Khảo sát tác dụng kháng khuẩn và hoạt tính chống oxi hóa của tràm gió (Melalecuca cajuputi powell)

Tài liệu nghiên cứu Khảo sát tác dụng kháng khuẩn hàm lượng polyphenol và hoạt tính chống oxi hóa của dược liệu tràm, tổng hợp lý thuyết và thực hành, cung cấp kiến thức chuyên

• Tác giả: Trần Minh Quân
• Người hướng dẫn: PGS. Nguyễn Thanh Hải
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Kháng Khuẩn Và Chống Oxi Hóa Từ Tràm Gió: Nghiên Cứu Hàm Lượng Polyphenol
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• 1. PHẦN I: MỞ ĐẦU
• 1.1. Tính cấp thiết của đề tài
• 1.2. Mục đích – yêu cầu
• 2. PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Cơ sở của sử dụng thảo dƣợc làm thuốc
• 2.2. Thực trạng vi khuẩn kháng kháng sinh
• 2.3. Tổng quan về cây Tràm gió
• 2.4. Tổng quan về polyphenol. Hoạt tính chống oxy hóa
• 2.5. Các loại vi khuẩn có trong thí nghiệm
• 2.5.1. Nhóm vi khuẩn Gram dƣơng
• 2.5.2. Nhóm vi khuẩn Gram âm
• 3. PHẦN III: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu. Vật liệu nghiên cứu
• 3.2. Các chủng vi khuẩn
• 3.3. Nội dung nghiên cứu
• 3.4. Phƣơng pháp nghiên cứu
• 3.4.1. Phƣơng pháp chiết xuất dƣợc liệu
• 3.4.2. Phƣơng pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết dƣợc liệu trên vi khuẩn
• 3.4.3. Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng polyphenol
• 3.4.4. Phƣơng pháp xác định hoạt tính chống oxy hóa
• 4. PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Kết quả khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của các loại dƣợc liệu
• 4.2. Kết quả xác định đƣờng kính vòng vô khuẩn của các dịch chiết dƣợc liệu tràm gió theo phƣơng pháp khuếch tán trên đĩa thạch
• 4.3. Kết quả xác định đƣờng kính vòng vô khuẩn của tinh dầu tràm gió theo phƣơng pháp xông hơi và khuếch tán trên đĩa thạch
• 4.4. Kết quả xác định hàm lƣợng polyphenol từ các dịch chiết của dƣợc liệu Tràm gió
• 4.5. Kết quả xây dựng đồ thị đƣờng chuẩn giữa hàm lƣợng chlorogenic acid và sự gia tăng giá trị mật độ quang đo đƣợc khi phản ứng với thuốc thử Folin Ciocalteu
• 4.6. Kết quả hàm lƣợng polyphenol tổng số quy đổi theo acid chlorogenic (mg) của dịch chiết (hàm lƣơng 100mg/ml)
• 4.7. Kết quả xác định hoạt tính chống oxy hóa của các dịch chiết dƣợc liệu Tràm gió
• 4.8. Kết quả xác định khả năng chống oxy hóa của chất chuẩn VTME (Alpha tocopherol)
• 4.9. Kết quả xác định khả năng chống oxy hóa của các dịch chiết dƣợc liệu
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về kháng khuẩn và chống oxi hóa từ tràm gió

Tràm gió (Melaleuca cajuputi powell) là một loại dược liệu quý, nổi bật với khả năng kháng khuẩn và chống oxi hóa. Nghiên cứu cho thấy, tràm gió chứa hàm lượng polyphenol cao, một hợp chất có tác dụng tích cực trong việc bảo vệ sức khỏe. Việc tìm hiểu về tác dụng của tràm gió không chỉ giúp nâng cao giá trị dược liệu mà còn mở ra hướng đi mới trong việc phát triển các sản phẩm tự nhiên an toàn cho sức khỏe.

1.1. Kháng khuẩn từ tràm gió Tác dụng và cơ chế

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng tràm gió có khả năng ức chế sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn, bao gồm cả Escherichia coli và Staphylococcus aureus. Cơ chế kháng khuẩn của tràm gió chủ yếu đến từ các hợp chất polyphenol và tinh dầu có trong lá cây, giúp ngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh.

1.2. Chống oxi hóa từ tràm gió Lợi ích cho sức khỏe

Hoạt tính chống oxi hóa của tràm gió được xác định thông qua các phương pháp như DPPH. Các nghiên cứu cho thấy, tràm gió có khả năng loại bỏ các gốc tự do, từ đó bảo vệ tế bào khỏi tổn thương. Điều này đặc biệt quan trọng trong việc ngăn ngừa các bệnh mãn tính và lão hóa sớm.

II. Vấn đề kháng kháng sinh trong y học hiện đại

Kháng kháng sinh đang trở thành một thách thức lớn trong y học hiện đại. Việc lạm dụng kháng sinh trong điều trị đã dẫn đến sự phát triển của các chủng vi khuẩn kháng thuốc. Điều này không chỉ ảnh hưởng đến hiệu quả điều trị mà còn gây ra nhiều hệ lụy nghiêm trọng cho sức khỏe cộng đồng.

2.1. Nguyên nhân gây ra kháng kháng sinh

Nguyên nhân chính dẫn đến kháng kháng sinh bao gồm việc sử dụng thuốc không đúng cách, sự phát triển của vi khuẩn qua các đột biến gen, và việc bán thuốc kháng sinh không kiểm soát. Những yếu tố này đã làm gia tăng tình trạng kháng thuốc trên toàn cầu.

2.2. Hệ lụy của kháng kháng sinh đối với sức khỏe

Kháng kháng sinh không chỉ làm tăng chi phí điều trị mà còn dẫn đến tỷ lệ tử vong cao hơn do các bệnh nhiễm trùng không thể điều trị. Điều này đặt ra yêu cầu cấp thiết về việc tìm kiếm các giải pháp thay thế an toàn và hiệu quả hơn.

III. Phương pháp nghiên cứu hàm lượng polyphenol trong tràm gió

Nghiên cứu hàm lượng polyphenol trong tràm gió được thực hiện thông qua các phương pháp chiết xuất khác nhau. Các dung môi như ethanol, methanol và nước cất được sử dụng để tối ưu hóa quá trình chiết xuất, nhằm thu được hàm lượng polyphenol cao nhất.

3.1. Quy trình chiết xuất polyphenol từ tràm gió

Quy trình chiết xuất bao gồm việc sử dụng dung môi phù hợp để hòa tan các hợp chất polyphenol. Sau đó, các dung môi được loại bỏ để thu được cao chiết, từ đó xác định hàm lượng polyphenol bằng phương pháp Folin-Ciocalteu.

3.2. Đánh giá hàm lượng polyphenol qua các phương pháp phân tích

Hàm lượng polyphenol được đánh giá thông qua các phương pháp phân tích quang phổ. Kết quả cho thấy, tràm gió có hàm lượng polyphenol cao, đặc biệt khi chiết xuất bằng methanol, cho thấy tiềm năng ứng dụng trong y học.

IV. Ứng dụng thực tiễn của tràm gió trong y học

Tràm gió không chỉ được sử dụng trong y học cổ truyền mà còn đang được nghiên cứu để phát triển thành các sản phẩm dược phẩm hiện đại. Các ứng dụng của tràm gió trong điều trị bệnh lý và bảo vệ sức khỏe ngày càng được khẳng định qua các nghiên cứu khoa học.

4.1. Sử dụng tràm gió trong điều trị bệnh

Tràm gió được sử dụng để điều trị các bệnh nhiễm khuẩn, viêm nhiễm và các vấn đề về hô hấp. Tinh dầu tràm gió có tác dụng sát trùng và kháng viêm, giúp cải thiện tình trạng sức khỏe.

4.2. Phát triển sản phẩm từ tràm gió

Nghiên cứu đang được tiến hành để phát triển các sản phẩm từ tràm gió như viên nang, tinh dầu và các sản phẩm chăm sóc sức khỏe. Điều này không chỉ nâng cao giá trị dược liệu mà còn đáp ứng nhu cầu thị trường về sản phẩm tự nhiên.

V. Kết luận và triển vọng nghiên cứu về tràm gió

Nghiên cứu về tràm gió cho thấy tiềm năng lớn trong việc phát triển các sản phẩm kháng khuẩn và chống oxi hóa. Việc khai thác và ứng dụng tràm gió trong y học không chỉ giúp bảo vệ sức khỏe mà còn góp phần vào việc phát triển nền y học hiện đại.

5.1. Tương lai của nghiên cứu tràm gió

Nghiên cứu về tràm gió cần được mở rộng để khám phá thêm nhiều ứng dụng mới. Việc kết hợp giữa y học cổ truyền và hiện đại sẽ mang lại nhiều lợi ích cho sức khỏe cộng đồng.

5.2. Khuyến nghị cho nghiên cứu tiếp theo

Cần có thêm nhiều nghiên cứu về các hợp chất có trong tràm gió và tác dụng của chúng đối với sức khỏe. Điều này sẽ giúp khẳng định vị thế của tràm gió trong ngành dược phẩm và y học.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ------- ------- KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT TÁC DỤNG KHÁNG KHUẨN, HÀM LƢỢNG POLYPHENOL VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXI HÓA CỦA DƢỢC LIỆU TRÀM GIÓ (Melalecuca cajuputi powell) HÀ NỘI- 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ------- ------- KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT TÁC DỤNG KHÁNG KHUẨN, HÀM LƢỢNG POLYPHENOL VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXI HÓA CỦA DƢỢC LIỆU TRÀM GIÓ (Melalecuca cajuputi powell) Ngƣời thực hiện : TRẦN MINH QUÂN Mã sinh viên : 637164 Lớp : K63CNSHB Khoa : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Ngƣời hƣớng dẫn : PGS. NGUYỄN THANH HẢI TS. NGUYỄN THỊ THANH HÀ HÀ NỘI- 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan về độ trung thực và khách quan của các số liệu, hình ảnh và kết quả trong báo cáo. Tất cả các số liệu, hình ảnh và kết quả chƣa từng đƣợc công bố trông bất kỳ một nghiên cứu khoa học nào.

Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện khóa luận tốt nghiệp đã đƣợc cảm ơn, các thông tin trích dẫn, tài liệu tham khảo đều đƣợc chỉ rõ nguồn gốc danh mục tài liệu tham khảo của khóa luận. Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Trần Minh Quân i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, tôi xin cảm ơn Ban Giám Đốc Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam, các thầy cô trong khoa Công Nghệ Sinh Học, các thầy cô trông bộ môn Công Nghệ Sinh Học Thực Vật đã giúp đỡ và tạo điều kiện tốt nhất trong quá trình làm khóa luận tốt nghiệp. Tôi xin gửi lời cảm ơn trân thành đến PGS. Nguyễn Thanh Hải và TS.

Nguyễn Thị Thanh Hà đã tận tình hƣớng dẫn và những lời khuyên có giá trị trong suốt thời gian chuẩn bị và thực hiện đề tài. Tôi rất may mắn khi đƣợc làm việc dƣới sự hƣớng dẫn của TS. Nguyễn Thị Thanh Hà, em cảm ơn cô đã hƣớng dẫn nhiệt tình, tâm huyết về kiến thức và những nhận xét phản biện trong quá trình thực hiện khóa luận. Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn về sự giúp đỡ và đồng hành đến từ các chị, các bạn trên phòng thí nghiệm Bộ môn Nội- Chẩn- Dƣợc- Độc chất, Khoa Thú Y trong suốt thời gian làm khóa luận.

Khóa luận khép lại cũng là kết thúc 4 năm học tại Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam, tôi xin gửi lời cảm ơn trân thành và biết ơn tới gia đình và bạn bè đã bên cạnh, ủng hộ và động viên trong suốt thời gian qua. Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Trần Minh Quân ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN. ii MỤC LỤC. iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT.

v DANH MỤC BẢNG. vi DANH MỤC HÌNH. vi DANH MỤC BIỂU ĐỒ, ĐỒ THỊ. ix TÓM TẮT KHÓA LUẬN.

Tính cấp thiết của đề tài. Mục đích – yêu cầu. 2 PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU. Cơ sở của sử dụng thảo dƣợc làm thuốc.

Thực trạng vi khuẩn kháng kháng sinh. Tổng quan về cây Tràm gió. Tổng quan về polyphenol. Hoạt tính chống oxy hóa.

Các loại vi khuẩn có trong thí nghiệm .1 Nhóm vi khuẩn Gram dƣơng .2 Nhóm vi khuẩn Gram âm. 9 PHẦN III: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU. Thời gian và địa điểm nghiên cứu. Vật liệu nghiên cứu.

Các chủng vi khuẩn. Nội dung nghiên cứu. Phƣơng pháp nghiên cứu. Phƣơng pháp chiết xuất dƣợc liệu.

Phƣơng pháp xác định hoạt tính kháng khuẩn của dich chiết dƣợc liệu trên vi khuẩn. Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng polyphenol. Phƣơng pháp xác định hoạt tính chống oxy hóa. 21 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN.

Kết quả khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của các loại dƣợc liệu. Kết quả xác định đƣờng kính vòng vô khuẩn của các dịch chiết dƣợc liệu tràm gió theo phƣơng pháp khuếch tán trên đĩa thạch. Kết quả xác định đƣờng kính vòng vô khuẩn của tinh dầu tràm gió theo phƣơng pháp xông hơi và khuếch tán trên đĩa thạch. Kết quả xác định hàm lƣợng polyphenol từ các dịch chiết của dƣợc liệu Tràm gió.

Kết quả xây dựng đồ thị đƣờng chuẩn giữa hàm lƣợng chlorogenic acid và sự gia tăng giá trị mật độ quang đo đƣợc khi phản ứng với thuốc thử Folin Ciocalteu. Kết quả hàm lƣợng polyphenol tổng số quy đổi theo acid chlorogenic (mg) của dịch chiết (hàm lƣơng 100mg/ml). Kết quả xác định hoạt tính chống oxy hóa của các dịch chiết dƣợc liệu Tràm gió. Kết quả xác định khả năng chống oxy hóa của chất chuẩn VTME ( Alpha tocopherol).

Kết quả xác định khả năng chống oxy hóa của các dịch chiết dƣợc liệu. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ. 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO. 43 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Viết đầy đủ ATCC American Type Culture Collection DMSO Dimethyl Sunfoxide DPPH 1,1 – diphenyl – 2 – picrylhydrazyl VTME Vitamin E DW Distilled water Ethyl Ethyl acetate E.

coli Eschrichia coli B. subtilis Bacillus subtilis G. philus Geobacillus stearothemophilus P. seudo Pseudomonas aeruginosa S.

aureus Staphylococcus aureus Sal Salmonella enterica v DANH MỤC BẢNG Bảng 4. Kết quả đƣờng kính vòng vô khuẩn(mm) của dịch chiết tràm gió dung môi ethanol, methanol, ethyl acetate trên vi khuẩn B. Kết quả đƣờng kính vòng vô khuẩn(mm) của dịch chiết tràm gió dung môi aceton, hexan, nƣớc nóng (DW) trên vi khuẩn E. Kết quả đƣờng kính vòng vô khuẩn (mm) của dịch chiết tràm gió dung môi aceton, hexan, nƣớc nóng (DW) trên vi khuẩn P.

aureus ATCC 25923, Salmonella ATCC 13311. Đƣờng kính vòng vô khuẩn (mm) của tinh dầu tràm gió với nồng độ nguyên chất, 1/5, 1/10 trên 9 loại vi khuẩn. Sự thay đổi giá OD values theo nồng độ chất chuẩn acid chlorogenic (mg/ml). Hàm lƣợng polyphenol của dƣợc liệu quy đổi theo chlorogenic acid (mg/ 100mg dƣợc liệu) khi chiết xuất bằng các dung môi khác nhau.

Hoạt tính chống oxy hóa của chất chuẩn VTME xác định theo phƣơng thức sử dụng DPPH tại các nồng độ khác nhau AA %. Hàm lƣợng VTME trong dịch chiết Tràm gió khi chiết xuất bằng các dung môi khác nhau. 38 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2. Dƣợc liệu lá tràm gió (Melaleuca cajuputi powell) và sau khi nghiền thành bột trong phòng thí nghiệm.

Tổng quan các ảnh hƣởng tích cực của polyphenol. Các bƣớc thực hiện phƣơng pháp chiết xuất dƣợc liệu. Hệ thống chiết xuất tinh dầu. Máy lắc hỗn hợp nƣớc chƣng và muối tinh.

Bình quả lê để tách tinh dầu. Tinh dầu tràm gió thu đƣợc sau ly tâm. Sơ đồ phƣơng pháp trộn vi khuẩn vào thạch và đục giếng nhỏ dịch chiết dƣợc liệu lên các đĩa thạch. Dụng cụ đục lỗ có đƣờng kính 10 mm đƣợc sử dụng để tạo các giếng chứa các dịch chiết trên bề mặt thạch.

Ảnh đối chứng nhỏ dung dịch DMSO và nhỏ dƣợc liệu để xác định hoạt tính ức chế sinh trƣởng của vi khuẩn. Hình ảnh đĩa khuẩn của vi khuẩn ATCC 13311 với nồng độ nguyên chất sau 24 giờ nuôi cấy ở nhiệt độ 370C. Sử dụng nắp đồng đƣờng kính 10mm để đậy nắp giếng chƣa tinh dầu. Cơ chế của phản ứng chuyển màu trong xác định hàm lƣợng polyphenol tổng số, sử dụng thuốc thử Folin – Ciocalteu’s Phenol Reagent.

Cơ chế của phản ứng chuyển màu trong xác định hoạt tính chống oxy hóa sử dụng chất thử nghiệm DPPH. Máy đo quang phổ so màu 722 Utra Violet – Visibility Spectrum, công ty Jinghua, Trung Quốc ( ảnh tại phòng thí nghiệm). Kích thƣớc đƣờng kính vòng vô khuẩn của dƣợc liệu tràm gió trên chủng vi khuẩn S. aureus ATCC 25923 của dịch chiết ethyl vii acetate ở các nồng độ lần lƣợt là 2000mg/ml, 1000mg/ml, 500mg/ml, 250mg/ml.

Đƣờng kính vòng vô khuẩn của dƣợc liệu tràm gió trên chủng vi khuẩn E. coli ATCC 85922 của dịch chiết ethyl acetate ở các nồng độ lần lƣợt là 2000mg/ml, 1000mg/ml, 500mg/ml, 250mg/ml. Đƣờng kính vòng vô khuẩn đƣợc đo bằng thƣớc điện tử của dƣợc liệu tràm gió trên chủng vi khuẩn B. Subtilis ATCC 6633 của dịch chiết methanol tại nồng độ 250mg/ml.

Kết quả xác định đƣờng kính vòng vô khuẩn của tinh dầu tràm gió trên vi khuẩn E. coli ATCC 85922 và , B.subtilis ATCC 6633 ở nồng độ nguyên chất. Đƣờng kính vòng vô khuẩn của tinh dầu tràm gió trên vi khuẩn B. Subtilis ATCC 6633 ở các nồng độ nguyên chất, 1/5, 1/10.

Đƣờng kính vòng vô khuẩn của tinh dầu tràm gió trên vi khuẩn Salmonella ATCC 13311 ở các nồng độ nguyên chất, 1/5, 1/10. Sự đổi màu sắc đƣợc tạo ra bởi hệ nồng độ chất chuẩn acid chlorogenic ( các ống từ trái sang: Acid chlorogenic các nồng độ 0,1; 0,3; 0,5; 0,7; 0,9; 1 và 2 mg/ml. Polyphenol trong các dịch chiết tràm gió tại nồng độ 20mg/ml làm chuyển màu thuốc thử Folin Ciocalteu. Polyphenol trong tinh dầu tại nồng độ 1/50 chuyển màu thuốc thử Folin Ciocalteu.

Các cốc màu thể hiện sự thay đổi màu sắc của dung dịch DPPH tạo ra bởi hoạt tính chống oxy hóa của VTME ( chất chuẩn) tại nồng độ khác nhau. Sự thay đổi màu thuốc thử DPPH tạo ra bởi dịch chiết tràm gió tại nồng độ đo 20mg/ml. Sự thay đổi màu sắc của dung dịch DPPH tạo ra bởi hoạt tính chống oxy hóa của VTME tại nồng độ 1/10 của tinh dầu tràm gió. 40 viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ, ĐỒ THỊ Biểu đồ 4.

Hàm lƣợng polyphenol tổng số ( quy đổi theo số mg acid chlorogenic tƣơng đƣơng/ 100mg dƣợc liệu) của dƣợc liệu tràm gió khi đƣợc chiết với các dung môi khác nhau. Hoạt tính chống oxy hóa ( quy đổi theo số mg VTME tƣơng đƣơng / 100mg dƣợc liệu) của dƣợc liệu tràm gió khi chiết xuất với các dung môi khác nhau. Mối tƣơng quan giữa hàm lƣợng chất chuẩn acid chlorogenic (mg/ml) với mức độ tăng giá trị mật độ quang (OD value). Mối tƣơng quan giữa hàm lƣợng chất chuẩn VTME và hoạt tính chống oxy hóa ( scavenging activity).

38 ix TÓM TẮT KHÓA LUẬN Mục đích nghiên cứu Khảo sát tác dụng kháng khuẩn, hàm lƣơng pholyphenol và hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết cây tràm gió trên 9 loại vi khuẩn: Escheria coli ATCC 25922; Escheria coli ATCC 35218; Escheria coli ATCC 85922; Staphylococcus aureus ATCC 25923; Staphylococcus aureus ATCC 25023; Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027; Bacillus subtilis ATCC 6633; Geobacillus stearothemophilus ATCC 7953; Salmonela ATCC 13311. Phƣơng pháp nghiên cứu Dƣợc liệu đƣợc chiết xuất thành cao bằng 6 loại dung môi: ethanol, methanol, nƣớc cất ( DW), acetone, hexan, ethyl acetate. Tất cả dƣợc liệu đƣợc mua từ cơ sở sản xuất Tinh dầu Thiên Nhiên Phú Xuân- thôn 2, Cẩm Mỹ, huyện Cẩm Xuyên, tỉnh Hà Tĩnh. Toàn bộ dung môi chiết xuất sau đó đƣợc loại bỏ ra khỏi cao khô dƣợc liệu bằng phƣơng pháp cô quay tại áp suất thấp.