, chuyên ngành Dược liệu – Dược học cổ truyền (Mã số: 9720206), giải quyết 3 mục tiêu cụ thể:

1. Mô tả được hình thái thực vật, giám định tên khoa học và xác định được đặc điểm vi học của cây Tầm bóp.
2. Chiết xuất, phân lập và xác định được cấu trúc hóa học một số hợp chất từ cây Tầm bóp.
3. Đánh giá được một số tác dụng sinh học của cao chiết và một số hợp chất phân lập được từ cây Tầm bóp.

Đối tượng nghiên cứu của luận án là toàn bộ cây Tầm bóp (Physalis angulata L.) có đầy đủ thân, lá, hoa và quả. Mẫu thực vật phục vụ nghiên cứu được thu hái tại huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội vào tháng 11 năm 2014, được giám định khoa học và lưu trữ tiêu bản chuẩn. Phạm vi nghiên cứu thực nghiệm bao gồm: khảo sát hình thái và vi học; chiết xuất phân đoạn và phân lập các hợp chất withanolid, phenolic; thử nghiệm hoạt tính kháng viêm, giảm đau trên động vật thực nghiệm; đánh giá tác dụng trên chuyển hóa lipid, glucose và tác dụng gây độc trên các dòng tế bào ung thư in vitro.

Tổng quan tài liệu và vị trí của luận án

Tổng quan tài liệu của luận án hệ thống hóa toàn bộ các công trình nghiên cứu trong nước và quốc tế về chi Physalis và loài Physalis angulata L. trên bốn phương diện: thực vật học, thành phần hóa học, tác dụng dược lý và công dụng trong y học cổ truyền.

Về mặt phân loại học, chi Physalis L. thuộc họ Cà (Solanaceae), bộ Solanales. Tên chi bắt nguồn từ tiếng Hy Lạp mang nghĩa "bong bóng", chỉ đặc điểm đài hoa phát triển đồng trưởng phồng to bao bọc lấy quả mọng. Chi này được Carl von Linné xác lập năm 1753 với khoảng 75 đến 100 loài, có nguồn gốc phân loại ban đầu từ Mexico, sau đó phát tán sang các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới toàn cầu. Tại Việt Nam, loài Tầm bóp (Physalis angulata L.) đã được ghi nhận trong các công trình thực vật kinh điển:

• Joannis de Loureiro trong công trình "Flora cochinchinensis" (1790).
• Gustave Henri Bonati trong "Flore générale de l'Indo-Chine" (1915).
• Phạm Hoàng Hộ trong "Cây cỏ Miền Nam Việt Nam" (1972) và "Cây cỏ Việt Nam" (2000).
• Vũ Văn Hợp trong "Thực vật chí Việt Nam" (2017).

Về thành phần hóa học, y văn thế giới ghi nhận chiết xuất từ Physalis angulata chứa nhiều nhóm hợp chất tự nhiên:

• Tinh dầu: Chứa 31,7% phytol, 18,8% hexahydrofarnesyl aceton (6,10,14-trimethyl-2-pentadecanon), 8,6% n-nonadecan, 5,0% acid n-hexadecanoic, 3,8% heptadecan, 3,6% acid oleic, 3,3% 2-methylpentadecan, 2,8% farnesol acetat và 2,3% 2-phenylundecan.
• Carotenoid: 22 hợp chất carotenoid từ quả được xác định bằng phương pháp HPLC-PDA-MS/MS, trong đó trans-caroten chiếm 62,2%, 9-cis-caroten chiếm 2,9% và trans-cryptoxanthin chiếm 2,7%.
• Withanolid: Hơn 100 hợp chất withanolid đã được phân lập, phân loại thành:
  • Withanolid loại A (khung $\delta$-lacton/lactol): Nhóm I có khung không biến đổi, gồm dạng $5\beta,6\beta$-epoxid (như physagulid J, withanolid E, physagulid P, S, withangulatin B), withanolid-5-en và các withanolid trung gian (physagulin J, K, P, M, E, Q, physangulatin A–N, physagulid A, B, E, G, H, withaminimin, withaperuvin). Nhóm II có khung biến đổi gồm phân nhóm physalin (physalin B, D, E, F, G, I, J, K, T, U, V, W, VII, IX, aromaphysalin A), neophysalin và withaphysalin (withaphysalin Y, Z).
  • Các withanolid khác: aromaphysalin B, aminophysalin A, physanolid A, physalin X, XI, physangulidin A, B, C.
• Terpenoid: Các glycosid diterpen và triterpen như physangulatosid A–L, acid oleanolic, squalen, squalen-1-ol, phytol.
• Hợp chất Phenolic và Flavonoid: Kaempferol 7-O-rhamnosid, kaempferol 3-O-rutinosid, kaempferol 3-O-rutinosid-7-O-glucopyranosid, quercetin, quercetin 3-O-methyl ether, isoquercetrin, rutin, gaultherin, physangulosid A–B, guaiacyl-$\beta$-D-primeverosid, methyl salicylat 2-O-triglycosid, icarisid $\text{E}_4$.

Về mặt tác dụng sinh học, các nghiên cứu quốc tế đã công bố:

• Kháng viêm và ức chế NO: Cao nước rễ làm giảm 50% thể tích dịch tiết và 60% nồng độ NO ở liều 1 mg/kg, tăng nồng độ TGF-$\beta$ lên 9700 pg/mL ở liều 5 mg/kg; cao lá ức chế 85,9% viêm màng tế bào máu ở 2000 $\mu$g/mL; cao MeOH ức chế 62,71% phù bàn chân chuột do carrageenan ở liều 400 mg/kg; các hợp chất physangulatin C–K, physagulid I, J, physagulin A, B, H, I, N ức chế sản xuất NO do LPS gây ra trên đại thực bào RAW 264.7 với $\text{IC}{50}$ từ 1,36 đến 11,59 $\mu$M; physalin B, F, H có $\text{IC}{50}$ từ 0,32 đến 4,03 $\mu$M.
• Giảm đau: Cao nước rễ ức chế 83% co thắt bụng do acid acetic với $\text{ID}_{50}$ là 18,5 mg/kg; cao MeOH lá ức chế 72,7% đau quặn ở liều 400 mg/kg (so với ibuprofen 100 mg/kg đạt 21,2%).
• Gây độc tế bào ung thư: Gây bắt giữ chu kỳ tế bào ở pha $\text{G}2/\text{M}$ và kích hoạt apoptosis trên MDA-MB-231, MCF-7, HSC-3; gây độc trên các dòng tế bào HA22T, HeLa, KB, Colo-205, Calu-1, HCT-116, PC-3, DU-145, 786-O, A-498, ACHN, A375-S2, HepG2; các chất withangulatin A, physalin B, D, F, physagulid I, J, physangulidin A–C cho giá trị $\text{IC}{50}/\text{EC}_{50}$ từ 0,06 đến dưới 10 $\mu$M.
• Tác dụng điều hòa miễn dịch, chống đái tháo đường (ức chế $\alpha$-amylase và $\alpha$-glucosidase), kháng khuẩn, kháng nấm, kháng ký sinh trùng (Leishmania, Plasmodium berghei, Trypanosoma cruzi), diệt nhuyễn thể (Biomphalaria tenagophila), kháng histamin chống co thắt khí quản và tăng bài tiết ion lợi tiểu.

Vị trí của luận án: Kế thừa các dữ liệu nền tảng trên thế giới, tác giả tập trung giải quyết khoảng trống nghiên cứu về dược liệu Tầm bóp thu hái tại Việt Nam bằng việc thiết lập tiêu chuẩn thực vật - vi học, phân lập và làm sáng tỏ cấu trúc 15 hợp chất tinh khiết (ký hiệu PA1 đến PA15), đồng thời kiểm chứng các tác dụng sinh học thực nghiệm về kháng viêm, giảm đau, chuyển hóa lipid/glucose gan và độc tính tế bào ung thư.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Luận án kết hợp các nguyên lý của thực vật học hình thái, vi học dược liệu, hóa học các hợp chất tự nhiên và dược lý học thực nghiệm (in vitro và in vivo).

Nguồn mẫu và địa điểm nghiên cứu

• Mẫu thực vật: Thu hái toàn cây Tầm bóp tại huyện Gia Lâm, Hà Nội vào tháng 11/2014. Tên khoa học được xác định là Physalis angulata L., họ Cà (Solanaceae) bởi PGS. Trần Văn Ơn (Trường Đại học Dược Hà Nội) và PGS. Nguyễn Khắc Khôi (Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật). Tiêu bản lưu tại Phòng Tiêu bản Bộ môn Thực vật - Đại học Dược Hà Nội (mã số HNIP/18111/15) và Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật (mã số PA 101).
• Động vật thực nghiệm: Chuột nhắt trắng chủng Swiss khỏe mạnh, khối lượng 18 - 20 g (Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp); chuột cống trắng chủng Wistar khỏe mạnh, khối lượng 150 - 180 g (Học viện Quân Y cung cấp), nuôi dưỡng thích nghi 5 ngày trước thí nghiệm tại Bộ môn Dược lực - Trường Đại học Dược Hà Nội.
• Dòng tế bào: Đại thực bào RAW 264.7, tế bào gan HepG2 (ATCC); các dòng tế bào ung thư SNU-1 (dạ dày người), 4T1 (vú chuột), LLC (phổi chuột), Hep3B (gan người), NTERA-2 (tế bào gốc ung thư người).

Phương pháp nghiên cứu thực vật

• Quan sát hình thái học: Mô tả chi tiết cấu tạo rễ, thân, cành, lá, hoa, quả và hạt theo các chỉ tiêu thực vật chí.
• Phương pháp vi học: Cắt lát vi phẫu tươi thân và lá bằng dao cạo, tẩy nhuộm kép bằng xanh methylen và phẩm đỏ carmin, soi dưới kính hiển vi quang học để phân tích cấu trúc giải phẫu mô. Soi bột dược liệu khô để xác định các yếu tố đặc trưng của bột thân và bột lá.

Phương pháp nghiên cứu hóa học

• Chiết xuất phân đoạn: Chiết ngấm kiệt hoặc hồi lưu toàn cây Tầm bóp khô xay nhỏ với ethanol 96% để thu được cao toàn phần EtOH 96% (TBT). Phân bố cao toàn phần với các dung môi có độ phân cực tăng dần: thu cao phân đoạn n-hexan (TBH), cao ethyl acetat (TBE) và cặn dịch nước (TBN).
• Định tính sơ bộ: Thực hiện các phản ứng hóa học ống nghiệm đặc trưng cho từng nhóm hợp chất tự nhiên (withanolid, alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, acid hữu cơ).
• Phân lập hợp chất: Sử dụng kỹ thuật sắc ký cột pha thường (Silica gel 0,040 - 0,063 mm, Merck), sắc ký cột pha đảo (RP-$\text{C}{18}$, 30 - 50 $\mu$m, Fuji Silysia), sắc ký lớp mỏng (TLC) pha thường $\text{F}{254}$ và pha đảo $\text{RP-18}\ \text{F}_{254}$.
• Xác định cấu trúc hóa học: Đo nhiệt độ nóng chảy, đo phổ khối ion hóa phun mù điện tử (ESI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1 chiều và 2 chiều ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, DEPT, HSQC, HMBC, NOESY) hòa tan trong các dung môi deuterat ($\text{CDCl}_3$, $\text{CD}_3\text{OD}$, $\text{DMSO-}d_6$, $\text{aceton-}d_6$).

Phương pháp nghiên cứu tác dụng sinh học

• Kháng viêm cấp in vivo: Mô hình gây phù bàn chân chuột bằng dung dịch carrageenan. Đánh giá mức độ giảm phù chân tại các thời điểm theo dõi.
• Kháng viêm mạn in vivo: Mô hình gây u hạt thực nghiệm bằng amian hoặc bông cấy dưới da chuột cống trắng, đánh giá sự thay đổi khối lượng u hạt.
• Giảm đau ngoại vi in vivo: Mô hình gây đau quặn bằng cách tiêm xoang bụng dung dịch acid acetic trên chuột nhắt trắng, đếm số cơn co thắt cơ bụng trong thời gian quy định.
• Kháng viêm in vitro: Thử nghiệm ức chế sản xuất NO trên đại thực bào RAW 264.7 được kích thích bởi LPS, xác định tỷ lệ tế bào sống bằng phương pháp khử màu MTT.
• Chuyển hóa lipid và glucose tế bào gan in vitro: Đánh giá mức độ phosphoryl hóa p-AMPK và p-ACC bằng kỹ thuật Western Blot; khảo sát ức chế biểu hiện enzym tổng hợp acid béo FAS và yếu tố điều hòa SREBP-1c; định lượng tích tụ lipid nội bào trong tế bào HepG2 bằng thuốc nhuộm huỳnh quang Nile Red.
• Độc tính tế bào ung thư in vitro: Đánh giá khả năng ức chế tăng sinh tế bào trên các dòng ung thư SNU-1, 4T1, LLC, Hep3B và NTERA-2 bằng phương pháp MTT, tính toán giá trị $\text{IC}_{50}$.

---

Nội dung chính theo từng chương

Chương 1: Tổng quan

Chương này tổng thuật toàn diện cơ sở dữ liệu về cây Tầm bóp (Physalis angulata L.), bao gồm vị trí phân loại học trong giới thực vật, đặc điểm hình thái thân thảo sống hàng năm cao tới 1 m, thân có góc cạnh, lá hình trái xoan mép nguyên hoặc lượn sóng, hoa vàng nhạt rủ xuống, quả mọng đỏ nằm trong đài đồng trưởng. Tác giả tổng hợp nguồn gốc phát tán từ nhiệt đới châu Mỹ sang các hệ sinh thái Địa Trung Hải (Ai Cập, Thổ Nhĩ Kỳ, Iraq, Syria) và phân bố tại Việt Nam (Sơn La, Lạng Sơn, Bắc Giang, Hà Nội, Ninh Bình, Đà Nẵng, Kon Tum, Gia Lai, Bà Rịa - Vũng Tàu, TP. Hồ Chí Minh).

Về mặt hóa thực vật, chương 1 phân tích chi tiết cấu trúc hóa học của hơn 100 withanolid, hệ terpenoid glycosid (physangulatosid A–L), các flavonoid (kaempferol, quercetin và dẫn xuất glycosid), acid phenolic cùng thành phần tinh dầu và carotenoid. Đồng thời, chương 1 điểm lại các mô hình thử nghiệm sinh học trên thế giới về kháng viêm (ức chế NO, PGE2, MPO, TNF-$\alpha$, IL-6), giảm đau quặn, độc tế bào ung thư (G2/M arrest, caspase activation, apoptosis), hạ đường huyết (ức chế $\alpha$-glucosidase), điều hòa miễn dịch và công dụng trong y học cổ truyền Việt Nam cũng như thế giới (Peru, Brazil, Bolivia, Nigeria, Kenya, Samoa, Tonga, Indonesia, Ấn Độ, Mexico).

Chương 2: Nguyên vật liệu, trang thiết bị và phương pháp nghiên cứu

Chương 2 mô tả chi tiết nguồn gốc mẫu Tầm bóp thu hái tháng 11/2014 tại Gia Lâm - Hà Nội (mã tiêu bản HNIP/18111/15 và PA 101), các động vật thí nghiệm (chuột nhắt trắng chủng Swiss 18 - 20 g, chuột cống Wistar 150 - 180 g), môi trường nuôi cấy tế bào (DMEM, EMEM bổ sung 10% FBS), các dòng tế bào chuẩn ATCC (RAW 264.7, HepG2) và tế bào ung thư (SNU-1, 4T1, LLC, Hep3B, NTERA-2).

Chương này trình bày toàn bộ quy trình công nghệ chiết xuất phân đoạn (TBT, TBH, TBE, TBN), quy trình phân lập sắc ký cột và các thông số kỹ thuật đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, DEPT, HMBC, HSQC). Các quy trình thử nghiệm sinh học được chuẩn hóa thành sơ đồ thao tác: quy trình nhuộm MTT, quy trình gây phù chân chuột bằng carrageenan, quy trình gây đau quặn bằng acid acetic, quy trình Western Blot đánh giá p-AMPK, p-ACC, FAS, SREBP-1c và quy trình nhuộm huỳnh quang Nile Red trên tế bào HepG2.

Chương 3: Kết quả nghiên cứu

Chương 3 trình bày các số liệu thực nghiệm thu được từ 3 nội dung nghiên cứu chính:

1. Kết quả nghiên cứu về thực vật học

• Giám định chính xác mẫu nghiên cứu là loài Physalis angulata L., họ Solanaceae.
• Mô tả giải phẫu vi phẫu thân: Mặt cắt thân có góc cạnh lồi; biểu bì phủ cutin mỏng mang lông che chở; mô dày góc nằm dưới biểu bì ở các góc lồi; mô mềm vỏ tế bào thành mỏng; hệ thống dẫn libe - gỗ xếp thành vòng liên tục, trong đó libe bao gồm cả libe trong và libe ngoài (cấu tạo libe hai phía đặc trưng của họ Cà); tủy xốp rộng ở tâm.
• Vi phẫu lá: Gân giữa lồi ở mặt dưới, biểu bì trên và dưới mang lỗ khí và lông che chở đa bào; mô giậu gồm 1 - 2 lớp tế bào xếp thẳng đứng ở phía mặt trên (cấu tạo lá dị thể); mô xốp chứa nhiều khoảng gian bào; bó mạch gỗ - libe hình cung ở gân chính.
• Bột dược liệu: Bột thân và lá có các mảnh biểu bì mang lỗ khí kiểu vô bào, mảnh lông che chở đa bào một dãy, mảnh mạch vạch, mạch mạng, hạt tinh thể calci oxalat hình cát hoặc hình khối nhỏ, sợi mô cứng.

2. Kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học

• Định tính hóa học xác nhận sự có mặt của các nhóm chất withanolid, flavonoid, diterpenoid/triterpenoid, saponin và acid hữu cơ trong mẫu nghiên cứu.
• Quá trình chiết xuất và phân tách sắc ký từ các phân đoạn cao $n$-hexan (TBH), cao ethyl acetat (TBE) và cặn nước (TBN) đã phân lập được 15 hợp chất tinh khiết, ký hiệu từ PA1 đến PA15.
• Cấu trúc hóa học của 15 hợp chất (PA1 – PA15) được giải mã và chứng minh đầy đủ bằng phân tích phổ khối ESI-MS kết hợp phổ cộng hưởng từ hạt nhân ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, DEPT, HSQC, HMBC), bao gồm các hợp chất thuộc nhóm withanolid (các dạng $5\beta,6\beta$-epoxid, withanolid trung gian, physalin) và các dẫn xuất phenolic/terpenoid.

Ký hiệu mẫu	Nhóm hợp chất	Phương pháp xác định cấu trúc	Dữ liệu phổ chính trong luận án
PA1 - PA15	Withanolid (Physalin, 5,6-epoxid, withanolid trung gian), Terpenoid, Phenolic	ESI-MS, $^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, DEPT, HSQC, HMBC	Bảng dữ liệu phổ NMR từ Bảng 3.2 đến Bảng 3.16; Tương tác HMBC Hình 3.8 đến 3.21

3. Kết quả nghiên cứu về tác dụng sinh học

• Tác dụng kháng viêm và giảm đau: Cao toàn phần EtOH 96% (TBT) làm giảm rõ rệt thể tích phù chân chuột do carrageenan so với lô đối chứng; làm giảm khối lượng u hạt thực nghiệm ở chuột cống; ức chế số cơn đau quặn do acid acetic ở chuột nhắt trắng theo liều sử dụng. Trên mô hình in vitro, các cao chiết (ở nồng độ 20 $\mu$g/mL) và các chất tinh khiết (ở nồng độ 10 $\mu$M) thể hiện khả năng ức chế sản sinh NO trên đại thực bào RAW 264.7 được kích thích bằng LPS mà không gây độc tế bào.
• Tác dụng trên chuyển hóa lipid và glucose tế bào gan HepG2: Các cao chiết và hai hợp chất withanolid tinh khiết PA12 và PA14 có khả năng hoạt hóa quá trình phosphoryl hóa p-AMPK và p-ACC; ức chế biểu hiện của các protein sinh tổng hợp acid béo là FAS và SREBP-1c theo nồng độ; thử nghiệm nhuộm huỳnh quang Nile Red chứng minh khả năng ức chế tích tụ lipid nội bào rõ rệt trên tế bào gan HepG2.
• Tác dụng gây độc tế bào ung thư: Đánh giá độc tính tế bào của các cao phân đoạn và các hợp chất tinh khiết trên các dòng tế bào ung thư (SNU-1, 4T1, LLC, Hep3B, NTERA-2), xác định được các giá trị $\text{IC}_{50}$ ức chế tăng sinh tế bào đặc hiệu.

Chương 4: Bàn luận

Chương 4 tiến hành so sánh, biện giải các kết quả nghiên cứu thực vật, hóa học và sinh học của đề tài với các dữ liệu đã công bố trong và ngoài nước:

• Về thực vật học: Khẳng định tính tương đồng về đặc điểm hình thái và giải phẫu của mẫu Tầm bóp thu hái tại Gia Lâm với các mô tả trong Thực vật chí Việt Nam và dược điển, đồng thời chỉ rõ đặc điểm phân biệt hình thái giữa Tầm bóp (Physalis angulata L.) với các loài dễ nhầm lẫn trong họ Cà hoặc chi Physalis như Lu lu đực (Solanum nigrum) và cây Xoan leo.
• Về hóa học: Bàn luận về mối tương quan giữa khung cấu trúc withanolid (sự hiện diện của liên kết đôi $\Delta^2$, nhóm chức $4\beta$-hydroxy, vòng $5\beta,6\beta$-epoxid hoặc khung seco-steroid của physalin) đối với độ dịch chuyển hóa học trên phổ NMR.
• Về tác dụng sinh học: Phân tích cơ chế chống viêm thông qua ức chế các chất trung gian tiền viêm; cơ chế giảm đau ngoại vi; cơ chế điều hòa chuyển hóa lipid gan thông qua trục tín hiệu AMPK/ACC và ức chế yếu tố phiên mã SREBP-1c cùng enzym FAS; so sánh độc tính chọn lọc của các withanolid phân lập được trên các dòng tế bào ung thư thử nghiệm.

---

Kết quả và những đóng góp mới

Đóng góp về mặt khoa học lý luận

• Cung cấp bộ dữ liệu thực vật học toàn diện, có hệ thống về hình thái giải phẫu vi phẫu thân, lá và đặc điểm bột dược liệu của cây Tầm bóp (Physalis angulata L.) thu hái tại Việt Nam, phục vụ trực tiếp cho công tác tiêu chuẩn hóa và kiểm nghiệm dược liệu.
• Phân lập và làm sáng tỏ cấu trúc hóa học của 15 hợp chất tinh khiết (PA1 đến PA15) bằng các phương pháp phổ hiện đại, bổ sung vào cơ sở dữ liệu hóa thực vật về các withanolid và hợp chất thiên nhiên từ chi Physalis tại Việt Nam.
• Cung cấp bằng chứng thực nghiệm về cơ chế tác dụng của cao chiết và các hợp chất tinh khiết (PA12, PA14) trên chuyển hóa lipid ở tế bào gan HepG2 thông qua hoạt hóa trục AMPK/ACC và ức chế con đường SREBP-1c/FAS.

Đóng góp về mặt thực tiễn

• Chứng minh cơ sở khoa học cho việc sử dụng cây Tầm bóp trong y học cổ truyền dân gian để điều trị các chứng bệnh viêm nhiễm, sưng đau, mụn nhọt và rối loạn chuyển hóa.
• Định hướng tiềm năng ứng dụng của các phân đoạn chiết xuất và các withanolid từ Tầm bóp trong nghiên cứu phát triển các chế phẩm hỗ trợ điều trị bệnh gan nhiễm mỡ không do rượu (NAFLD), giảm đau kháng viêm và hỗ trợ ức chế tăng sinh tế bào ung thư.

Kiến nghị của luận án

• Tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về độc tính bán trường diễn và trường diễn của các cao chiết tiềm năng từ Tầm bóp trên động vật thực nghiệm.
• Mở rộng khảo sát cơ chế phân tử chi tiết của các withanolid tinh khiết (đặc biệt là PA12, PA14) trên các mô hình bệnh lý chuyển hóa và ung thư in vivo.
• Nghiên cứu quy trình chiết xuất ở quy mô lớn hơn và xây dựng quy chuẩn kiểm tra chất lượng định lượng hoạt chất chính làm tiền đề phát triển sản phẩm thuốc/dược liệu ứng dụng.

---

Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp

Hạn chế của nghiên cứu

• Phạm vi thu hái mẫu thực vật của đề tài mới tập trung tại khu vực huyện Gia Lâm, Hà Nội vào tháng 11/2014, chưa tiến hành so sánh hàm lượng hoạt chất withanolid giữa các vùng sinh thái khác nhau trên toàn quốc hoặc theo các mùa thu hái khác nhau.
• Thử nghiệm tác dụng trên chuyển hóa acid béo và glucose chủ yếu được thực hiện trên mô hình tế bào gan HepG2 in vitro; các thử nghiệm tác dụng gây độc ung thư mới dừng ở mức sàng lọc trên một số dòng tế bào in vitro, chưa triển khai đồng thời trên mô hình động vật mang khối u in vivo.

Hướng nghiên cứu tiếp theo

• Khảo sát hàm lượng hoạt chất withanolid chính (PA12, PA14) của cây Tầm bóp thu hái ở các thời điểm sinh trưởng và vùng địa lý khác nhau tại Việt Nam bằng phương pháp HPLC định lượng.
• Đánh giá tác dụng cải thiện gan nhiễm mỡ, kháng viêm mạn và kháng u của các hợp chất withanolid chọn lọc trên các mô hình chuột thực nghiệm in vivo.

---

Giá trị tham khảo

Luận án là tài liệu tham khảo chuyên ngành cho nhiều đối tượng:

• Nghiên cứu sinh, học viên cao học, sinh viên ngành Dược học, Hóa hợp chất thiên nhiên và Thực vật học: Cung cấp tài liệu tra cứu về phương pháp phân tích giải phẫu thực vật họ Cà, quy trình sắc ký phân lập các hợp chất withanolid phức tạp và phương pháp giải phổ NMR ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, HMBC, HSQC).
• Giảng viên và cán bộ nghiên cứu tại các trường đại học, viện nghiên cứu dược liệu: Cung cấp nguồn số liệu thực nghiệm về các mô hình thử nghiệm sinh học chuẩn hóa như đánh giá phù chân chuột bằng carrageenan, đo cơn đau quặn acid acetic, thử nghiệm ức chế NO trên RAW 264.7 và Western Blot khảo sát con đường tín hiệu AMPK/SREBP-1c/FAS.
• Các nhà sản xuất dược phẩm và cán bộ kiểm nghiệm dược liệu: Cung cấp các tiêu chuẩn vi học bột và dữ liệu hóa học nhận diện phục vụ công tác kiểm nghiệm, phân biệt Tầm bóp thật với các loài cỏ dại khác và định hướng phát triển sản phẩm chăm sóc sức khỏe từ nguồn dược liệu trong nước.

---

Câu hỏi thường gặp

1. Tên khoa học, họ thực vật và mẫu tiêu bản của cây Tầm bóp trong luận án được xác định như thế nào?

Cây Tầm bóp được giám định tên khoa học là Physalis angulata L., thuộc họ Cà (Solanaceae), bộ Solanales. Mẫu nghiên cứu được thu hái có đủ hoa và quả vào tháng 11/2014 tại huyện Gia Lâm, Hà Nội, được giám định bởi PGS. Trần Văn Ơn (Đại học Dược Hà Nội) và PGS. Nguyễn Khắc Khôi (Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật). Tiêu bản được lưu trữ tại Phòng Tiêu bản Bộ môn Thực vật - Đại học Dược Hà Nội (mã số HNIP/18111/15) và Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật (mã số PA 101).

2. Luận án đã phân lập và xác định cấu trúc bao nhiêu hợp chất tinh khiết từ cây Tầm bóp?

Luận án đã chiết xuất phân đoạn và phân lập thành công 15 hợp chất tinh khiết, ký hiệu từ PA1 đến PA15, từ các phân đoạn cao $n$-hexan, ethyl acetat và cặn nước. Cấu trúc hóa học của cả 15 hợp chất này đã được làm sáng tỏ bằng các phương pháp phân tích phổ hiện đại bao gồm ESI-MS và phổ cộng hưởng từ hạt nhân đa chiều ($^1\text{H-NMR}$, $^{13}\text{C-NMR}$, DEPT, HSQC, HMBC).

3. Tác dụng của cây Tầm bóp trên chuyển hóa lipid và acid béo tại tế bào gan HepG2 diễn ra theo cơ chế nào?

Kết quả nghiên cứu thực nghiệm của luận án chỉ ra rằng các cao chiết Tầm bóp và các hợp chất withanolid tinh khiết PA12, PA14 có khả năng kích hoạt quá trình phosphoryl hóa p-AMPK và p-ACC, đồng thời ức chế theo nồng độ sự biểu hiện của enzym tổng hợp acid béo (FAS) và yếu tố phiên mã điều hòa sterol (SREBP-1c), từ đó ức chế sự tích tụ lipid nội bào trong tế bào gan HepG2 (được chứng minh qua thử nghiệm nhuộm huỳnh quang Nile Red).

4. Các mô hình dược lý thực nghiệm nào đã được sử dụng để đánh giá tác dụng kháng viêm và giảm đau của Tầm bóp trong luận án?

Luận án đã sử dụng:

• Mô hình gây phù bàn chân chuột bằng carrageenan (đánh giá kháng viêm cấp).
• Mô hình gây u hạt thực nghiệm trên chuột cống trắng (đánh giá kháng viêm mạn).
• Mô hình gây đau quặn bằng dung dịch acid acetic trên chuột nhắt trắng chủng Swiss (đánh giá tác dụng giảm đau ngoại vi).
• Mô hình ức chế sản sinh Nitric Oxide (NO) do LPS kích thích trên đại thực bào RAW 264.7 in vitro.

5. Đặc điểm vi học giải phẫu nổi bật nào của thân cây Tầm bóp được ghi nhận trong nghiên cứu?

Vi phẫu thân Tầm bóp thể hiện cấu tạo có góc cạnh lồi; mô dày góc nằm dưới biểu bì tại các góc; hệ thống dẫn libe - gỗ gồm cả libe trong và libe ngoài (cấu trúc bó libe hai phía đặc trưng của họ Cà Solanaceae); tủy xốp rộng ở giữa và biểu bì mang lông che chở đa bào một dãy.

---

Kết luận

Luận án tiến sĩ của nghiên cứu sinh Hoàng Thái Hòa là công trình nghiên cứu khoa học chuyên sâu, toàn diện và có hệ thống về cây Tầm bóp (Physalis angulata L., họ Solanaceae) thu hái tại Việt Nam. Công trình đã hoàn thành xuất sắc 3 mục tiêu đề ra: xác lập đầy đủ bộ dữ liệu hình thái và giải phẫu vi học phục vụ tiêu chuẩn hóa dược liệu; phân lập và xác định cấu trúc 15 hợp chất tinh khiết (PA1 - PA15) thuộc nhóm withanolid và phenolic; chứng minh các tác dụng sinh học thực nghiệm về kháng viêm, giảm đau, ức chế tế bào ung thư và làm sáng tỏ cơ chế điều hòa chuyển hóa lipid gan qua trục tín hiệu AMPK/ACC/SREBP-1c/FAS. Kết quả của luận án góp phần khẳng định giá trị sử dụng kinh nghiệm dân gian của cây thuốc Tầm bóp, đồng thời cung cấp luận cứ khoa học vững chắc cho hướng phát triển các chế phẩm hỗ trợ điều trị bệnh lý chuyển hóa và viêm nhiễm từ nguồn dược liệu Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN DƯỢC LIỆU HOÀNG THÁI HÒA NGHIEN CUU DAC DIEM THUC VAT, THANH PHAN HOA HOC VA MOT SO TAC DUNG SINH HOC CUA CAY TAM BOP (Physalis angulata L.), ho Ca (Solanaceae) LUẬN ÁN TIÊN SĨ DƯỢC HỌC HA NOI, 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU HOÀNG THÁI HÒA NGHIEN CUU DAC DIEM THUC VAT, THANH PHAN HOA HOC VA MOT SO TAC DUNG SINH HOC CUA CAY TAM BOP (Physalis angulata L.), ho Ca (Solanaceae) LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: Dược liệu - Dược học cổ truyền MA SO: 9720206 Người hướng dẫn khoa học: 1. Trần Thị Oanh 2. Nguyễn Thượng Dong HA NOI, 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận án này là công trình nghiên cứu khoa học của riêng tôi đưới sự hướng dẫn của PGS. Trần Thị Oanh và PGS.

Nguyễn Thượng Dong. Các số liệu, kết quả trình bày trong luận án là trung thực, khách quan và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ một công trình nào khác. Tác giả luận án NCS. Hoang Thai Hoa LOI CAM ON Đề hoàn thành được luận án này, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ quý báu của các Thầy Cô giáo, các nhà khoa học cùng bạn bè, đồng nghiệp và gia đình.

Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc nhất tới PGS. Trần Thị Oanh và PGS. Nguyễn Thượng Dong, những người Thầy Cô đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận án. Tôi xin trân trọng cảm ơn PGS.

TSKH Nguyễn Minh Khởi, Ban lãnh đạo, các Khoa, Phòng và các nhà khoa học tại Viện Dược liệu, Viện Hóa học, Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật - Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam và Trường Đại học Dược Hà Nội đã nhiệt tình giúp đỡ, tạo điều kiện và cộng tác giúp tôi hoàn thành công trình này. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo bệnh viện cùng các đồng nghiệp tại Khoa Dược - Bệnh viện Đa khoa Đức Giang đã động viên tinh thần và tạo điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành luận án này. Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn tới: + PGS. Đỗ Thị Hà - Viện Dược liệu + PGS.

Phạm Thị Vân Anh - Trường Đại học Y Hà Nội + TS. Đỗ Thị Nguyệt Quế - Trường Đại học Dược Hà Nội + TS. Trần Thị Hiền - Truong Dai hoc Lund, Thuy Dién Đã đóng góp những ý kiến quí báu cho tôi khi thực hiện luận án này. Cuối cùng, tôi xin gửi lời cám ơn sâu sắc tới gia đình, người thân và bạn bè đã động viên, giúp đỡ và tạo mọi điêu kiện tôt nhât cho tôi trong suôt quá trình nghiên cứu, học tập và hoàn thành luận án.

Một lần nữa, tôi xin chân thành cảm ơn những sự giúp đỡ quý báu đó! NCS. Hoang Thai Hoa MỤC LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC SƠ ĐÒ b7 0⁄06). THỰC VẬT HỌC. Đặc điểm thực vật.

Phân bố và sinh thái 1. CÁC THÀNH PHÀN HÓA HỌC CHÍNH. Nhóm hợp chất phi phenolic. 2-2-2 ©+£22E+2EE+2EEt2EE2EE2EE2EECEEErrrkrrek 4 1.

Nhóm hợp chat phenolic. TÁC DỤNG SINH HỌC. Hoạt tính giảm đau. Hoạt tính gây độc tế bào ung thư 1.

Hoạt tính điều hòa miễn dịch.--2- 2 22+2Ez+2EE£EEEEEEEE2E. Hoạt tính chống đái tháo đường. Hoạt tính kháng khuân và kháng nấm. Hoat tinh khang v20) 07.

Hoat tinh diét nhuyén thé. Hoạt tính chống hen Suy6n o. Hoat tính lợi tiỂu. CÔNG DỰNG TRONG Y HỌC CÔ TRUYN.

Công dụng trong y học cổ truyền thế giới. Công dụng trong y học cổ truyền Việt Nam.--2- -s+czczxcerrcerrcee 34 CHUONG 2 NGUYEN VAT LIEU, TRANG THIET BI VA PHUONG PHAP NGHIEN COU ~. NGUYEN VAT LIEU NGHIEN CUU .