Nghiên cứu nhân giống cây sói rừng Sarcandra Glabra bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Giới thiệu về Chi Sói rừng và loài cây Sói rừng (Sarcandra glabra (Thunb.)

1.2. Phân loại, phân bố

1.3. Đặc điểm thực vật học

1.4. Giá trị của cây Sói rừng (Sarcandra glabra (Thunb.)

1.5. Cơ sở việc định danh loài và xác định quan hệ di truyền

1.6. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng

1.6.1. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng trên thế giới

1.6.2. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng ở nước ta

1.7. Cơ sở phương pháp nhân giống in vitro (vi nhân giống)

1.7.1. Ưu điểm của phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

1.7.2. Nhược điểm của phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

1.7.3. Các phương pháp nuôi cấy mô

1.7.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô thực vật

1.7.5. Các giai đoạn trong nhân giống in vitro

2. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu

2.1.1. Đối tượng nghiên cứu

2.1.2. Phạm vi nghiên cứu

2.2. Nội dung nghiên cứu

2.3. Phương pháp nghiên cứu

2.3.1. Điều tra đánh giá thực trạng phân bố và thu thập mẫu nghiên cứu

2.3.2. Phương pháp nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng đặc điểm hình thái

2.3.3. Phương pháp nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng chỉ thị DNA

2.3.4. Phương pháp nhân giống in vitro cây Sói rừng

2.3.5. Phương pháp xử lý số liệu

3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1. Điều tra, đánh giá thực trạng phân bố, giá trị sử dụng của loài Sói rừng và thu thập mẫu

3.2. Kết quả nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng đặc điểm hình thái

3.2.1. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Xín Mần

3.2.2. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Mèo Vạc

3.2.3. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Quản Bạ

3.2.4. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Hoàng Su Phì

3.2.5. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Vị Xuyên

3.3. Kết quả nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng chỉ thị DNA

3.3.1. Kết quả tách chiết DNA tổng số của mẫu Sói rừng nghiên cứu

3.3.2. Kết quả PCR của mẫu Sói rừng nghiên cứu

3.3.3. Kết quả giải trình tự vùng ITS-rDNA của mẫu Sói rừng nghiên cứu

3.3.4. Kết quả phân tích đa dạng di truyền, xác định mối quan hệ di truyền giữa 15 mẫu Sói rừng nghiên cứu

3.4. Kết quả nghiên cứu nhân giống in vitro cây Sói rừng

3.4.1. Chọn vật liệu khởi đầu

3.4.2. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng bằng HgCl2 0,1% đến khả năng tạo mẫu vô trùng

3.4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân nhanh chồi Sói rừng

3.4.4. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh đến khả năng ra rễ chồi Sói rừng

3.4.5. Nghiên cứu đưa cây ra nhà kính

3.4.6. Chăm sóc cây giai đoạn in vitro

4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về cây sói rừng Sarcandra glabra

Cây sói rừng, có tên khoa học là Sarcandra glabra, thuộc họ Chloranthaceae. Loài cây này được biết đến với nhiều tên gọi khác nhau như sói nhẵn, cửu tiết trà, và có giá trị dược liệu cao. Cây thường mọc ở những khu vực ẩm ướt, có độ cao lên đến 1000m. Theo Đông y, cây sói rừng có vị đắng, tính hơi ấm, có tác dụng kháng khuẩn, tiêu viêm, và hỗ trợ điều trị nhiều bệnh như viêm phổi, viêm phế quản. Việc nghiên cứu và bảo tồn cây sói rừng là cần thiết, đặc biệt trong bối cảnh nhiều loài cây thuốc quý đang bị khai thác cạn kiệt.

II. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây sói rừng

Nghiên cứu về nhân giống cây sói rừng đã được thực hiện ở nhiều nơi trên thế giới, tuy nhiên, ở Việt Nam, công tác này vẫn còn nhiều hạn chế. Việc nhân giống truyền thống không đảm bảo chất lượng và số lượng giống. Kỹ thuật nuôi cấy in vitro được xem là giải pháp hiệu quả để bảo tồn và phát triển cây sói rừng. Phương pháp này giúp tạo ra các mẫu cây giống có chất lượng cao, đồng thời giảm thiểu áp lực khai thác từ tự nhiên. Việc áp dụng công nghệ sinh học trong nhân giống cây thuốc quý như sói rừng là rất cần thiết để bảo tồn nguồn gen và phát triển bền vững.

III. Phương pháp nuôi cấy in vitro

Kỹ thuật nuôi cấy in vitro là một trong những phương pháp hiện đại được áp dụng trong nhân giống cây sói rừng. Phương pháp này bao gồm các bước như khử trùng mẫu, nuôi cấy mô tế bào, và kích thích sinh trưởng. Việc lựa chọn chất khử trùng và chất kích thích sinh trưởng phù hợp là rất quan trọng để đạt được tỷ lệ mẫu vô trùng cao và khả năng nhân nhanh chồi. Nghiên cứu cho thấy, việc sử dụng các chất như BAP, NAA, và IBA có ảnh hưởng tích cực đến quá trình ra rễ và phát triển của cây giống. Kết quả từ nghiên cứu này sẽ là cơ sở cho việc phát triển quy trình nhân giống cây sói rừng hiệu quả.

IV. Giá trị thực tiễn của nghiên cứu

Nghiên cứu nhân giống cây sói rừng bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro không chỉ có giá trị khoa học mà còn có ý nghĩa thực tiễn lớn. Việc bảo tồn và phát triển cây sói rừng sẽ góp phần vào việc bảo vệ nguồn tài nguyên dược liệu quý hiếm của Việt Nam. Hơn nữa, cây sói rừng có tiềm năng kinh tế cao, có thể được phát triển thành sản phẩm dược liệu phục vụ cho nhu cầu chữa bệnh của người dân. Việc áp dụng công nghệ sinh học trong nhân giống cây thuốc sẽ mở ra hướng đi mới cho ngành nông nghiệp và dược liệu, đồng thời góp phần vào phát triển bền vững.

Luận Văn Thạc Sĩ: Nghiên Cứu Nhân Giống Cây Sói Rừng Sarcandra Glabra Bằng Kỹ Thuật Nuôi Cấy In Vitro