Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ Từ Lá Thông Đỏ (Taxus wallichiana Zucc.)

Khóa luận nghiên cứu phân lập và xác định hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ Taxus wallichiana trồng tại Lâm Đồng, mang lại giá trị khoa học và ứng dụng.

• Tác giả: Nguyễn Thị Trúc Phương
• Người hướng dẫn: ThS. Hứa Hoàng Oanh
• Trường học: Trường Đại Học Sư Phạm Thành Phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ
• Đề tài: Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ Từ Lá Thông Đỏ (Taxus wallichiana Zucc.) Tại Lâm Đồng
• Loại tài liệu: Khóa Luận Tốt Nghiệp
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Thành Phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT
• DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU
• DANH MỤC CÁC BẢNG
• DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ
• DANH MỤC CÁC HÌNH
• PHỤ LỤC
• Phụ lục 1: Phổ 1H-NMR của hợp chất P1
• Phụ lục 2: Phổ 13C-NMR của hợp chất P1
• Phụ lục 3: Phổ DEPT của hợp chất P1
• Phụ lục 4: Phổ COSY của hợp chất P1
• Phụ lục 5: Phổ HSQC của hợp chất P1
• Phụ lục 6: Phổ HMBC của hợp chất P1
• Phụ lục 7: Phổ 1H-NMR của hợp chất P2
• Phụ lục 8: Phổ 13C-NMR của hợp chất P2
• Phụ lục 9: Phổ DEPT của hợp chất P2
• Phụ lục 10: Phổ COSY của hợp chất P2
• Phụ lục 11: Phổ HSQC của hợp chất P2
• Phụ lục 12: Phổ HMBC của hợp chất P2
• LỜI MỞ ĐẦU
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. KHÁI QUÁT VỀ THÔNG ĐỎ LÁ DÀI
• 1.1.1. Tên gọi
• 1.1.2. Vị trí phân loại
• 1.1.3. Mô tả thực vật
• 1.1.4. Phân bố, sinh thái
• 1.2. TỔNG QUAN VỀ TAXOL
• 1.2.1. Lịch sử tìm ra taxol
• 1.2.2. Cấu trúc hóa học
• 1.2.3. Hoạt tính sinh học
• 1.3. THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG THÔNG ĐỎ LÁ DÀI
• 1.3.1. Taxoid
• 1.3.2. Flavonoid
• 1.3.3. Các thành phần hóa học khác
• 1.4. ĐỘC TÍNH VÀ TÁC DỤNG DƯỢC LÝ
• 1.4.1. Tác dụng dược lý
• 1.5. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU CÂY THÔNG ĐỎ
• 2. CHƯƠNG 2: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Nguyên vật liệu, dụng mỗ, trang thiết bị
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Phân lập hợp chất taxoid trong cao methanol của lá thông đỏ lá dài
• 2.2.2. Xác định cấu trúc hợp chất taxoid từ lá thông đỏ lá dài
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Phân lập hợp chất taxoid trong cao methanol của thông đỏ lá dài
• 3.1.1. Loại các thành phần kém phân cực bằng PE
• 3.1.2. Tách phân đoạn cao methanol sau khi xử lý bằng sắc ký cột
• 4. CHƯƠNG 4: XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT TAXOID
• 4.1. Khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất P1
• 4.2. Khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất P2

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ Từ Lá Thông Đỏ

Nghiên cứu về hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ (Taxus wallichiana) tại Lâm Đồng đang thu hút sự chú ý của nhiều nhà khoa học. Cây thông đỏ không chỉ có giá trị kinh tế mà còn chứa nhiều hoạt chất có tác dụng dược lý quan trọng. Việc phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất này sẽ mở ra hướng đi mới trong nghiên cứu và ứng dụng trong y học.

1.1. Giới Thiệu Về Cây Thông Đỏ Tại Lâm Đồng

Cây thông đỏ (Taxus wallichiana) là một loài cây quý hiếm, phân bố chủ yếu ở các vùng núi cao. Tại Lâm Đồng, cây được trồng và nghiên cứu để khai thác các hợp chất hữu cơ có giá trị. Việc tìm hiểu về cây thông đỏ không chỉ giúp bảo tồn loài mà còn phát triển kinh tế địa phương.

1.2. Tầm Quan Trọng Của Nghiên Cứu Hợp Chất Từ Thông Đỏ

Nghiên cứu các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các loại thuốc điều trị ung thư. Các hoạt chất như paclitaxel đã được chứng minh có hiệu quả trong việc điều trị nhiều loại ung thư, mở ra cơ hội cho việc sản xuất thuốc trong nước.

II. Vấn Đề Và Thách Thức Trong Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ

Mặc dù có nhiều tiềm năng, nhưng việc nghiên cứu và khai thác hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ cũng gặp phải nhiều thách thức. Sự khan hiếm của nguyên liệu, cũng như các vấn đề về bảo tồn loài, là những yếu tố cần được xem xét kỹ lưỡng.

2.1. Khó Khăn Trong Việc Khai Thác Nguyên Liệu

Việc khai thác lá thông đỏ để nghiên cứu gặp khó khăn do số lượng cây trong tự nhiên đang giảm sút. Điều này đòi hỏi các nhà nghiên cứu phải tìm ra phương pháp trồng và bảo tồn hiệu quả để đảm bảo nguồn nguyên liệu bền vững.

2.2. Thách Thức Trong Phân Tích Thành Phần Hóa Học

Phân tích và xác định cấu trúc các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ là một thách thức lớn. Các phương pháp sắc ký và phổ hồng ngoại cần được áp dụng chính xác để đảm bảo độ tin cậy của kết quả nghiên cứu.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ Từ Lá Thông Đỏ

Để nghiên cứu các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ, các phương pháp chiết xuất và phân lập hiện đại đã được áp dụng. Những phương pháp này không chỉ giúp tối ưu hóa quy trình mà còn nâng cao hiệu quả thu hồi các hoạt chất có giá trị.

3.1. Quy Trình Chiết Xuất Hợp Chất Từ Lá Thông Đỏ

Quy trình chiết xuất thường sử dụng dung môi methanol để thu hồi các hợp chất hữu cơ. Sau đó, các phương pháp sắc ký cột được áp dụng để phân lập các hợp chất riêng lẻ, đảm bảo độ tinh khiết cao.

3.2. Phân Tích Cấu Trúc Hóa Học Của Hợp Chất

Các hợp chất sau khi phân lập sẽ được phân tích bằng các kỹ thuật như NMR và MS để xác định cấu trúc hóa học. Việc này giúp hiểu rõ hơn về tính chất và hoạt tính sinh học của các hợp chất hữu cơ.

IV. Ứng Dụng Thực Tiễn Của Hợp Chất Hữu Cơ Từ Thông Đỏ

Các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ không chỉ có giá trị trong nghiên cứu mà còn có nhiều ứng dụng thực tiễn trong y học. Việc phát triển các sản phẩm từ những hợp chất này có thể mang lại lợi ích lớn cho sức khỏe cộng đồng.

4.1. Ứng Dụng Trong Y Học Hiện Đại

Các hoạt chất như paclitaxel được chiết xuất từ lá thông đỏ đã được sử dụng trong điều trị ung thư. Việc phát triển các sản phẩm từ lá thông đỏ có thể giúp giảm chi phí điều trị và nâng cao hiệu quả.

4.2. Tiềm Năng Kinh Tế Từ Hợp Chất Hữu Cơ

Việc khai thác và sản xuất các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ không chỉ mang lại lợi ích về sức khỏe mà còn tạo ra nguồn thu nhập cho người dân địa phương. Điều này góp phần phát triển kinh tế bền vững cho khu vực.

V. Kết Luận Và Tương Lai Của Nghiên Cứu Hợp Chất Hữu Cơ

Nghiên cứu về hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ tại Lâm Đồng mở ra nhiều triển vọng mới trong lĩnh vực y học và kinh tế. Việc tiếp tục nghiên cứu và phát triển các sản phẩm từ lá thông đỏ là cần thiết để khai thác tối đa tiềm năng của loài cây này.

5.1. Triển Vọng Nghiên Cứu Trong Tương Lai

Các nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào việc phát triển các phương pháp chiết xuất hiệu quả hơn, cũng như nghiên cứu sâu hơn về hoạt tính sinh học của các hợp chất hữu cơ từ lá thông đỏ.

5.2. Định Hướng Phát Triển Bền Vững

Định hướng phát triển bền vững cho cây thông đỏ cần được chú trọng, bao gồm việc bảo tồn loài và phát triển các mô hình trồng trọt hiệu quả. Điều này sẽ đảm bảo nguồn nguyên liệu cho nghiên cứu và sản xuất trong tương lai.

Nội dung chính

Bối cảnh và vấn đề nghiên cứu

Bệnh ung thư là một trong những nguyên nhân gây tử vong hàng đầu trên thế giới. Từ thập niên 1960, các nhà khoa học đã tập trung tìm kiếm các hoạt chất tự nhiên có khả năng ức chế tế bào ung thư. Trong số đó, paclitaxel (Taxol) chiết xuất từ các loài thông đỏ (Taxus sp.) đã trở thành hoạt chất quan trọng để điều chế thuốc điều trị ung thư buồng trứng, ung thư vú và ung thư phổi di căn. Tuy nhiên, việc khai thác paclitaxel từ tự nhiên gặp nhiều trở ngại lớn: hàm lượng hoạt chất trong vỏ cây rất thấp (khoảng 20 mg paclitaxel từ 1 kg vỏ cây khô, giá thành thị trường khoảng 4,87 USD/mg tại thời điểm nghiên cứu) và để sản xuất một liều điều trị cần sử dụng vỏ của khoảng 6 cây thông đỏ trưởng thành.

Tại Việt Nam, nguồn thông đỏ tự nhiên có nguy cơ tuyệt chủng và đã được đưa vào Sách đỏ Việt Nam. Nhằm giải quyết bài toán nguyên liệu bền vững, Trung tâm Trồng và Chế biến cây thuốc Đà Lạt đã tiến hành trồng thực nghiệm loài thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) tại tỉnh Lâm Đồng để cung cấp sinh khối lá phục vụ chiết tách paclitaxel và các tiền chất taxoid. Để phục vụ công tác tiêu chuẩn hóa, kiểm nghiệm và đánh giá chất lượng nguồn dược liệu trồng cũng như các chế phẩm chiết xuất, việc nghiên cứu phân lập và xác định các hợp chất taxoid đặc trưng là nhiệm vụ cấp bách.

Khóa luận được thực hiện nhằm giải quyết 2 mục tiêu nghiên cứu cụ thể:

1. Phân lập một số hợp chất tự nhiên từ lá cây thông đỏ lá dài;
2. Tinh chế và xác định cấu trúc các hợp chất đã phân lập.

Đối tượng và phạm vi nghiên cứu:

• Đối tượng nghiên cứu: Lá cây thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc., họ Taxaceae).
• Phạm vi không gian: Mẫu dược liệu thu hái từ cây trồng tại tỉnh Lâm Đồng; thực nghiệm phân lập và tinh chế thực hiện tại Trung tâm Sâm và Dược liệu TP.HCM phối hợp cùng Khoa Hóa, Trường Đại học Sư phạm TP.HCM; đo các dữ liệu phổ nghiệm tại Viện Hóa học thuộc Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam (Hà Nội).
• Phạm vi thời gian: Đề tài hoàn thành và bảo vệ vào tháng 05 năm 2014.

---

Cơ sở lý thuyết và phương pháp

Nghiên cứu dựa trên cơ sở hóa thực vật học về nhóm hợp chất taxan diterpenoid (taxoid) đặc trưng của chi Taxus, cùng cơ chế dược lý ngăn chặn sự mất kiểm soát phân bào ung thư thông qua việc thúc đẩy tạo thành các vi ống (microtubule) vững chắc nhưng mất chức năng khử trùng hợp tubulin. Về mặt hóa học, khung cấu trúc cơ bản của taxoid gồm 3 vòng (6/8/6 cạnh) hoặc các biến thể chuyển vị như 11(15→1)-abeo-taxan, gắn các nhóm thế chức năng như ester acetyl (-OAc), ester cinnamoyl, nhóm hydroxyl (-OH), vòng oxetan 4 cạnh hoặc cầu nối oxido.

Quy trình thực nghiệm kết hợp các phương pháp chiết xuất, phân tích sắc ký và phổ nghiệm cấu trúc:

• Phương pháp xử lý mẫu và chiết tách phân đoạn: Sử dụng kỹ thuật chiết phân bố lỏng - lỏng với dung môi kém phân cực petroleum ether (PE) nhằm loại bỏ triệt để các tạp chất màu, lipid, sáp và các thành phần không phân cực trong cao chiết thô methanol (MeOH).
• Phương pháp sắc ký cột cổ điển (CC): Sử dụng pha tĩnh silica gel pha thuận cỡ hạt 0,040 - 0,063 mm. Khai triển với hai hệ dung môi gradient phân cực tăng dần: Dichloromethan - Aceton (CH₂Cl₂ - Aceton) để phân tách cao tổng và Petroleum ether - Ethyl acetat (PE - EA) để phân tách phân đoạn nhỏ.
• Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC): Thực hiện trên bản mỏng nhôm tráng sẵn silica gel 60 F₂₅₄ (Merck Art No.05554), soi dưới đèn tử ngoại ở bước sóng 254 nm và 365 nm, phát hiện vết bằng thuốc thử acid sulfuric 10% trong ethanol (H₂SO₄ 10%/EtOH) và sấy nóng ở 110°C.
• Phương pháp tinh chế: Kết hợp rửa kết tinh bằng dung môi chọn lọc (MeOH) và kỹ thuật kết tinh phân đoạn lặp lại trong hệ dung môi CH₂Cl₂ - PE.
• Phương pháp xác định cấu trúc hóa học:
  • Phổ tử ngoại - khả kiến (UV-Vis) và phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (FT-IR, đo mẫu ép viên KBr).
  • Phổ khối lượng (MS) trên máy MS-5989B Engine.
  • Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1 chiều (¹H-NMR 500 MHz, ¹³C-NMR 125 MHz, DEPT 90, DEPT 135) và 2 chiều (¹H-¹H COSY, HSQC, HMBC) trên thiết bị Bruker Avance 500 MHz, sử dụng dung môi deuterochloroform (CDCl₃).

---

Nội dung chính theo từng chương

Chương 1: Tổng quan

Chương 1 hệ thống hóa các tài liệu khoa học về loài thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) trên các khía cạnh:

• Thực vật và phân bố: Cây gỗ thường xanh cao đến 20 m, đường kính thân 40 - 50 cm, lá hình dải mọc so le xếp thành 2 dãy, hạt nằm trong áo hạt giả màu đỏ. Tại Việt Nam, chi Taxus có 2 loài chính là Taxus chinensis (thông đỏ lá ngắn) và Taxus wallichiana Zucc. (thông đỏ lá dài, phân bố chủ yếu ở Lâm Đồng, Khánh Hòa, Hà Giang ở độ cao từ 1400 - 1600 m).
• Lịch sử và cơ chế của taxol: Khái quát công trình phân lập paclitaxel của Wall và Wani (1971) từ Taxus brevifolia, cấu trúc phân tử gồm mạch bên phenylisoserin tại C-13 và khung vòng 6/8/6/4, cơ chế tác động làm bền vững vi ống ngăn chặn chu kỳ nguyên phân của tế bào khối u.
• Thành phần hóa học: Tổng quan các nhóm hợp chất đã biết gồm taxoid trung gian, taxoid cơ bản, taxoid mang nhóm cinnamoyl, taxoid chứa vòng oxetan, abeo-taxan; nhóm biflavonoid (amentoflavone, 7,7'',4'-tri-O-methylamentoflavon); cùng tinh dầu, triterpenoid, lignan và tannin. Điểm lại các công trình nghiên cứu trong nước của Nguyễn Hữu Toàn Phan, Trần Công Luận, Nguyễn Thị Thanh Tâm.
• Dược lý và độc tính: Ghi nhận kinh nghiệm y học cổ truyền (Trung Quốc, Ấn Độ, Thổ Nhĩ Kỳ) và các thử nghiệm dược lý hiện đại (kháng khối u, ức chế thụ thai trên chuột cống, chống co giật, giảm đau, hạ sốt, kháng khuẩn, kháng nấm). Nêu rõ độc tính tim mạch của alcaloid taxin và các tác dụng phụ của paclitaxel (suy tủy, giảm bạch cầu, hạ huyết áp, rụng tóc).
• Phương pháp chiết xuất và phân lập: Tổng kết các kỹ thuật chiết xuất bằng dung môi hữu cơ thông thường, chiết lỏng siêu tới hạn bằng CO₂ (SFE-CO₂) và chiết hỗ trợ sóng siêu âm (MAE).

Chương 2: Phương pháp nghiên cứu

Chương 2 trình bày chi tiết danh mục nguyên vật liệu, thiết bị thực nghiệm và quy trình phân lập:

• Dược liệu lá thông đỏ lá dài được xử lý chiết ngấm kiệt thu hồi cao tổng methanol.
• Xử lý 200 g cao thô MeOH: lắc phân bố nhiều lần với tổng cộng 6 lít petroleum ether (PE) để loại sạch phân đoạn kém phân cực và chất béo.
• Quy trình sắc ký cột silica gel lần 1: Nạp 60 g cao MeOH đã xử lý bằng phương pháp nạp khô lên cột thủy tinh kích thước 7 × 100 cm chứa 1200 g silica gel (chiều cao lớp chất hấp phụ 80 cm). Rửa giải bằng hệ dung môi gradient CH₂Cl₂ - Aceton (từ 100% CH₂Cl₂ đến CH₂Cl₂ - Aceton 50:50), tốc độ dòng 20 ml/phút, thể tích mỗi phân đoạn hứng là 250 ml.
• Quy trình sắc ký cột silica gel lần 2 trên phân đoạn III: Nạp mẫu lên cột thủy tinh kích thước 4 × 60 cm chứa 150 g silica gel (chiều cao lớp chất hấp phụ 40 cm), giải ly bằng hệ PE - EA (từ 100% PE đến PE - EA 70:30), tốc độ dòng 4 ml/phút, thể tích mỗi phân đoạn hứng là 50 ml.
• Các bước tinh chế kết tinh thu được và phương pháp đo quang phổ UV-Vis, FT-IR, MS, NMR (1D và 2D) để định danh cấu trúc.

Chương 3: Kết quả và bàn luận

Chương 3 tập trung vào quá trình thực nghiệm phân lập và đánh giá độ tinh khiết:

• Xử lý cao chiết: Sau khi lắc 200 g cao thô MeOH với 6 lít PE, đã loại bỏ được lượng lớn tạp màu và chất béo kém phân cực.
• Thăm dò hệ dung môi: Sắc ký lớp mỏng thăm dò xác định hệ CHCl₃ - MeOH (90:10) là hệ dung môi tối ưu để theo dõi cao MeOH xử lý, và hệ PE - EA (70:30) tối ưu cho việc tách phân đoạn III.
• Phân lập sắc ký cột lớn: Quá trình sắc ký 60 g mẫu trên cột silica gel 1200 g thu được nhiều phân đoạn. Trong đó, phân đoạn VIII sau khi cô quay thu hồi dung môi cho chất kết tinh màu trắng không tan trong MeOH, ký hiệu là P2. Phân đoạn III được gộp lại để tiến hành sắc ký cột tiếp theo.
• Phân lập sắc ký cột phân đoạn III: Sắc ký cột phân đoạn III thu được 6 phân đoạn nhỏ (từ A đến F). Phân đoạn D sau khi cô đuổi dung môi dưới áp suất giảm thu được chất kết tinh màu trắng, ký hiệu là P1.
• Tinh chế và kiểm tra độ tinh khiết:
  • Hợp chất P2 được tinh chế bằng cách hòa tan trong lượng tối thiểu CH₂Cl₂, nhỏ từ từ PE vào cho đến khi xuất hiện kết tinh trắng, làm lạnh để kết tinh tối đa, gạn dịch và rửa sạch nhiều lần bằng MeOH.
  • Kiểm tra độ tinh khiết của P1 và P2 trên sắc ký lớp mỏng với 3 hệ dung môi có độ phân cực khác nhau: P1 kiểm tra trên hệ PE - EtOH (90:10), PE - Aceton (70:10), CHCl₃ - MeOH (90:10); P2 kiểm tra trên hệ PE - Aceton (80:20), PE - Aceton (60:40), CHCl₃ - MeOH (90:10). Cả hai hợp chất đều cho một vết đơn duy nhất trên bản mỏng dưới ánh sáng UV 254 nm, UV 365 nm và khi hiện màu bằng thuốc thử H₂SO₄ 10%/EtOH.

Chương 4: Xác định cấu trúc hợp chất taxoid

Chương 4 phân tích chi tiết dữ liệu phổ nghiệm của 2 hợp chất phân lập được:

• Cấu trúc hợp chất P1:
  • Cảm quan: Tinh thể nhỏ mịn, không màu, lấp lánh; tan tốt trong CHCl₃, ACN, EtOAc, ít tan trong MeOH.
  • Dữ liệu phổ: UV-Vis (MeOH) cho đỉnh hấp thu cực đại tại 217 nm và 279,4 nm. Phổ FT-IR xuất hiện dải hấp thụ của nhóm carbonyl (1684 cm⁻¹), liên kết đôi C=C (1634 cm⁻¹) và liên kết C-O-C (1132, 1070 cm⁻¹). Phổ MS cho ion phân tử [M+Na]⁺ tại m/z = 687,28, tương ứng khối lượng phân tử [M]⁺ là 664 Da và công thức phân tử C₃₅H₄₄O₁₂ (độ bất bão hòa bằng 16).
  • Phổ cộng hưởng từ hạt nhân: ¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) và ¹³C-NMR (125 MHz, CDCl₃)/DEPT chỉ ra 35 carbon gồm: 1 carbon carbonyl ceton tại δC 199,3 (C-13); 4 carbon carbonyl ester (δC 169,7; 169,2...); 4 nhóm methyl đặc trưng khung taxan (trong đó 19-Me tại δH 1,03); 4 nhóm acetoxy (-OAc); 5 carbon bậc 3 mang oxy (δC 68,8 của C-10); 1 nhóm methylen exocyclic liên kết đôi tại δC 118,8 (C-20) tương ứng δH 4,45; cùng nhóm thế cinnamoyl.
  • Kết luận: Cấu trúc của P1 hoàn toàn trùng khớp với Taxinine B (7β-acetate-O-taxinine A).
• Cấu trúc hợp chất P2:
  • Cảm quan: Tinh thể nhỏ mịn, không màu, lấp lánh; tan trong CHCl₃, CH₂Cl₂, EA, ít tan trong MeOH.
  • Dữ liệu phổ: UV-Vis cho đỉnh cực đại tại 279 nm. Phổ MS ghi nhận ion [M+Na]⁺ tại m/z = 747,05, xác định khối lượng phân tử [M]⁺ là 724 Da, công thức phân tử C₃₉H₄₈O₁₃ (độ bất bão hòa bằng 16).
  • Phổ NMR 1D và 2D: Khẳng định sự hiện diện của 39 carbon gồm 5 nhóm carbonyl ester (δC 170,5 của 13-OAc...); 1 nhóm cinnamoyl ester (C-21 tại δC 165,2); 4 nhóm methyl trên khung taxan (19-Me tại δH 1,53); 1 nhóm hydroxyl alcol (-OH) gắn vào carbon bậc 4 mang oxy tại C-11 (δC 77,3); carbon olefin bậc hai C-20 tại δC 110,9 (tương ứng proton olefin H-20a, H-20b); 4 carbon mang oxy bậc ba. Phổ HMBC, HSQC và COSY giải mã chi tiết toàn bộ tương quan cấu trúc không gian của khung diterpen 6/8/6.
  • Kết luận: Cấu trúc của P2 hoàn toàn trùng khớp với Taxuspine D.

Chương 5: Kết luận và đề nghị

Chương 5 tóm tắt các kết quả đạt được về mặt phương pháp và thực nghiệm, đồng thời đưa ra các đề xuất định hướng nghiên cứu tiếp theo nhằm nâng cao giá trị khoa học và ứng dụng thực tiễn của dược liệu.

---

Kết quả và đóng góp

Nghiên cứu đã xây dựng thành công quy trình phân lập và làm sạch 2 hợp chất taxoid tinh khiết từ phân đoạn cao methanol của lá thông đỏ lá dài trồng tại Lâm Đồng.

Thông số / Đặc tính	Hợp chất P1 (Taxinine B)	Hợp chất P2 (Taxuspine D)
Trạng thái cảm quan	Tinh thể nhỏ mịn, không màu, lấp lánh	Tinh thể nhỏ mịn, không màu, lấp lánh
Độ tan	Dễ tan trong CHCl₃, ACN, EtOAc; ít tan trong MeOH	Dễ tan trong CHCl₃, CH₂Cl₂, EA; ít tan trong MeOH
Hấp thu UV-Vis ($\lambda_{max}$)	217 nm và 279,4 nm	279 nm
Hấp thu hồng ngoại (FT-IR)	1684 (C=O), 1634 (C=C), 1132, 1070 (C-O-C) cm⁻¹	Có tín hiệu C=O ester và C=C olefin
Ion khối phổ [M+Na]⁺ ($m/z$)	687,28	747,05
Khối lượng phân tử ($M$)	664 Da	724 Da
Công thức phân tử	C₃₅H₄₄O₁₂	C₃₉H₄₈O₁₃
Độ bất bão hòa ($k$)	16	16
Số lượng carbon (¹³C-NMR)	35 carbon	39 carbon
Đặc điểm cấu trúc chính	Khung taxan 6/8/6, 1 ceton C-13, 4 nhóm -OAc, 1 nhóm cinnamoyl, nối đôi C-20	Khung taxan 6/8/6, 1 nhóm -OH tại C-11, 5 nhóm -OAc, 1 nhóm cinnamoyl, nối đôi C-20

Bảng thông số kỹ thuật phân lập bằng sắc ký cột silica gel trong khóa luận:

Thông số thực nghiệm	Sắc ký cột lần 1 (Cao MeOH xử lý)	Sắc ký cột lần 2 (Phân đoạn III)
Khối lượng mẫu nạp cột	60 g (nạp khô trộn silica gel)	Mẫu phân tích từ phân đoạn III
Kích thước cột thủy tinh	7 × 100 cm	4 × 60 cm
Khối lượng pha tĩnh silica gel	1200 g (hạt 0,040 - 0,063 mm)	150 g (hạt 0,040 - 0,063 mm)
Chiều cao lớp silica gel	80 cm	40 cm
Hệ dung môi rửa giải	CH₂Cl₂ - Aceton (100:0 → 50:50)	PE - EA (100:0 → 70:30)
Tốc độ dòng	20 ml/phút	4 ml/phút
Thể tích hứng phân đoạn	250 ml/phân đoạn	50 ml/phân đoạn
Sản phẩm thu nhận	Phân đoạn III và kết tinh P2 (phân đoạn VIII)	Phân đoạn D cho kết tinh P1

Giải pháp và kiến nghị kỹ thuật đề xuất:

• Áp dụng bước tiền xử lý cao thô bằng petroleum ether để loại triệt để chất béo, dầu mỡ và sắc tố trước khi chạy sắc ký cột, giúp nâng cao độ bền của cột và hiệu quả phân tách.
• Kết hợp kỹ thuật kết tinh phân đoạn trong hệ dung môi CH₂Cl₂ - PE và rửa lạnh MeOH để làm sạch taxoid mà không cần qua nhiều lần sắc ký tinh chế phức tạp.

Đóng góp của khóa luận:

• Phân lập thành công 2 dẫn xuất taxoid có cấu trúc phức tạp là taxinine B và taxuspine D từ nguồn lá thông đỏ lá dài trồng tại tỉnh Lâm Đồng.
• Cung cấp bộ dữ liệu phổ nghiệm đầy đủ và chi tiết (UV, IR, MS, 1D và 2D NMR) cho 2 hợp chất, đóng góp cơ sở dữ liệu cho việc kiểm soát chất lượng dược liệu và thiết lập chất chuẩn đối chiếu cho các tạp chất liên quan trong quy trình sản xuất paclitaxel tại Việt Nam.

---

Hạn chế và hướng nghiên cứu tiếp

Khóa luận ghi nhận các giới hạn trong phạm vi nghiên cứu và đề xuất các hướng mở tiếp theo:

• Hạn chế: Nghiên cứu tập trung vào phân lập và xác định cấu trúc định tính, chưa tiến hành định lượng hàm lượng phần trăm cụ thể của taxinine B và taxuspine D trong sinh khối lá; chưa thực hiện khảo sát hoạt tính sinh học trực tiếp (in vitro/in vivo) trên các dòng tế bào ung thư đối với 2 chất tinh khiết thu được; chưa tiến hành khảo sát hết các phân đoạn còn lại từ sắc ký cột lần 1.
• Hướng nghiên cứu tiếp theo (do tác giả đề xuất):
  1. Khảo sát hàm lượng của taxinine B và taxuspine D trong lá thông đỏ lá dài và trong các chế phẩm tương ứng bằng phương pháp phân tích định lượng (HPLC).
  2. Thử nghiệm xác định hoạt tính sinh học của taxinine B và taxuspine D nhằm làm sáng tỏ và nâng cao giá trị sử dụng của nguồn dược liệu.
  3. Tiếp tục phân lập, xác định cấu trúc, tiêu chuẩn hóa và thiết lập chất đối chiếu cho các hợp chất taxoid khác có trong các phân đoạn của cao methanol, phục vụ công tác kiểm nghiệm nguồn dược liệu và kiểm soát tạp chất liên quan của paclitaxel.

---

Giá trị tham khảo

Khóa luận có giá trị tham khảo chuyên môn đối với:

• Đối tượng: Sinh viên, học viên cao học, nghiên cứu sinh và cán bộ nghiên cứu thuộc các chuyên ngành Hóa hữu cơ, Hóa hợp chất thiên nhiên, Dược học (Dược liệu, Kiểm nghiệm thuốc) và Công nghệ Hóa - Sinh.
• Nội dung tham khảo giá trị:
  • Quy trình chiết xuất và kỹ thuật tiền xử lý loại tạp béo từ cao dược liệu thực vật chứa diterpenoid.
  • Điều kiện vận hành sắc ký cột cổ điển phân tách các hợp chất taxoid với hệ dung môi CH₂Cl₂ - Aceton và PE - EA.
  • Phương pháp luận và quy trình phân tích phổ NMR 2 chiều (COSY, HSQC, HMBC) để giải mã cấu trúc lập thể phức tạp của các dẫn xuất khung taxan diterpenoid.

---

Câu hỏi thường gặp

1. Khối lượng mẫu cao methanol thô ban đầu được tác giả xử lý là bao nhiêu và sử dụng dung môi gì để loại tạp kém phân cực?
Tác giả đã sử dụng 200 g cao thô methanol, tiến hành lắc phân bố nhiều lần với tổng cộng 6 lít petroleum ether (PE) để loại bỏ các thành phần dầu mỡ, chất màu và hợp chất kém phân cực trước khi nạp 60 g cao đã xử lý lên cột sắc ký.

2. Hai hợp chất P1 và P2 phân lập được trong khóa luận có tên khoa học và công thức phân tử là gì?
Hợp chất P1 được định danh là Taxinine B (tên khác: 7β-acetate-O-taxinine A) với công thức phân tử C₃₅H₄₄O₁₂ (khối lượng phân tử 664 Da). Hợp chất P2 được định danh là Taxuspine D với công thức phân tử C₃₉H₄₈O₁₃ (khối lượng phân tử 724 Da).

3. Tác giả đã sử dụng các kỹ thuật phổ nghiệm nào để làm sáng tỏ cấu trúc của hai hợp chất?
Tác giả đã sử dụng phối hợp các kỹ thuật: quang phổ tử ngoại - khả kiến (UV-Vis), quang phổ hồng ngoại (FT-IR ép viên KBr), phổ khối lượng (MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1 chiều (¹H-NMR, ¹³C-NMR, DEPT 90, DEPT 135) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân 2 chiều (¹H-¹H COSY, HSQC, HMBC) đo trên thiết bị 500 MHz với dung môi CDCl₃.

4. Quy trình tinh chế kết tinh P2 từ phân đoạn sắc ký được tiến hành như thế nào?
Chất P2 thu được từ phân đoạn lẫn nhiều tạp màu được tinh chế bằng cách: hòa tan trong một lượng tối thiểu CH₂Cl₂, nhỏ từ từ PE vào dịch dung dịch cho đến khi xuất hiện kết tinh trắng, làm lạnh để thu hồi lượng kết tinh tối đa, gạn bỏ dịch lỏng, rửa sạch lại tinh thể bằng MeOH và để khô; quy trình này được lặp lại nhiều lần cho đến khi kết tinh đạt độ tinh khiết (cho 1 vết duy nhất trên TLC).

5. Sự khác biệt cơ bản về nhóm chức trên khung taxan giữa Taxinine B (P1) và Taxuspine D (P2) được xác định qua phổ NMR là gì?
Taxinine B (P1) có chứa 1 nhóm carbonyl ceton tại vị trí C-13 (δC 199,3 ppm) và 4 nhóm acetoxy (-OAc). Trong khi đó, Taxuspine D (P2) không có nhóm ceton tại C-13 mà mang 5 nhóm acetoxy (-OAc) kèm 1 nhóm hydroxyl (-OH) gắn tại carbon bậc bốn C-11 (δC 77,3 ppm).

---

Kết luận

Khóa luận tốt nghiệp của tác giả Nguyễn Thị Trúc Phương đã thực hiện thành công việc phân lập, tinh chế và xác định cấu trúc hóa học của 2 hợp chất taxoid gồm Taxinine B (C₃₅H₄₄O₁₂) và Taxuspine D (C₃₉H₄₈O₁₃) từ dịch chiết methanol của lá thông đỏ lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) trồng tại tỉnh Lâm Đồng. Nghiên cứu đã xây dựng được quy trình chiết tách kết hợp xử lý cao bằng petroleum ether, phân đoạn qua sắc ký cột silica gel và tinh chế bằng kết tinh phân đoạn hiệu quả. Kết quả phổ nghiệm 1D và 2D NMR thu được cung cấp cơ sở khoa học quan trọng phục vụ công tác tiêu chuẩn hóa dược liệu, kiểm nghiệm chất lượng và kiểm soát tạp chất liên quan trong sản xuất thuốc chống ung thư từ thông đỏ tại Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

TRUONG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH KHOA HÓA CHUYÊN NGÀNH HÓA HỮU CƠ ICR KHOA LUAN TOT NGHIEP PHAN LAP VÀ XÁC ĐỊNH MOT SO HỢP CHAT HỮU CƠ TỪ LA THONG DO LA DAI (74XUS WALLICHIANA ZUCC.) TRONG Ở LAM DONG GV hướng dẫn: ThS. Hứa Hoang Oanh SV thực hiện: Nguyễn Thị Trúc Phương MSSV: K36.068 : E THU Vir Ww Tp. Hồ Chí Minh, ngày 6 tháng 05 năm 2014 LỜI CẢM ƠN Hoan thành khóa luận tốt nghiệp này em xin chân thành cảm on: > Cảm on thay Tran Công Luận, cùng các thầy cô, anh chị trong phòng Hóa - Chế Phẩm thuộc Trung tâm Sâm và Dược liệu TP.HCM, đã tạo diéu kiện va giúp đỡ em trong suốt qua trình hoan thanh dé tai. > Cảm on cô Hứa Hoang Oanh, giảng viên trường ĐH Y Dược TP.HCM đã theo sat tận tinh hướng dẫn, giúp đờ, cung cấp kiến thức và động viên em trong suốt thời gian thực hiện khóa luận tốt nghiệp.

` Cam ơn thay Dương Thúc Huy, cô Lẻ Thị Thu Hương. anh Bùi The Vinh nhân viên Trung tắm Sâm và Dược liệu TP.HCM đã giúp đỡ và cho em những lời khuyên quý báu để hoàn thành khóa luận. > Cảm ơn tất cả các thiy cô trong khoa Hóa đã tận tỉnh day dỗ em trong suốt bến năm qua dé em có kiến thức hoan thành khóa luận. >» Cảm ơn bạn Nguyễn Thị Nhài, Nguyễn Thị Thanh Kim Huệ, các bạn sinh viên trường ĐH Công nghiệp TP.HCM, ĐH Nông Lam TP.HCM đã giúp đỡ chia sẻ cùng em những khó khăn, vui buồn trong suốt quá trinh hoàn thành dé tải.

v Cảm ơn ba mẹ và cả gia đình đã nuôi nang, dạy dỗ, là chỗ dựa tinh than vừng chắc dé em vượt qua mọi khó khăn vả tạo mọi điều kiện để em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Xin gửi lời chúc tốt đẹp đến tất cả mọi người! Khỏa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TÁT Chữ viết Từ nguyên Nghĩa tiếng Việt tắt rổ —^ | m— a doublets ofdoublet Mũi đôi kép Coupling constant Hing số ghép Distortionless Enhancement Phỏ DEPT byPolarization Transfer HMBC Photo diode array Day diod quang Ultraviolet - Visible Tử ngoại - Kha kiến Khóa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU ——m—— ———— Khoa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương DANH MỤC CÁC BANG Bảng 1:. Sắc kf cột cao me ÌbaDGÏ: ¿:ss--4czc2c¿<422000602020026G2GSGGGQl-xe-cidi00246G0023i1326646E 23 Bảng 2: Sắc kí cột silical gel trên phân đoạn II1.- 2 S922 S577 c227517722272/277 24 Bảng 3: Bang dữ liệu phO NMR của PL. 27 Bang 4: So sánh phé 1 H-NMR (500 MHz, CDCl) và 13C-NMR (125 MHz, CDCh) của P1 va par) dA MECN SEE TERRE NS 8p ODEON TOTO EOIE TEC SOS RTA ONE SaPTOT RST PNT PUTCO R ATT a 30 Băng 5: 8 liài phổ NMR cn 2 h2 ——— cá SE uae atcsasins 33 Bảng 6: So sánh phố 1H-NMR (500 MHz, CDCI,) va 13C-NMR (125 MHz, CDC1,) của P2 va IUNEEN('O 130121((62GGGGUGGGStGEORQiRSHSGGSiGEGGGdq 37 DANH MỤC CÁC SƠ DO Sơ đỗ 1: Qui trình chiết xuất phân đoạn cao methanol.

6c 5c SE v S1 S re 18 Khóa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương DANH MỤC CÁC HÌNH Binh 2: Gey: trường 0D oon eee ee eee eee et a3 Hinh 1: Cay thông đỏ lá dat Taxtes wallichiand ZỤCC .cccveccscscesssseesvsnssseesssssecsssseescesecsnncnencen 3 Hình 3: Câu trú của Tekh C02225 6600 62666006 a xe 5 Thi ng iets eis nam sa can nan n san suann 21 Hình S: Kiểm tra độ tinh khiết của PI trên SKLM với 3 hệ dung môi khắc nhau. 25 Hình 6: Kiếm tra độ tinh khiết của P2 trên SKLM với 3 hệ dung môi khác nhau. 26 Hình 7: Cầu trúc hỏa học của taxinine B.--25--2cccg eeczameccrddegrreorrcrree 32 Hình 8: Cau trúc hóa học của taxuspine ÏD2. 2-22 11 S2 91 2100001100121 118000011826 39 Khóa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trủc Phương DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục 1: Phé 1H-NMR của hợp chất P1 Phụ lục 2: Phổ 13C-NMR của hợp chất P1 Phụ lục 3: Phổ DEPT của hợp chất PI Phụ lục 4: Phố COSY của hợp chất P1 Phụ lục 5: Phổ HSQC của hợp chit PI Phụ lục 6: Phổ HMBC của hợp chất P1 Phụ lục 7: Phổ 1H-NMR của hợp chất P2 Phụ lục 8: Phổ 13C-NMR của hợp chất P2 Phụ lục 9: Phổ DEPT của hợp chất P2 Phụ lục 10: Phỏ COSY của hợp chat P2 Phụ lục 11: Phô HSQC của hợp chất P2 Phụ lục 12: Phỏ HMBC của hợp chất P2 Khỏa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương MỤC LỤC [IN CAN OR ss cei ec es i BANH ME EU |: 5; |, | ac ii DANH MUC CAG NS BIG $s seers ssc eee ~- tii CTE ch:! | ee iv GRANT: MUC CAC SƯ score see eee ae iv PIaR LÍ Cj oct || HA NNNNNNODDDDDDIDAIIIRRSI.

v BAMIENUC CAC PIED EUG oo es ree eee vi )0/20/Ô. vii KÔI MÔ ĐH: Ser eno seis ne Rt oer mate RT recone ty erie Neer ree aE I Ec0 S|10) | ne 2 lly KHAEQUAT-VE THONG DO LA DAI PHHEI——————m——————3 Pla |: a a eee aT 2 NAS) AON as VIR iss ccinissccicisercstserccacectnnsncirccscmaseceasts i tsatecssiats iimsbmasesibit ashes 2 BE SEs La. | aS Rea SN CN SCO 3 li TG QUAN VER TU Geoiddieddkededoioeceotodreekdeoeis 4 lõi: PƯQ€SVOUWfMHOEGLGL166áA06GGL ye 4 IS GÀ GB |» reeiee»eedeseeeecooeeesuooeeoosenoiye 4 123: Hoạthhiribhfg€:(GG/2(02600066G0Cl6L-k 5 1.3: THANH PHAN HOA HỌC TRONG THONG ĐỎ LA DALI .- 6 kLãd: Tce eae Sle SaaScpa e a aaae aa 6 IS FT gu qeauoaeatecaseeavtoaecsevvasssynauaa 12 1.3: Các thành phân hóa học khác .--- su s2 c1, l3 Tide ĐỘE TÍNH VÀ TÁEDUNG DUUC UD saadeaiceceeoacasecsisee l3 AT: TC ORREOI S626 992226062442. 13 Khóa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương ITBS ND N xuuxeé*1ede°bnntatdearaasaaioaauneasgneeesaossm 14 1.5: TINH HINH NGHIÊN CUU CAY THONG ĐỎ .--ccccoceee 15 IAN BE vvvvevaeesesoasaaseeseeisonaeeessssseeoosesd l§ 1S Oi Nem cca eas 16 Chuong 2: PHƯƠNG PHAP NGHIÊN CỨU .1: NGUYEN VAT LIEU, DUNG MỖI, TRANG THIET BỊ.

Nips wilt | [Rcscbtciocancuctiocpiocaocitiitsbssi(6o1io00 2c 18 3 RD gD | ee 18 DiDe PHƯỜNGPHAPNGHIÊNCỮU aii ise aka cca cl 19 2.1: Phan lập hợp chất taxoid trong cao methanol của lá thông đỏ lá dài.2: Xác định cấu trúc hợp chất taxoid tử lá thông đỏ lá dài.--- 20 Chương3: KET QUA VÀ BAN LUẬN.1: PHAN LAP HOP CHAT TAXOID TRONG CAO METHANOL CUA THONG ĐỎ LÁ ĐẮT: tec a ee 21 3.1: Loại các thành phần kém phân cực bằng PE .2: Tach phân đoạn cao methanol sau khi xử ly bằng sắc ký cột.- 21 UME NT accee 23 SOc: “SIME CHE RET TUNG 02 sass -25 Chương 4: XÁC ĐỊNH CAU TRÚC HỢP CHAT TAXOID.1: KHẢO SÁT CAU TRÚC HÓA HỌC CUA HỢP CHAT P1.2: KHẢO SÁT CÁU TRÚC HÓA HỌC CUA HỢP CHAT P2.cŸeeeeseeeeeeeee= 40 kh | | a 40 SS: ‘BERGE cccseecasiianoicnnrentnoaa nema eae 4I MưnCN|; | |; | oo oo a rae 42 PHÙ LỤC 66010 52ã26660ic\0021100GGQ6A010X8Si/A0GSAGNe 45 LỜI MỞ ĐÀU Ngày nay, kinh tế ngay cảng phát triển, cuộc sống vật chất ngảy càng được nâng cao nhưng cuộc đấu tranh giữa con người va bệnh tật vẫn không ngừng nghỉ ma ngảy càng trở nên quyết liệt, gay gắt. Con người đứng trước nhitng mỗi đe dọa vẻ căn bệnh hiểm nghèo đó là ung thư- căn bệnh chiếm tỉ lệ tử vong rat cao. Từ những năm 60 của thé ki trước các nha khoa học thế giới đã nghiên cứu, tìm kiếm những hoạt chất thiên nhiên có tác dụng ức chế căn bệnh hiểm nghèo. Taxol (paclitaxel) được chiết xuất từ các loài thông đỏ (Taxus sp.), được sử dụng làm nguyên liệu chính để điều chế thuốc chữa ung thư như ung thư buông trứng, ung thư vú, ung thư phỏi.

Những loại thuốc chữa ung thư được chiết xuất từ thông đỏ do Pháp và Mỹ sản xuất đã có mit trên thị trường từ năm 1994 với giá vô cùng đắt đỏ. Thông thường, | kg vỏ cây thông đỏ chiết xuất được 20 mg paclitaxel, giá mỗi mg paclitaxel trên thị trường khoảng 4,87 USD. Tuy nhiên, việc chiết xuất paclitaxel từ vỏ cây thông đó không hé dễ dang. Dé có thé tạo ra một liều thuốc trị bệnh ung thư tir vỏ cây, người ta cần phái sử dụng khoảng 6 cây thông đỏ trưởng thảnh, trong khi số lượng thông đỏ lại không hẻ déi dao.

Hiện tại, thông đỏ trong tự nhiên ở nước ta đã có nguy cơ tuyệt chúng vả đã cỏ mặt trong sách đỏ Việt Nam. Chính vi vay, Trung tâm trong vả chế biến cây thuốc Da Lạt đâ nghiên cứu trồng thông đỏ lá dai để chiết tách Taxol” (paclitaxel) va các hợp chattaxoid làm nguyên liệu dé san xuất thuốc điều trị ung thư. Các nhà khoa học Việt Nam da tiễn hành một vài nghiên cứu vẻ chiết xuất, phân lập và xác định cấu trúc các hoạt chat sinh học từ lá thông đỏ lá dai trồng ở Lâm Đồng HSM 7HSHPM OMI) Triển vọng phát triển thông do lá dài (Taxus wallichiana Zucc.) không những trở thành một sản phẩm tốt phục vụ cho diéu trị vi chăm sóc sức khỏe ma còn là một sản phẩm mang lại nguồn lợi kinh tế lớn cho đất nước. Vì vậy, việc xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm va đánh giá chất lượng taxol được chiết tách tử thông đỏ Việt Nam là hết sức quan trọng và cấp bách.

Dé đánh giả được chất lượng thông đỏ ở Việt Nam và các chế phẩm cần phải khảo sát thành phan các hợp chất đặc trưng cho thông đó ở Việt Nam. Chính vì thế, dé tải: “Phân lập vả xác định một số hợp chat hữu cơ từ lá thông đó lá dai (Taxus wallichiana Zuec.) trong ớ Lâm Đồng” được thực hiển với những mục tiêu như sau: 1. Phân lập một số hợp chất tự nhiên từ lá cây thông đò lá dài; 2. Tinh chế vả xác định cấu trúc các hợp chất đã phân lập.

Khỏa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương Chương!: TONG QUAN 1.1: KHÁI QUAT VE THONG ĐỎ LA DAI?" 1.1: Tên gọi Tên khoa học: Taxus wallichiana Zucc. Tên nước ngoài: Himalayan yew (Anh), Xu mi hong dou shan (Trung Quốc) Tên Việt Nam: thông đỏ lá dai, thông đỏ nam, thông đó Hymalaya, sam hạt đỏ lá dai, vân nam hỏng đậu sam.2: Vj trí phân loại Giới thực vật (Plantae) | Phân giới thực vật bậc cao (Cormobionta) Ngành Thông hay Hạt trần (Pinophyta) | Lớp Thông (Pinopsida) | Bộ Thông (Pinales) | Họ Thanh tùng hay Thủy tùng (Taxaceac) | Chi Thông đỏ (Taxus) Cây Thông đỏ lá dai (Taxus wallichiana Zucc.3: Mô tả thực vật Cây gỗ to, thường xanh, cao đến 20 m, đường kính thân 40 - 50 cm. Thân có vỏ mau hông xám, phân nhiều cảnh mánh, khi non mau luc, Khoa Luận Tốt Nghiệp Nguyễn Thị Trúc Phương Lá mọc so le, hau như không cuống, thường xếp thành 2 dãy như một lá kép, hình dai rất hẹp, dang cong, đài 2,5 - 3,5 cm, rộng 2 - 3 mm, gốc thuôn, đầu nhọn, mặt trên 16m như lòng thuyền, mặt dưới có hai dãy lỗ khi. Cụm hoa đơn tính, khác gốc.

Nón đực đơn độc ở nách lá, hình cầu, kèm theo ở gốc là những lá bắc lợp.