Nghiên cứu tạo dòng hoa hồng lửa rosa hybrida l qua xử lý đột biến tia gamma in vitro

Trang phụ bìa

Trang xác nhận của người hướng dẫn khoa học

Lời cảm tạ

Lời cam đoan

Danh sách bảng

Danh sách hình

Danh mục từ viết tắt

1. CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU

1.1. Mục tiêu nghiên cứu

1.2. Mục tiêu chung

1.3. Mục tiêu cụ thể

1.4. Đối tượng nghiên cứu

1.5. Phạm vi nghiên cứu

1.6. Nội dung nghiên cứu

1.7. Ý nghĩa khoa học của luận án

1.8. Ý nghĩa thực tiễn của luận án

1.9. Điểm mới của luận án

2. CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Giới thiệu chung về cây hoa hồng

2.1.1. Nguồn gốc và phân loại

2.1.2. Đặc điểm thực vật học

2.1.3. Điều kiện sinh thái của cây hoa hồng

2.1.3.1. Tính chất đất đai

2.1.4. Sơ lược về tình hình sản xuất và tiêu thụ hoa hồng trên thế giới và ở Việt Nam

2.1.4.1. Trên thế giới

2.1.5. Một số giống hoa hồng đang trồng phổ biến ở Việt Nam

2.1.6. Giới thiệu về giống hoa hồng Lửa

2.2. Phương pháp nhân giống hoa hồng bằng nuôi cấy mô

2.2.1. Chọn nguồn vật liệu

2.2.2. Khử trùng bề mặt và tiến hành nuôi cấy

2.2.3. Thích nghi cây và chuyển ra đất

2.2.4. Ứng dụng một số kỹ thuật mới trong nuôi cấy in vitro

2.2.4.1. Ứng dụng đèn LED trong nuôi cấy in vitro

2.2.4.2. Ứng dụng nuôi cấy thoáng khí

2.3. Đột biến và ứng dụng trong chọn tạo giống cây trồng

2.3.1. Khái niệm đột biến

2.3.2. Phân loại đột biến

2.3.3. Các tác nhân gây đột biến

2.3.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả gây đột biến

2.4. Phương pháp xử lý đột biến tia gamma in vitro

2.4.1. Bức xạ gamma

2.4.2. Một số đặc trưng của chất phóng xạ

2.4.3. Phương pháp chiếu xạ

2.4.4. Ưu và nhược điểm của phương pháp tạo đột biến in vitro

2.4.5. Ứng dụng tia gamma trong tạo giống hoa ở Việt Nam

2.5. Cơ chế trong nghiên cứu thay đổi về màu sắc và hình dạng hoa

2.5.1. Cơ chế trong sự biến đổi màu sắc hoa

2.5.2. Cơ chế về sự thay đổi về hình dạng hoa

2.6. Ứng dụng chỉ thị phân tử trong chọn giống cây trồng

2.6.1. Phản ứng chuỗi trùng hợp

2.6.2. Kỹ thuật chuỗi lặp lại đơn giản giữa (Inter Simple Sequence Repeat –ISSR)

2.7. Mục tiêu và tiêu chí trong chọn tạo giống hoa hồng

2.8. Một số nhận xét rút ra từ tổng quan tài liệu

3. CHƯƠNG 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP

3.1. Phương tiện nghiên cứu

3.1.1. Thời gian và địa điểm

3.1.2. Trang thiết bị và hóa chất

3.2. Thiết bị và dụng cụ

3.3. Nội dung nghiên cứu

3.4. Phương pháp nghiên cứu

3.4.1. Nội dung 1: Nghiên cứu nhân giống hoa hồng Lửa bằng phương pháp nuôi cấy mô

3.4.1.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA khác nhau đến sự nhân nhanh

3.4.1.2. Ảnh hưởng của nồng độ IBA và NAA bổ sung thích hợp đến sự nhân nhanh

3.4.1.3. Ảnh hưởng của than hoạt tính trên môi trường MS/3 đến sự tạo cây hoàn chỉnh

3.4.1.4. Ảnh hưởng của 3 loại đèn chiếu sáng đến sự tạo cây hoàn chỉnh

3.4.1.5. Ảnh hưởng của 2 loại túi cấy đến sự tạo cây hoàn chỉnh

3.4.2. Nội dung 2: Ảnh hưởng của liều chiếu xạ tia gamma đến mẫu cấy đoạn thân hoa hồng Lửa in vitro

3.4.2.1. Xác định liều gây chết LD50

3.4.2.2. Nhân nhanh và vươn chồi

3.4.2.3. Ra ngôi và thuần dưỡng

3.4.2.4. Đánh giá quần thể và chọn lọc cá thể hoa hồng Lửa đột biến

3.4.2.5. Đánh giá tính ổn định về hình thái hoa của 3 cá thể hoa hồng mới chọn tạo

3.4.3. Nội dung 3: Đánh giá hình thái và đa dạng di truyền các dòng hồng Lửa mới chọn tạo

3.4.3.1. Đánh giá hình thái các dòng hoa hồng Lửa mới chọn tạo từ cây chiết cành

3.4.3.2. Đánh giá hình thái dòng hoa hồng H1 mới chọn tạo từ cây cấy mô

3.4.3.3. Đánh giá đa dạng di truyền các dòng hồng mới chọn tạo

3.4.4. Phương pháp phân tích và xử lý số liệu

4. CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1. Nội dung 1: Nghiên cứu nhân giống hoa hồng Lửa bằng phương pháp nuôi cấy mô

4.1.1. Ảnh hưởng của nồng độ BA khác nhau đến sự nhân nhanh

4.1.2. Ảnh hưởng của nồng độ IBA và NAA khác nhau đến sự nhân nhanh

4.1.3. Ảnh hưởng của than hoạt tính trên môi trường MS/3 đến sự tạo cây hoàn chỉnh

4.1.4. Ảnh hưởng của 3 loại đèn chiếu sáng khác nhau đến sự tạo cây hoàn chỉnh

4.1.5. Ảnh hưởng của 2 loại túi cấy khác nhau đến sự tạo cây hoàn chỉnh

4.1.6. Tóm tắt kết quả của Nội dung 1

4.2. Nội dung 2: Ảnh hưởng của liều chiếu xạ tia gamma đến mẫu cấy đoạn thân hoa hồng Lửa in vitro

4.2.1. Ảnh hưởng của liều chiếu xạ tia gamma khác nhau đến tỷ lệ sống và mức phát triển của mẫu cấy ở 30 và 60 ngày sau chiếu xạ

4.2.2. Ảnh hưởng của liều chiếu xạ tia gamma khác nhau đến số chồi và sự phát triển của mẫu cấy ở 90 và 110 ngày sau chiếu xạ

4.2.3. Ảnh hưởng của liều chiếu xạ tia gamma khác nhau đến khả năng sống và phát triển của cây con ở giai đoạn vườn ươm

4.2.4. Một số đặc điểm về hình thái của các quần thể chiếu xạ khác nhau

4.2.4.1. Một số đặc điểm về hình thái cây của các quần thể chiếu xạ

4.2.4.2. Một số đặc điểm về thân và lá của các quần thể chiếu xạ

4.2.4.3. Một số đặc điểm biến dị về hoa của các quần thể chiếu xạ

4.2.4.4. Phổ biến dị hoa hồng được tạo ra sau chiếu xạ tia gamma trên đoạn thân in vitro của giống hoa hồng Lửa

4.2.5. Đánh giá tính ổn định về màu sắc hoa của các cá thể chọn lọc

4.2.6. Tóm tắt kết quả của Nội dung 2

4.3. Nội dung 3: Đánh giá hình thái và đánh giá đa dạng di truyền các dòng hoa hồng mới chọn tạo

4.3.1. Một số đặc điểm hình thái các dòng hoa hồng mới chọn tạo từ cành chiết

4.3.2. Nhân giống dòng hoa hồng mới H1 bằng phương pháp nuôi cấy mô và đánh giá so sánh dòng hoa hồng mới H1 so với giống gốc từ cây cấy mô

4.3.2.1. Nhân giống dòng hoa hồng mới H1 bằng phương pháp nuôi cấy mô

4.3.2.2. Đánh giá so sánh dòng hoa hồng H1 so với giống hoa hồng Lửa từ cây cấy mô

4.3.3. Đánh giá đa dạng di truyền các dòng hoa hồng Lửa mới chọn tạo

4.3.3.1. Sự đa dạng di truyền của các dòng hoa hồng mới chọn tạo

4.3.3.2. Mối quan hệ di truyền của các dòng hoa hồng mới chọn tạo dựa trên chỉ thị phân tử ISSR

5. CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

Tài liệu tham khảo

Phụ lục

I. Giới thiệu

Nghiên cứu 'Tạo dòng hoa hồng Lửa (Rosa hybrida L.) mới bằng phương pháp xử lý đột biến tia gamma in vitro' nhằm mục tiêu xác định quy trình nhân giống cho giống hoa hồng Lửa và tạo vật liệu in vitro cho việc chiếu xạ gây đột biến. Nghiên cứu này không chỉ giúp cải thiện giống hoa mà còn mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng công nghệ sinh học vào sản xuất nông nghiệp. Theo tác giả, 'Quy trình nhân giống hoa hồng Lửa bằng phương pháp nuôi cấy mô đã được xác định với các bước kỹ thuật chính trong thời gian 6 tháng'.

1.1 Mục tiêu nghiên cứu

Mục tiêu chính của nghiên cứu là xác định liều chiếu xạ thích hợp để tạo ra các đột biến về kích thước và màu sắc hoa. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng liều chiếu xạ 15 Gy tạo ra nhiều đột biến đa dạng về hình dạng và màu sắc hoa, khác biệt so với giống hoa hồng Lửa gốc. Điều này cho thấy tiềm năng của phương pháp xử lý đột biến tia gamma trong việc tạo ra các giống hoa mới có giá trị thương mại cao.

1.2 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

Nghiên cứu này có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển giống hoa hồng tại Việt Nam, đặc biệt là trong bối cảnh thị trường ngày càng cạnh tranh. Việc tạo ra các dòng hoa hồng mới không chỉ đáp ứng nhu cầu thị trường mà còn góp phần bảo tồn và phát triển nguồn gen quý giá. 'Đã tạo được 02 dòng hoa hồng đột biến mới là dòng H1 có màu hồng cam và dòng H2 có màu hồng', điều này mở ra cơ hội cho các nhà sản xuất trong việc đa dạng hóa sản phẩm.

II. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng phương pháp nuôi cấy mô để nhân giống hoa hồng Lửa. Quy trình này bao gồm việc sử dụng môi trường MS bổ sung BA 1,0 mg/L để nhân nhanh, và áp dụng các kỹ thuật mới như nuôi cấy thoáng khí. 'Quy trình này đã được áp dụng trong quá trình nhân nhanh dòng hoa hồng mới đột biến tạo ra'. Việc xác định liều chiếu xạ LD50 là 20-25 Gy cho thấy tính chính xác và hiệu quả của phương pháp nghiên cứu.

2.1 Quy trình nhân giống

Quy trình nhân giống hoa hồng Lửa được thực hiện qua các bước cụ thể, từ khử trùng bề mặt đến nuôi cấy và thuần dưỡng cây. 'Sử dụng túi cấy thoáng khí chứa môi trường 1/3 MS trong 10 ngày', điều này giúp tạo ra cây hoàn chỉnh và thuần dưỡng cây trên giá thể tảo và mụn dừa. Quy trình này không chỉ đảm bảo tỷ lệ sống cao mà còn tạo ra cây giống chất lượng tốt.

2.2 Ứng dụng tia gamma

Phương pháp chiếu xạ tia gamma được áp dụng để tạo ra các đột biến. 'Liều 15 Gy tạo được nhiều đột biến đa dạng về hình dạng hoa và màu sắc hoa khác với giống hoa hồng Lửa gốc'. Điều này chứng tỏ rằng việc sử dụng tia gamma là một phương pháp hiệu quả trong việc tạo giống mới, mở ra hướng đi mới cho ngành nông nghiệp.

III. Kết quả và thảo luận

Kết quả nghiên cứu cho thấy đã tạo ra 02 dòng hoa hồng đột biến mới với các đặc điểm hình thái khác biệt. Dòng H1 có màu hồng cam và dòng H2 có màu hồng, cả hai đều có tính ổn định qua các lần nhân giống. 'Dòng hoa hồng mới H1 khác biệt về màu sắc lá và hoa so với giống hoa hồng Lửa'. Điều này cho thấy tiềm năng của các dòng hoa mới trong việc đáp ứng nhu cầu thị trường.

3.1 Đánh giá hình thái

Đánh giá hình thái các dòng hoa hồng mới cho thấy sự khác biệt rõ rệt về màu sắc và kích thước. 'Cần tiếp tục đánh giá dòng hoa hồng mới H1 ở giai đoạn tuổi cây lớn hơn để có kết luận chính xác về đường kính hoa'. Điều này nhấn mạnh tầm quan trọng của việc theo dõi sự phát triển của cây qua các giai đoạn khác nhau.

3.2 Đánh giá di truyền

Phân tích di truyền cho thấy độ tương đồng về di truyền giữa các dòng hoa hồng mới đạt 0.89, cho thấy tính ổn định và khả năng sinh sản của các dòng này. 'Mối quan hệ di truyền của các dòng hoa hồng mới chọn tạo dựa trên chỉ thị phân tử ISSR' cho thấy tiềm năng ứng dụng trong việc chọn giống cây trồng.

Luận án tiến sĩ: Tạo dòng hoa hồng lửa rosa hybrida l bằng phương pháp xử lý đột biến tia gamma in vitro