BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀOTẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC KHAO SAT MOT SO HOẠT CHAT VÀ HOẠT TINH KHANG KHUAN CUA CAO CHIET TU CAY BACH DONG NU’ (Clerodendron squamatum L. Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện : LÊ THỊ BÍCH THÙY Mã số sinh viên : 18126172 Niên khóa: : 2018 — 2022 ; BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀOTẠO _ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHÓ HÒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP KHẢO SAT MOT SO HOAT CHAT VÀ HOẠT TINH KHANG KHUAN CUA CAO CHIET TU’ CAY BACH DONG NU’ (Clerodendron squamatum L. Hướng dẫn khoa luận Sinh viên thực hiện PGS. TRÀN THỊ LỆ MINH LÊ THỊ BÍCH THÙY ThS.
NGUYEN THỊ QUYEN TP. Thủ Đức, 2/2023 LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lòng biết ơn đến Ban Giám hiệu Trường Đại Học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh, Thay, Cô, Cán bộ khoa Khoa học Sinh học và Viện Nghiên Cứu Công Nghệ Sinh Học và Môi Trưởng- Trường Đại Học Nông Lâm Thành phó Hồ Chi Minh đã hỗ trợ, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn. Cảm ơn các Thầy Cô trong Bộ môn đã hết lòng giảng dạy, truyền đạt những kiến thức và kinh nghiệm quý báu cho tôi. Tôi xin chân thành biết ơn PGS.
Trần Thị Lệ Minh, ThS. Nguyễn Thị Quyên, đã trực tiếp hướng dẫn đề tài, giúp đỡ tận tình, dành nhiều thời gian truyền đạt kiến thức, cho tôi những lời khuyên, động viên và tạo điều kiện tốt để tôi hoàn thành luận văn. Chân thành cảm ơn TS. Trịnh Thị Phi Ly, TS.
Biện Thị Lan Thanh và các bạn phụ đề tài đã tạo điều cho tôi sử dụng các tài nguyên cũng như hỗ trợ tôi hoàn thành nội dung nghiên cứu. Tôi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn be cùng làm việc tại phòng thí nghiệm dược liệu Bio — 309 đã động viên, hỗ trợ tôi trong quá trình hoàn thành khóa luận. XÁC NHẬN VÀ CAM DOAN Tôi tên Lê Thị Bich Thùy, MSSV: 18126172, lớp DH18SHB, thuộc ngành Công nghệ Sinh học, khoa Khoa học Sinh học, trường Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, xin cam đoan: Đây là khóa luận tốt nghiệp do tôi trực tiếp thực hiện.
Các số liệu và thông tin trong nghiên cứu là hoàn toàn trung thực và khách quan. Tôi xin chịu toàn bộ trách nhiệm trước hội đồng về những cam kết này. Hô Chí Minh, ngày 01 tháng 02 năm 2023 Người viet cam kêt Lê Thị Bích Thùy Họ tên: Lê Thị Bích Thùy Lớp: DH18SHB Mssv: 18126172 Số di động: 0337262053 Email: 18126172@st.vn TÓM TẮT Cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L.) thuộc chỉ Clerodendron, họ Verbenaceae, thường sử dụng lá, thân, rễ sắc uống chữa bệnh khí hu, bach doi, giảm dau,. Tùy mỗi địa phương lại có các loại cây với những đặc điểm hình thái khác nhau, tuy nhiên người dân vẫn sử dụng tên gọi chung là bạch đồng nữ và sử dụng như một loại dược liệu tự nhiên dựa trên kinh nghiệm gia đình, chưa có nghiên cứu về thành phần dược liệu cụ thể và khai thác tối đa tiềm năng ứng dụng còn hạn chế.
Do đó nghiên cứu này nhằm xác định đúng cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L.), khảo sat sự hiện diện và hàm lượng của một số hoạt chất, đồng thời khả năng kháng khuẩn của cao chiết từ rễ, thân, lá của cây bằng phương pháp chiết ngâm dầm trong ethanol 70%. Kết quả thu được là đã xác định được đặc điểm hình thái và vi phẫu cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L. Khảo sat dich chiết rễ, thân, lá có sự hiện diện của các nhóm alkaloid, flavonoid, saponin, saponin triterpen, saponin steroid, terpenoid, polyphenol, các chất khử va có khả năng hiện diện tannin trong bộ phận lá. Ham lượng flavonoid tổng số từ rễ, thân, lá lần lượt là: 12,85 mg/g; 17,89 mg/g; 89,85 mg/g.
Ham lượng terpenoids từ rễ, thân, lá lần lượt là: 4,26 mg/g; 4,07 mg/g; 7,46 mg/g. Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L.) cho kết quả cao chiết rễ, thân, lá ở nồng độ 100 mg/mL không thể hiện khả năng kháng khuân đối với Escherichia coli và có khả năng kháng khuân đối với Staphylococcus aureus ở cả ba bộ phan rễ, thân và lá với đường kính vòng kháng lần lượt là: 11,77 mm; 14,43 mm; 15,60 mm. Từ khóa: Bach đồng nữ, flavonoid, terpenoid, kháng khuẩn, Escherichia coli, Staphylococcus aureus. ABSTRACT Clerodendron squamatum L.
belongs to the genus Clerodendron, family Verbenaceae, often used leaves, stems, and roots to drink to treat bad breath, white blood cells, relieve pain,. Depending on each locality, there are plants with different morphological characteristics, but people still use the common name and use it as a natural medicine based on family experience. specific medicinal ingredients and exploiting the maximum application potential are still limited. Therefore, this study aimed to clarify morphological characteristics distinguishing Clerodendron squamatum L., investigate the presence and content of some active ingredients, and investigate the antibacterial ability of extracts from roots, stems and leaves.
of plants by extraction method soaked in 70% ethanol. The results obtained a high amount of extract with extraction efficiency in roots, stems and leaves, respectively: 15. Investigation of the extracts of roots, stems and leaves showing the presence of alkaloids, flavonoids, saponins, triterpen saponins, steroid saponins, terpenoids, polyphenols, reducing agents. Total flavonoid content from roots, stems, and leaves respectively: 12.
The content of terpenoids from roots, stems and leaves were: 4. Investigation of antibacterial activity of Clerodendron squamatum L. extract showed that root, stem and leaf extracts at the concentration of 100 mg/mL did not show antibacterial ability against Escherichia coli and antibacterial ability against Staphylococcus aureus in all three divisions of roots, stems and leaves with ring diameters of 11. Keywords: Clerodendron, flavonoid, terpenoid, antibacteria, Escherichia coli, Staphylococcus aureus.
MỤC LỤC ¬ Trang LOI CAM ON il XAC NHAN VA CAM DOAN iii TOM TAT iv ABSTRACT V MỤC LỤC vi DANH SACH CAC CHU VIET TAT ix DANH SACH CAC BANG % DANH SÁCH CÁC HÌNH xi CHƯƠNG |. Mục tiêu của đề tài 12 1. Nội dung thực hiện: 13 CHƯƠNG 2. TÔNG QUAN TÀI LIỆU 14 2.
Sơ lược về cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L. Phân loại thực vật 14 2. Nguồn gốc phân bó 15 2. Đặc điềm thực vật học 15 2.
Các nghiên cứu về chỉ Clerodendron 15 2. Thành phần hóa thực vật l6 2. Hoạt tính sinh học và giá trị dược liệu 16 2. Một số hợp chất tự nhiên 17 2.
Hợp chất alkaloid 17 2. Hợp chất flavonoid 18 2. Hợp chất terpenoid 20 2. Hợp chất glycosid 21 2.
Hợp chất phenolic 22 2. Hoạt tinh kháng khuẩn từ thực vat 24 2. Vi khuẩn Escherichia coli (E. Vi khuân Staphylococcus aureus (S.
aureus) 26 6 CHƯƠNG 3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2d 3. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 27 3. Vật liệu nghiên cứu 27 3.
Vật liệu nghiên cứu 2] 3. Thu hoạch và xử lý vật liệu mẫu cây bạch đồng nữ ZT 3. Độ 4m mẫu bột ZT 3. Chiết xuất hợp chất từ mẫu cây bạch đồng nữ 28 3.
Hiệu suất chiết xuất 29 3. Phương pháp nghiên cứu 29 3. Khảo sát hình thái thực vật 29 3. Mô tả đặc điểm hình thái 29 3.
Khảo sát một số nhóm hoạt chất 31 3. Định tính alkaloid 31 3. Định tính flavonoid 31 3. Định tính saponin 32 3.
Định tính terpenoid 32 3. Định tính polyphenol 32 3. Định tính tannin 33 3. Định tính các chất khử 33 3.
Xác định hàm lượng flavonoid và terpenoid 33 3. Xác định hàm lượng flavonoid bằng phương pháp quang phố 33 3. Xác định hàm lượng terpenoid bằng phương pháp quang phổ 34 3. Khảo sát hoạt tính kháng khuân 35 CHƯƠNG 4.
KET QUA VÀ THẢO LUẬN 37 4. Kết quả và thảo luận 37 4. Khao sát hình thái thực vật của cây bach đồng nữ (Clerodendron squamatum LS 37 4. Mô ta đặc điểm hình thái 37 4.
Đặc điểm giải phẫu thực vật 40 4. Thu hái và xử lý mẫu 42 4. Khảo sát một số nhóm hoạt chat từ cây bach đồng nữ (Clerodendron squamatum L) 44 4. Xác định hàm lượng flavonoid và terpenoid từ cây bạch đồng nữ (Clerodendron squamatum L.1 Xác định ham lượng flavonoid 48 4.
Xac dinh ham luong terpenoid 49 4. Khảo sát hoạt tinh kháng khuẩn của cao chiết cây bach đồng nữ (Clerodendron squamatum L. KET LUAN VA DE NGHI 55 5. Đề nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHỤ LỤC DANH SÁCH CAC CHỮ VIET TAT Abs : Độ hap thụ quang Ctv : cộng tác viên DC : dịch chiết E.
coli -Escherichia coli HQ : Hàn Quốc L : La LLL : Lần lượt là MT : Menthol Equivalent QE : Quercetin Equivalent R : Rê S. aureus -Staphylococcus aureus T : Than TCVN :Tiêu chuẩn Việt Nam TQ : Trung Quốc DANH SÁCH CÁC BANG Bảng 4. Kết quả đo độ âm bột 43 Bảng 4. Kết quả hiệu suất chiết và độ 4m cao chiết Bảng 4.
Kết quả định tính khảo sát một số nhóm hoạt chất từ cây bạch đồng nữ 44 Bang 4. Kết qua hàm lượng flavonoid tổng số của mẫu 49 Bảng 4. Kết quả hàm lượng terpenoids của mẫu 51 Bảng 4. Kết quả đường kính vòng kháng khuẩn 52 10 DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.
Bạch đồng nữ Clerodendron squamatum 14 Hình 2. Cấu trúc phân tử cơ bản của một số hợp chất alkaloid 18 Hình 2. Cấu trúc phân tử cơ bản của một số hợp chất flavonoid 19 Hình 2. Cấu trúc phân tử cơ bản của một số hợp chất terpenoid 20 Hình 2.
Cau trúc phân tử cơ bản của một số hợp chat phenolic 23 Hình 2. Escherichia coli 25 Hình 2. Staphylococcus aureus 26 Hình 3. Quy trình chiết xuất hợp chat từ cây bach đồng nữ 28 Hình 4.
Rễ cây bạch đồng nữ 37 Hình 4. Thân và ngọn cây bạch đồng nữ 38 Hình 4. Lá cây bạch đồng nữ Hình 4. Hoa bạch đồng nữ 39 Hình 4.
Hoa và quả bạch đồng nữ 39 Hình 4. Vi phẫu rễ cây bach đồng nữ 40 Hình 4. Vi phẫu thân cây bạch đồng nữ 4I Hình 4. Vi phẫu lá cây bạch đồng nữ 42 Hình 4.
Bột mẫu cây bạch đồng nữ 42 Hình 4. Mẫu dịch chiết cồn rễ, thân, lá 45 Hình 4. Định tính flavonoid 46 Hình 4. Dinh tính alkaloid 46 Hình 4.
Dinh tính saponin 46 Hinh 4. Dinh tinh triterpen va steroid 46 Hinh 4. Dinh tinh terpenoid 47 Hinh 4. Dinh tinh polyphenol 47 Hinh 4.
Dinh tinh tannin 47 Hình 4. Dinh tinh các chất khử 47 Hình 4. Đường chuẩn quercetin 48 Hình 4. Đường chuẩn menthol 50 1] Hình 4.
Khảo sát đường kính vòng khang khuân trên E. Dat van dé Việt Nam nằm trong khu vực Đông Nam A với tông diện tích tự nhiên khoảng 330,541 km’, là nước có tính đa dang sinh học cao nhờ vào điều kiện khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng 4m đã góp phan tạo nên môi trường thuận lợi cho hệ sinh thái động thực vật phong phú.