Luận Văn Thạc Sĩ: Kỹ Thuật Nâng Cao Hệ Số Nhân Giống Lan Kim Tuyến Anoectochilus Roxburghii Qua Nuôi Cấy Mô Tế Bào

• Tác giả: Đào Bá Tuyên
• Người hướng dẫn: PGS. Ngô Xuân Bình
• Trường học: Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Nghiên cứu kỹ thuật nâng cao hệ số nhân giống lan kim tuyến (Anoectochilus roxburghii) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật
• Loại tài liệu: Khóa luận tốt nghiệp đại học
• Năm xuất bản: 2015
• Địa điểm: Thái Nguyên

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC HÌNH
• DANH MỤC BIỂU ĐỒ
• 1. PHẦN 1: MỞ ĐẦU
• 1.1. Đặt vấn đề Lan Kim Tuyến - Anoectochilus roxburghii (Wall) Lindl, thuộc họ lan – Orchidaceae
• 1.2. Mục đích của đề tài
• 1.3. Yêu cầu của đề tài
• 1.4. Ý nghĩa của đề tài
• 1.4.1. Ý nghĩa khoa học
• 1.4.2. Ý nghĩa thực tiễn
• 2. PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Giới thiệu về cây lan kim tuyến
• 2.1.1. Phân loại
• 2.2. Đặc điểm hình thái
• 2.2.1. Đặc điểm nhận dạng Lan Kim Tuyến
• 2.2.2. Đặc điểm thân rễ
• 2.2.3. Đặc điểm thân khí sinh
• 2.2.4. Đặc điểm của rễ
• 2.2.5. Đặc điểm của lá
• 2.3. Đặc điểm phân bố
• 2.3.1. Phân bố theo kiểu rừng
• 2.3.2. Phân bố theo trạng thái rừng
• 2.3.3. Phân bố theo sinh cảnh
• 2.3.4. Phân bố theo địa lý, địa hình
• 2.3.5. Phân bố theo đai cao
• 2.4. Số lượng quần thể
• 2.5. Giá trị của lan Kim Tuyến
• 2.5.1. Giá trị kinh tế
• 2.5.2. Giá trị dược liệu
• 2.6. Khái quát về nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 2.6.1. Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 2.6.2. Cơ sở khoa học của nuôi cấy mô tế bào thực vật
• 2.6.2.1. Tính toàn năng của tế bào thực vật
• 3. PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu
• 3.1.1. Đối tượng nghiên cứu
• 3.1.2. Phạm vi nghiên cứu
• 3.2. Địa điểm thời gian nghiên cứu
• 3.3. Hóa chất, thiết bị và dụng cụ nuôi cấy mô
• 3.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
• 3.4.1. Nội dung nghiên cứu
• 3.4.2. Phương pháp nghiên cứu
• 4. PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Kết quả ảnh hưởng của hàm lượng, thời gian khử trùng bằng HgCl2 đến hiệu quả vô trùng vật liệu nuôi cấy chồi lan Kim Tuyến (sau 10 ngày nuôi cấy)
• 4.2. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng GA3 đến khả năng tái sinh chồi lan Kim Tuyến (sau 3 tuần nuôi cấy)
• 4.3. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của GA3 kết hợp với BA đến khả năng tái sinh chồi lan Kim Tuyến
• 4.4. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng BA đến khả năng nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến (sau 4 tuần nuôi cấy)
• 4.5. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của sự kết hợp nồng độ BA và NAA đến khả năng nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến (sau 4 tuần nuôi cấy)
• 4.6. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng Kinetin đến khả năng nhân nhanh chồi lan Kim Tuyến
• 4.7. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của hàm lượng NAA đến khả năng ra rễ của chồi lan Kim Tuyến (sau 4 tuần nuôi cấy)
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về lan kim tuyến

Lan kim tuyến (Anoectochilus roxburghii) là một loài thực vật quý hiếm thuộc họ lan (Orchidaceae). Loài này phân bố chủ yếu ở các khu vực có độ cao từ 500-1600m, nơi có đất giàu mùn, độ ẩm cao và thoáng khí. Lan kim tuyến được biết đến với giá trị dược liệu cao, đặc biệt trong điều trị các bệnh như tiểu đường, viêm thận, và các bệnh tim mạch. Tuy nhiên, do khai thác quá mức, loài này đang đối mặt với nguy cơ tuyệt chủng và được đưa vào danh sách bảo vệ của Sách đỏ Việt Nam.

1.1. Đặc điểm hình thái

Lan kim tuyến có thân thảo, mọc sát đất, với thân rễ dài và thân khí sinh mọng nước. Lá của loài này có hình trứng, màu sắc đa dạng từ xanh sẫm đến nâu đỏ, với các gân lá nhạt hơn. Hoa của lan kim tuyến thường có màu trắng, mọc thành cụm thưa. Thân rễ của loài này thường có màu xanh trắng hoặc nâu đỏ, với chiều dài trung bình khoảng 8.5 cm.

1.2. Giá trị dược liệu

Lan kim tuyến chứa nhiều hợp chất có giá trị dược liệu như axit 4-hydroxycinnamic, β-sitosterol, và kinsenoside. Các hợp chất này có tác dụng kháng viêm, kháng virus, và hỗ trợ điều trị các bệnh về gan, tim mạch. Ngoài ra, loài này còn được sử dụng trong y học cổ truyền để điều trị các chứng đau ngực, đau bụng, và tiểu đường.

II. Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào

Kỹ thuật nuôi cấy mô là phương pháp hiện đại được sử dụng để nhân giống lan kim tuyến với hiệu quả cao. Phương pháp này cho phép tạo ra cây giống sạch bệnh, đồng đều về chất lượng và giữ được tính di truyền của cây mẹ. Nuôi cấy mô tế bào cũng giúp tăng hệ số nhân giống, đáp ứng nhu cầu bảo tồn và phát triển loài thực vật quý hiếm này.

2.1. Điều kiện nuôi cấy

Để đạt hiệu quả cao trong nuôi cấy mô, cần đảm bảo các điều kiện vô trùng tuyệt đối. Môi trường nuôi cấy thường sử dụng là môi trường MS (Murashige & Skoog) với các chất kích thích sinh trưởng như GA3, BA, và NAA. Nhiệt độ và ánh sáng cũng cần được kiểm soát chặt chẽ để đảm bảo sự phát triển tối ưu của chồi và rễ.

2.2. Ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng

Các chất kích thích sinh trưởng như GA3, BA, và NAA có vai trò quan trọng trong quá trình tái sinh và nhân nhanh chồi lan kim tuyến. Nghiên cứu cho thấy, sự kết hợp giữa BA và NAA giúp tăng hệ số nhân giống đáng kể. Ngoài ra, hàm lượng Kinetin cũng ảnh hưởng đến khả năng ra rễ của chồi, giúp cây con phát triển khỏe mạnh.

III. Ứng dụng và ý nghĩa thực tiễn

Nghiên cứu về kỹ thuật nuôi cấy mô để nhân giống lan kim tuyến không chỉ có ý nghĩa khoa học mà còn mang lại giá trị thực tiễn cao. Kết quả nghiên cứu giúp xây dựng quy trình nhân giống hiệu quả, góp phần bảo tồn nguồn gen quý hiếm và đáp ứng nhu cầu sử dụng trong y học và làm cảnh.

3.1. Ý nghĩa khoa học

Nghiên cứu này cung cấp cơ sở khoa học cho việc ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô trong nhân giống các loài thực vật quý hiếm. Đồng thời, nó cũng giúp sinh viên và nhà nghiên cứu nắm vững phương pháp nghiên cứu, phân tích số liệu, và trình bày kết quả khoa học.

3.2. Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả nghiên cứu góp phần phát triển công nghệ sinh học trong lĩnh vực nhân giống thực vật. Việc nhân giống lan kim tuyến bằng nuôi cấy mô không chỉ giúp bảo tồn loài quý hiếm mà còn tạo ra nguồn cây giống chất lượng cao, phục vụ cho y học và thị trường cây cảnh.