; BỘ GIAODUCVADAOTAO TRUONG DAI HỌC NONG LAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUAN VA CHONG OXY HOA TREN CÂY SÂM NO (Ruellia tuberosa L.) Nganh hoc : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện : NGUYEN THỊ ANH THU Mã số sinh viên : 19126176 Niên khóa: : 2019 — 2023 TP. Thủ Đức, 08/2023 ; BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO. ; TRUONG ĐẠI HỌC NONG LAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUAN VÀ CHONG OXY HÓA TREN CÂY SÂM NO (Ruellia tuberosa L.) Huong dẫn khóa luận Sinh viên thực hiện PGS. TRAN THỊ LE MINH NGUYEN THI ANH THU TP.
Thủ Đức, 08/2023 LỜI CẢM ƠN Trong quá trình thực hiện đề tài: ” Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn và chống oxy hóa trên cây sâm nỗ (Ruellia tuberosa L.)” em đã nhận được rất nhiều sự quan tâm, giúp đỡ từ quý thầy cô, anh chị, gia đình và bạn bè. Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến VỚI: Ban giám hiệu trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm khoa Khoa học Sinh học, cùng tất cả quý thầy cô đã hết lòng giảng dạy, tạo nhiều cơ hội học tập và rèn luyện, truyền đạt những kinh nghiệm quý báu, giúp em tiếp thu tốt nhất kiến thức và kỹ năng trong nghiên cứu dé em có thê thực hiện khóa luận tốt nghiệp thuận lợi. Giảng viên PGS. Trần Thị Lệ Minh, ThS.
Nguyễn Thị Quyên đã trực tiếp hướng dẫn đề tài rất tận tình, luôn theo dõi và đưa ra những lời khuyên bồ ích giúp em giải quyết được các van đề gặp phải trong quá trình nghiên cứu và hoàn thành khóa luận một cách tốt nhất. Giảng viên TS. Cao Thị Thanh Loan đã tận tình giúp đỡ em trong quá trình thực hiện khóa luận. Anh Nguyễn Quốc Thắng đã hỗ trợ em trong quá trình nghiên cứu.
Những người anh chi, bạn, em tại phòng nghiên cứu Dược liệu và Cây dược liệu (Bio309) đã luôn động viên, hỗ trợ em trong suốt quá trình. Cuối cùng, là một người con của gia đình, con muốn gửi lời tri ân sâu sắc nhất đến gia đình, cảm ơn cha mẹ, anh, chị, em luôn tạo cho con điều kiện tốt nhất về vật chất và cả tinh than, đã nuôi dạy, yêu thương, luôn động viên, cho con những lời khuyên bé ích dé em có thể hoàn thành khóa luận tốt nghiệp thành công. XÁC NHẬN VÀ CAM ĐOAN Tôi tên: Nguyễn Thị Anh Thư, MSSV: 19126176, lớp: DH19SHB, thuộc ngành Công nghệ Sinh học, khoa Khoa học Sinh học, trường Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, xin cam đoan: Đây là Khóa luận tốt nghiệp do bản thân tôi trực tiếp thực hiện, các sô liệu và thông tin trong nghiên cứu là hoàn toàn trung thực và khách quan.
Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước Hội đồng về những cam kết này. Hồ Chí Minh, ngày 07 thang 09 năm 2023 Người viet cam kêt Nguyễn Thị Anh Thư ii TÓM TẮT Cây sâm nd (Ruellia tuberosa L.) thuộc chi Ruellia L., họ Acanthaceae được dùng điều trị cảm sốt, ho gà, chữa chứng viêm lợi gây dau nhức rang, chữa chứng run chân tay, mệt mỏi và chóng mặt. Người dân thường dùng rễ củ nau nước uống làm thuốc bố mát và cũng dùng chữa bệnh về thận và sỏi bàng. Bên cạnh đó cây còn có lợi ích như chống ung thư, chống nhiễm trùng, chống loét da dày, chống oxy hóa, chống viêm.
Đã có nghiên cứu về hoạt tính sinh học và ứng dụng của loại cây này trên thế giới, kết quả nghiên cứu được thực hiện từ dé tài này nhằm bồ sung thêm về công dụng, dược tính của cây sâm nỗ Việt Nam, bằng phương pháp chiết ngâm dam trong ethanol 70%. Kết quả xác định dịch chiết của cây sâm nỗ (Ruellia tuberosa L.) có sự hiện diện của các nhóm flavonoid, saponin, polyphenol, tanin, terpenoid, đường khử va không có sự hiện diện của alkaloid. Hàm lượng flavonoid có trong mẫu rễ, thân, lá lần lượt là 17,14 mgQE/g; 23,93 mgQE/g; 36,13 mgQE/g. Hàm lượng polyphenol có trong mẫu rễ, thân, lá lần lượt là: 89,05 mgGAE/g; 91,25 mgGAE/g; 39,80 mgGAE/g.
Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cây sâm nỗ (Ruellia tuberosa L.) cho kết quả cao chiết rễ, thân, lá ở nồng độ 100 mg/mL; 200 mg/mL và 400 mg/mL không thé hiện khả năng kháng khuẩn đối với Escherichia coli. Ở nồng độ 100 mg/mL; 200 mg/mL không thé hiện kháng Staphylococcus aureus, ở nồng độ 400 mg/mL có khả năng kháng khuẩn đối với Staphylococcus aureus ở cả ba bộ phận rễ, thân và lá với đường kính vòng vô khuẩn lần lượt là: 2,33 mm; 5,33 mm; 2,33 mm. Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa mẫu dịch chiết rễ, thân, lá của cây sâm nỗ (Ruellia tuberosa L.) cho kết quả các mẫu lần lượt là thân > rễ > lá tương ứng với các giá trị ICso là 115,91 ug/mL < 368,15 g/mL < 491,20 pg/mL. Từ khóa: cây sâm nổ, flavonoid, polyphenol, kháng khuẩn, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, chong oxy hóa, DPPH.
1H ABSTRACT Ruellia tuberosa L. of the genus Ruellia L., family Acanthaceae is used to treat fever, whooping cough, to treat gingivitis causing toothache, to treat tremors, fatigue and dizziness. People often use root boiled water as a cooling supplement and also for treating kidney and bladder stones. In addition, this plant also has benefits such as anticancer, anti infection, anti gastric ulcer, antioxidant, and anti-inflammatory properties,.
There have been studied on the biological activity and application of this plant in the world, and the research results conducted on this topic aim to supplement the use and medicinal properties of Vietnamese Ruellia tuberosa L. by soaked in 70% ethanol for extraction. Investigation of the extracts of roots, stems and leaves showing the presence of flavonoids, saponins, phenols,tannins, terpenoids and there are no alkaloids present. The content of Flavonoid from roots, stems, and leaves respectively: 17.
The content of polyphenol from roots, stems and leaves respectively: 89. Investigation of antibacterial activity of Ruellia tuberosa L. extract showed root, stem and leaf extracts at the concentration of 100 mg/mL; 200 mg/mL and 400 mg/mL did not show antibacterial ability against Escherichia coli. At a concentration of 100 mg/mL; 200 mg/mL did not show antibacterial ability against Staphylococcus aureus, and at a concentration of 400 mg/mL antibacterial ability against Staphylococcus aureus in all three divisions of roots, stems and leaves with the diameter of the resistance ring respectively: 2.
Investigation of antioxidant activity of Ruellia tuberosa L. roots, stems and leaves extracts showed that the samples respectively were stems > roots > leaves , with ICso values of 115.15 ug/mL, respectively. Keywords: Ruellia tuberosa L., flavonoids, phenols, antibacterial, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, antioxidants, DPPH. iv MỤC LỤC Trang LOI CẢM ƠN.
-- 52252 222222122122112112112112112112112112112112112112112111112112121212121 21 xe i Se ee ees CS. an ii TOM 0/005.- 5+ 2< 21 21122122112112212112112112112111211211211111111211111211121212 1e iv MỤC LỤC.---2-©52222222222222122112212211211221121121121121122112111112111121121121211 2121 xe V DANH SÁCH CÁC CHỮ VIET TẮTT.-----22- 22222+22S+2E++2EE+2E+++Exz+rxezrrrrrree viii TON eee eeneeeeeeeeeeeeeee ix DANH SÁCH CÁC HÌNH.NIip Tiồn cuildU ĐĨ enear 1 1:3: Nội dung thre iG esse ccassioss cseaesvssecenzun spunea 3886 8)A 4E888Eg463g3301E2u00548gg3ã2328gii20558. TONG QUAN TÀI LIỆU. Sơ lược về cây sâm nỗ (Ruellia tuberosa L.-----2-©22©22252255z22222+z22z2sz>xscse2 3 DML.
PHAN LOA HC AU see sess ses cx ove scass axe sewer sate ana ateeme Semana te caadiesbe cde Ea SA LS51/H63i0g36. Wie 00 PEI Mi pennceerecsner ronnie nwener amare neamnmeunnnenaneunsinnesuh neem nieteanades 4 3. E điểm thực vật ccna cates a 4 PP lu) 00. Hoạt tính sinh học và giá trị dược LGU.
Chống nhiễm trùng và chống viêm.--- 2 2222E22EE+2EE+2EE22EE22EE222E222x2ze. Moat đồng chúng luết Wa ỮÊMoceesesasseeseireoDlESoSL0A1502010005400008002320. Hoariltua chúng nữ TỦ ss ctasesnssninasnnasnancevasananenina mcanastansaressnsivesbaaaricennanonesnannatace 5 2:2:4. Hoạt động bao vệ đa đây và, Slat Cats.
Hoạt tính chống sinh tỉnh.- 2-2 22 ©2222E£+EEE2EEE2EEES2EE2EE222E222E22Errrrrred 5 2. Hoạt động chống đái tháo đường, ha lipid máu va bảo vệ gan.3, MIột sỗ hợp chất tự nHÌềN vac cxerssers eosenerercovenesextonorsoneovsroveiviersexaeneesecansbuutoeaytesse taped 6 2. Hợp chat flavonoid. Phuong phap chiét xuat 8n.
Vi khuẩn Escherichia COli-c. Vi khuân Staphylococcus @ŒIF€HS.--5-22-552©52©522S222E22EEt2E2EE2EE2EESEESEErEvrrresrver 10 CHƯƠNG 3: VAT LIEU VÀ PHƯƠNG PHÁP.- 2-2 Ss+E22E£EE2E2EeEEzErEerxres 12 3. Thời gian và địa điểm nghiên cứu. Nội dung 1: xác định các nhóm thành phan hợp chat trong cây sâm né.
Wat ICU TP HIỂH!GỮsesusessssoessesetsoaigsaoidoai04351903/0560193A458/2GB0003GE88.ISSHBISQHĐ0ESSE45BI33801/883003010848 12 3. Cách tiến barn o.1 TÚ canoe HH Wisco eee a ee ees ees 18 3. Chiết xuất hợp chat từ mẫu cây sâm nỗ.3 Hiệu suất chiết sâm n. Khảo sát một số hợp chất trong sâm nô .5 Đánh giá hàm lượng flavonoid bằng phương pháp quang phổ.
Xác định hàm lượng polyphenol bang phương pháp quang phô. Nội dung 2: khảo sát hoạt tinh kháng khuẩn.- 2-22 22222+2222+22zz>x+zzxze2 19 ef, | seengennntdeeuiutggddrintiicterdticlirtoigtniiritdidggniEHbidrngiringGiigttkdttg481/00:60 n201G 8006 19 3. Cách tiến hành. Nội dung 3: khảo sát hoạt tính chống oxy hóa.------22- 2©2++22++2z++2z+zzzxez 20 3,4,1, Chư nh BỊ tri unguannnaigonngogioioioticgDi0G0513400305i000B40/00S01VBHIHGIEEIEEDBSS.
Phương pháp xử lý số TQ. ccc cccecccecssecosecssesssecsseesseessesssesssecssesseessessueesseceseesees 21 CHƯƠNG 4: KET QUA VÀ THẢO LUẬN. Nội dung 1: xác định các nhóm thành phan hợp chat trong cây sâm nô. Độ âm bột, độ âm cao chiết và hiệu suất cao Chiét.
Khảo sát một số nhóm hợp chat trong cây sâm nô (Ruellia tuberosa L.531, Di TOTS, TAV ONO s16 S2 nà tendons denisetnndeestennndente'sneieatsinndbinnestinnicienuinnh aden 25 4. Nội dung 2: Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn.-- 22252552 2z2Szzcxzcce2 29 Kết quả thử nghiệm hoạt tính kháng khuan S.coli được thé hiện qua đĩa RACH TINH HuÁ LLeesscsseessesisdiesisbiriosngadkssstekcueisipgrnidisicdirgogicgis.hươnggipo434c:4pugisgugi:ggggrggigogirgiisgisbsep 29 4. Nội dung 3: Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa bằng phương pháp trung hòa gốc tự đo 2,2- diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPIPH). KẾT LIÊN XÃ DE NGIĨ]-ceoeeeeensesetoaekeboiosooocioiobcskd0.
33 TÀI LIEU THAM KHẢO.-- 2-5 52 +S+E£EE+E+EEE+EEEE2EEEE2EEEEE1212111211121 7112122. 37 Vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIET TAT ABS : Độ hap thụ quang ctv : Cộng tác viên DPPH : 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl E. coli : Escherichia coli GAE : Gallic Acid Equivalent HQ : Hàn Quốc IC : Inhibitory Concentraion L :La QE : Quercetin Equivalent R :Rễ S. aureus : Staphylococcus aureus ue ; Thân TCVN : Tiêu Chuan Việt Nam TFC : Total Flavonoids Content TPC : Total Phenolic Content viii DANH SÁCH CAC BANG Trang.
Kết quả đo độ ầm bột, độ 4m và hiệu suất cao chiết của mẫu sâm né 22 Kết quả định tính khảo sát một số nhóm hợp chất từ cây sâm nỗ.23 Tương quan giữa nồng độ Quercetin và độ hap thụ.--- 25 Hàm lượng flavonoid có trong mẫu cây sâm nỗ:.------- 26 Tương quan giữa nồng độ gallic acid và độ hấp thụ. Hàm lượng polyphenol có trong mẫu. Kết quả đường kính vòng vô khuân của mẫu đối với S.coli rl I Tr Ss Rec on ene rac 29 Két quả xác định ICso của các mau dich cao chiết.-- --scscccez 31 ix DANH SÁCH CÁC HÌNH Trang Hình 2. Sâm nỗ Ruellia tuberosa Liceeccccccccccssessessessessessessessessessessessessessessessessesees 3 Hình 2.
Cấu trúc khung cơ bản của flavonoid và các lớp của chúng. Cau trúc phân tử cơ bản của một số hợp chất phenolic. Mẫu bột sâm nỗ (Ruellia tuberosa L. Quy trình chiết xuất hợp chat từ cây sâm nỗ.
Mẫu dịch chiẾt.2; Đính tính polyphenol. ‹-<:s:<-:<:s<<czzz2eczizc<cz814566001326508128200915. Dinh tính: šấDGOlll;cccecgecseeesssnseoainniosavaeitgteidgcgaiGEAEGGL0NE30000g06/000013 24 Hình 4. Dinh tinh flavonoid.--- - + 222-2232 222 %3 22223222 vs vcrrreeerree 24 Hình 4.
Định tính terpenoid. Dinh tính alkaloid.7; Đình tính fan: ;:‹zccecz se aex2216 266130554566 5503100354908 800540468 g8. Định tính đường KAWsececcessnssacaresveesennrvasssesneavernenavaverse eewssusussevssvnsines 24 Hình 4.