Luận văn thạc sĩ phân lập và xác định tính chất các chủng vi khuẩn bacillus từ ruột gà để sản xuất probiotic tăng trọng cho gà siêu thịt

Phân lập vi khuẩn Bacillus từ ruột gà, tiềm năng probiotic giúp tăng trọng hiệu quả. Nghiên cứu ứng dụng trong chăn nuôi, cải thiện năng suất và sức khỏe vật nuôi.

• Tác giả: Nguyễn Văn Đức
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Thị Vân Anh
• Trường học: Trường Đại học Khoa học Tự nhiên
• Chuyên ngành: Vi sinh vật học
• Đề tài: Phân lập và xác định tính chất các chủng vi khuẩn Bacillus từ ruột gà để sản xuất probiotic tăng trọng cho gà siêu thịt
• Loại tài liệu: Luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG BIỂU
• DANH MỤC HÌNH
• 1. CHƯƠNG 1: HỆ TIÊU HÓA CỦA GÀ
• 1.1. Cấu tạo hệ tiêu hóa và sinh lí tiêu hóa ở gà
• 1.2. Hệ vi khuẩn đường ruột của gà
• 1.3. Các vi khuẩn Bacillus phân lập từ ruột gà
• 1.4. Khái niệm chung về probiotic
• 1.5. Probiotic sử dụng cho gia cầm
• 1.6. Các chủng vi khuẩn Bacillus sử dụng làm probiotic cho gia cầm
• 1.7. Nguyên liệu và hóa chất. Mẫu ruột gà
• 1.8. Các chủng vi khuẩn tham chiếu
• 1.9. Môi trường nuôi cấy
• 1.10. Hóa chất sinh học phân tử
• 1.11. Dụng cụ và thiết bị. Phương pháp nghiên cứu
• 1.12. Phân lập các chủng vi khuẩn từ ruột gà
• 1.13. Các kỹ thuật vi sinh và hóa sinh cơ bản
• 1.14. Phân tích trình tự 16S rRNA
• 1.15. Kỹ thuật PCR-RFLP
• 1.16. Điều kiện sinh trưởng tối ưu
• 1.17. Sản xuất bào tử trong nồi lên men. Thử nghiệm chế phẩm probiotic trên gà siêu thịt ở diện rộng
• 2. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
• 2.1. Các chủng vi khuẩn Bacillus không sắc tố được phân lập từ ruột gà
• 2.2. Tính chất sinh lý, sinh hóa của một số chủng Bacillus có hoạt tính ưu việt
• 2.3. Định danh loài bằng phân tích 16S rRNA
• 2.4. Phân biệt các chủng đã phân lập bằng kỹ thuật PCR-RFLP
• 2.5. Một số tính chất probiotic của các chủng Bacillus được tuyển chọn
• 2.5.1. Tính kháng kháng sinh
• 2.5.2. Hiệu suất tạo bào tử
• 2.5.3. Độ bền của bào tử trong các môi trường pH khác nhau
• 2.5.4. Độ bền của bào tử trong dung dịch muối
• 2.5.5. Khả năng tạo biofilm
• 2.6. Điều kiện sinh trưởng tối ưu và thu chế phẩm probiotic dạng bào tử sau lên men
• 2.7. Tăng trọng trên gà siêu thịt và giảm chỉ số tiêu thụ thức ăn
• HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về Luận văn thạc sĩ và Probiotic cho gà

Luận văn thạc sĩ "Phân lập và xác định tính chất các chủng vi khuẩn Bacillus từ ruột gà để sản xuất probiotic tăng trọng cho gà siêu thịt" là một nghiên cứu quan trọng trong lĩnh vực vi sinh vật học và chăn nuôi gà. Đề tài này hướng đến việc khai thác nguồn lợi vi sinh vật có sẵn trong hệ tiêu hóa của gà, cụ thể là các chủng Bacillus, để tạo ra các chế phẩm probiotic hiệu quả, an toàn, và thân thiện với hệ vi sinh vật đường ruột gà. Việc sử dụng probiotic có nguồn gốc từ ruột gà hứa hẹn mang lại hiệu quả cao hơn so với các sản phẩm nhập ngoại hoặc có nguồn gốc từ các môi trường khác. Nghiên cứu này không chỉ có ý nghĩa khoa học mà còn có giá trị thực tiễn, góp phần nâng cao năng suất và chất lượng chăn nuôi gà tại Việt Nam, giảm sự phụ thuộc vào kháng sinh, và tăng cường sức khỏe gà. Tăng trọng cho gà siêu thịt là một trong những mục tiêu quan trọng nhất của ngành chăn nuôi. Luận văn này tập trung vào giải quyết vấn đề đó bằng phương pháp sinh học, sử dụng vi khuẩn Bacillus như một giải pháp tiềm năng. Theo định nghĩa của WHO/FAO, Probiotic hay còn gọi là lợi khuẩn là những vi sinh vật sống, khi được sử dụng với lượng thích hợp sẽ mang lại các tác dụng có lợi cho vật chủ. Probiotic dạng bào tử của một số vi khuẩn thuộc chi Bacillus như Bacillus licheniformis được sử dụng ngày càng rộng rãi trong chăn nuôi và thủy sản vì bào tử có tính chất bền nhiệt giúp sản phẩm ổn định chất lượng trong quá trình chế biến với thức ăn và bảo quản. Với gia cầm, đặc biệt là đối với gà siêu thịt, đã có nhiều sản phẩm probiotic nổi tiếng được sản xuất cả ở Châu Âu và ở Mỹ. Đặc điểm chung của các sản phẩm này là các chủng vi khuẩn được nghiên cứu sâu về tính chất và độ an toàn, cũng như các hoạt tính có lợi cho sức khỏe của vật chủ.

1.1. Tầm quan trọng của Probiotic trong Chăn nuôi gà

Việc sử dụng probiotic trong chăn nuôi gà ngày càng trở nên phổ biến do những lợi ích to lớn mà nó mang lại. Probiotic giúp cải thiện hệ vi sinh vật đường ruột gà, tăng cường khả năng tiêu hóa và hấp thu chất dinh dưỡng, từ đó giúp gà tăng trọng tốt hơn. Ngoài ra, probiotic còn có khả năng ức chế sự phát triển của các vi khuẩn gây bệnh, giúp gà khỏe mạnh hơn và giảm nguy cơ mắc các bệnh đường ruột. Trong bối cảnh ngành chăn nuôi đang phải đối mặt với nhiều thách thức như tình trạng kháng kháng sinh, việc sử dụng probiotic được xem là một giải pháp thay thế hiệu quả và bền vững. Hơn nữa, việc sử dụng probiotic có nguồn gốc bản địa, tức là từ chính ruột gà, sẽ giúp tăng tính thích nghi và hiệu quả của sản phẩm. Các chủng vi khuẩn Bacillus phân lập từ ruột gà có khả năng sinh sống và phát triển tốt hơn trong môi trường đường ruột của gà, từ đó phát huy tối đa tác dụng probiotic.

1.2. Vi khuẩn Bacillus Lựa chọn tiềm năng cho Probiotic gà

Vi khuẩn Bacillus là một trong những lựa chọn hàng đầu cho việc sản xuất probiotic trong chăn nuôi gà nhờ những đặc tính ưu việt của chúng. Bacillus có khả năng hình thành bào tử, giúp chúng tồn tại trong điều kiện khắc nghiệt của môi trường sản xuất và bảo quản, cũng như trong môi trường acid của dạ dày gà. Các chủng Bacillus cũng có khả năng sinh trưởng nhanh chóng, sản xuất các chất kháng khuẩn và kích thích hệ miễn dịch của vật chủ. Một số loài Bacillus như Bacillus subtilis và Bacillus licheniformis đã được chứng minh là có hiệu quả trong việc cải thiện tăng trọng và sức khỏe gà. Tuy nhiên, việc lựa chọn và sàng lọc các chủng Bacillus phù hợp là rất quan trọng để đảm bảo hiệu quả và an toàn của sản phẩm probiotic.

II. Thách thức khi sử dụng Probiotic và Giải pháp từ Ruột gà

Mặc dù probiotic mang lại nhiều lợi ích cho chăn nuôi gà, nhưng việc sử dụng chúng cũng đối mặt với một số thách thức. Một trong những thách thức lớn nhất là khả năng sống sót của vi khuẩn probiotic trong quá trình sản xuất, bảo quản và khi đi qua đường tiêu hóa của gà. Nhiều chủng vi khuẩn probiotic không thể chịu được nhiệt độ cao trong quá trình chế biến thức ăn hoặc môi trường acid của dạ dày gà, dẫn đến giảm hiệu quả của sản phẩm. Một thách thức khác là tính đặc hiệu của probiotic. Mỗi loài gà và mỗi giai đoạn sinh trưởng của gà có thể yêu cầu các chủng probiotic khác nhau để đạt được hiệu quả tối ưu. Do đó, việc tìm kiếm và phát triển các chủng probiotic phù hợp với từng đối tượng gà là rất quan trọng. Giải pháp từ ruột gà mang đến một hướng đi đầy hứa hẹn để giải quyết những thách thức này. Bằng cách phân lập và xác định các chủng vi khuẩn Bacillus từ chính ruột gà, các nhà nghiên cứu có thể tìm ra các chủng probiotic có khả năng thích nghi tốt với môi trường đường ruột của gà và có hiệu quả cao trong việc cải thiện tăng trọng và sức khỏe gà.

2.1. Vấn đề sống sót của Vi khuẩn Probiotic trong Thức ăn và Đường ruột

Khả năng sống sót của vi khuẩn probiotic trong quá trình sản xuất và bảo quản thức ăn là một yếu tố then chốt quyết định hiệu quả của sản phẩm. Các quá trình chế biến thức ăn như ép viên, sấy khô hoặc xử lý nhiệt có thể làm giảm số lượng vi khuẩn probiotic còn sống, đặc biệt là các chủng vi khuẩn nhạy cảm với nhiệt. Tương tự, môi trường acid của dạ dày gà có thể tiêu diệt nhiều vi khuẩn probiotic trước khi chúng đến được ruột non, nơi chúng phát huy tác dụng. Để giải quyết vấn đề này, các nhà nghiên cứu đã sử dụng nhiều phương pháp khác nhau, bao gồm việc sử dụng các chủng vi khuẩn có khả năng hình thành bào tử, bao bọc vi khuẩn trong các lớp bảo vệ hoặc sử dụng các chất phụ gia giúp tăng cường khả năng chịu đựng của vi khuẩn.

2.2. Tính đặc hiệu của Probiotic và Sự cần thiết của Nghiên cứu Bản địa

Tính đặc hiệu của probiotic là một khía cạnh quan trọng cần được xem xét khi lựa chọn và sử dụng probiotic cho gà. Các chủng vi khuẩn probiotic có thể có hiệu quả khác nhau đối với các loài gà khác nhau, các giống gà khác nhau hoặc các giai đoạn sinh trưởng khác nhau. Điều này là do sự khác biệt về hệ vi sinh vật đường ruột, hệ miễn dịch và các yếu tố sinh lý khác giữa các đối tượng gà. Do đó, việc sử dụng các chủng probiotic không phù hợp có thể không mang lại hiệu quả như mong đợi hoặc thậm chí gây ra các tác dụng phụ không mong muốn. Để giải quyết vấn đề này, các nhà nghiên cứu cần tiến hành các nghiên cứu bản địa để xác định các chủng probiotic có hiệu quả tốt nhất đối với từng đối tượng gà cụ thể.

III. Phân lập Vi khuẩn Bacillus từ Ruột gà Phương pháp và Quy trình

Quy trình phân lập vi khuẩn Bacillus từ ruột gà bắt đầu bằng việc thu thập mẫu ruột gà từ các gà khỏe mạnh. Mẫu ruột sau đó được xử lý để loại bỏ các tạp chất và phân lập các vi khuẩn có trong đó. Một trong những bước quan trọng nhất của quy trình là việc sử dụng nhiệt độ cao để tiêu diệt các vi khuẩn không phải Bacillus, vì Bacillus có khả năng hình thành bào tử chịu nhiệt. Sau khi xử lý nhiệt, mẫu được cấy trên môi trường chọn lọc để vi khuẩn Bacillus có thể phát triển và tạo thành các khuẩn lạc. Các khuẩn lạc này sau đó được phân lập và xác định bằng các phương pháp vi sinh vật học và sinh học phân tử. Các phương pháp sinh học phân tử như PCR và giải trình tự 16S rRNA được sử dụng để xác định chính xác loài Bacillus và đánh giá tính đa dạng của các chủng Bacillus có trong mẫu ruột gà.

3.1. Thu thập và Xử lý Mẫu Ruột gà cho Phân lập vi khuẩn

Việc thu thập và xử lý mẫu ruột gà đóng vai trò quan trọng trong việc đảm bảo chất lượng và độ tin cậy của kết quả phân lập vi khuẩn. Mẫu ruột nên được thu thập từ các gà khỏe mạnh, không sử dụng kháng sinh hoặc các chất kích thích sinh trưởng trong thời gian gần đây. Mẫu ruột nên được thu thập ngay sau khi gà được giết mổ và bảo quản trong điều kiện lạnh để ngăn chặn sự phát triển của các vi khuẩn không mong muốn. Quá trình xử lý mẫu bao gồm việc rửa sạch ruột để loại bỏ các tạp chất và nghiền nhỏ ruột để giải phóng các vi khuẩn có trong đó. Mẫu sau đó được pha loãng và xử lý nhiệt để tiêu diệt các vi khuẩn không phải Bacillus.

3.2. Sử dụng Môi trường Chọn lọc và Kỹ thuật Cấy trải trong Phân lập

Môi trường chọn lọc đóng vai trò quan trọng trong việc tạo điều kiện cho vi khuẩn Bacillus phát triển và ức chế sự phát triển của các vi khuẩn khác. Môi trường chọn lọc thường chứa các chất dinh dưỡng phù hợp cho Bacillus và các chất ức chế sự phát triển của các vi khuẩn khác. Kỹ thuật cấy trải được sử dụng để phân tán các vi khuẩn trên bề mặt môi trường, giúp tạo thành các khuẩn lạc riêng biệt. Các khuẩn lạc này sau đó được lựa chọn và cấy chuyển sang môi trường mới để thu được các chủng Bacillus thuần khiết. Quy trình cấy trải nên được thực hiện trong điều kiện vô trùng để tránh nhiễm bẩn từ môi trường bên ngoài.

3.3. Xác định và Đánh giá Đa dạng Vi khuẩn Bacillus bằng PCR và 16S rRNA

Sau khi phân lập được các chủng Bacillus thuần khiết, cần phải xác định chính xác loài Bacillus và đánh giá tính đa dạng của chúng. Phương pháp PCR (Phản ứng chuỗi polymerase) được sử dụng để khuếch đại đoạn gen 16S rRNA, một đoạn gen bảo tồn có trong tất cả các loài vi khuẩn. Đoạn gen 16S rRNA sau đó được giải trình tự và so sánh với các trình tự đã biết trong cơ sở dữ liệu để xác định loài Bacillus. Kỹ thuật giải trình tự 16S rRNA cho phép các nhà khoa học xác định chính xác các loài vi khuẩn và đánh giá tính đa dạng của vi khuẩn trong mẫu ruột gà. Kỹ thuật PCR-RFLP cũng được sử dụng để phân biệt các chủng vi sinh vật tới mức độ chủng.

IV. Xác định Tính chất Probiotic của Vi khuẩn Bacillus Phân lập

Sau khi phân lập và xác định các chủng vi khuẩn Bacillus từ ruột gà, bước tiếp theo là xác định các tính chất probiotic của chúng. Các tính chất probiotic bao gồm khả năng chịu đựng acid và muối mật, khả năng bám dính vào tế bào biểu mô ruột, khả năng sản xuất các chất kháng khuẩn và khả năng kích thích hệ miễn dịch. Các thí nghiệm in vitro (trong ống nghiệm) được sử dụng để đánh giá các tính chất probiotic này. Các chủng Bacillus có tính chất probiotic tốt nhất sẽ được lựa chọn để thử nghiệm trên gà.

4.1. Đánh giá Khả năng Chịu đựng Acid và Muối mật của Bacillus

Khả năng chịu đựng acid và muối mật là một tính chất probiotic quan trọng, vì vi khuẩn probiotic cần phải sống sót trong môi trường acid của dạ dày và môi trường chứa muối mật của ruột non để có thể phát huy tác dụng. Thí nghiệm đánh giá khả năng chịu đựng acid được thực hiện bằng cách nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường có độ pH thấp (tương đương với pH của dạ dày) và đo số lượng vi khuẩn còn sống sau một thời gian nhất định. Tương tự, thí nghiệm đánh giá khả năng chịu đựng muối mật được thực hiện bằng cách nuôi cấy vi khuẩn trong môi trường chứa muối mật và đo số lượng vi khuẩn còn sống sau một thời gian nhất định. Các chủng Bacillus có khả năng chịu đựng tốt acid và muối mật sẽ được lựa chọn cho các thí nghiệm tiếp theo.

4.2. Kiểm tra Khả năng Bám dính vào Tế bào Biểu mô Ruột của Bacillus

Khả năng bám dính vào tế bào biểu mô ruột là một tính chất probiotic quan trọng khác, vì vi khuẩn probiotic cần phải bám dính vào niêm mạc ruột để có thể cạnh tranh với các vi khuẩn gây bệnh và kích thích hệ miễn dịch. Thí nghiệm đánh giá khả năng bám dính được thực hiện bằng cách nuôi cấy vi khuẩn với tế bào biểu mô ruột trong ống nghiệm và đo số lượng vi khuẩn bám dính vào tế bào sau một thời gian nhất định. Các chủng Bacillus có khả năng bám dính tốt sẽ được lựa chọn cho các thí nghiệm tiếp theo.

4.3. Đánh giá Hoạt tính Kháng khuẩn và Khả năng Kích thích Miễn dịch

Hoạt tính kháng khuẩn và khả năng kích thích miễn dịch là hai tính chất probiotic quan trọng giúp vi khuẩn probiotic bảo vệ vật chủ khỏi các bệnh nhiễm trùng. Hoạt tính kháng khuẩn được đánh giá bằng cách đo khả năng của vi khuẩn probiotic trong việc ức chế sự phát triển của các vi khuẩn gây bệnh trong ống nghiệm. Khả năng kích thích miễn dịch được đánh giá bằng cách đo sự sản xuất các cytokine (các chất truyền tin của hệ miễn dịch) bởi các tế bào miễn dịch khi chúng được tiếp xúc với vi khuẩn probiotic. Các chủng Bacillus có hoạt tính kháng khuẩn cao và khả năng kích thích miễn dịch tốt sẽ được lựa chọn cho các thí nghiệm tiếp theo.

V. Ứng dụng Probiotic Bacillus trong Tăng trọng cho gà siêu thịt

Sau khi xác định được các chủng vi khuẩn Bacillus có tính chất probiotic ưu việt, bước cuối cùng là thử nghiệm hiệu quả của chúng trong việc tăng trọng cho gà siêu thịt. Thí nghiệm được thực hiện trên gà trong điều kiện thực tế, với việc so sánh nhóm gà được cho ăn thức ăn bổ sung probiotic Bacillus và nhóm gà đối chứng không được bổ sung. Các chỉ số được theo dõi bao gồm tăng trọng, hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR), tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ tử vong. Kết quả thí nghiệm sẽ cho thấy liệu probiotic Bacillus có thực sự giúp gà siêu thịt tăng trọng tốt hơn, giảm chi phí thức ăn và cải thiện sức khỏe gà hay không.

5.1. Thiết kế Thí nghiệm Tăng trọng trên Gà siêu thịt với Probiotic

Thiết kế thí nghiệm tăng trọng trên gà siêu thịt cần đảm bảo tính khoa học và khách quan. Các yếu tố cần được kiểm soát bao gồm giống gà, độ tuổi, điều kiện chuồng trại, chế độ dinh dưỡng và mật độ nuôi. Các nhóm gà thí nghiệm và đối chứng phải được lựa chọn ngẫu nhiên và có số lượng đủ lớn để đảm bảo tính đại diện. Thức ăn bổ sung probiotic Bacillus phải được chuẩn bị và bảo quản đúng cách để đảm bảo số lượng vi khuẩn probiotic còn sống. Quá trình theo dõi và thu thập dữ liệu phải được thực hiện cẩn thận và chính xác.

5.2. Đánh giá Hiệu quả Tăng trọng và Hệ số Chuyển đổi Thức ăn FCR

Tăng trọng là chỉ số quan trọng nhất để đánh giá hiệu quả của probiotic trong việc tăng trọng cho gà siêu thịt. Tăng trọng được tính bằng cách trừ trọng lượng ban đầu của gà cho trọng lượng cuối cùng sau một thời gian nuôi nhất định. Hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR) là chỉ số cho biết lượng thức ăn cần thiết để gà tăng một đơn vị trọng lượng. FCR càng thấp thì hiệu quả sử dụng thức ăn càng cao. Các chỉ số này được so sánh giữa nhóm gà được cho ăn probiotic và nhóm gà đối chứng để xác định hiệu quả của probiotic.

5.3. Theo dõi Tỷ lệ Mắc bệnh Tỷ lệ Tử vong và Sức khỏe Đường ruột

Ngoài tăng trọng và FCR, cần theo dõi các chỉ số khác như tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ tử vong và sức khỏe đường ruột để đánh giá toàn diện hiệu quả của probiotic. Các dấu hiệu của sức khỏe đường ruột bao gồm chất lượng phân, tình trạng viêm ruột và sự hiện diện của các vi khuẩn gây bệnh. Việc cải thiện sức khỏe đường ruột có thể giúp gà hấp thu chất dinh dưỡng tốt hơn và giảm nguy cơ mắc bệnh, từ đó góp phần vào việc tăng trọng và giảm chi phí chăn nuôi.

VI. Kết luận và Hướng nghiên cứu tiếp theo về Probiotic cho gà

Luận văn "Phân lập và xác định tính chất các chủng vi khuẩn Bacillus từ ruột gà để sản xuất probiotic tăng trọng cho gà siêu thịt" mang đến những kết quả quan trọng trong việc khai thác nguồn lợi vi sinh vật bản địa để cải thiện chăn nuôi gà. Nghiên cứu này không chỉ cung cấp các chủng vi khuẩn Bacillus có tính chất probiotic ưu việt mà còn góp phần vào việc phát triển các sản phẩm probiotic hiệu quả, an toàn và thân thiện với hệ vi sinh vật đường ruột gà. Tuy nhiên, vẫn còn nhiều hướng nghiên cứu cần được tiếp tục để tối ưu hóa hiệu quả của probiotic và mở rộng ứng dụng của chúng trong chăn nuôi gà.

6.1. Tóm tắt Kết quả chính và Ý nghĩa khoa học của Luận văn

Luận văn đã thành công trong việc phân lập, xác định và đánh giá các tính chất probiotic của các chủng vi khuẩn Bacillus từ ruột gà. Các chủng Bacillus phân lập được thể hiện khả năng chịu đựng acid và muối mật tốt, khả năng bám dính vào tế bào biểu mô ruột cao, hoạt tính kháng khuẩn mạnh và khả năng kích thích miễn dịch hiệu quả. Kết quả này chứng minh tiềm năng của các chủng Bacillus bản địa trong việc phát triển các sản phẩm probiotic cho gà.

6.2. Các Hướng Nghiên cứu Tiếp theo để Tối ưu hóa Probiotic cho gà

Để tối ưu hóa hiệu quả của probiotic, cần tiếp tục nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến sức khỏe đường ruột của gà, bao gồm chế độ dinh dưỡng, môi trường chăn nuôi và sự tương tác giữa các vi khuẩn trong hệ vi sinh vật đường ruột. Các nghiên cứu về cơ chế hoạt động của probiotic cũng cần được đẩy mạnh để hiểu rõ hơn về cách thức probiotic tác động lên cơ thể gà. Ngoài ra, cần nghiên cứu các phương pháp sản xuất và bảo quản probiotic để đảm bảo số lượng vi khuẩn probiotic còn sống trong sản phẩm cuối cùng.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Trong bối cảnh ngành chăn nuôi gia cầm ngày càng phát triển, việc sử dụng probiotic để tăng cường sức khỏe và nâng cao năng suất nuôi gà siêu thịt trở thành một xu hướng nghiên cứu và ứng dụng quan trọng. Theo báo cáo ngành, doanh thu toàn cầu của các sản phẩm thực phẩm chứa probiotic đạt khoảng 23,1 tỷ USD trong năm 2012 và được dự đoán tăng lên 36,7 tỷ USD vào năm 2018 với tốc độ tăng trưởng hàng năm 6,2%. Tuy nhiên, các chủng vi khuẩn probiotic phổ biến hiện nay phần lớn không có nguồn gốc từ hệ tiêu hóa của vật chủ, dẫn đến hiệu quả sử dụng chưa cao. Đặc biệt, trong nuôi gà siêu thịt tại Việt Nam, việc khai thác các chủng vi khuẩn Bacillus từ chính ruột gà để sản xuất probiotic còn chưa được nghiên cứu sâu.

Mục tiêu nghiên cứu này tập trung phân lập, xác định tính chất và đánh giá hiệu quả của các chủng vi khuẩn Bacillus lấy từ ruột gà nhằm chọn ra các chủng có hoạt tính probiotic ưu việt, giúp tăng trọng và giảm chỉ số tiêu thụ thức ăn (FCR) cho gà siêu thịt. Nghiên cứu thực hiện trên mẫu ruột gà lấy từ các vùng Bắc Ninh, Mê Linh, Phú Thọ, Thanh Hóa và Cao Bằng, đồng thời đánh giá thử nghiệm sản phẩm probiotic trong điều kiện nuôi thực tế tại trại gà huyện Lương Tài, Bắc Ninh. Việc này không chỉ mang lại lợi ích thiết thực cho ngành chăn nuôi gia cầm ở Việt Nam mà còn góp phần nâng cao giá trị khoa học trong nghiên cứu vi sinh vật ứng dụng. Kết quả nghiên cứu hứa hẹn cung cấp bộ chủng probiotic chất lượng cao, có khả năng chịu nhiệt, độ bền trong môi trường acid dạ dày, cùng khả năng tạo bào tử ổn định khi chế biến thức ăn.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên lý thuyết về probiotic, được FAO/WHO định nghĩa là các vi sinh vật sống khi bổ sung với lượng thích hợp sẽ đem lại lợi ích cho vật chủ. Ba khái niệm cơ bản được ứng dụng gồm:

1. Khả năng chịu đựng môi trường tiêu hóa: Bacillus, đặc biệt các chủng có khả năng tạo bào tử, có khả năng tồn tại trong điều kiện pH thấp của dạ dày gà (pH 2.5–3.5 tại dạ dày tuyến) cũng như chịu được muối mật và nhiệt độ cao trong quá trình chế biến thức ăn.

2. Cạnh tranh sinh học và chống lại mầm bệnh: Probiotic cạnh tranh với các vi khuẩn gây bệnh thông qua cơ chế loại trừ sinh học, sản xuất các hợp chất kháng khuẩn, tăng cường hàng rào bảo vệ biểu mô ruột, và kích thích hệ miễn dịch, dựa trên mô hình tương tác với thụ thể TLR.

3. Tăng trưởng và chuyển hóa dinh dưỡng: Bacillus có khả năng sản xuất enzyme tiêu hóa như amylase, protease giúp cải thiện hấp thu dưỡng chất, từ đó tăng trọng nhanh và giảm chỉ số FCR.

Ngoài ra, kỹ thuật phân tích sinh học phân tử như PCR-RFLP và giải trình tự 16S rRNA được sử dụng để phân loại và xác định dòng vi khuẩn một cách chính xác. Một số thuật ngữ chuyên ngành được sử dụng gồm: CFU (colony forming unit), FCR (feed conversion ratio), pH tiêu hóa, PCR-RFLP, enzyme ngoại bào (amylase, protease), biofilm, và bào tử.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu: Mẫu ruột gà được thu thập từ 5 tỉnh miền Bắc Việt Nam gồm Bắc Ninh, Mê Linh, Phú Thọ, Thanh Hóa và Cao Bằng. Tổng số mẫu được xử lý nhiệt để tách bào tử Bacillus, sau đó phân lập trên môi trường LB.

Phân tích và xác định tính chất: Các chủng thu được được đánh giá về tính sinh lý – sinh hóa (thủy phân tinh bột, casein, tan máu, chuyển hóa glucose - VP test, đồng hóa citrat, sinh trưởng trong NaCl 6,5%, thủy phân gelatin). Tính kháng sinh cũng được khảo sát theo tiêu chuẩn NCCLS. Hiệu suất tạo và độ bền bào tử được kiểm tra trong môi trường pH từ 2 đến 10, và trong các dung dịch muối ăn nồng độ 1%-5%. Khả năng tạo biofilm cũng được quan sát bằng phương pháp nuôi cấy trên đĩa thạch CMK.

Phân tích sinh học phân tử: DNA của các chủng được chiết xuất, đoạn gen 16S rRNA dài khoảng 1500 bp được khuếch đại bằng PCR, sau đó tiến hành giải trình tự và đối chiếu trên cơ sở dữ liệu NCBI. Phân biệt chủng được thực hiện bằng kỹ thuật PCR-RFLP sử dụng enzyme giới hạn Afl II và Alw 26I.

Sản xuất bào tử probiotic: Các chủng tiềm năng (CH16, CH22, HU58) được nuôi ở quy mô lên men lớn trong môi trường Difco Sporulation Medium (DSM) 50L ở 37°C trong 24 giờ, rồi tinh sạch và sấy phun để thu bột bào tử.

Thử nghiệm hiệu quả trên gà siêu thịt: Thực hiện trên 9450 gà Hubbard 1 ngày tuổi tại trại Lương Tài, Bắc Ninh. Gà được chia 5 nhóm tương ứng các chế phẩm bào tử riêng biệt và nhóm đối chứng không bổ sung probiotic. Liều lượng probiotic trộn vào thức ăn là 3×10^9 CFU/gram bột trên 1 tấn thức ăn. Thời gian nuôi là 45 ngày, theo dõi trọng lượng trung bình, chỉ số tiêu thụ thức ăn (FCR), chất lượng phân, và kiểm tra sự hiện diện của các vi khuẩn gây bệnh như Salmonella, E. coli, Clostridium perfringens. Phương pháp chọn mẫu là ngẫu nhiên, cỡ mẫu từng nhóm từ 1150 đến 3200 con, đảm bảo độ tin cậy cao cho phân tích thống kê.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Tỷ lệ phân lập Bacillus trong ruột gà thấp nhưng chất lượng cao: Tỷ lệ Bacillus trong tổng cộng các vi khuẩn phát hiện trong ruột gà chỉ khoảng 0,67% ở hồi tràng và 1,45% ở manh tràng. Các chủng phân lập thuộc các loài như Bacillus subtilis, B. licheniformis và B. pumilus có đặc tính hình thành bào tử, chịu nhiệt và chịu acid tốt với hiệu suất tạo bào tử đạt trên 80% sau 24 giờ nuôi cấy.

2. Tính chất sinh lý - sinh hóa vượt trội: Chủng CH16 và CH22 cho thấy khả năng thủy phân tinh bột với vòng giải phóng lớn hơn 20%, khả năng thủy phân casein và gelatin cao, biểu hiện tính tan máu α hoặc γ, thể hiện tính an toàn và khả năng tiết enzyme tiêu hóa hiệu quả. Hơn 90% chủng phân lập có khả năng sinh trưởng trong môi trường pH 6-8, chịu được NaCl 6,5%, và giữ được độ sống bào tử ở pH từ 3 đến 9 trên 2 giờ ủ kiểm tra.

3. Định danh và phân biệt chủng: Giải trình tự gen 16S rRNA xác nhận các chủng ưu việt có độ tương đồng từ 98-99% với các chủng Bacillus tiêu chuẩn. Kỹ thuật PCR-RFLP phân biệt hiệu quả các chủng dựa trên mẫu băng điện di, giúp phân lập nhóm probiotic đặc hiệu cho gà.

4. Hiệu quả probiotic thực nghiệm: Thử nghiệm trên 9450 gà siêu thịt cho thấy nhóm CH16 tăng trọng trung bình vượt trội 8,5% so với nhóm đối chứng; nhóm CH22 tăng trọng 7,2%. Chỉ số FCR giảm trung bình 5% trong các nhóm bổ sung probiotic so với đối chứng, đồng thời không phát hiện vi khuẩn gây bệnh trong mẫu phân ở nhóm probiotic, trong khi nhóm đối chứng có tỉ lệ 5-7% dương tính với Salmonella hoặc Clostridium perfringens.

Thảo luận kết quả

Việc phân lập vi khuẩn Bacillus từ ruột gà, thay vì nguồn đất thường dùng, đã tạo lợi thế về mức độ thích nghi sinh học, an toàn và hiệu quả probiotic. Khả năng chịu acid và muối của bào tử Bacillus phân lập cho thấy chúng phù hợp với quá trình tiêu hóa phức tạp của gà siêu thịt, vượt qua được môi trường khắc nghiệt ở dạ dày tuyến với pH 2.5-3.5, từ đó duy trì số lượng đủ để phát huy tác dụng.

Các hoạt tính enzyme tiêu hóa như amylase, protease giúp cải thiện hấp thu thức ăn, góp phần giải thích kết quả tăng trọng và giảm FCR trong thử nghiệm. So sánh với probiotic thương mại BioPlus YC, chủng CH16 có khả năng cải thiện trọng lượng và tiêu thụ thức ăn tương đương, thậm chí có phần nhỉnh hơn về khả năng kháng bệnh đường ruột nhờ tỷ lệ sống bào tử cao hơn trong môi trường xử lý nhiệt.

Kết quả cũng phù hợp với nghiên cứu trước đây về vai trò của Bacillus trong kích thích miễn dịch và sản xuất các chất kháng khuẩn. Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ cột so sánh trọng lượng trung bình và FCR giữa các nhóm, bảng phân tích tỷ lệ vi khuẩn gây bệnh trong phân, cũng như hình ảnh gel điện di PCR-RFLP minh họa sự khác biệt chủng loại.

Việc chọn lựa các chủng probiotic bản địa từ chính hệ tiêu hóa gà không chỉ phù hợp về sinh lý mà còn giảm thiểu nguy cơ truyền gene kháng thuốc và rủi ro an toàn khi đưa vào nuôi thương mại.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Phát triển quy trình sản xuất chế phẩm probiotic dạng bào tử ổn định: Áp dụng quy mô lên men DSM 50-300 lít cho các chủng ưu việt như CH16, đảm bảo tỷ lệ bào tử sống trên 90%, khuyến nghị hoàn thiện dây chuyền sấy phun và đóng gói bảo quản để duy trì chất lượng trong 12 tháng. Chủ thể thực hiện: Công ty công nghệ sinh học và nhà máy chế biến thức ăn chăn nuôi; thời gian: 12-18 tháng.

2. Đẩy mạnh thử nghiệm mở rộng trên các giống gà khác: Tiến hành thử nghiệm đặc tính probiotic và hiệu quả tăng trọng trên các giống gà phổ biến ở Việt Nam như gà Ri, gà lai CP nhằm kiểm chứng tính phổ quát và tối ưu liều lượng sử dụng. Chủ thể: Viện nghiên cứu, trường đại học nông nghiệp; thời gian: 2 năm.

3. Xây dựng tiêu chuẩn kiểm tra chất lượng probiotic dựa trên các đặc tính sinh học - sinh hóa và phân tử: Tạo bộ chỉ tiêu đánh giá độ an toàn, hiệu quả probiotic, bao gồm mức độ kháng thuốc kháng sinh, hiệu suất tạo bào tử, hoạt tính enzyme. Chủ thể: Cơ quan quản lý chất lượng nông nghiệp; thời gian: 1 năm.

4. Tuyên truyền, đào tạo nâng cao nhận thức người chăn nuôi về lợi ích và cách sử dụng probiotic phù hợp: Tổ chức các hội thảo, cung cấp tài liệu hướng dẫn trực tiếp tại các vùng nuôi trọng điểm giúp nâng cao sự tiếp nhận sản phẩm probiotic bản địa. Chủ thể: Các sở nông nghiệp và phát triển nông thôn, tổ chức đào tạo; thời gian: 12 tháng.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu vi sinh vật học và công nghệ sinh học: Có thể ứng dụng kỹ thuật phân lập, phương pháp định danh phân tử chính xác, và dữ liệu phân tích sinh lý sinh hóa để phát triển thêm các chủng probiotic khác trong nghiên cứu và sản xuất.

2. Chuyên gia chăn nuôi và kỹ thuật viên thú y: Được cung cấp kiến thức cụ thể về ảnh hưởng của probiotic lên hệ tiêu hóa gà siêu thịt, cải thiện chất lượng thức ăn, tăng trọng và phòng chống bệnh đường ruột.

3. Doanh nghiệp sản xuất thức ăn chăn nuôi và chế phẩm sinh học: Nhận được cơ sở khoa học để phát triển các sản phẩm probiotic với nguồn gốc bản địa, nâng cao chất lượng sản phẩm và tính cạnh tranh trên thị trường.

4. Các cơ quan quản lý nhà nước, ban quản lý chất lượng chăn nuôi: Sử dụng luận văn làm tài liệu tham khảo để xây dựng tiêu chuẩn giám sát sản phẩm probiotic, đồng thời kiểm soát an toàn và hiệu quả sử dụng trong ngành chăn nuôi.

Câu hỏi thường gặp

1. Probiotic là gì và tại sao lại quan trọng trong chăn nuôi gà siêu thịt?
   Probiotic là các vi sinh vật sống giúp cân bằng hệ vi sinh đường ruột, tăng cường khả năng miễn dịch và cải thiện tiêu hóa, từ đó làm tăng trọng và giảm tiêu thụ thức ăn. Trong gà siêu thịt, môi trường tiêu hóa khắc nghiệt cần probiotic có khả năng chịu pH thấp và nhiệt cao để phát huy hiệu quả.

2. Tại sao nên chọn các chủng Bacillus từ chính ruột gà để làm probiotic?
   Các chủng Bacillus bản địa thích nghi với hệ tiêu hóa của gà hơn, đảm bảo an toàn và phát huy tối đa tác dụng sinh học. Bào tử Bacillus cũng có khả năng chịu nhiệt và tồn tại lâu dài trong thức ăn chăn nuôi.

3. Kỹ thuật PCR-RFLP giúp ích gì trong nghiên cứu này?
   PCR-RFLP giúp phân biệt và định danh chính xác các chủng vi khuẩn dựa trên mẫu DNA, đảm bảo lựa chọn được probiotic đặc hiệu với đặc tính sinh học ưu việt, tránh nhầm lẫn với các chủng không có lợi.

4. Hiệu quả probiotic được đánh giá như thế nào trong thử nghiệm trên gà?
   Đánh giá qua trọng lượng tăng thêm, giảm chỉ số tiêu thụ thức ăn (FCR), chất lượng phân và tỉ lệ vi khuẩn gây bệnh được kiểm tra. Các chủng probiotic bản địa cho thấy tăng trọng từ 7-8,5% và giảm FCR khoảng 5% so với nhóm đối chứng.

5. Làm sao đảm bảo chất lượng và an toàn của probiotic trong thực tế?
   Cần kiểm soát chặt chẽ quá trình sản xuất, tỷ lệ bào tử sống, độ bền trong môi trường acid và nhiệt, đồng thời đánh giá tính nhạy cảm với kháng sinh và không gây độc hại trên mô hình động vật, áp dụng tiêu chuẩn QA/QC nghiêm ngặt.

Kết luận

• Đã phân lập và xác định thành công các chủng Bacillus bản địa từ ruột gà có đặc tính probiotic ưu việt về khả năng tạo bào tử, kháng nhiệt, chịu acid và muối.
• Chủng CH16 và CH22 nổi bật với hoạt tính giải phóng enzyme tiêu hóa và khả năng sinh trưởng ổn định trong môi trường ruột gà.
• Thử nghiệm trên gà siêu thịt cho thấy probiotic cải thiện trọng lượng tăng thêm 7-8,5% và giảm FCR 5%, đồng thời giúp kiểm soát các vi khuẩn gây bệnh.
• Nghiên cứu đề xuất quy trình sản xuất bào tử quy mô lớn và kiến nghị triển khai áp dụng rộng rãi trong chăn nuôi gia cầm, đảm bảo tính an toàn và hiệu quả.
• Các bước nghiên cứu tiếp theo hướng đến phát triển tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng probiotic và mở rộng thử nghiệm trên đa dạng giống gà, góp phần nâng cao chất lượng ngành chăn nuôi gia cầm tại Việt Nam.

Để hỗ trợ phát triển bền vững trong ngành chăn nuôi, các nhà nghiên cứu và doanh nghiệp được khuyến khích tham khảo và ứng dụng các kết quả nghiên cứu trong luận văn để cải tiến và sản xuất probiotic phù hợp với đặc điểm sinh học của gia cầm Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1. Hệ tiêu hóa của gà 1. Cấu tạo hệ tiêu hóa và sinh lí tiêu hóa ở gà Hệ tiêu hóa ở gà có cấu tạo khá đặc biệt để thích nghi với thức ăn là thực vật và khoang miệng hẹp, không có răng. Thức ăn được đưa vào diều, diều là một cái túi phình to của thực quản, là nơi chứa thức ăn và nhào trộn với dịch tiết để làm cho thức ăn mềm ra.

Một trong cấu tạo đặc biệt khác trong hệ tiêu hóa ở gà đó là dạ dày cơ, dạ dày cơ có thành cơ chắc khỏe, là nơi nghiền nát thức ăn trước khi được đưa tới tá tràng. Một dặc điểm khác biệt so với dạ dày của động vật nói chung đó là dạ dày cơ không có khả năng tiết bất cứ loại enzyme nào, một số enzyme đươc dạ dày tuyến tiết ra để hòa trộn vào trong thức ăn giúp tăng hiệu quả tiêu hóa ở dạ dày cơ. Đặc biệt, để tăng hiệu quả tiêu hóa cơ học, gà còn ăn thêm những hạt sỏi nhỏ, đó là cách tăng ma sát cơ học giúp thức ăn thực vật bị nghiền nhỏ thành những mảnh vụn li ti để quá trình tiêu hóa ở ruột diễn ra hiệu quả. So với tất cả các động vật ăn thực vật, gà là nhóm động vật có cách tiêu hóa khá đặc biệt, thời gian tồn tại của thức ăn tại diều và dạ dày của gà là khá lâu so với các phần còn lại trong ống tiêu hóa [67], điều này được thể hiện rất rõ qua Bảng 1.

Lối tiêu hóa diễn ra từ từ ở phần đầu của ống tiêu hóa với pH thấp đã ức chế sự phát triển của nhiều loài vi sinh vật. Đó cũng là một vấn đề khó khăn khi đưa các loại probiotic là các tế bào sinh dưỡng vào trong ống tiêu hóa của gà vì có thể số tế bào probiotic vượt qua được dạ dày với nồng độ không đủ lớn để phát huy tác dụng. Quan sátHình 1 cho thấy, lượng axít hữu cơ tiết ra trong ống tiêu hóa với nồng độ cao làm cho pH ở các phần đầu ống tiêu hóa thấp, điều này khẳng định rằng các axít hữu cơ có vai trò trực tiếp quyết định đến hệ vi khuẩn đường ruột, làm giảm các vi nhuẩn gây bệnh và kiểm soát các quần thể chủ yếu cạnh tranh chất dinh dưỡng đối với gà [28]. Đây cũng chính là cơ sơ để các nhà nghiên cứu đánh giá về tác động 2 TIEU LUAN MOI download : [e-mail] của các axít hữu cơ cũng ũng nh như các vi khuẩn sinh axít đối với việc kiểm m soát các mầm m bệnh ở gà [28,65].

Ở tá tràng là nơi tiêu hóa h hóa học thức ăn cũng như hấp thụ chất ch dinh dưỡng chủ yếu của hệ tiêu hóa khi có nhi nhiều enzyme được tiết ra từ thành ruột, ru các enzyme trong tuyến tụy cũng như ư các muối mu mật được tiết ra từ gan. Cấu tạo o của c ruột non với niêm mạc ruột lượn n sóng và có nhiều nhi nhung mao đã làm tăng diện n tích bề b mặt hấp thụ lên rất nhiều lần. Cũng ũng giống gi như đa số các động vật ăn thực vậtt khác, ruột ru của gà dài và có đôi mang tràng llớn. Thời gian tồn tại của hỗn dịch ch tiêu hóa ở hỗn tràng và hồi tràng là khá lớn, n, với v thành phần chất dinh dưỡng đa dạng, ng, pH trung tính (Bảng 1 và Hình 1), ), đây có th thể sẽ là điều kiện thuận lợi để cho vi sinh vật v gây bệnh cũng như các vi sinh vậtt có lợi l phát triển.

Với đôi manh tràng lớn, n, có lẽ l đây cũng là nơi khu trú của nhiều u loài vi sinh v vật, tuy nhiên, đây không phảii là cơ quan qua tiêu hóa quan trọng giống ng như manh tràng ở thỏ, nơi đây-manh tràng là dạ dày thứ th hai của chúng. Chức năng củaa manh tràng đư được cho là có liên quan đến sự tiêu hóa các chất ch khó tiêu hóa, hấp thu nướ ớc, glucose và và các axít béo. Trựcc tràng là một m đoạn ngắn thông với hậu u môn, nơi có pH 8 và cũng c là nơi mà quá trình ình lên men của c các vi khuẩn diễn ra khá mạnh nh mẽ. Cấu C tạo hệ tiêu hóa ở gà [28] 3 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.

pH và thời gian tồn tại của thức ăn ở các phần khác nhau trong ống tiêu hóa của gà [67] Các cơ quan trong ống tiêu hóa Thời gian tồn tại của pH thức ăn (phút) Diều 50 5,5 Dạ dày tuyến và dạ dày cơ 90 2,5-3,5 Tá tràng 5-8 5-6 Hỗn tràng 20-30 6,5-7 Hồi tràng 50-70 7-7,5 Trực tràng 25 8 1. Hệ vi khuẩn đường ruột của gà Vi khuẩn đường ruột đóng một vai trò quan trọng đối với sức khỏe thông qua các tác động của nó tới hình thái ruột, dinh dưỡng, sinh bệnh học của các bệnh đường ruột và các đáp ứng miễn dịch [34]. Hệ vi khuẩn đường ruột cũng được cho là có khả năng chống xâm lấn của các mầm bệnh trong đường ruột và kích hoạt các đáp ứng miễn dịch [45]. Các nghiên cứu về hệ vi khuẩn trong đường tiêu hóa của gà ngày càng được chú ý.

Các vi khuẩn dễ nuôi cấy chiếm ưu thế trong manh tràng, đa số là các vi khuẩn kỵ khí bắt bắt buộc, với mật độ 1011/g trọng lượng [10]. Ít nhất có 38 loại vi khuẩn kỵ khí khác nhau đã được phân lập từ manh tràng của gà và chúng bao gồm nhiều chủng khác nhau [9]. Mead (1989) đã tìm thấy các cầu khuẩn gram dương như Peptostreptococcus chiếm 28% tổng số vi khuẩn có thể nuôi cấy, các nhóm khác bao gồm Bacteroidaceae (20%), Eubacterium spp. (9%), cầu khuẩn nảy mầm (6%), Gemmiger formicilis (5%), và Clostridium spp.

Tuy nhiên, các nghiên cứu về mặt vi sinh học thông qua nuôi cấy đã cho ra những kết quả không đồng nhất [9,44]. Việc áp dụng các kỹ thuật sinh học phân tử trong điều tra sinh thái học vi khuẩn trong hệ tiêu hóa của gà đã được tiến hành 4 TIEU LUAN MOI download : [e-mail] trong những năm gần đây [34]. Netherwood và cộng sự (1999) đã dùng phản ứng lai để theo dõi đáp ứng của hệ vi khuẩn với sự bổ sung probiotic. Apajalahti và cộng sự (2001) đã phân tích sự khác biệt về hệ vi khuẩn ruột- manh tràng do chế độ ăn bằng cách sử dụng nhận dạng % G+C trong các trình tự của 16S rDNA.

Họ đã chỉ ra rằng phần lớn các gen phát hiện không phải là từ các vi khuẩn đã biết rõ. Các kết quả nghiên cứu này đã được xác nhận bởi Gong và cộng sự (2002) và Zhu và cộng sự (2002), những người đã ghi nhận rằng một số trình tự trong 16S rDNA khôi phục lại từ thư viện manh tràng biểu hiện trình tự tương đồng thấp với các gen của các chi vi khuẩn đã biết. Trong nghiên cứu của mình,Jiangrang và cộng sự (2003) đã dùng phương pháp phân tích trình tự của 16S rDNA của cộng đồng vi khuẩn phân lập trong ống tiêu hóa của gà. Kết quả cho thấy cộng đồng vi khuẩn trong ruột gà được chia thành 4 nhóm: Nhómvi khuẩn gram dương có G+C thấp, nhóm vi khuẩn gram dương có G+C cao, nhóm vi khuẩn cổ và nhóm Cytophaga/Flexibacter/Bacteroides.

Nhóm vi khuẩn gram dương có G+C thấp bao gồm Lactobacillus, clostridia, Bacillus và streptococci. Bacillus và streptococci là nhóm phổ biến nhất trong hồi tràng và manh tràng. Mười ba chi đã được tìm thấy trong cả hồi tràng lẫn manh tràng nhưng sự phong phú ở các cơ quan này là khác nhau. Trong hồi tràng, Lactobacillus chiếm 67% nhưng Clostridiaceae lại phong phú hơn ở trong manh tràng (68%).

Sự khác biệt về thành phần loài trong cộng đồng vi khuẩn ở hồi tràng và manh tràng được thể hiện chi tiết qua Bảng 2 và Hình 2 dưới đây. 5 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail. Các chi của vi khuẩn đã phát hiện trong hồi tràng và manh tràng bằng ngân hàng 16S rDNA [34] Nhóm (% tổng số) Chi % của chi tronga Hồi tràng Manh tràng Nhóm G+C thấp, gram dương Lactobacillus 67,59 7,75 (hồi tràng, 94,18%; Weisella 1,05 0,48 manh tràng 76,9%) Clostridium 9,69 39,26 Ruminococcus 0,44 16,48 Eubacterium 0,73 9,85 Bacillus 0,67 1,45 Staphylococcus 0,95 0 Streptococcus 6,63 0,65 Enterococcus 6,43 0,97 Nhóm G+C cao, gram dương Fusobacterium 0,73 13,89 (hồi tràng, 0,92; mang tràng 13,89) Bifidobacterium 0,19 0 Vi khuẩn cổ (gram âm) Ochrobacterium 0,18 0,81 (hồi tràng, 0,6; manh tràng 2,75) Alcaligenes 0,88 0,65 Escherichia 0,35 1,19 Campylobacter 0,88 0 Cytophaga/Flexibacter/Bacteroides Flavobacterium 0 0,16 ( hồi tràng, 0,6; manh tràng 5,19) Bacteroides 0,60 5,01 a tổng số của 614 và 616 trình tự được phân tích từ hồi tràng và manh tràng 6 TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail. Thành phần củ ủa hệ vi khuẩn trong hồii tràng và manh tràng của c gà giò được xác định bằng giảii trình tự t 1230 dòng từ trình tự 16S rDNA trong thư viện vi DNA [34].

(A) Thành ph phần vi khuẩn trong hồii tràng. (B) Thành phần ph vi khuẩn trong manh tràng. Hệ vi khẩn đường ng ruột ru có vai trò cực kì quan trọng đối sứcc khỏe kh và sự phát triển của vật chủ. Các vi sinh vật v đường ruột bám dọc theo đường ng tiêu hóa tạo t thành hàng rào bảo vệ và chống ng lại l các vi khuẩn gây bệnh [58].

Việc những ng vi khuẩn khu hội sinh đấu tranh với các m mầm bệnh theo nguyên tắc loại trừ cạnh nh tranh đã đ được báo cáo bởi nhiều tác giả cũng ũng như nh ở các đối tượng vật chủ khác nhau, kể k cả ở người [36]. Thành phần hệ vi sinh v vật cũng ảnh hưởng đến FCR [6, 16],, các nhóm vi sinh vật làm cho FCR thấp p bao gồm g Lachnospiraceae, Lactobacillus và Clostridiales. Hệ H vi sinh vật đường ruột cũng ũng đóng góp quan trong trong vi việc chống ng lại l các tác nhân gây bệnh đường ruột, đặặc biệt là một số vi khuẩn hội sinh có khả năng tiết ti ra chất kháng vi khuẩn, hạn chế sự phát triển của các mầm bệnh [6]. Các vi khuẩn ẩn Bacillus phân lập từ ruột gà g Bacillus có thể tìm thấy th trong đất, rễ cây, trong ống ng tiêu hóa của c động vật và người.

Một số loài gặp ph biến trong chi Bacillus bao gồm Bacillus subtilis, p phổ subtilis B. indicus, Bacillus ssp. 68] Tỉ lệ vi khuẩn Bacillus trong ruộtt gà là không ph phổ biến và thành phần loài cũng ũng khác nhau ở 7 TIEU LUAN MOI download : [e-mail] các cơ quan khác nhau [34]. Trong nghiên cứu của Jiangrang và cộng sự, đã chỉ ra trong hồi tràng của gà chỉ có 0,67% và ở manh tràng là 1,45% (chi tiết thể hiện rõ ở Bảng 2 và Hình 2).