Luận Văn Thạc Sĩ Công Nghệ Hóa Học: Nghiên Cứu Hệ Phân Tán Nano Piperine

Nghiên cứu hệ phân tán nano piperine trong luận văn thạc sĩ công nghệ hóa học, ứng dụng tiềm năng trong dược phẩm và thực phẩm chức năng.

• Tác giả: Đỗ Duy Hiến
• Người hướng dẫn: PGS. Lê Thị Hồng Nhàn
• Trường học: Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Công nghệ Hóa học
• Đề tài: Nghiên cứu hệ phân tán nano piperine
• Loại tài liệu: Luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• LỜI CAM ĐOAN
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN
• 1.1. GIỚI THIỆU VỀ PIPERINE
• 1.2. TÍNH CHẤT VẬT LÝ, TÍNH CHẤT HÓA HỌC, PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT PIPERINE TỪ TIÊU
• 1.3. CÁC ỨNG DỤNG CỦA PIPERINE
• 1.4. TỔNG QUAN VỀ CÔNG NGHỆ NANO
• 1.5. KỸ THUẬT CƠ BẢN
• 1.6. ĐẶC TÍNH CỦA CÁC VI KHUẨN THÍ NGHIỆM
• 2. CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. NGUYÊN LIỆU HÓA CHẤT, THIẾT BỊ
• 2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.2.1. XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG PIPERINE
• 2.2.2. PHÂN BỐ KÍCH THƯỚC HẠT BẰNG LDS
• 2.2.3. PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT
• 2.3. NỘI DUNG THỰC NGHIỆM
• 2.3.1. ĐÁNH GIÁ NGUYÊN LIỆU
• 2.3.2. NGHIÊN CỨU TẠO HỆ HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 2.3.3. NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA HỆ HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA NGUYÊN LIỆU
• 3.2. NGHIÊN CỨU TẠO HỆ PHÂN TÁN HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3.2.1. ẢNH HƯỞNG CỦA PHƯƠNG PHÁP TẠO HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3.2.2. ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT HOẠT ĐỘNG BỀ MẶT
• 3.2.3. ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG ĐỘ CHẤT HĐBM
• 3.2.4. ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN ĐẾN ĐỘ BỀN HỆ
• 3.2.5. ẢNH HƯỞNG CỦA THỜI GIAN ĐÁNH SÓNG SIÊU ÂM
• 3.2.6. ẢNH HƯỞNG CỦA THỂ TÍCH MẪU
• 3.3. PHÂN TÍCH NỒNG ĐỘ HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3.4. NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA HỆ HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3.4.1. XÁC ĐỊNH MIC CỦA HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 3.4.2. XÁC ĐỊNH ĐƯỜNG KÍNH VÒNG KHÁNG KHUẨN
• 3.4.3. KHẢ NĂNG ĐỒNG VẬN CỦA HUYỀN PHÙ NANO PIPERINE
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• DANH MỤC HÌNH
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
• DANH MỤC PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Giới thiệu về nghiên cứu hệ phân tán nano piperine

Nghiên cứu hệ phân tán nano piperine là một phần quan trọng trong lĩnh vực công nghệ hóa học, đặc biệt là trong việc cải thiện khả năng hòa tan và hấp thụ của các hợp chất không tan trong nước. Piperine, một alkaloid tự nhiên có trong hạt tiêu, được biết đến với nhiều đặc tính dược lý như kháng khuẩn, chống oxy hóa và chống viêm. Tuy nhiên, độ tan thấp của piperine trong nước hạn chế ứng dụng của nó. Hệ phân tán nano được nghiên cứu để khắc phục vấn đề này bằng cách giảm kích thước hạt và tăng diện tích bề mặt, từ đó cải thiện độ tan và hiệu quả sinh học. Nghiên cứu này tập trung vào việc tạo ra hệ phân tán nano piperine bằng hai phương pháp: đồng hóa tốc độ cao và đánh sóng siêu âm, đồng thời đánh giá các yếu tố ảnh hưởng đến kích thước hạt và độ ổn định của hệ.

1.1. Mục tiêu và ý nghĩa của nghiên cứu

Mục tiêu chính của nghiên cứu là tạo ra hệ phân tán nano piperine với kích thước hạt nhỏ và độ ổn định cao, từ đó cải thiện khả năng hòa tan và hấp thụ của piperine. Nghiên cứu cũng nhằm đánh giá khả năng kháng khuẩn của hệ phân tán nano piperine đối với các chủng vi sinh vật gây bệnh như Bacillus cereus, Staphylococcus aureus và Pseudomonas aeruginosa. Ý nghĩa của nghiên cứu nằm ở việc mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng công nghệ nano để cải thiện hiệu quả của các hợp chất dược liệu tự nhiên, đặc biệt là những hợp chất có độ tan thấp như piperine.

II. Phương pháp nghiên cứu và kết quả

Nghiên cứu sử dụng hai phương pháp chính để tạo hệ phân tán nano piperine: đồng hóa tốc độ cao và đánh sóng siêu âm. Các yếu tố ảnh hưởng đến kích thước hạt và độ ổn định của hệ được khảo sát, bao gồm nồng độ piperine, loại chất hoạt động bề mặt (như lecithin và sodium stearoyl lactylate (SSL)), thời gian tạo hệ và thể tích mẫu. Kết quả cho thấy phương pháp đánh sóng siêu âm hiệu quả hơn trong việc tạo ra hạt nano với kích thước nhỏ hơn và độ ổn định cao hơn. Hệ phân tán nano piperine 0.5 g/l với SSL 3 g/l cho kích thước hạt 77 nm, trong khi hệ với lecithin 20 g/l cho độ phân bố đồng đều và độ ổn định hơn 5 ngày.

2.1. Khả năng kháng khuẩn của hệ phân tán nano piperine

Hệ phân tán nano piperine được đánh giá khả năng kháng khuẩn đối với các chủng vi sinh vật gây bệnh. Kết quả cho thấy hệ phân tán nano piperine có khả năng ức chế sự phát triển của Bacillus cereus, Staphylococcus aureus và Pseudomonas aeruginosa. Ngoài ra, nghiên cứu cũng khảo sát khả năng đồng vận của hệ phân tán nano piperine với kháng sinh ciprofloxacin, cho thấy hiệu quả tăng cường trong việc ức chế vi khuẩn. Điều này mở ra tiềm năng ứng dụng của hệ phân tán nano piperine trong việc kết hợp với các loại kháng sinh để tăng hiệu quả điều trị.

III. Đánh giá và ứng dụng thực tiễn

Nghiên cứu hệ phân tán nano piperine đã chứng minh được giá trị thực tiễn trong việc cải thiện độ tan và hiệu quả sinh học của piperine. Việc sử dụng công nghệ nano để tạo ra hệ phân tán với kích thước hạt nhỏ và độ ổn định cao không chỉ giúp tăng cường khả năng hấp thụ của piperine mà còn mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng các hợp chất dược liệu tự nhiên. Kết quả nghiên cứu cũng cho thấy tiềm năng ứng dụng của hệ phân tán nano piperine trong việc kết hợp với các loại kháng sinh để tăng hiệu quả điều trị các bệnh nhiễm khuẩn. Đây là một bước tiến quan trọng trong việc phát triển các hệ phân phối thuốc mới, đặc biệt là đối với các hợp chất không tan trong nước.

3.1. Triển vọng và hướng phát triển trong tương lai

Nghiên cứu hệ phân tán nano piperine mở ra nhiều triển vọng trong việc ứng dụng công nghệ nano để cải thiện hiệu quả của các hợp chất dược liệu tự nhiên. Trong tương lai, nghiên cứu có thể tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình sản xuất hệ phân tán nano piperine, cũng như mở rộng ứng dụng của nó trong các lĩnh vực khác như thực phẩm chức năng và mỹ phẩm. Ngoài ra, việc kết hợp hệ phân tán nano piperine với các loại kháng sinh khác cũng là một hướng nghiên cứu đầy tiềm năng, nhằm tăng cường hiệu quả điều trị các bệnh nhiễm khuẩn.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Piperine là một alkaloid chiếm khoảng 5-9% khối lượng hạt tiêu, nổi bật với các hoạt tính sinh học như kháng oxy hóa, chống viêm, ức chế tế bào ung thư và tăng hấp thu các dưỡng chất quan trọng. Tuy nhiên, piperine không tan trong nước, làm giảm đáng kể sinh khả dụng và hiệu quả ứng dụng trong y học và dược phẩm. Công nghệ nano được xem là giải pháp tiềm năng để cải thiện độ tan và sinh khả dụng của các hợp chất kém tan như piperine. Nghiên cứu này tập trung vào việc tạo hệ phân tán nano piperine với nồng độ 0.5 g/l bằng hai phương pháp đồng hóa tốc độ cao rotor-stator và đánh sóng siêu âm, đồng thời khảo sát ảnh hưởng của các yếu tố như nồng độ piperine, loại và nồng độ chất hoạt động bề mặt (lecithin, sodium stearoyl lactylate - SSL), thời gian xử lý và thể tích mẫu đến kích thước hạt và độ bền của hệ. Ngoài ra, luận văn còn đánh giá khả năng kháng khuẩn của hệ nano piperine đối với các chủng vi sinh vật gây bệnh phổ biến như Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, và khảo sát khả năng đồng vận của hệ với kháng sinh ciprofloxacin. Thời gian nghiên cứu từ tháng 1 đến tháng 6 năm 2014 tại Trường Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh. Kết quả nghiên cứu hứa hẹn mở ra hướng phát triển mới cho hệ phân phối thuốc đối với các dược chất không tan trong nước, góp phần nâng cao hiệu quả điều trị và ứng dụng trong y học.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình sau:

• Công nghệ nano và vật liệu nano: Vật liệu nano có kích thước dưới 100 nm, với diện tích bề mặt lớn giúp tăng độ tan, khả năng hấp thu và tính ổn định của dược chất. Các phương pháp tạo hạt nano bao gồm kỹ thuật top-down (đồng hóa cơ, siêu âm) và bottom-up (kết tủa, siêu tới hạn CO2).

• Hệ phân tán nano (nanosuspension): Hệ huyền phù gồm các hạt nano phân tán trong môi trường lỏng, giúp cải thiện độ tan và sinh khả dụng của các hợp chất kém tan.

• Chất hoạt động bề mặt (surfactants): Lecithin và sodium stearoyl lactylate (SSL) được sử dụng để ổn định hệ phân tán, ảnh hưởng đến kích thước hạt và độ bền của hệ.

• Khả năng kháng khuẩn và đồng vận kháng sinh: Đánh giá hoạt tính sinh học của hệ nano piperine thông qua các phương pháp đo nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) và khuếch tán trên giếng thạch đối với các chủng vi khuẩn gây bệnh.

Các khái niệm chính bao gồm kích thước hạt nano, độ bền hệ huyền phù, nồng độ ức chế tối thiểu (MIC), và đồng vận kháng sinh.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu: Nguyên liệu piperine thu được từ Việt Nam, các chất hoạt động bề mặt lecithin và SSL nhập khẩu từ Trung Quốc. Vi sinh vật thử nghiệm gồm 6 chủng phổ biến gây bệnh: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Typhi, Enterococcus faecalis ATCC 29212, Bacillus cereus ATCC 90028, Staphylococcus aureus ATCC 5923.

• Phương pháp tạo hệ phân tán nano: So sánh hai kỹ thuật đồng hóa tốc độ cao rotor-stator và đánh sóng siêu âm (tần số 50 kHz, thời gian 15-60 phút). Các hệ được chuẩn bị với nồng độ piperine 0.5 g/l, bổ sung các chất hoạt động bề mặt ở nhiều nồng độ khác nhau (lecithin 5-20 g/l, SSL 2-5 g/l).

• Phân tích kích thước hạt: Sử dụng máy Laser Diffraction Spectrometry (LDS) để đo kích thước trung bình và phân bố kích thước hạt.

• Đánh giá hàm lượng piperine: Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector PDA bước sóng 343 nm, cùng phương pháp UV-VIS để xác định hàm lượng.

• Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn: Phương pháp khuếch tán trên giếng thạch và xác định nồng độ ức chế tối thiểu MIC theo tiêu chuẩn CLSI, sử dụng môi trường Mueller-Hinton Agar (MHA) và Tryptic Soy Broth (TSB).

• Timeline nghiên cứu: Nghiên cứu được thực hiện trong 6 tháng (01/2014 - 06/2014), bao gồm giai đoạn chuẩn bị nguyên liệu, thử nghiệm tạo hệ nano, phân tích đặc tính vật lý hóa học, đánh giá hoạt tính sinh học và tổng hợp kết quả.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Phương pháp tạo hệ nano hiệu quả: Thiết bị đánh sóng siêu âm cho kết quả tốt hơn phương pháp đồng hóa tốc độ cao về kích thước hạt và độ ổn định. Cụ thể, hệ nano piperine 0.5 g/l với SSL 3 g/l xử lý bằng siêu âm 30 phút đạt kích thước hạt trung bình 77 nm, trong khi phương pháp đồng hóa rotor-stator cho kích thước lớn hơn và phân bố không đồng đều.

2. Ảnh hưởng của chất hoạt động bề mặt: Lecithin ở nồng độ 20 g/l tạo ra hệ phân tán nano piperine có phân bố kích thước đồng đều nhất và độ ổn định kéo dài trên 5 ngày, vượt trội so với SSL và các chất khác. Kích thước hạt dưới 100 nm chiếm tỷ lệ cao nhất khi sử dụng lecithin.

3. Ảnh hưởng của nồng độ piperine và thời gian xử lý: Kích thước hạt giảm khi tăng thời gian đánh sóng siêu âm từ 15 đến 30 phút, tuy nhiên thời gian quá dài không cải thiện đáng kể. Nồng độ piperine 0.5 g/l được xác định là tối ưu để tạo hệ nano ổn định.

4. Khả năng kháng khuẩn và đồng vận kháng sinh: Hệ phân tán nano piperine thể hiện khả năng kháng khuẩn rõ rệt đối với các chủng Bacillus cereus, Staphylococcus aureus và Pseudomonas aeruginosa với đường kính vòng ức chế đạt từ 10-15 mm. Đặc biệt, hệ nano piperine 0.5 g/l phối hợp với kháng sinh ciprofloxacin cho thấy hiệu quả đồng vận, làm tăng khả năng ức chế vi khuẩn so với ciprofloxacin đơn lẻ, giảm MIC của kháng sinh khoảng 20-30%.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy phương pháp siêu âm là kỹ thuật ưu việt trong việc tạo hệ phân tán nano piperine nhờ khả năng tạo ra lực cắt mạnh và hiệu ứng sủi bọt giúp giảm kích thước hạt hiệu quả. Lecithin với cấu trúc phospholipid tự nhiên đóng vai trò chất hoạt động bề mặt lý tưởng, tạo lớp vỏ ổn định bao quanh hạt nano, kéo dài độ bền của hệ trên 5 ngày, phù hợp cho ứng dụng dược phẩm. So với các nghiên cứu trước đây chủ yếu tập trung vào hệ liposome hoặc kết hợp curcumin-piperine, nghiên cứu này cung cấp dữ liệu cụ thể về hệ phân tán nano piperine đơn lẻ với kích thước hạt dưới 100 nm và hiệu quả sinh học rõ ràng.

Khả năng kháng khuẩn của hệ nano piperine được cải thiện so với piperine dạng thô do kích thước nhỏ giúp tăng diện tích tiếp xúc và khả năng thâm nhập vào tế bào vi khuẩn. Hiệu quả đồng vận với ciprofloxacin mở ra tiềm năng ứng dụng trong điều trị các nhiễm khuẩn đa kháng, giảm liều lượng kháng sinh cần thiết, góp phần hạn chế kháng thuốc. Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ phân bố kích thước hạt, bảng so sánh đường kính vòng ức chế và MIC giữa các mẫu thử nghiệm, giúp minh họa rõ ràng hiệu quả của từng điều kiện thử nghiệm.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Ứng dụng phương pháp siêu âm trong sản xuất hệ phân tán nano piperine: Khuyến nghị sử dụng thiết bị siêu âm với tần số 50 kHz, thời gian xử lý 30 phút để đạt kích thước hạt tối ưu (~77 nm) và độ ổn định cao. Thời gian thực hiện trong quy trình sản xuất nên được kiểm soát nghiêm ngặt để đảm bảo chất lượng sản phẩm.

2. Sử dụng lecithin làm chất hoạt động bề mặt chính: Lecithin ở nồng độ 20 g/l được đề xuất làm chất ổn định hệ nano piperine nhằm tăng độ đồng đều kích thước hạt và kéo dài độ bền hệ trên 5 ngày, phù hợp cho các ứng dụng dược phẩm và thực phẩm chức năng.

3. Phát triển sản phẩm phối hợp nano piperine với kháng sinh ciprofloxacin: Khuyến khích nghiên cứu sâu hơn về cơ chế đồng vận và thử nghiệm lâm sàng để ứng dụng trong điều trị các bệnh nhiễm khuẩn đa kháng, giảm liều lượng kháng sinh và tác dụng phụ.

4. Mở rộng nghiên cứu về tính ổn định và hiệu quả sinh học: Đề xuất khảo sát thêm các yếu tố ảnh hưởng như pH, nhiệt độ bảo quản, thời gian lưu trữ dài hạn và thử nghiệm trên các dòng tế bào ung thư hoặc mô hình động vật để đánh giá toàn diện hiệu quả và an toàn của hệ nano piperine.

Các giải pháp trên nên được thực hiện trong vòng 1-2 năm tiếp theo bởi các đơn vị nghiên cứu và doanh nghiệp dược phẩm nhằm thúc đẩy ứng dụng công nghệ nano trong phát triển thuốc và thực phẩm chức năng.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Nhà nghiên cứu và sinh viên ngành Công nghệ Hóa học, Dược học, Công nghệ Sinh học: Luận văn cung cấp kiến thức chuyên sâu về công nghệ nano, phương pháp tạo hệ phân tán nano và kỹ thuật phân tích đặc tính vật lý hóa học, giúp nâng cao hiểu biết và kỹ năng thực nghiệm.

2. Doanh nghiệp sản xuất dược phẩm và thực phẩm chức năng: Thông tin về quy trình tạo hệ nano piperine và khả năng đồng vận với kháng sinh hỗ trợ phát triển sản phẩm mới có hiệu quả sinh học cao, cải thiện sinh khả dụng và giảm tác dụng phụ.

3. Bác sĩ và chuyên gia y tế: Hiểu rõ về tiềm năng ứng dụng nano piperine trong điều trị các bệnh nhiễm khuẩn và hỗ trợ điều trị ung thư, giúp tư vấn và lựa chọn liệu pháp phù hợp cho bệnh nhân.

4. Cơ quan quản lý và hoạch định chính sách y tế: Cung cấp cơ sở khoa học để đánh giá và khuyến khích phát triển công nghệ nano trong ngành dược, góp phần nâng cao chất lượng thuốc và an toàn cho người tiêu dùng.

Câu hỏi thường gặp

1. Nano piperine là gì và tại sao cần tạo hệ nano?
   Nano piperine là hệ phân tán các hạt piperine có kích thước nano (<100 nm) trong môi trường lỏng. Việc tạo hệ nano giúp tăng độ tan, sinh khả dụng và hiệu quả sinh học của piperine vốn không tan trong nước, từ đó nâng cao ứng dụng trong y học và dược phẩm.

2. Phương pháp nào hiệu quả nhất để tạo hệ nano piperine?
   Phương pháp đánh sóng siêu âm được chứng minh hiệu quả hơn phương pháp đồng hóa rotor-stator, cho kích thước hạt nhỏ hơn (khoảng 77 nm) và độ ổn định cao hơn, nhờ tác động lực cắt mạnh và hiệu ứng sủi bọt giúp phá vỡ hạt lớn.

3. Chất hoạt động bề mặt nào phù hợp để ổn định hệ nano piperine?
   Lecithin ở nồng độ 20 g/l được xác định là chất hoạt động bề mặt tối ưu, tạo ra hệ phân tán có phân bố kích thước đồng đều và độ bền trên 5 ngày, vượt trội so với sodium stearoyl lactylate (SSL) và các chất khác.

4. Nano piperine có khả năng kháng khuẩn như thế nào?
   Hệ nano piperine thể hiện khả năng kháng khuẩn rõ rệt với các chủng Bacillus cereus, Staphylococcus aureus và Pseudomonas aeruginosa, với đường kính vòng ức chế từ 10-15 mm, cải thiện so với piperine dạng thô nhờ kích thước hạt nhỏ và diện tích tiếp xúc lớn.

5. Khả năng đồng vận giữa nano piperine và kháng sinh ciprofloxacin có ý nghĩa gì?
   Sự đồng vận giúp tăng hiệu quả kháng khuẩn, giảm nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của ciprofloxacin khoảng 20-30%, từ đó có thể giảm liều lượng kháng sinh cần dùng, hạn chế tác dụng phụ và nguy cơ kháng thuốc.

Kết luận

• Đã phát triển thành công hệ phân tán nano piperine với kích thước hạt trung bình khoảng 77 nm bằng phương pháp đánh sóng siêu âm, vượt trội so với phương pháp đồng hóa rotor-stator.
• Lecithin ở nồng độ 20 g/l là chất hoạt động bề mặt tối ưu, giúp hệ nano có phân bố kích thước đồng đều và độ ổn định trên 5 ngày.
• Hệ nano piperine thể hiện khả năng kháng khuẩn hiệu quả với các chủng vi khuẩn gây bệnh phổ biến và có khả năng đồng vận với kháng sinh ciprofloxacin, tăng hiệu quả điều trị.
• Nghiên cứu mở ra hướng phát triển mới cho công nghệ phân phối thuốc đối với các dược chất không tan trong nước, góp phần nâng cao sinh khả dụng và hiệu quả điều trị.
• Đề xuất tiếp tục nghiên cứu mở rộng về tính ổn định, hiệu quả sinh học và ứng dụng lâm sàng trong vòng 1-2 năm tới, đồng thời phát triển sản phẩm phối hợp nano piperine với kháng sinh.

Hành động tiếp theo là triển khai thử nghiệm quy mô lớn và nghiên cứu lâm sàng để đưa hệ nano piperine vào ứng dụng thực tiễn, đồng thời khuyến khích hợp tác giữa các viện nghiên cứu và doanh nghiệp dược phẩm nhằm thúc đẩy chuyển giao công nghệ.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1: TONG QUAN. SG 11121 1E 5111512111 11111211113 12111 1H11 TT ngu rke 2 1.GIỚI THIEU VE PIPEERINEE,. - St SE SE SE E9 3E EeE SE ekrkrereesed 2 1.1-Tính chất vật lý.Tính chất hóa hỌC.Phương pháp tách chiết piperine từ tiÊu.Cac ứng dụng CUA PIPETING .TONG QUAN VE CÔNG NGHỆ NANO. KY thuật cơ bản.ĐẶC TINH CUA CÁC VI KHUAN THÍ NGHIỆM.ESCh@FICHhỈ( COLL.

nọ ng 12 vi 1.EHf€TOCOCCHS fACCAUIS. SG G0 nọ nh 13 1.BaCIIUS COTEUS 10nố.CAC NGHIÊN CUU LIEN QUAN.Y NGHĨA MỤC TIÊU CUA DE TAL .NOI DUNG NGHIÊN CỨU. - - G6 E9EE9E 2E E$E E12 SE reesed 19 2.NGUYEN LIEU HÓA CHAT THIET Bl.PHUONG PHAP NGHIÊN CUU. -- + TH TH gio 22 2.Xác định hàm lượng piperine .Phan bố kích thước hat bằng LDS .Phương pháp khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật.NỘI DUNG THUC NGHIỆM.Đánh giá nguyên lIỆU .Nghiên cứu tạo hệ huyền phù nano piperine .---- ¿5+5 + s+s+se+szx+zscs2 27 2.Nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của hệ huyền phù nano piperine.

29 CHUONG 3: KET QUA VA BAN LUẬN. G5 E62 E312 SE SE seEekeereree 31 3.DANH GIA DAC TINH CUA NGUYEN LIỆU.NGHIÊN CUU TẠO HE PHAN TAN HUYEN PHÙ NANO PIPERINE.Ảnh hưởng của phương pháp tạo huyền phù nano piperine .Anh huong cua chat hoat dong DE mặt .Ảnh hưởng của nông độ chất HĐBM.Ảnh hưởng của thời gian đến độ bên hệ.Ảnh hưởng của thời gian đánh sóng siêu âm.Ảnh hưởng của thể tích mẫuu.---- + 2+ 2 2+E+S£SE+E+E£E£E+EEEE£EeEEEErErrrrererrees 44 3.Phân tích nồng độ huyền phù nano piperine.NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHANG KHUAN CUA HỆ HUYEN PHÙ NANO PIPERIINEE.-- -- - G5 00 nọ TH ve 49 3.Xác định MIC của huyền phù nano piperine .Xác định đường kính vòng kháng khuẩn.Khả năng đồng vận của huyền phù nano piperine.---- - 25s szs+sze: 53 CHUONG 4: KET LUẬN VÀ KIEN NGHI .ececcccccccecesesccsscscecessesevecsceceesevecscscecevevaceees 58 TAI LIEU THAM KHẢO. 63 vill DANH MUC HINH Hình 1.1: Công thức cầu tạo của PiPerine. 555cc SE S31 E2 2111511111111 tk.2: Phản ứng thủy phân muối piperine bằng NaOH.3: Phản ứng trung hòa piperin bằng HCl .- + + 55+ SE‡E‡ESEeErrkrterrsred 3 Hình 1.4: Quá trình sứ dụng CO; siêu tới han để tạo hạt nano thuOC .5: Thiết bị đồng hóa CƠ LOCOK-StALOP veseccccecscssessscesssssesvesesssssesesessssssssssesssssesssseseseess 10 Hình 1.6: Hình chụp TEM piperine-encapsulated liposomes với lớp bao PEG .1: Sơ đồ nghiên cứu tÔHg QỐTF.3: So sánh độ đục giữa huyén phù vi sinh vật va McFarland 0.2: Phương pháp chung tạo hệ huyền phù nano pÏD€FÌH€.--5- 55255 cs+s+sccs: 27 Hình 3.

1: Nguyên liệu ĐỘT PiPervine. o0 nọ nh 3l Hình 3.2: Sắc kí đồ HPLC của piperine Chuẩn .---+-:- 552 5< SE +E+E‡ESEEEEEEEESEerrkrerreree 32 Hình 3.3: Anh hưởng của chất HDBM đến kích thước hạt .- + 2555+s+c+csccce+sceee 34 Hình 3.4: Anh hưởng nông độ SSL đến kích thước hạt nano piperine.5: Kế: quả LDS phân bố kích thước hạt tại các nông độ SSL khác nhau.6: Phan trăm kích thước hạt dưới 100 nm và dưới 1000 nm ở các nông độ SSL '3/1/108/1/177/SE0000n0n858Ẻ5.7: Anh hướng nông độ lecithin đến kích thước hat nano piperine.8: Kết quả LDS phân bố kích thước hạt tại các nông độ Lecithin khác nhau.9: Phần tram kích thước hạt dưới 100 nm và dưới 1000 nm ở các nông độ Lecithin '3/1/108/1/177/SE0000n0n858Ẻ5.10: Anh hưởng của thời gian đánh sóng siêu âm đến kích thước hạt .11: Anh hưởng của thời gian đánh sóng siêu âm đến phan trăm của kích thước hạt Hình 3.13: Anh hưởng của thé tích mẫu đến phan trăm của hạt có kích thước lớn hơn 08.14: Đường chuẩn của piperine nguyên ÏiỆU .- + 2555 cc+cSe£e+e+tsesrererereee 46 Hình 3.15:ĐÐường kính vòng kháng khuẩn đối với vi khuẩn Escherichia coli.16: Cách tiến hành và doc kết quả thí nghiệm dong vận của piperine .17: Kết qua đồng vận kháng vì khuẩn Escherichia coli giữa Amoxcillin với SSL.18: Khả năng dong vận doi với ciprofloxacin ở nông độ 0.125 g/l với vi khuẩn N/7///A/1099018/AN/1/112 SEN ẽgéẽdẦẦdSỂẦẢ.19: Khả năng dong vận doi với ciprofloxacin ở nông độ 0.125 g/l với vi khuẩn 2ý3/114///7/. 56 DANH MỤC BANG Bảng 2.1: Nguyên liệu, hóa chất thiết Dị. - 5-5-5 SeSESE St SE 1151111111111 111111.2: Thành phan hệ huyén phù piperine trong thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của Gt DBM 800000009886.1: Đặc tinh của Nguy€n [CU .2: Độ dm của bột piperine nguyên LiCU .----+- 5-5-5525 SESE+E‡ESEEEEEEESEerrrkrreree 3l Bảng 3.3: So sánh kích thước hạt được tạo bởi hai phương PAD .4: Anh hưởng thời gian đến kích thước của hệ huyén phù nano piperine với chất 7977/06) .5: Anh hưởng thời gian đến kích thước của hệ huyén phù nano piperine với chất /Z7/277/8/24/7/7/,0 0 07ẼẼnẺ8e.6: Nong độ piperine theo phương pháp quang phô háp thu UV-VIS.7: Số liệu HPLC trên mẫu chuẩn và mẫu khảo sắt .- + 2©5©c+s+c+csccce+sceee 48 Bảng 3.8: Kết quả nông độ piperine theo phương pháp HPLC.

5 ccs5scscs+sccse 48 Bang 3.9: Giá tri MIC với các vi sinh vật thí ng hÄỆHH .10: Đường kính vòng kháng khuẩn doi với vi khuẩn Staphylococcus aureus và 2ý3/114///7/.11: Đường kính vòng kháng khuẩn kết hợp .--- ¿5c cccscscccecertsrererrereee 54 xi DANH MUC TU VIET TAT HDBM Hoạt động bề mặt LDS Laser difraction spectrometry (Quang pho nhiễu xa laser) DNA Deoxyribo nucleic acid PEG Poly ethylene glycol SSL Sodium stearoyl lactylate XRD X-ray diffraction (Nhiéu xa tia X) UV- VIS Ultraviolet—visible (vùng ánh sáng cực tím- nhìn thay) TWEEN 80 Polyoxyethylene (80) sorbitan monooleate rpm round per minute (Vong trén phut) MIC Minimum inhabitation concentration (Nông độ ức chế tối thiểu) VSV Vị sinh vật TSB Tryptic Soy Broth (Môi trường dinh dưỡng lỏng) TSA Tryptic Soy Agar (Môi trường dinh dưỡng ran) MHA Mueller — Hinton Agar (Môi trường dinh dưỡng ran) VKI Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 VK2 Escherichia coli ATCC 25922 VK3 Salmonella Typhi VK4 Enterococcus faecalis ATCC 29212 VK5 Bacillus cereus ATCC 90028 VK6 Staphylococcus aureus ATCC 5923 xi DANH MỤC PHỤ LỤC Phụ lục 1: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0. Thể tích tổng 100 ml. Sử dụng thiết bị đánh sóng siêu âm trong 30 phút, tần số 50 KHz.---- + 2 + 2 2+s+£+£2£z£s+Ezezcze 63 Phụ lục 2: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0. Thể tích tong 100 ml.

Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao trong 15 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 63 Phụ lục 3: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0. Thể tích tong 100 ml. Sử dụng thiết bị đánh sóng siêu âm trong 15 phút, tần số 50 KHZ.--- 63 Phụ lục 4: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0.

Thể tích tong 100 ml. Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao trong 45 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 64 Phụ lục 5: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0.Thé tích tong 100 ml. Bang thiết bị đánh sóng siêu âm QSONICA trong 45 phút, tần số 50 kHz.

64 Phụ lục 6: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0.Thé tích tổng 100 ml. Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 15 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 64 Phụ lục 7: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0. Thể tích tổng 100 ml.

Bang thiết bị đánh sóng siêu âm QSONICA 15 phút, tần số 50 kHz. 65 Phụ lục 8: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0.5 g/l (Lecithin 10 g/l)Thé tích tổng 100 ml. Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 45 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 65 Phụ lục 9: Sự phân bồ kích thước hạt piperine 0.5 g/l (Lecithin 10 g/l) Thể tích tổng 100 ml.

Bang thiết bị đánh sóng siêu âm QSONICA trong 45 phút, tần số 50 kHz. 65 Phụ lục 10: Sự phân bố kích thước hạt piperine 0.Thé tích tổng 100 ml. Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 15 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 65 Phụ lục 11: Sự phân bố kích thước hạt piperine 0.Thé tích tổng 100 ml.

Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 45 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 66 Phụ lục 12: Sự phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tổng 100 ml. Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 15 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 66 Phụ lục 13: Sự phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tổng 100 ml.

Sử dụng thiết bị đồng hóa tốc độ cao 45 phút, tốc độ 3600 vòng/phút. 66 xiii Phụ lục 14: Su phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 KHz,. 66 Phụ lục 15: Sw phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tong 100 ml.Bang thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 kHz.Thoi gian DO [Ut 1 HØÀY.

nọ 67 Phụ lục 16: Sw phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tổng 100 ml.Bang thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 kHz.Thoi gian DAO [UU 3 AY. 67 Phụ lục 17: Su phân bố kích thước hat piperine 0.Thé tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 kHz. Thời gian DAO [UU S AY.

67 Phụ lục 18: Sw phân bố kích thước hat piperine 0. Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 KHz,. 68 Phụ lục 19: Su phân bố kích thước hạt piperine 0.Thể tích tổng 100 ml.

Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 15 phút, tan số 50 kH¿. Thời gian DAO [Uru Ï HỢÀN. cc G9901 11 0 re 68 Phụ lục 20: Su phân bố kích thước hat piperine 0.5 gl (SSL 3 g/I)Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 15 phút, tan số 50 kHz.

Thời gian DAO [UU 3 AY. 68 Phụ lục 21: Sw phân bố kích thước hạt piperine 0.5 gl (SSL 3 g/)Thé tích tổng 12. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan S050 KHZ. 68 Phụ lục 22: Sw phân bố kích thước hạt piperine 0.

Thể tích tổng 25 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 KHz,. 69 Phụ lục 23: Su phân bố kích thước hạt piperine 0.Thể tích tong 25 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 KHZ.

69 Phụ lục 24: Sự phân bố kích thước hạt piperine 0.5 g/l (SSL 3 g/1) Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan S050 KHZ. 69 XIV Phụ lục 25: Sự phân bố kích thước hạt piperine 0.Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm QSONICA trong 30 phút, tan sõ50 kHz.

Thời gian DO [Ut 1 HØÀY. nọ 69 Phụ lục 26: Su phân bố kích thước hạt piperine 0.5 gl (SSL 3 gl) Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong30phút, tan sõ50 kHz.Thoi gian bảo 0/88/1288.- 70 Phụ lục 27: Su phân bố kích thước hạt piperine 0. Thể tích tổng 100 ml.

Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm OSONICA trong 30 phút, tan số 50 kHz. Thời gian DAO [UU S AY. 70 Phụ lục 28: Su phân bố kích thước hat piperine 0.5 gl (SSL 3 gf) Thể tích tổng 100 ml. Bằng thiết bị đánh sóng siêu âm QSONICA trong45phút, tan số 50 KHZ.

70 Phụ lục 29: Sw phân bố kích thước hạt piperine 0.5 gl (SSL 3 gf) Thể tích tổng 100 ml.