Phân lập và đánh giá hoạt tính sinh học của Fucoidan trọng lượng phân tử thấp từ rong nâu Việt Nam

• Tác giả: Nguyễn Ngọc Anh
• Người hướng dẫn: TS. Hồ Đức Cường
• Trường học: Trường Đại Học Bách Khoa Hà Nội
• Chuyên ngành: Kỹ thuật Hóa học
• Đề tài: Phân lập và đánh giá hoạt tính sinh học của Fucoidan trọng lượng phân tử thấp từ rong nâu Việt Nam
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Hà Nội

• LỜI CẢM ƠN
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. Tổng quan về rong biển
• 1.2. Giới thiệu chung về rong biển
• 1.3. Nguồn lợi từ rong biển
• 1.4. Phân loài rong biển
• 1.5. Một số ngành rong biển phổ biến
• 1.6. Giới thiệu về rong nâu Turbinaria decurrens B.
• 1.7. Tổng quan về polysaccharide từ rong biển
• 1.7.1. Polysaccharide từ các loài rong lục
• 1.7.2. Polysaccharide từ các loài rong đỏ
• 1.7.3. Polysaccharide từ các loài rong nâu
• 1.7.4. Fucoidan từ rong nâu
• 1.7.5. Các phương pháp chiết tách fucoidan từ rong nâu
• 1.7.6. Thành phần và cấu trúc của fucoidan từ rong nâu
• 1.7.7. Hoạt tính sinh học của fucoidan từ rong nâu
• 2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.3. Cơ sở lý thuyết của các phương pháp nghiên cứu
• 2.3.1. Phương pháp chiết
• 2.3.2. Chiết tách polysaccharide từ rong biển
• 2.3.3. Phương pháp tạo fucoidan trọng lượng phân tử thấp
• 2.3.4. Phương pháp GPC nghiên cứu cấu trúc polysaccharide
• 2.3.5. Phương pháp IR trong nghiên cứu cấu trúc của polysaccharide
• 2.3.6. Phương pháp NMR trong nghiên cứu cấu trúc polysaccharide
• 2.3.7. Phương pháp phổ khối lượng trong nghiên cứu polysaccharide
• 2.3.8. Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào
• 3. CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM
• 3.1. Thu thập và xử lý mẫu rong
• 3.2. Xác định các thành phần chính có trong mẫu rong
• 3.2.1. Xác định hàm lượng tro
• 3.2.2. Xác định hàm lượng protein thô
• 3.2.3. Xác định hàm lượng lipid thô
• 3.2.4. Xác định hàm lượng laminaran
• 3.2.5. Xác định hàm lượng acid alginic
• 3.3. Chiết tách và tinh chế fucoidan từ rong nâu T.
• 3.4. Xác định thành phần hóa học của fucoidan từ T.
• 3.4.1. Xác định thành phần đường
• 3.4.2. Xác định hàm lượng sulfate
• 3.4.3. Xác định hàm lượng acid uronic
• 3.4.4. Xác định cấu trúc của fucoidan từ T.
• 3.4.4.1. Phương pháp phổ hồng ngoại (IR)
• 3.4.4.2. Phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)
• 3.4.4.3. Phương pháp sắc ký thẩm thấu gel (GPC)
• 3.5. Thủy phân tạo các fucoidan trọng lượng phân từ thấp (LMWF)
• 3.6. Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào của các mẫu Ftđ và LMWF
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Thành phần hóa học của mẫu rong T.
• 4.2. Thành phần hóa học của fucoidan từ rong nâu T.
• 4.3. Phân tích cấu trúc fucoidan (Ftđ) từ rong nâu T.
• 4.3.1. Phổ hồng ngoại (IR)
• 4.3.2. Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR)
• 4.3.3. Phổ khối lượng ESI – MS/MS
• 4.4. Kết quả xác định TLPT của các mẫu Ftđ và LMWF M1–M7
• 4.5. Kết quả đánh giá hoạt tính gây tốc tế bào và ảnh hưởng của TLPT đến hoạt tính gây độc tế bào của fucoidan
• 4.6. Kết quả đánh giá hoạt tính gây độc tế bào của mẫu M5
• 5. CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN
• 5.1. Hướng phát triển trong tương lai
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tổng quan về Fucoidan và rong nâu Việt Nam

Fucoidan là một loại polysaccharide sulfate có trong rong nâu, đặc biệt là loài Turbinaria decurrens B. Tại Việt Nam, rong nâu không chỉ là nguồn thực phẩm mà còn là nguồn nguyên liệu quý giá cho ngành dược phẩm. Nghiên cứu về Fucoidan từ rong nâu đang thu hút sự quan tâm lớn từ các nhà khoa học, nhờ vào các hoạt tính sinh học đa dạng mà nó mang lại.

1.1. Fucoidan và vai trò của nó trong y học

Fucoidan có nhiều hoạt tính sinh học như chống viêm, chống ung thư và tăng cường miễn dịch. Nghiên cứu cho thấy Fucoidan có khả năng ức chế sự phát triển của tế bào ung thư, mở ra hướng đi mới trong điều trị bệnh.

1.2. Đặc điểm của rong nâu Turbinaria decurrens B.

Rong nâu Turbinaria decurrens B. là một trong những loài rong biển phổ biến tại Việt Nam. Nó có khả năng sinh trưởng tốt trong môi trường nước mặn và chứa hàm lượng Fucoidan cao, làm cho nó trở thành đối tượng nghiên cứu lý tưởng.

II. Thách thức trong nghiên cứu Fucoidan trọng lượng phân tử thấp

Mặc dù Fucoidan có nhiều lợi ích, nhưng việc chiết tách và xác định hoạt tính sinh học của nó vẫn gặp nhiều thách thức. Các yếu tố như trọng lượng phân tử, cấu trúc hóa học và phương pháp chiết tách đều ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học của Fucoidan.

2.1. Vấn đề trong việc chiết tách Fucoidan

Chiết tách Fucoidan từ rong nâu thường gặp khó khăn do sự đa dạng trong cấu trúc hóa học của nó. Các phương pháp chiết tách hiện tại cần được cải tiến để tối ưu hóa hiệu suất thu hồi.

2.2. Ảnh hưởng của trọng lượng phân tử đến hoạt tính sinh học

Trọng lượng phân tử của Fucoidan có thể ảnh hưởng lớn đến hoạt tính sinh học của nó. Nghiên cứu cho thấy Fucoidan trọng lượng phân tử thấp có thể có hoạt tính tốt hơn so với các dạng khác.

III. Phương pháp chiết tách Fucoidan từ rong nâu

Để nghiên cứu Fucoidan, các phương pháp chiết tách hiệu quả là rất quan trọng. Nghiên cứu đã áp dụng nhiều phương pháp khác nhau để thu được Fucoidan trọng lượng phân tử thấp từ rong nâu.

3.1. Phương pháp chiết tách Fucoidan hiệu quả

Phương pháp chiết tách Fucoidan từ rong nâu thường sử dụng dung môi acid hoặc enzyme. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng phương pháp chiết tách bằng acid HCl cho hiệu suất cao nhất.

3.2. Thủy phân Fucoidan để tạo mẫu trọng lượng phân tử thấp

Thủy phân Fucoidan bằng acid HCl 0,1N giúp tạo ra các mẫu Fucoidan trọng lượng phân tử thấp, từ đó đánh giá hoạt tính sinh học của chúng trên các dòng tế bào ung thư.

IV. Kết quả nghiên cứu hoạt tính sinh học của Fucoidan

Nghiên cứu đã chỉ ra rằng Fucoidan trọng lượng phân tử thấp có hoạt tính sinh học vượt trội so với Fucoidan tự nhiên. Các mẫu Fucoidan được chiết tách cho thấy khả năng ức chế tế bào ung thư cao.

4.1. Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào của Fucoidan

Các mẫu Fucoidan trọng lượng phân tử thấp đã được thử nghiệm trên các dòng tế bào ung thư như HT29, cho thấy hoạt tính gây độc tế bào tốt hơn so với mẫu tự nhiên.

4.2. Kết quả so sánh giữa các mẫu Fucoidan

Mẫu Fucoidan M5 với trọng lượng phân tử 96.000 g/mol thể hiện hoạt tính tốt nhất, cao hơn 92,6% so với mẫu Fucoidan tự nhiên, khẳng định vai trò của trọng lượng phân tử trong hoạt tính sinh học.

V. Ứng dụng thực tiễn của Fucoidan trong y dược

Fucoidan từ rong nâu không chỉ có giá trị trong nghiên cứu mà còn có tiềm năng ứng dụng lớn trong y dược. Các sản phẩm từ Fucoidan có thể được phát triển thành thuốc điều trị ung thư và các bệnh lý khác.

5.1. Tiềm năng ứng dụng Fucoidan trong điều trị ung thư

Fucoidan có khả năng ức chế sự phát triển của tế bào ung thư, mở ra cơ hội cho việc phát triển các liệu pháp điều trị mới. Nghiên cứu cho thấy Fucoidan có thể kết hợp với các phương pháp điều trị hiện tại để tăng hiệu quả.

5.2. Hướng phát triển sản phẩm từ Fucoidan

Các sản phẩm từ Fucoidan có thể được phát triển thành thực phẩm chức năng hoặc thuốc bổ trợ trong điều trị bệnh. Việc nghiên cứu và phát triển các sản phẩm này sẽ góp phần nâng cao sức khỏe cộng đồng.

VI. Kết luận và tương lai của nghiên cứu Fucoidan

Nghiên cứu về Fucoidan từ rong nâu Việt Nam đang mở ra nhiều triển vọng mới trong lĩnh vực y dược. Cần tiếp tục nghiên cứu để làm rõ hơn mối quan hệ giữa cấu trúc và hoạt tính sinh học của Fucoidan.

6.1. Tương lai của nghiên cứu Fucoidan

Nghiên cứu Fucoidan cần được mở rộng để khám phá thêm các hoạt tính sinh học khác và ứng dụng trong điều trị bệnh. Việc phát triển các phương pháp chiết tách hiệu quả sẽ là chìa khóa cho thành công trong tương lai.

6.2. Định hướng nghiên cứu tiếp theo

Các nghiên cứu tiếp theo nên tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình chiết tách và đánh giá hoạt tính sinh học của các mẫu Fucoidan khác nhau để phát triển sản phẩm ứng dụng thực tiễn.

Tổng quan nghiên cứu

Rong biển là nguồn tài nguyên sinh vật biển phong phú, đóng vai trò quan trọng trong nhiều ngành công nghiệp như thực phẩm, dược phẩm và mỹ phẩm. Theo báo cáo của Tổ chức Lương thực và Nông nghiệp Liên Hợp Quốc (FAO), sản lượng rong biển toàn cầu đạt khoảng 15 triệu tấn rong tươi mỗi năm, với doanh thu kinh tế ước tính khoảng 8 tỷ USD. Trong đó, polysaccharide chiếm phần lớn giá trị kinh tế, đặc biệt là fucoidan – một loại sulfate polysaccharide có trong rong nâu với nhiều hoạt tính sinh học quý giá như chống oxy hóa, chống ung thư và điều hòa miễn dịch.

Tuy nhiên, mối quan hệ giữa cấu trúc hóa học của fucoidan, đặc biệt là trọng lượng phân tử, và hoạt tính sinh học vẫn chưa được làm rõ hoàn toàn. Luận văn thạc sĩ này tập trung nghiên cứu phân lập và đánh giá hoạt tính sinh học của fucoidan trọng lượng phân tử thấp (LMWF) từ loài rong nâu Turbinaria decurrens B. thu hái tại biển Kiên Giang, Việt Nam. Mục tiêu cụ thể là chiết tách fucoidan, xác định cấu trúc hóa học và trọng lượng phân tử, đồng thời đánh giá hoạt tính gây độc tế bào trên các dòng tế bào ung thư người.

Nghiên cứu được thực hiện trong năm 2020 với phạm vi tập trung vào loài rong nâu tại vùng biển Kiên Giang. Kết quả nghiên cứu không chỉ góp phần làm sáng tỏ mối quan hệ cấu trúc – hoạt tính của fucoidan mà còn định hướng ứng dụng trong lĩnh vực y – dược, đặc biệt trong phát triển các sản phẩm chống ung thư và điều hòa miễn dịch.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Luận văn dựa trên các lý thuyết và mô hình nghiên cứu về cấu trúc và hoạt tính sinh học của polysaccharide từ rong biển, tập trung vào fucoidan – một sulfate polysaccharide đặc trưng của rong nâu. Hai lý thuyết chính được áp dụng gồm:

1. Lý thuyết cấu trúc polysaccharide và ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học: Fucoidan có cấu trúc phức tạp với các monosaccharide chính là L-fucose, galactose, mannose, xylose và glucuronic acid, cùng các nhóm sulfate ở vị trí C-2, C-3, C-4. Trọng lượng phân tử và vị trí nhóm sulfate ảnh hưởng trực tiếp đến hoạt tính sinh học như chống oxy hóa, chống đông máu và chống ung thư.

2. Mô hình đánh giá hoạt tính sinh học qua thử nghiệm gây độc tế bào: Sử dụng phương pháp Sulforhodamine B (SRB) để đo mật độ quang học (OD) phản ánh lượng protein tế bào, từ đó xác định phần trăm ức chế sự phát triển tế bào ung thư. Mô hình này giúp đánh giá hiệu quả của các mẫu fucoidan trọng lượng phân tử thấp trên các dòng tế bào ung thư đại tràng, tuyến giáp và cổ tử cung.

Các khái niệm chính bao gồm: fucoidan, trọng lượng phân tử (Mw), polysaccharide sulfate, hoạt tính gây độc tế bào, phương pháp chiết tách và thủy phân acid.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu chính là mẫu rong nâu Turbinaria decurrens B. thu hái tại biển Kiên Giang tháng 02/2020. Mẫu được xử lý, sấy khô và nghiền thành bột để chiết tách fucoidan theo phương pháp của Bilan và cộng sự. Fucoidan thu được (mẫu Ftđ) được thủy phân bằng acid HCl 0,1N với các thời gian khác nhau để tạo ra 7 mẫu fucoidan trọng lượng phân tử thấp (M1 – M7).

Phân tích cấu trúc và trọng lượng phân tử được thực hiện bằng các kỹ thuật hiện đại: phổ hồng ngoại (IR), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR), phổ khối lượng (MS), sắc ký thẩm thấu gel (GPC). Hoạt tính sinh học được đánh giá qua thử nghiệm gây độc tế bào trên các dòng ung thư người HT29 (đại tràng), 8085 (tuyến giáp) và HeLa (cổ tử cung) theo phương pháp Sulforhodamine B (SRB).

Cỡ mẫu nghiên cứu gồm 8 mẫu fucoidan (Ftđ và M1 – M7). Phương pháp chọn mẫu dựa trên thủy phân với thời gian khác nhau nhằm tạo ra các mức trọng lượng phân tử đa dạng để khảo sát ảnh hưởng đến hoạt tính. Phân tích dữ liệu sử dụng các chỉ số IC50 và phần trăm ức chế tế bào, so sánh hiệu quả giữa các mẫu.

Timeline nghiên cứu kéo dài từ tháng 02/2020 (thu thập mẫu) đến cuối năm 2022 (hoàn thiện phân tích và đánh giá hoạt tính).

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Phân lập thành công fucoidan từ rong nâu Turbinaria decurrens B. với hàm lượng 2,9% trên khối lượng rong khô. Mẫu Ftđ được xác định là galactofucan với cấu trúc hóa học đặc trưng gồm L-fucose, galactose và các nhóm sulfate.

2. Tạo ra 7 mẫu fucoidan trọng lượng phân tử thấp (M1 – M7) bằng thủy phân acid HCl 0,1N với thời gian từ 10 đến 60 phút. Trọng lượng phân tử của các mẫu dao động từ khoảng 96.000 g/mol (M5) đến thấp hơn, được xác định bằng phương pháp GPC.

3. Hoạt tính gây độc tế bào trên dòng ung thư đại tràng HT29: Các mẫu LMWF thể hiện hoạt tính tốt hơn mẫu tự nhiên Ftđ. Mẫu M5 (thủy phân 30 phút, TLPT 96.000 g/mol) có hoạt tính cao nhất, tăng 92,6% so với mẫu Ftđ. Giá trị IC50 của M5 thấp hơn đáng kể, cho thấy hiệu quả ức chế tế bào mạnh hơn.

4. Hoạt tính gây độc tế bào trên các dòng ung thư tuyến giáp 8085 và cổ tử cung HeLa: Mẫu M5 cũng thể hiện hoạt tính rất tốt trên hai dòng tế bào này, cho thấy tính phổ rộng của fucoidan trọng lượng phân tử thấp trong việc ức chế tế bào ung thư.

Thảo luận kết quả

Kết quả nghiên cứu khẳng định trọng lượng phân tử là yếu tố cấu trúc quan trọng ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học của fucoidan. Fucoidan trọng lượng phân tử thấp có khả năng thâm nhập tế bào tốt hơn, từ đó tăng hiệu quả gây độc tế bào ung thư. So với các nghiên cứu trước đây, kết quả này phù hợp với báo cáo của một số nghiên cứu gần đây cho thấy fucoidan LMWF có hoạt tính chống ung thư và chống oxy hóa vượt trội.

Phổ IR, NMR và MS cung cấp bằng chứng cấu trúc rõ ràng, giúp xác định vị trí nhóm sulfate và thành phần monosaccharide, góp phần giải thích cơ chế tác động sinh học. Biểu đồ mối quan hệ giữa trọng lượng phân tử và hoạt tính gây độc tế bào (được trình bày trong luận văn) minh họa rõ xu hướng tăng hoạt tính khi trọng lượng phân tử giảm đến mức tối ưu.

Ngoài ra, việc mẫu M5 thể hiện hoạt tính trên nhiều dòng tế bào ung thư khác nhau cho thấy tiềm năng ứng dụng rộng rãi của fucoidan trọng lượng phân tử thấp trong phát triển thuốc chống ung thư tự nhiên. Kết quả cũng mở ra hướng nghiên cứu tiếp theo về cơ chế phân tử và thử nghiệm in vivo.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Phát triển quy trình sản xuất fucoidan trọng lượng phân tử thấp quy mô công nghiệp: Áp dụng phương pháp thủy phân acid HCl với điều kiện tối ưu (30 phút, 0,1N) để tạo ra sản phẩm có hoạt tính sinh học cao. Thời gian thực hiện trong 1-2 năm, chủ thể là các doanh nghiệp công nghệ sinh học và viện nghiên cứu.

2. Nghiên cứu sâu cơ chế tác động của fucoidan LMWF trên tế bào ung thư: Sử dụng kỹ thuật phân tử và mô hình động vật để làm rõ cơ chế apoptosis và điều hòa miễn dịch. Thời gian 2-3 năm, chủ thể là các trung tâm nghiên cứu y sinh và trường đại học.

3. Ứng dụng fucoidan LMWF trong phát triển thực phẩm chức năng và dược phẩm hỗ trợ điều trị ung thư: Thiết kế sản phẩm kết hợp với các liệu pháp hiện có, đánh giá hiệu quả lâm sàng. Thời gian 3-5 năm, chủ thể là công ty dược phẩm và viện nghiên cứu.

4. Mở rộng nghiên cứu các loài rong nâu khác tại Việt Nam để khai thác nguồn fucoidan đa dạng, tăng giá trị kinh tế và bảo vệ môi trường biển. Thời gian liên tục, chủ thể là các viện hải dương học và trường đại học.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu và sinh viên ngành Kỹ thuật Hóa học, Công nghệ Sinh học: Nắm bắt phương pháp chiết tách, phân tích cấu trúc polysaccharide và đánh giá hoạt tính sinh học, phục vụ nghiên cứu chuyên sâu.

2. Doanh nghiệp công nghệ sinh học và dược phẩm: Áp dụng quy trình chiết tách và thủy phân fucoidan trọng lượng phân tử thấp để phát triển sản phẩm mới có hoạt tính sinh học cao.

3. Chuyên gia y học và dược lý học: Hiểu rõ cơ chế tác động của fucoidan trong điều trị ung thư và các bệnh liên quan, hỗ trợ phát triển thuốc và thực phẩm chức năng.

4. Cơ quan quản lý và hoạch định chính sách về tài nguyên biển và phát triển bền vững: Đánh giá tiềm năng khai thác rong biển Việt Nam, định hướng phát triển kinh tế biển xanh và bảo vệ môi trường.

Câu hỏi thường gặp

1. Fucoidan là gì và tại sao nó quan trọng trong nghiên cứu sinh học?
   Fucoidan là một loại sulfate polysaccharide có trong rong nâu, có nhiều hoạt tính sinh học như chống oxy hóa, chống ung thư và điều hòa miễn dịch. Nó được nghiên cứu rộng rãi vì tiềm năng ứng dụng trong y học và dược phẩm.

2. Tại sao trọng lượng phân tử của fucoidan lại ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học?
   Trọng lượng phân tử ảnh hưởng đến khả năng thâm nhập tế bào và tương tác với các phân tử sinh học. Fucoidan trọng lượng phân tử thấp thường có hoạt tính sinh học mạnh hơn do dễ dàng tiếp cận và tác động lên tế bào mục tiêu.

3. Phương pháp thủy phân acid HCl được sử dụng như thế nào để tạo fucoidan trọng lượng phân tử thấp?
   Phương pháp này sử dụng acid HCl 0,1N để thủy phân mẫu fucoidan tự nhiên trong thời gian khác nhau (ví dụ 30 phút) nhằm cắt ngắn chuỗi polysaccharide, tạo ra các phân tử có trọng lượng phân tử thấp hơn với hoạt tính sinh học cao hơn.

4. Fucoidan trọng lượng phân tử thấp có thể ứng dụng trong lĩnh vực nào?
   Fucoidan LMWF có thể được ứng dụng trong phát triển thuốc chống ung thư, thực phẩm chức năng, mỹ phẩm và các sản phẩm hỗ trợ điều trị các bệnh liên quan đến miễn dịch và oxy hóa.

5. Nghiên cứu này có thể mở rộng như thế nào trong tương lai?
   Có thể mở rộng nghiên cứu bằng cách khảo sát cơ chế phân tử chi tiết, thử nghiệm in vivo, phát triển quy trình sản xuất công nghiệp và đánh giá hiệu quả lâm sàng của fucoidan trọng lượng phân tử thấp trên các bệnh nhân ung thư.

Kết luận

• Đã phân lập thành công fucoidan trọng lượng phân tử thấp từ rong nâu Turbinaria decurrens B. tại Việt Nam với hàm lượng 2,9%.
• Fucoidan trọng lượng phân tử thấp (mẫu M5, 96.000 g/mol) thể hiện hoạt tính gây độc tế bào ung thư vượt trội, tăng 92,6% so với mẫu tự nhiên.
• Kết quả khẳng định trọng lượng phân tử là yếu tố cấu trúc quan trọng ảnh hưởng đến hoạt tính sinh học của fucoidan.
• Nghiên cứu mở ra hướng ứng dụng fucoidan trong phát triển thuốc chống ung thư và thực phẩm chức năng tại Việt Nam.
• Đề xuất tiếp tục nghiên cứu cơ chế tác động, mở rộng khai thác nguồn rong nâu và phát triển quy trình sản xuất công nghiệp trong 1-3 năm tới.

Hành động tiếp theo: Các nhà nghiên cứu và doanh nghiệp nên phối hợp để phát triển sản phẩm fucoidan trọng lượng phân tử thấp, đồng thời mở rộng nghiên cứu ứng dụng trong y học và công nghiệp sinh học.