Khóa Luận Tốt Nghiệp: Phân Tích Đa Dạng Di Truyền Giống Hoàng Tinh Hoa Trắng Disporopsis Longifolia Craib

• Tác giả: Nguyễn Anh Bảo Nhi
• Người hướng dẫn: TS. Đinh Trường Sơn
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Phân tích đa dạng di truyền của một số mẫu giống Hoàng tinh hoa trắng (Disporopsis longifolia Craib) bằng chỉ thị ISSR
• Loại tài liệu: Khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2021
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• I. PHẦN I: MỞ ĐẦU
• I.1. Mục tiêu nghiên cứu
• II. PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• II.1. Giới thiệu chung về cây Hoàng tinh hoa trắng (Disporopsis longifolia Craib)
• II.2. Phân loại học
• II.3. Đặc điểm thực vật học
• II.4. Phân bố và đặc điểm sinh thái
• II.5. Thành phần hóa học và dược tính
• II.6. Giá trị của Hoàng tinh hoa trắng ở Việt Nam
• II.7. Tình hình nghiên cứu về cây Hoàng tinh hoa trắng ở Việt Nam
• II.8. Một số nghiên cứu về Hoàng tinh hoa trắng trên thế giới
• II.9. Một số chỉ thị phân tử sử dụng nghiêm cứu phân tích đa dạng di truyền
• II.9.1. Khái niệm chỉ thị phân tử
• II.9.2. Một số kỹ thuật chỉ thị DNA
• II.9.2.1. Chỉ thị RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)
• II.9.2.2. Chỉ thị AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism)
• III. PHẦN III: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
• III.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
• III.2. Địa điểm nghiên cứu
• III.3. Đối tượng nghiên cứu
• III.4. Nội dung nghiên cứu
• III.5. Trang thiết bị, dụng cụ, hóa chất phòng thí nghiệm
• III.6. Phương pháp nghiên cứu
• III.6.1. Phương pháp tách chiết DNA
• III.6.2. Phương pháp PCR
• III.6.3. Điện di trên gel Agarose
• III.6.4. Phương pháp đánh giá, xử lý số liệu
• IV. PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• IV.1. Kết quả tách chiết ADN tổng số
• IV.2. Phân tích đa dạng di truyền bằng chỉ thị phân tử ISSR
• V. PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Phân Tích Đa Dạng Di Truyền

Phân Tích Đa Dạng Di Truyền là một phương pháp quan trọng trong nghiên cứu sinh học, đặc biệt là trong việc bảo tồn và phát triển nguồn gen. Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định mức độ đa dạng di truyền của 21 mẫu giống Hoàng Tinh Hoa Trắng (Disporopsis longifolia Craib) bằng chỉ thị ISSR. Kết quả cho thấy sự đa dạng di truyền cao giữa các mẫu giống, với hệ số tương đồng di truyền dao động từ 0.452 đến 0.910. Điều này chứng tỏ sự phong phú về nguồn gen của loài cây này, tạo tiền đề cho các nghiên cứu bảo tồn và nhân giống trong tương lai.

1.1. Phương Pháp ISSR

Phương Pháp ISSR (Inter-Simple Sequence Repeat) được sử dụng để phân tích đa dạng di truyền do tính đơn giản, chi phí thấp và hiệu quả cao. Kỹ thuật này dựa trên việc khuếch đại các đoạn DNA ngắn lặp lại giữa các trình tự đơn giản. Trong nghiên cứu này, 17 chỉ thị ISSR đã được sử dụng, phát hiện tổng cộng 111 locus với 1150 sản phẩm PCR. Chỉ số đa hình PIC trung bình là 0.34, cho thấy tính đa dạng di truyền cao của các mẫu giống Hoàng Tinh Hoa Trắng.

1.2. Kết Quả Phân Tích

Kết quả phân tích đa dạng di truyền bằng chỉ thị ISSR cho thấy sự khác biệt rõ rệt giữa các mẫu giống. Hệ số tương đồng di truyền dao động từ 0.452 đến 0.910, chứng tỏ sự đa dạng về nguồn gen. Điều này có ý nghĩa quan trọng trong việc bảo tồn và phát triển loài cây này, đặc biệt là trong bối cảnh nguồn gen tự nhiên đang bị suy giảm nghiêm trọng.

II. Giống Hoàng Tinh Hoa Trắng

Giống Hoàng Tinh Hoa Trắng (Disporopsis longifolia Craib) là một loài dược liệu quý, được sử dụng rộng rãi trong y học cổ truyền. Loài cây này có tác dụng bổ âm, bổ phế, bổ huyết, và được sử dụng để điều trị nhiều bệnh khác nhau. Tuy nhiên, do khai thác quá mức và môi trường sống bị thu hẹp, loài cây này đang đứng trước nguy cơ tuyệt chủng. Nghiên cứu này nhằm mục đích bảo tồn và phát triển nguồn gen của loài cây này thông qua việc phân tích đa dạng di truyền.

2.1. Đặc Điểm Giống

Đặc Điểm Giống của Hoàng Tinh Hoa Trắng bao gồm thân thảo, cao từ 0.6 đến 1.2 mét, lá mọc so le, hoa màu trắng hình chuông, và quả mọng màu trắng xốp. Cây sinh trưởng mạnh vào mùa xuân hè và lụi vào mùa đông. Thân rễ của cây có nhiều đốt, mọc ngang, và có khả năng tái sinh cao. Đây là những đặc điểm quan trọng giúp nhận diện và bảo tồn loài cây này.

2.2. Phân Bố Và Sinh Thái

Phân Bố Và Sinh Thái của Hoàng Tinh Hoa Trắng chủ yếu ở các vùng núi cao, ẩm mát tại các tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam như Hòa Bình, Ninh Bình, và Lào Cai. Cây thường mọc dưới tán rừng, trên đất ẩm nhiều mùn hoặc các hốc đá. Tuy nhiên, do khai thác quá mức và nạn phá rừng, vùng phân bố của loài cây này đang ngày càng thu hẹp, đặt ra yêu cầu cấp bách về bảo tồn và phát triển.

III. Chỉ Thị ISSR Và Ứng Dụng

Chỉ Thị ISSR là một công cụ hiệu quả trong nghiên cứu di truyền, đặc biệt là trong việc phân tích đa dạng di truyền. Kỹ thuật này dựa trên việc khuếch đại các đoạn DNA ngắn lặp lại giữa các trình tự đơn giản, cho phép xác định sự đa dạng di truyền một cách nhanh chóng và chính xác. Trong nghiên cứu này, chỉ thị ISSR đã được sử dụng để phân tích 21 mẫu giống Hoàng Tinh Hoa Trắng, cho thấy sự đa dạng di truyền cao và mối quan hệ di truyền giữa các mẫu giống.

3.1. Nguyên Lý ISSR

Nguyên Lý ISSR dựa trên việc khuếch đại các đoạn DNA ngắn lặp lại giữa các trình tự đơn giản. Kỹ thuật này không yêu cầu thông tin về trình tự gen, làm cho nó trở thành một công cụ linh hoạt và hiệu quả trong nghiên cứu di truyền. Trong nghiên cứu này, 17 chỉ thị ISSR đã được sử dụng, phát hiện tổng cộng 111 locus với 1150 sản phẩm PCR, cho thấy tính đa dạng di truyền cao của các mẫu giống.

3.2. Ứng Dụng Thực Tiễn

Ứng Dụng Thực Tiễn của chỉ thị ISSR trong nghiên cứu này là xác định mối quan hệ di truyền giữa các mẫu giống Hoàng Tinh Hoa Trắng. Kết quả phân tích cho thấy sự đa dạng di truyền cao, tạo tiền đề cho các nghiên cứu bảo tồn và nhân giống trong tương lai. Điều này có ý nghĩa quan trọng trong việc duy trì và phát triển nguồn gen của loài cây quý hiếm này.