Nghiên cứu tách và xác định cấu trúc hợp chất từ vỏ cây Vối (Cleistocalyx operculatus)

Khám phá thành phần hóa học của vỏ cây Vối. Tài liệu trình bày quá trình tách và xác định cấu trúc các hợp chất bằng phương pháp sắc ký, phổ NMR.

Người đăng

Ẩn danh

Thể loại

khóa luận/báo cáo
69
2
0

Phí lưu trữ

30 Point

Tóm tắt

I. Giới thiệu về cây vối và ý nghĩa nghiên cứu

Cây vối (Cleistocalyx operculatus) thuộc họ Sim (Myrtaceae), là một loài thực vật quý có giá trị dược liệu cao trong y học cổ truyền Việt Nam. Vỏ cây vối chứa nhiều hợp chất hoạt tính mạnh, được sử dụng rộng rãi để chữa trị các bệnh ngoài da, viêm gan và các rối loạn tiêu hóa. Tuy nhiên, thành phần hóa học của vỏ cây vối chưa được nghiên cứu kỹ lưỡng. Tách và xác định cấu trúc hóa học các hợp chất từ vỏ cây vối là cần thiết để khai thác đầy đủ tiềm năng dược liệu của nó. Nghiên cứu này nhằm xác định các hợp chất hoạt tính và ứng dụng của chúng trong y dược hiện đại.

1.1. Đặc điểm thực vật học của cây vối

Cây vối mọc hoang và được trồng rộng rãi tại các tỉnh Việt Nam, đặc biệt là Nghệ An. Vỏ cây vối có độ dày đều, chứa nhiều dầu tinh và các chất chuyên biệt. Lá vối tươi hay khô được sắc để uống, có tác dụng tiêu cơm và thơm. Trong cây vối chứa các chất chữa bệnh tiêu chảy, đau bông, và các bệnh ngoài da như ghẻ lở, môn nhật.

1.2. Giá trị ứng dụng trong y học cổ truyền

Theo y học cổ truyền, hợp chất từ vỏ cây vối có khả năng sát khuẩn mạnh, chữa trị viêm gan, vàng da và các rối loạn tiêu hóa. Rễ vối chứa chất có tác dụng chữa bệnh viêm gan hiệu quả. Lá vối được dùng tắm cho trẻ em bị các bệnh da liễu. Nhu cầu khai thác các hợp chất này ngày càng tăng cao trong lĩnh vực dược phẩm và thực phẩm chức năng.

II. Phương pháp tách và phân lập hợp chất

Tách hợp chất từ vỏ cây vối được thực hiện thông qua các bước liên tiếp sử dụng dung môi hữu cơ khác nhau. Quá trình bắt đầu bằng ngâm vỏ cây vối trong metanol để chiết xuất các chất hoạt tính. Sau đó, sử dụng các phương pháp sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng và kết tinh phân đoạn để phân lập các hợp chất riêng lẻ. Các phương pháp này cho phép tách biệt các thành phần khác nhau dựa trên tính chất hoá học và độ cực của từng chất, đảm bảo độ tinh sạch cao cho các mẫu nghiên cứu.

2.1. Quy trình chiết xuất và chuẩn bị mẫu

Vỏ cây vối được thu thập tại Nghệ An, làm sạch và sấy khô ở nhiệt độ phòng. Chiết xuất hợp chất được thực hiện bằng cách ngâm mẫu trong metanol trong thời gian xác định. Dung dịch thu được được lọc, cô tập và chiết phân đoạn với các dung môi khác nhau theo thứ tự cực tăng dần để phân loại các hợp chất theo tính chất.

2.2. Các kỹ thuật phân lập và tinh sạch

Sắc ký cột sử dụng chất hấp phụ thích hợp để tách các hợp chất theo độ cực. Sắc ký lớp mỏng (TLC) được dùng để kiểm tra độ tinh sạch và theo dõi quá trình phân lập. Kết tinh phân đoạn từ dung môi hữu cơ giúp thu nhận các tinh thể hợp chất tinh khiết với độ tinh sạch cao, phục vụ cho các bước xác định cấu trúc tiếp theo.

III. Xác định cấu trúc hóa học bằng phổ NMR

Xác định cấu trúc hợp chất từ vỏ cây vối được thực hiện chủ yếu bằng phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR). Phổ 1H-NMR cung cấp thông tin về các proton trong phân tử, cho thấy vị trí, số lượng và mối liên kết của các nhóm chức năng. Phổ 13C-NMRDEPT xác định số lượng carbon, loại carbon (CH₃, CH₂, CH, C) và cấu trúc bộ khung carbon. Những dữ liệu này, kết hợp với các phương pháp phân tích khác như khối lượng phân tử học, cho phép các nhà khoa học xác định chính xác cấu trúc phân tử của mỗi hợp chất.

3.1. Phổ 1H NMR và thông tin cấu trúc

Phổ cộng hưởng từ proton (1H-NMR) cung cấp sự dịch chuyển hoá học (δ) của các proton, cho phép xác định các nhóm chức năng khác nhau như alkyl, aromatic, hydroxyl hay carbonyl. Hằng số ghép (J) giữa các proton kề cận giúp xác định tính liên kết và vị trí tương đối. Từ mẫu vỏ cây vối, phổ 1H-NMR thường cho thấy sự hiện diện của các thành phần hữu cơ phức tạp.

3.2. Phổ 13C NMR DEPT và phân tích cấu trúc bộ khung

Phổ 13C-NMR cung cấp thông tin về tất cả các nguyên tử carbon trong hợp chất, xác định số lượng và vị trí của chúng. Phổ DEPT (Distortionless Enhancement by Polarization Transfer) phân biệt các loại carbon khác nhau, giúp xây dựng bộ khung carbon chính xác. Thông tin từ hai phương pháp này cho phép xác định cấu trúc phân tử và phân loại hợp chất.

IV. Ứng dụng và ý nghĩa của kết quả nghiên cứu

Việc tách và xác định cấu trúc hợp chất từ vỏ cây vối có ý nghĩa quan trọng cho sự phát triển của ngành dược phẩm và sản phẩm chức năng Việt Nam. Kết quả nghiên cứu cung cấp dữ liệu khoa học để chứng minh hiệu quả dược liệu của cây vối, mở đường cho việc sản xuất các dược phẩm mới. Các hợp chất hoạt tính được tách lập có thể ứng dụng trong treatment các bệnh viêm, nhiễm khuẩn và rối loạn tiêu hóa. Ngoài ra, nghiên cứu này góp phần bảo vệ và phát triển bền vững tài nguyên thực vật quý có của Việt Nam.

4.1. Ứng dụng trong dược phẩm và sản phẩm chức năng

Hợp chất từ vỏ cây vối có tiềm năng ứng dụng cao trong ngành dược phẩm để phát triển các loại thuốc chữa bệnh da liễu, viêm gan và rối loạn tiêu hóa. Sản phẩm chức năng chứa các chiết xuất vỏ cây vối có thể được phát triển cho thị trường, giúp cải thiện sức khỏe người tiêu dùng. Các công thức bổ sung vitamin, khoáng chất kết hợp với hợp chất từ vỏ cây vối có thể tạo ra sản phẩm giá trị cao.

4.2. Bảo vệ tài nguyên và phát triển bền vững

Nghiên cứu xác định cấu trúc hợp chất từ vỏ cây vối hỗ trợ việc khai thác bền vững tài nguyên thực vật của Việt Nam. Hiểu biết sâu về thành phần hoá học giúp tối ưu hoá quy trình trồng trọt, chế biến và bảo quản. Công bố kết quả khoa học khuyến khích cộng đồng nghiên cứu tiếp tục khám phá tiềm năng của các loài thực vật Việt Nam khác, góp phần phát triển kinh tế xanh.

22/12/2025

Trích đoạn nội dung tài liệu

Më ®Çu 1 LÝ do chän ®Ò tµi Ngµy nay hãa häc ®ang b-íc vµo thêi k× ph¸t triÓn rÊt m¹nh mÏ. Dùa trªn nÒn t¶ng tri thøc khoa häc hiÖn ®¹i, c¸c thµnh tùu ®· ®¹t ®-îc trong nghiªn cøu vµ s¶n xuÊt ho¸ häc ngµy cµng phong phó vµ ®a d¹ng, nã ®· ®ãng gãp quan träng vµo viÖc n©ng cao chÊt l-îng cuéc sèng cña con ng-êi, kh«ng nh÷ng thÕ hãa häc cßn lµ c«ng cô hç trî ®¾c lùc cho c¸c nghµnh khoa häc kh¸c ph¸t triÓn. Tr-íc nhu cÇu ngµy cµng cao cña ®êi sèng, ®ång thêi do ®Æc tÝnh th©n thiÖn vµ an toµn, ho¸ häc c¸c hîp chÊt thiªn nhiªn ®· vµ ®ang ®-îc nhiÒu phßng thÝ nghiÖm trªn toµn thÕ giíi nghiªn cøu ®Ó t×m ra nhiÒu hîp chÊt míi, v× nh÷ng øng dông quý b¸u cña chóng trªn nhiÒu lÜnh vùc cho c¸c ngµnh nh- : c«ng nghiÖp, n«ng nghiÖp, mÜ phÈm, thùc phÈm, h-¬ng liÖu, d-îc liÖu vµ ®Æc biÖt lµ trong Y häc. HÖ thùc vËt ViÖt Nam rÊt phong phó vµ ®a d¹ng, trong ®ã cã nhiÒu loµi thùc vËt quý lµm thuèc ch÷a bÖnh vµ thøc ¨n hµng ngµy.

Trong ®êi sèng ng-êi d©n ViÖt Nam tõ xa x-a cho ®Õn nay, ®· cã phong tôc sö dông c¸c lo¹i c©y cá tù nhiªn ®Ó lµm thuèc ( chñ yÕu ë d¹ng chÕ phÈm th«). C¸c c«ng tr×nh nghiªn cøu ®iÒu tra c©y thuèc ë ViÖt Nam cho thÊy sè l-îng c¸c loµi c©y dïng ®Ó lµm thuèc ch÷a bÖnh lªn tíi 1.850 loµi ph©n bè trong 224 hä thùc vËt ViÖt Nam n»m trong vïng khÝ hËu nhiÖt ®íi giã mïa, cËn xÝch ®¹o, l-îng m-a nhiÒu, ®é Èm cao nªn cã th¶m thùc vËt phong phó. MÆc dï cho ®Õn nay viÖc tiÕn hµnh nghiªn cøu hÖ thùc vËt ë n-íc ta ch-a ®-îc tiÕn hµnh mét c¸ch ®Çy ®ñ vµ quy m«, nh-ng theo tæng hîp tõ c¸c nguån tµi liÖu cña nhiÒu t¸c gi¶ th× ë ViÖt Nam hiÖn nay cã trªn 7.000 loµi thùc vËt bËc cao.000 loµi thùc vËt nh©n d©n ta sö dông lµm nguån l-¬ng thùc, thùc phÈm, lÊy gç, tinh dÇu, thuèc ch÷a bÖnh. Trong nhiÒu loµi thùc vËt ®ã, hä Sim (Myrtaceae) còng lµ mét hä lín, gåm kho¶ng 100 chi vµ gÇn 3000 loµi ph©n bè chñ yÕu ë c¸c n-íc nhiÖt ®íi ch©u §¹i D-¬ng .ë n-íc ta hä Sim cã kho¶ng 13 chi víi gÇn 100 loµi , chñ yÕu dïng lµm thuèc ch÷a bÖnh, trong sè ®ã cã c©y vèi (Cleitocalyx operculatus ( Roxb) Merr.

Et Perry ) ®-îc trång lÊy l¸ vµ nô nÊu n-íc uèng thay chÌ cã t¸c dông, võa th¬m võa tiªu c¬m, l¸ vèi t-¬i hay kh« ®-îc s¾c ®Æc ®-îc coi lµ thuèc s¸t khuÈn ch÷a nhiÒu bÖnh ngoµi da nh- ghÎ lë, môn nhät, nªn th-êng ®-îc dïng t¾m cho trÎ em, trong vá c©y vèi cã chÊt ch÷a bÖnh tiªu ch¶y. ®au bông, ¨n kh«ng tiªu , ch÷a báng , rÔ vèi cã chÊt dïng ch÷a bÖnh viªm gan, vµng da. C©y vèi mäc hoang vµ ®-îc trång nhiÒu t¹i hÇu kh¾p c¸c tØnh ë n-íc ta, ®-îc sö dông nhiÒu trong cuéc sèng d©n gian nh-ng thµnh phÇn ho¸ häc cña vá vèi ch-a ®-îc nghiªn cøu nhiÒu. ChÝnh v× vËy chóng t«i lùa chän ®Ò tµi “T¸ch vµ x¸c ®Þnh cÊu tróc cña mét sè hîp chÊt tõ vá c©y vèi (Cleistocalyx operculatus (Roxb) Merr.

Et Perry ) ë NghÖ An’’ nh»m gãp phÇn x¸c ®Þnh thµnh phÇn ho¸ häc cña vá c©y vèi vµ ®ång thêi phôc vô cho c«ng t¸c ®iÒu tra c¬ b¶n vµ ®Þnh h-íng sö dông c¸c hîp chÊt ho¸ häc tõ vá c©y vèi vµo thùc tiÔn cuéc sèng. NhiÖm vô nghiªn cøu - LÊy mÉu vá c©y vèi - Ng©m vá c©y vèi trong dung m«i metanol - Ch-ng cÊt thu håi dung m«i thu ®-îc phÇn cao ®Æc metanol - ChiÕt phÇn cao ®Æc víi c¸c dung m«i kh¸c ®Ó thu ®-îc c¸c dÞch chiÕt t-¬ng øng - Sö dông c¸c ph-¬ng ph¸p s¾c ký cét, s¾c ký líp máng vµ kÕt tinh ph©n ®o¹n ®Ó ph©n lËp c¸c hîp chÊt tõ c¸c dÞch chiÕt -X¸c ®Þnh cÊu tróc cña c¸c hîp chÊt b»ng ph-¬ng ph¸p phæ: Phæ céng h-ëng tõ h¹t nh©n 1H-NMR, céng h-ëng tõ h¹t nh©n 13C-NMR, DEPT. §èi t-îng nghiªn cøu §èi t-îng nghiªn cøu lµ bé phËn vá cña c©y vèi, mÉu ®-îc thu t¹i thµnh phè Vinh tØnh NghÖ An Ch-¬ng 1: tæng quan 1. §¹i c-¬ng vÒ thùc vËt häc vµ ho¸ häc C¸c c©y hä sim 1.

§¹i c-¬ng vÒ thùc vËt häc Hä Sim ( Myrtaceae) lµ hä lín nhÊt cña bé Sim ( Myrtales) hay cßn gäi lµ bé §µo kim n-¬ng thuéc ph©n líp Hoa hång – líp Hai l¸ mÇm cña ngµnh thùc vËt h¹t kÝn Trªn thÕ giíi hä Sim gåm 100 chi víi 3000 loµi ph©n bè ë c¸c vïng nhiÖt ®íi vµ ¸ nhiÖt ®íi, chñ yÕu lµ ch©u Mü vµ ch©u óc [1]. ë ViÖt Nam, hä Sim gåm 13 chi víi gÇn 100 loµi ®-îc ph©n bè kh¾p 3 miÒn : B¾c, Trung, Nam. C¸c c©y thuéc hä Sim cã thÓ lµ c©y gç lín, c©y nhá, hay c©y bôi ®-îc trång trong v-ên nhµ cho qu¶ ¨n, cho tinh dÇu hay mäc hoang d¹i ë ®ång b»ng trung du, miÒn nói. L¸ mäc ®èi ®¬n nguyªn, kh«ng cã l¸ kÌm.

Hoa cña chóng tËp hîp thµnh côm, h×nh chïm, ®«i khi mäc ®¬n. C¸c l¸ ®µi ®Ýnh l¹i víi nhau ë d-íi thµnh h×nh chÐn, c¸nh hoa rêi nhau vµ ®Ýnh trªn mÐp èng ®µi. NhÞ rÊt nhiÒu, bÊt ®Þnh vµ xÕp kh«ng theo mét trËt tù nµo, nhÞ th-êng cuén l¹i ë trong nô, chØ nhÞ rêi hay dÝnh nhau ë d-íi thµnh èng ng¾n. Bé nhÞ cã sè l¸ no·n th-êng b»ng sè c¸nh hoa hoÆc Ýt h¬n, dÝnh l¹i víi nhau thµnh bÇu d-íi hoÆc bÇu gi÷a víi sè « t-¬ng øng sè l¸ no·n, ®Ýnh no·n trô gi÷a, mét vßi, mét ®Çu nhuþ.

Qu¶ mäng, thÞt, th-êng do ®Õ hoa ph¸t triÓn thµnh, còng cã khi qu¶ kh« më. Qu¶ mang ®µi tån t¹i ë ®Ønh.H¹t kh«ng cã néi nhò [1] NhiÒu c©y hä Sim chøa tinh dÇu nh- c©y trµm (Melaleuca Leucadendron Linn); c©y chæi xuÓ (Baeckia frutescens Linn); c©y b¹ch ®µn chanh (Eucalyptus citriodora Hook. Tinh dÇu cña c¸c c©y nµy ®· ®-îc khai th¸c vµ sö dông trong c«ng nghiÖp h-¬ng liÖu, y häc. C¸c c©y kh¸c thuéc hä Sim cã nhiÒu c«ng dông ch÷a bÖnh nh-: c©y æi (Psidium guajava Linn); c©y sim (Rhodomyrtus tomentosa (Ait), Hassk.); c©y ®¬n t-íng qu©n (Syzygium formosum Var.

Merr et Perry); c©y s¾n thuyÒn (Syzygium resinosum (Gagnep) Merr Et Perry .[ 2,3] Trong lÞch sö hä Myrtaceae ®· tõng chia thµnh 2 ph©n hä ) Ph©n hä Myrtaceae cã qu¶ nhiÒu cïi thÞt vµ l¸ ®èi mÐp tr¬n. PhÇn lín c¸c chi trong hä nµy cã mét trong 3 d¹ng ph«i dÔ nhËn ra. C¸c chi cña Myrtoideae ®-îc t×m thÊy kh¾p thÕ giíi trong c¸c khu vùc nhiÖt ®íi vµ cËn nhiÖt ®íi, víi c¸c trung t©m ®a d¹ng n»m ë Trung Mü, Nam Mü, ®«ng b¾c Australia va Malaysia. ) Ph©n hä Leptospermoideae cã qu¶ kh«, kh«ng nøt ( qu¶ nang ) vµ c¸c l¸ mäc so le hay theo vßng xo¾n.

Ph©n hä Leptospermoideae chñ yÕu ®-îc t×m thÊy ë Australia. NhiÒu chi ë miÒn t©y Australia cã c¸c l¸ bÞ suy tho¸i m¹nh vµ c¸c hoa mang ®Æc ®iÓm ®iÓn h×nh cho vïng sinh tr-ëng kh« c»n h¬n. Sù ph©n chia hä Myrtaceae thµnh Leptospermoideae vµ Myrtoideae ®· bÞ nhiÒu t¸c gi¶ nghi ngê trong ®ã cã Johnson vµ Brigg ( 1984), ph¸t hiÖn ra lµ trong hä Myrtaceae lµ ®a ngµnh. Ph©n tÝch ë møc ®é ph©n tö cña Wilson, Obrien vµ nh÷ng ng-êi kh¸c vµo n¨m 2001®· ph¸t hiÖn thÊy 11 ph©n nhãm râ nÐt trong ph¹m vi hä nµy, bao gåm nhiÒu ph©n nhãm ®· ®-îc Johson vµ Brigg x¸c ®Þnh.

Ph©n tÝch ph©n tö sau ®ã cña Sytsma vµ Litt (2002) ®· ph¸t hiÖn ph©n nhãm Myrtoideae ë Trung- Nam Mü phï hîp víi ph©n hä ®a ngµnh Leptoideae. Trong hä Sim chi lín nhÊt lµ Eugenia (trªn thÕ giíi cã 600 loµi, ë n-íc ta cã 26 loµi ®-îc chuyÓn vµo chi Syzygium). Nh÷ng c©y trong chi nµy phÇn lín lµ c©y gç trung b×nh vµ ®a sè lµ c©y hoang d¹i. Trong chi nµy cã c©y thuèc quý lµ c©y ®inh h-¬ng (E.caryophyllataThunb= Syzygium aromaticumMerr.

Et Perry), cã nô dïng lµm thuèc, gia vÞ. Mét sè loµi thuéc chi Eugenia ®· ®-îc t¸ch ra vµ ®Æt vµo chi míi nh- c©y gioi ( Syzygium jambos(L) Alston, Eugenia jambos L.) cã qu¶ ¨n ngon, c©y vèi (Cleislocalyx operculatus (Roxb) Merr. Et Perry) ®-îc trång lÊy l¸ vµ nô ®Ó uèng n-íc C©y trµm hay chÌ ®ång (Melaleca leucadendronL.) lµ c©y to cã vá xèp, bong tõng m¶nh rÊt dÔ bãc. L¸ h×nh m¸c nhän, cuèng ng¾n, g©n h×nh cung, hoa cã mµu vµng nh¹t mäc thµnh b«ng.

C©y mäc thµnh rõng thuÇn lo¹i ®Êt phÌn ë ven biÓn, cßn gÆp ë mét sè vïng biÓn phÝa B¾c. Vá c©y dïng ®Ó x¶m thuyÒn, l¸ dïng cÊt tinh dÇu. C©y chæi xuÓ (Baeckea frutescens L.) th-êng gÆp mäc xen lÉn víi c¸c c©y sim, mua. Lµ c©y bôi thÊp, ph©n nh¸nh nhiÒu, cã l¸ h×nh sîi dÔ rông, c©y cã l¸ dïng ®Ó t¸ch dÇu th¬m gäi lµ dÇu chæi ®Ó xoa bãp, khi pha víi r-îu th× thµnh r-îu chæi Trªn c¸c ®åi träc, trong c¸c c«ng viªn, c¸c v-ên vµ ®-êng c¸i cã trång nhiÒu loµi thuéc chi Eucalytus.

Chóng lµ c©y nhËp néi, trªn thÕ giíi cã h¬n 300 loµi, ph©n bè chñ yÕu ë ch©u óc vµ Malaysia, sèng trong nh÷ng ®iÒu kiÖn sinh th¸i kh¸c nhau. HÇu hÕt lµ c©y lín, cã thÓ cao tíi 10 m. NhiÒu loµi cho tinh dÇu kh¸c nhau. Gç cña chóng tèt cã thÓ dïng vµo nhiÒu viÖc kh¸c nhau.

ë n-íc ta hiÖn cã trång nhiÒu loµi nh- :b¹ch ®µn tr¾ng (E. camaldulensis Dehahardt) cã gç dïng lµm tµ vÑt, vµ lµm bét giÊy. C©y b¹ch ®µn l¸ liÔu hay long duyªn (E.Muell) lµ c©y trång lµm c¶nh ë c¸c c«ng viªn, cã gç n©u, cøng dïng trong x©y dùng hay lµm gç trô má ; dÇu lµm thuèc s¸t trïng, trÞ c¶m, gi¶m ho. ) trång lµm c¶nh vµ g©y rõng vÖ sinh, cã gç mµu x¸m, th¬m cøng dïng ®ãng thuyÒn, rÔ vµ l¸ cµnh dïng cÊt tinh dÇu th¬m, dïng lµm thuèc bæ d¹ dµy, gi¶i c¶m, gi¶m ®au ®Çu, gi¶m ho, s¸t trïng, ch÷a viªm cuèng phæi.) cã l¸ nhá dµi hÑp, dïng lµm thuèc ho long ®êm.

C©y b¹ch ®µn ®á hay b¹ch ®µn l¸ mÝt (E. Smith) trång lÊy bãng m¸t, cã gç dïng lµm trô cÇu, nÒn tÇu, trô má, tµ vÑt, bét giÊy, cßn ®-îc dïng lµm thuèc ch÷a c¶m, s¸t trïng, gi¶m ho. C©y b¹ch ®µn l¸ nhá hay khuynh diÖp ( E.Smith) cã gç kh«ng bÞ mèi mät vµ chÞu n-íc mÆn, dïng lµm tµ vÑt, ®ãng thµnh tµu vµ còng ®-îc dïng lµm thuèc long ®êm, s¸t trïng vµ ch÷a ho [3]. Giíi thiÖu mét sè c©y thuéc hä Sim 1.

C©y sim (Rhodomyrtus tomentosa Ait. Hassk) C©y sim ®-îc sö dông nhiÒu trong c¸c vÞ thuèc d©n gian, nh- dïng bóp vµ l¸ non s¾c uèng, ch÷a bÖnh tiªu ch¶y, kiÕt lþ hoÆc röa vÕt th-¬ng, vÕt loÐt. RÔ c©y sim thu h¸i quanh n¨m. Qu¶ vµo mïa thu vµ mïa hÌ ph¬i kh« lµm thuèc.

Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ