HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM LÊ THỊ XIÊM HOÀN THIỆN QUY TRÌNH SẢN XUẤT QUY MÔ CÔNG NGHIỆP VẮC XIN VÔ HOẠT NHŨ DẦU PHÒNG HỘI CHỨNG RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TẠI CÔNG TY TNHH MTV AVAC VIỆT NAM Chuyên Ngành: Thú Y Mã Số: 8640101 Người hướng dẫn khoa học: PGS. Nguyễn Bá Hiên NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2019 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa từng dùng để bảo vệ bất kỳ học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn đã được cám ơn, các thông tin trích dẫn trong luận văn này đều được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày … tháng . năm 2019 Tác giả luận văn Lê Thị Xiêm i LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự giúp đỡ động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi được bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Bá Hiên đã tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám Đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Vi sinh Vật – Truyền nhiễm, Khoa Thú y – Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán bộ công nhân viên tại công ty TNHH một thành viên Avac Việt Nam đã giúp đỡ và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày … tháng . năm 2019 Tác giả luận văn Lê Thị Xiêm ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC Lời cam đoan . ii Mục lục . iii Danh mục chữ viết tắt . vi Danh mục bảng . vii Danh mục hình . viii Trích yếu luận văn . ix Thesis abstract. Tính cấp thıết của đề tàı . Mục tıêu nghıên cứu . Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài . Ý nghĩa khoa học . Ý nghĩa thực tiễn . Tổng quan tài liệu . Hội chứng rối loạn sınh sản và hô hấp ở lợn . Lịch sử hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp . Tình hình phân bố và lưu hành hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp tại tại Việt Nam. Vırus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn . Hình thái và cấu trúc virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn . Sức đề kháng của virus và đặc tính nuôi cấy . Bệnh học hộı chứng rốı loạn sınh sản và hô hấp ở lợn . Triệu chứng lâm sàng và bệnh lý. Bệnh do virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn Type II thể độc lực cao . Miễn dịch đối với virus hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn . Vắc xın phòng hộı chứng rốı loạn sınh sản và hô hấp . Hiểu biết chung về vắc xin . 12 iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Những nguyên tắc chính để đảm bảo chất lượng trong sản xuất vắc xin, chế phẩm sinh học ở quy mô công nghiệp . Sản xuất vắc xin bằng phương pháp vô hoạt virus . Sản xuất vắc xin bằng phương pháp nhược độc virus trên môi trường tế bào. Phương pháp sản xuất vắc xin thế hệ mới . Chất bổ trợ . Vật liệu và phƣơng pháp nghiên cứu . Thời gian nghiên cứu . Địa điểm nghiên cứu . Nguyên vật liệu, đối tượng sử dụng trong nghiên cứu . Đối tượng, vật liệu . Hóa chất bất hoạt . Chất bổ trợ . Các loại dung dịch, môi trường . Trang thiết bị, dụng cụ . Nội dung nghiên cứu . Nghiên cứu sản xuất vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn quy mô công nghiệp . Kiểm nghiệm vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn ở quy mô công nghiệp . Phương pháp nghiên cứu . Quy trình tóm tắt sản xuất vắc xin PRRS trên quy mô công nghiệp . Phương pháp nuôi cấy tế bào . Phương pháp gây nhiễm, thu hoạch và chuẩn độ virus PRRS. Phương pháp cô đặc, vô hoạt, nhũ hóa và kiểm tra sau nhũ hóa vắc xin . Kiểm tra thành phẩm vắc xin . Phương pháp IPMA (Immunoperoxidase monolayer assay): Phương pháp miễn dịch có gắn enzyme trên thảm tế bào một lớp . Phương pháp Elisa phát hiện kháng thể hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (theo TCVN 8400-21:2014) . Phương pháp phân lập virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (theo TCVN 8400-21:2014) . 38 iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail. Xử lý số liệu. Kết quả và thảo luận . Tối Ưu quá trình sản xuất kháng nguyên VIRUS PRRS trên hệ thống chai roller. Tối ưu hóa quy trình nuôi tế bào Marc – 145 trên chai roller . Tối ưu hóa quy trình gây nhiễm, thu hoạch virus PRRS trên hệ thống chai roller. Tối ưu quá trình bất hoạt kháng nguyên sản xuất vắc xin vô hoạt nhũ dầu . Nghiên cứu quá trình cô đặc kháng nguyên . Nghiên cứu quá trình bất hoạt kháng nguyên . Xác nhận quá trình nhũ hóa, bổ sung chất bổ trợ vắc xin . Kiểm soát trong quá trình sản xuất vắc xin PRRS vô hoạt. Kiểm nghiệm thành phẩm vắc xin . Kiểm tra cảm quan . Kiểm tra vô trùng . Kiểm tra an toàn . Kiểm tra hiệu lực . Kết luận và kiến nghị . 69 Tài liệu tham khảo . 70 v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt BEI Binary Ethylenimine CPE Cytophathogenic Effect DMEM Dulbecco's Modified Eagle's Medium DMSO Dimethyl sulfoxide DNA Deoxyribonucleic acid ĐC Đối chứng ELISA Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay FBS Fetal Bovine Serum FTM Fruit Thioglycolate Agar GMP Good Manufacturing Practices IPC In Process control IPMA Immunoperoxidase monolayer Assay NBCS Newborn Calf Serum NSP Non structural protein OD Optical Density OIE Office International des Epizooties PBS Photphat Buffer Saline PCR Polymerase Chain Reaction PRRS Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome S/P Sample/Positive SD Sabouraud dextrose agar SP Structural protein TCID50 50% Tissue Culture Infective Dose TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam TN Thí nghiệm TRS Technical Report Series TSA Trypticase Soy Agar TSB Trypticase Soy Broth WHO World Health Organization XLD Xylose Lysine Deoxycholate vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC BẢNG Bảng 2. Một số tên thường gặp trong các tài liệu. Tổng hợp các ổ dịch PRRS xảy ra ở Việt Nam từ 2007-2016 . Các vắc xin đã thử nghiệm sản xuất . Kết quả kiểm tra khả năng phát triển tế bào Marc – 145 trong điều kiện có 5% CO2 và không có CO2 . Kết quả xác định lượng tế bào Marc-145 ra chai thích hợp . Kết quả xác định tốc độ lăn phù hợp . Khả năng sinh trưởng tế bào Marc – 145 trên chai roller 2X . Kết quả xác định liều gây nhiễm thích hợp của virus PRRS chủng KTY-PRRS1 trên môi trường nuôi cấy tế bào . Kết quả xác định thời gian thu hoạch thích hợp của virus PRRS chủng KTY-PRRS-01 trên môi trường nuôi cấy tế bào . Hiệu giá virus sau khi cô đặc bằng phương pháp lọc tiếp tuyến. Kiểm tra sản phẩm sau bất hoạt (bằng formaldehyde và BEI) . Xác nhận quy trình bất hoạt bằng BEI . Kết quả nhũ hóa vắc xin bằng dầu khoáng ISA 201VG . Kết quả kiểm tra vô trùng vắc xin trước khi bất hoạt . Kết quả kiểm tra hiệu giá virus trước khi bất hoạt . Kết quả kiểm tra quá trình vô hoạt virus vắc xin bằng BEI . Kết quả kiểm tra vô trùng virus vắc xin sau khi bất hoạt. Kết quả kiểm tra vắc xin sau khi nhũ hóa . Kết quả kiểm tra vô trùng sau khi nhũ hóa . Kết quả sản xuất thử nghiệm vắc xin PRRS . Kết quả kiểm tra cảm quan vắc xin PRRS vô hoạt . Kết quả kiểm tra vô trùng vắc xin . Kết quả kiểm tra an toàn vắc xin PRRS ở lợn thí nghiệm . Kết quả kiểm tra hàm lượng kháng thể bằng phương pháp ELISA . Kết quả kiểm tra hàm lượng kháng thể bằng phương pháp IPMA . Kết quả đánh giá công cường độc . 66 vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com DANH MỤC HÌNH Hình 2. Bản đồ dịch tễ phân bố của PRRS tại Việt Nam từ 2007-2013 . Hình ảnh về hình thái, cấu trúc của virus PRRS . Hình ảnh về cấu trúc bộ gen của virus PRRS . Gen từ các chủng virus khác nhau . Sơ đồ sản xuất vắc xin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp theo quy mô công nghiệp . Hình ảnh nuôi cấy tế bào trên chai roller 2X . Tế bào Marc-145 qua các thời điểm . CPE virus PRRS và đối chứng. Hiệu giá kháng thể (bằng ELISA, chỉ số S/P, tiêm vắc xin thời điểm D0, D21 và thử thách cường độc thời điểm D49) . Hiệu giá kháng thể (bằng phương pháp IPMA, tiêm vắc xin thời điểm D0, D21 và thử thách cường độc thời điểm D49) . Hình ảnh kiểm tra hạt nhũ hóa dưới kính hiển vi . Vắc xin PRRS vô hoạt sau chia liều . Một số hình ảnh kiểm tra vô trùng sản phẩm. Thân nhiệt lợn kiểm tra an toàn . Kiểm tra an toàn vắc xin . Ảnh lấy máu kiểm tra kháng thể kháng VIRUS PRRS . Hình ảnh kiểm tra IPMA. Lợn trước và sau khi công cường độc . Biến đổi thân nhiệt của lợn sau khi công cường độc . 68 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Lê Thị Xiêm Tên luận văn: Hoàn thiện quy trình sản xuất quy mô công nghiệp vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn tại công ty TNHH MTV Avac Việt Nam. Ngành: Thú y Mã số: 8640101 Tên cơ sở đào tạo: Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Chúng tôi áp dụng các kết quả đã thu được từ đề tài cấp nhà nước KC.
Luận văn thạc sĩ: Hoàn thiện quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt nhũ dầu cho lợn tại AVAC Việt Nam
Luận văn thạc sĩ nghiên cứu vnua hoàn thiện quy trình sản xuất quy mô công nghiệp vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội chứng rối, đánh giá hiện trạng, phân tích vấn đề, đề xuất biện
Trường đại học
Học viện Nông nghiệp Việt NamChuyên ngành
Thú yNgười đăng
Ẩn danhThể loại
Luận vănPhí lưu trữ
30 PointMục lục chi tiết
THÔNG TIN CHI TIẾT
Tác giả: Lê Thị Xiêm
Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Bá Hiên
Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
Chuyên ngành: Thú y
Đề tài: Hoàn thiện quy trình sản xuất quy mô công nghiệp vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn tại công ty TNHH MTV Avac Việt Nam
Loại tài liệu: Luận văn
Năm xuất bản: 2019
Địa điểm: Hà Nội
Tài liệu "Nghiên cứu quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt nhũ dầu phòng bệnh cho lợn tại AVAC Việt Nam" cung cấp cái nhìn sâu sắc về quy trình sản xuất vắc xin vô hoạt, một phương pháp quan trọng trong việc phòng ngừa bệnh tật cho lợn. Nghiên cứu này không chỉ nêu rõ các bước trong quy trình sản xuất mà còn nhấn mạnh những lợi ích của việc sử dụng vắc xin nhũ dầu, giúp tăng cường hiệu quả miễn dịch cho đàn lợn. Độc giả sẽ tìm thấy thông tin hữu ích về cách thức sản xuất và ứng dụng vắc xin trong chăn nuôi, từ đó nâng cao kiến thức và khả năng quản lý sức khỏe cho đàn vật nuôi.
Để mở rộng thêm kiến thức về lĩnh vực này, bạn có thể tham khảo các tài liệu liên quan như Luận văn thạc sĩ nghiên cứu sản xuất vắc xin nhược độc dịch tả lợn trên tế bào bằng công nghệ microcarrier tại công ty hanvet, nơi trình bày về công nghệ microcarrier trong sản xuất vắc xin. Bên cạnh đó, tài liệu Luận văn thạc sĩ vnua nghiên cứu sản xuất vắc xin nhược độc dịch tả lợn trên tế bào bằng công nghệ microcarrier tại công ty hanvet cũng sẽ cung cấp thêm thông tin chi tiết về quy trình và ứng dụng của công nghệ này trong sản xuất vắc xin. Những tài liệu này sẽ giúp bạn có cái nhìn toàn diện hơn về các phương pháp sản xuất vắc xin hiện đại và hiệu quả trong ngành chăn nuôi.
Trích đoạn nội dung tài liệu
Nội dung được bảo vệ bản quyền — Tải xuống đầy đủ