Luận văn thạc sĩ: Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên hệ thống microcarrier trong sản xuất vaccine tai xanh

• Tác giả: Trần Thị Vân Anh
• Người hướng dẫn: PGS. Bùi Trần Anh Đào
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên cứu ứng dụng kĩ thuật nuôi cấy tế bào trên hệ thống Microcarrier trong sản xuất vacxin Tai Xanh
• Loại tài liệu: Luận văn
• Năm xuất bản: 2019
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 1.1. Lời cam đoan
• 1.2. Mục lục
• 1.3. Danh mục chữ viết tắt
• 1.4. Danh mục bảng
• 1.5. Danh mục hình
• 1.6. Trích yếu luận văn
• 1.7. Thesis abstract
• 1.8. Tính cấp thiết của đề tài
• 1.9. Mục tiêu nghiên cứu
• 1.10. Tổng quan tài liệu
• 1.10.1. Tổng quan nuôi cấy tế bào
• 1.10.2. Một số đặc điểm của tế bào động vật
• 1.10.3. Thành phần dinh dưỡng của môi trường nuôi cấy tế bào
• 1.10.4. Các loại môi trường nuôi cấy tế bào
• 1.10.5. Điều kiện nuôi cấy tế bào
• 1.10.6. Sự tạp nhiễm và cách hạn chế
• 1.10.7. Sự sinh trưởng của tế bào động vật trong nuôi cấy
• 1.10.8. Virus tai xanh
• 1.10.9. Hình thái và cấu trúc của virus PRRS
• 1.10.10. Đặc tính nuôi cấy virus Tai Xanh
• 1.10.11. Nuôi cấy virus tai xanh trên môi trường tế bào
• 1.10.12. Các dòng tế bào nuôi cấy thích hợp virus Tai Xanh
• 1.10.13. Nuôi cấy virus Tai Xanh trên môi trường tế bào Marc-145
• 1.10.14. Các yếu tố ảnh hưởng trong nuôi cấy tế bào và virus tai xanh
• 1.10.14.1. Bề mặt nuôi cấy
• 1.10.14.2. Yếu tố không khí môi trường xung quanh
• 1.10.15. Các hệ thống nuôi cấy tế bào
• 1.10.15.1. Hệ thống nuôi cấy tế bào hiện nay
• 1.10.15.2. Hệ thống Microcarrier
• 1.10.15.3. Bình nuôi cấy
• 1.10.15.4. Các loại hạt Cytodex
• 1.11. Vật liệu - phương pháp nghiên cứu
• 1.11.1. Nội dung nghiên cứu
• 1.11.2. Nghiên cứu quy trình nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.11.3. Nghiên cứu tính thích ứng của virus Tai Xanh nuôi cấy trên tế bào Marc-145 bằng hệ thống Microcarrier
• 1.11.4. Nghiên cứu quy trình thu hoạch và xử lí dịch virus sau khi thu hoạch
• 1.11.5. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu
• 1.11.5.1. Đối tượng nghiên cứu
• 1.11.5.2. Vật liệu nghiên cứu
• 1.11.5.3. Địa điểm nghiên cứu
• 1.11.5.4. Thời gian nghiên cứu
• 1.11.6. Phương pháp nghiên cứu
• 1.11.6.1. Phương pháp nuôi cấy tế bào
• 1.11.6.2. Phương pháp gây nhiễm
• 1.11.6.3. Phương pháp thu hoạch
• 1.11.6.4. Phương pháp kiểm tra độ thuần khiết (TCVN8684:2011)
• 1.11.6.5. Phương pháp xác định chỉ số TCID50
• 1.11.6.6. Phương pháp xử lý số liệu
• 1.12. Kết quả và thảo luận
• 1.12.1. Nghiên cứu quy trình nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.1.1. Xác định tốc độ khuấy thích hợp để nuôi tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.1.2. Xác định giá trị DO thích hợp để nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.1.3. Xác định lưu lượng khí cấp vào thích hợp để nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.1.4. Xác định môi trường nuôi cấy thích hợp cho tế bào Marc-145 trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.1.5. Xác định lượng tế bào Marc-145 cấy vào hạt Cytodex trên hệ thống Microcarrier
• 1.12.2. Nghiên cứu tính thích ứng của virus tai xanh nuôi cấy trên tế bào Marc-145 bằng hệ thống Microcarrier
• 1.12.2.1. Xác định thời gian hấp phụ virus vào tế bào, xử lí dịch hấp phụ virus
• 1.12.2.2. Xác định môi trường duy trì sau gây nhiễm virus
• 1.12.2.3. Xác định liều gây nhiễm, thời gian thu hoạch virus thích hợp
• 1.12.3. Nghiên cứu quy trình thu hoạch-thu dồn dịch virus tai xanh
• 1.13. Kết luận và kiến nghị
• Tài liệu tham khảo

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên microcarrier

Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên microcarrier trong sản xuất vaccine tai xanh đang trở thành một trong những lĩnh vực quan trọng trong ngành thú y. Kỹ thuật này không chỉ giúp nâng cao năng suất sản xuất vaccine mà còn đảm bảo chất lượng và hiệu quả trong việc phòng chống dịch bệnh. Việc áp dụng công nghệ nuôi cấy tế bào trên microcarrier cho phép sản xuất vaccine với quy mô lớn, đáp ứng nhu cầu ngày càng cao của thị trường.

1.1. Khái niệm về nuôi cấy tế bào và microcarrier

Nuôi cấy tế bào là quá trình duy trì và phát triển tế bào ngoài cơ thể sống. Microcarrier là các hạt nhỏ được sử dụng để hỗ trợ sự phát triển của tế bào trong môi trường lỏng, giúp tăng cường hiệu quả nuôi cấy và thu hoạch tế bào.

1.2. Lợi ích của việc sử dụng microcarrier trong sản xuất vaccine

Việc sử dụng microcarrier trong sản xuất vaccine tai xanh mang lại nhiều lợi ích như tăng cường khả năng bám dính của tế bào, giảm thiểu tạp nhiễm và nâng cao hiệu suất thu hoạch virus. Điều này giúp giảm chi phí sản xuất và thời gian sản xuất vaccine.

II. Thách thức trong sản xuất vaccine tai xanh bằng kỹ thuật nuôi cấy tế bào

Mặc dù có nhiều lợi ích, nhưng việc sản xuất vaccine tai xanh bằng kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên microcarrier cũng gặp phải nhiều thách thức. Các vấn đề như tạp nhiễm, điều kiện nuôi cấy không ổn định và sự phát triển không đồng đều của tế bào là những yếu tố cần được giải quyết.

2.1. Vấn đề tạp nhiễm trong nuôi cấy tế bào

Tạp nhiễm là một trong những vấn đề nghiêm trọng trong nuôi cấy tế bào. Việc kiểm soát tạp nhiễm từ môi trường nuôi cấy và thiết bị là rất cần thiết để đảm bảo chất lượng sản phẩm cuối cùng.

2.2. Điều kiện nuôi cấy không ổn định

Điều kiện nuôi cấy như pH, nhiệt độ và nồng độ oxy hòa tan cần được kiểm soát chặt chẽ. Sự thay đổi đột ngột có thể ảnh hưởng đến sự phát triển của tế bào và hiệu suất sản xuất vaccine.

III. Phương pháp nuôi cấy tế bào trên microcarrier hiệu quả

Để đạt được hiệu quả cao trong sản xuất vaccine tai xanh, việc áp dụng các phương pháp nuôi cấy tế bào trên microcarrier là rất quan trọng. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc tối ưu hóa các điều kiện nuôi cấy có thể nâng cao đáng kể năng suất và chất lượng sản phẩm.

3.1. Quy trình nuôi cấy tế bào Marc 145

Quy trình nuôi cấy tế bào Marc-145 trên hệ thống microcarrier bao gồm các bước như chuẩn bị môi trường nuôi cấy, cấy tế bào và theo dõi sự phát triển của tế bào. Tốc độ khuấy và nồng độ oxy hòa tan là những yếu tố quan trọng cần được điều chỉnh.

3.2. Kỹ thuật thu hoạch virus tai xanh

Kỹ thuật thu hoạch virus tai xanh từ tế bào nuôi cấy trên microcarrier cần được thực hiện một cách cẩn thận để đảm bảo hiệu giá virus cao nhất. Việc xác định thời gian thu hoạch và điều kiện môi trường là rất quan trọng.

IV. Ứng dụng thực tiễn của vaccine tai xanh sản xuất từ kỹ thuật nuôi cấy tế bào

Vaccine tai xanh sản xuất từ kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên microcarrier đã được áp dụng thành công trong thực tiễn. Các nghiên cứu cho thấy vaccine này có hiệu quả cao trong việc phòng chống bệnh tai xanh ở lợn, giúp giảm thiểu thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi.

4.1. Hiệu quả phòng bệnh của vaccine tai xanh

Vaccine tai xanh sản xuất từ kỹ thuật nuôi cấy tế bào đã cho thấy khả năng phòng bệnh hiệu quả, giúp giảm tỷ lệ mắc bệnh và thiệt hại cho đàn lợn. Nghiên cứu cho thấy vaccine này có thể giảm thời gian tồn tại của virus trong cơ thể lợn.

4.2. Tác động kinh tế từ việc sử dụng vaccine

Việc sử dụng vaccine tai xanh không chỉ giúp bảo vệ sức khỏe đàn lợn mà còn mang lại lợi ích kinh tế cho người chăn nuôi. Giảm thiểu thiệt hại do dịch bệnh giúp tăng cường sản lượng và chất lượng thịt lợn.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy tế bào trên microcarrier trong sản xuất vaccine tai xanh mở ra nhiều triển vọng cho ngành thú y. Việc phát triển công nghệ này không chỉ giúp nâng cao năng suất sản xuất mà còn đảm bảo chất lượng vaccine, đáp ứng nhu cầu ngày càng cao của thị trường.

5.1. Tương lai của công nghệ nuôi cấy tế bào

Công nghệ nuôi cấy tế bào trên microcarrier có tiềm năng lớn trong việc sản xuất vaccine cho nhiều loại bệnh khác nhau. Nghiên cứu và phát triển công nghệ này sẽ giúp nâng cao hiệu quả phòng bệnh trong ngành chăn nuôi.

5.2. Định hướng nghiên cứu tiếp theo

Các nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sản xuất vaccine, giảm thiểu chi phí và nâng cao hiệu quả. Việc áp dụng công nghệ mới và cải tiến quy trình sản xuất sẽ là chìa khóa để đáp ứng nhu cầu thị trường.