Nghiên cứu chế tạo và bảo quản kit chẩn đoán bệnh trypanosomiasis ở trâu bò

LỜI CẢM ƠN

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU

1. PHẦN 1: MỞ ĐẦU

1.1. Mục tiêu nghiên cứu

1.2. Ý nghĩa của đề tài

1.2.1. Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học

1.2.2. Ý nghĩa trong thực tiễn

2. PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Những hiểu biết về tiên mao trùng và bệnh tiên mao trùng ở gia súc

2.2. Đặc điểm hình thái, cấu trúc và phân loại tiên mao trùng

2.3. Đặc điểm dịch tễ học tiên mao trùng

2.4. Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng

2.5. Phương pháp chẩn đoán bệnh

2.6. Phòng và trị bệnh tiên mao trùng trên gia súc

2.7. Những hiểu biết về Kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng

2.7.1. Kháng nguyên RoTAT 1.2 của Trypanosoma evansi

2.7.2. Tách dòng gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của Trypanosoma evansi

2.7.3. Biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của Trypanosoma evansi

2.8. Tình hình nghiên cứu về tiên mao trùng

2.8.1. Tình hình nghiên cứu trong nước

2.8.2. Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài

3. PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1. Đối tượng, hóa chất và thiết bị nghiên cứu

3.1.1. Đối tượng nghiên cứu

3.1.2. Hóa chất và thiết bị nghiên cứu

3.2. Địa điểm và thời gian nghiên cứu

3.2.1. Địa điểm nghiên cứu

3.2.2. Thời gian nghiên cứu

3.3. Nội dung nghiên cứu

3.3.1. Xác định điều kiện chế tạo Kit theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1

3.3.2. Xác định điều kiện bảo quản Kit theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1

3.3.3. Thử nghiệm Kit chế tạo từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò

3.4. Phương pháp nghiên cứu

3.4.1. Phương pháp ELISA

3.4.2. Phương pháp PCR

3.4.3. Phương pháp gắn kháng nguyên lên hạt latex

3.4.4. Phản ứng ngưng kết CATT

3.4.5. Phương pháp tách huyết thanh

3.4.6. Phương pháp xác định điều kiện bảo quản Kit theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1

3.4.7. Phương pháp thử nghiệm Kit chế tạo theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1

3.4.8. Phương pháp xử lý số liệu

4. PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1. Kết quả xác định các điều kiện sản xuất Kit chẩn đoán huyết thanh học từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1

4.2. Xác định các điều kiện gắn kháng nguyên - hạt latex

4.3. Kết quả xác định nhiệt độ và thời gian để tạo phức hợp kháng nguyên - hạt latex

4.4. Đánh giá hiệu quả chẩn đoán của phản ứng CATT

4.5. Nghiên cứu điều kiện bảo quản Kit

4.6. Kết quả thử nghiệm Kit chế tạo từ kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 theo nguyên lý CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng

5. PHẦN 5: KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ ĐỀ NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về nghiên cứu

Nghiên cứu tập trung vào chế tạo và bảo quản kit chẩn đoán bệnh trypanosomiasis ở trâu bò, một bệnh do Trypanosoma evansi gây ra. Bệnh này gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi, ảnh hưởng đến sản lượng thịt và sức kéo. Kit chẩn đoán được phát triển nhằm cung cấp phương pháp chẩn đoán nhanh, chính xác và hiệu quả, giúp kiểm soát và phòng ngừa bệnh. Nghiên cứu này có ý nghĩa quan trọng trong việc nâng cao hiệu quả chẩn đoán và quản lý bệnh ở gia súc.

1.1 Mục tiêu nghiên cứu

Mục tiêu chính của nghiên cứu là xác định các điều kiện tối ưu để chế tạo kit chẩn đoán và bảo quản kit một cách hiệu quả. Nghiên cứu cũng nhằm đánh giá độ nhạy và độ đặc hiệu của kit chẩn đoán trong việc phát hiện bệnh trypanosomiasis ở trâu bò.

1.2 Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả nghiên cứu cung cấp cơ sở khoa học để hoàn thiện quy trình sản xuất kit chẩn đoán, giúp giảm chi phí và tăng khả năng ứng dụng rộng rãi trong thực tế. Điều này đặc biệt quan trọng trong bối cảnh Việt Nam vẫn phụ thuộc vào kit nhập ngoại với giá thành cao.

II. Tổng quan về bệnh trypanosomiasis

Bệnh trypanosomiasis do Trypanosoma evansi gây ra, là một bệnh phổ biến ở trâu bò và các loài gia súc khác. Bệnh gây ra các triệu chứng như thiếu máu, suy nhược, giảm sức đề kháng và có thể dẫn đến tử vong. Trypanosoma evansi lây truyền qua các loài ruồi và mòng hút máu, làm tăng nguy cơ bùng phát dịch trong mùa mưa ẩm.

2.1 Đặc điểm dịch tễ học

Bệnh phân bố rộng khắp các vùng sinh thái ở Việt Nam, từ miền núi đến đồng bằng. Tỷ lệ nhiễm bệnh ở trâu bò dao động từ 5% đến 30%, tùy thuộc vào điều kiện môi trường và mùa vụ. Các loài ruồi và mòng hút máu đóng vai trò quan trọng trong việc lây truyền bệnh.

2.2 Cơ chế sinh bệnh

Khi xâm nhập vào cơ thể vật chủ, Trypanosoma evansi sinh sản nhanh chóng, gây tắc mạch máu và tiết ra các độc tố gây rối loạn chức năng cơ thể. Độc tố này ảnh hưởng đến hệ thần kinh, gan và các cơ quan khác, dẫn đến các triệu chứng lâm sàng nghiêm trọng.

III. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng các phương pháp như ELISA, PCR và phản ứng ngưng kết CATT để chế tạo kit chẩn đoán. Quá trình nghiên cứu bao gồm việc xác định các điều kiện tối ưu để gắn kháng nguyên lên hạt latex và đánh giá hiệu quả của kit chẩn đoán trong việc phát hiện bệnh.

3.1 Chế tạo kit chẩn đoán

Quy trình chế tạo kit bao gồm việc tách dòng gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của Trypanosoma evansi và biểu hiện gen này trong hệ thống tái tổ hợp. Kháng nguyên tái tổ hợp được sử dụng để tạo phức hợp với hạt latex, tạo thành kit chẩn đoán.

3.2 Bảo quản kit

Nghiên cứu cũng tập trung vào việc xác định các điều kiện bảo quản kit như nhiệt độ và thời gian để đảm bảo độ ổn định và hiệu quả của kit chẩn đoán trong thời gian dài.

IV. Kết quả và thảo luận

Kết quả nghiên cứu cho thấy kit chẩn đoán có độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong việc phát hiện bệnh trypanosomiasis ở trâu bò. Kit chẩn đoán được bảo quản ở nhiệt độ 4°C có thể duy trì hiệu quả trong thời gian dài. Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng kit chẩn đoán có khả năng ứng dụng rộng rãi trong thực tế, giúp cải thiện hiệu quả chẩn đoán và quản lý bệnh.

4.1 Độ nhạy và độ đặc hiệu

Kit chẩn đoán đạt độ nhạy 98% và độ đặc hiệu 95% trong việc phát hiện Trypanosoma evansi, cho thấy hiệu quả vượt trội so với các phương pháp truyền thống.

4.2 Ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu mở ra triển vọng ứng dụng kit chẩn đoán trong các chương trình kiểm soát bệnh ở trâu bò, giúp giảm thiểu thiệt hại kinh tế và nâng cao chất lượng chăn nuôi.

Luận văn thạc sĩ về chế tạo và bảo quản kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trypanosomiasis ở trâu bò