Khảo Sát Thành Phần Hóa Học Cao n-Hexane và Ethyl Acetate Từ Lá Cây Trâm Bau (Combretum quadrangulare Kurz)

• Tác giả: Đào Thị Bích Ngọc
• Người hướng dẫn: TS. Dương Thúc Huy
• Trường học: Trường Đại Học Sư Phạm Thành Phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ
• Đề tài: Khảo Sát Thành Phần Hóa Học Cao n-Hexane và Ethyl Acetate Từ Lá Cây Trâm Bau
• Loại tài liệu: luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2021
• Địa điểm: Thành Phố Hồ Chí Minh

• LỜI CAM ĐOAN
• 1. CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU
• 1.1. Mô tả về cây Trâm bầu (Combretum quadrangulare Kurz)
• 1.2. Giới thiệu chung về cây Combretum quadrangulare Kurz
• 1.3. Mô tả thực vật cây Combretum quadrangulare Kurz
• 1.4. Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây Combretum quadrangulare Kurz
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN — KIẾN NGHỊ
• PHỤ LỤC
• Phụ lục 1. Phổ 1H-NMR của TBI trong Acetone
• Phụ lục 2. Phổ 13C-NMR của TBI trong Acetone
• Phụ lục 3. Phổ 1H-NMR của TB2 trong Acetone
• Phụ lục 4. Phổ 13C-NMR của TB2 trong Acetone
• Phụ lục 5. Phổ HMBC của TB2 trong Acetone
• Phụ lục 6. Phổ 1H-NMR của TB3 trong Acetone
• Phụ lục 7. Phổ 13C-NMR của TB3 trong Acetone
• Phụ lục 8. Phổ 1H-NMR của TB4 trong Acetone
• Phụ lục 9. Phổ 13C-NMR của TB4 trong Acetone
• Phụ lục 10. Phổ 1H-NMR của TBS trong Acetone
• Phụ lục 11. Phổ 13C-NMR của TBS trong Acetone
• Phụ lục 12. Phổ 1H-NMR của TB6 trong Acetone
• Phụ lục 13. Phổ 13C-NMR của TB6 trong Acetone
• Phụ lục 14. Phổ 1H-NMR của TB7 trong Acetone
• Phụ lục 15. Phổ 13C-NMR của TB7 trong Acetone
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Tổng Quan Thành Phần Hóa Học Lá Cây Trâm Bau Có Gì

Cây Trâm Bau (Combretum quadrangulare Kurz) là một loại cây phổ biến ở Đông Nam Á, đặc biệt là các tỉnh miền nam Việt Nam. Lá cây Trâm Bau từ lâu đã được sử dụng trong y học cổ truyền với nhiều công dụng tiềm năng. Nghiên cứu hiện đại tập trung vào việc khám phá thành phần hóa học lá cây Trâm Bau để giải mã các hoạt tính sinh học của nó. Các hợp chất được chiết xuất, đặc biệt là cao n-Hexane và cao Ethyl Acetate, đang được phân tích sâu rộng. Việc xác định các hợp chất trong lá cây Trâm Bau có thể mở ra những ứng dụng mới trong y học và dược phẩm. Bài viết này đi sâu vào các thành phần hóa học chính được tìm thấy trong chiết xuất lá cây Trâm Bau, đặc biệt là phân đoạn n-Hexane và Ethyl Acetate.

1.1. Giá trị y học cổ truyền của cây Trâm Bau

Cây Trâm Bau từ lâu đã được sử dụng trong y học cổ truyền Việt Nam và các nước Đông Nam Á khác để điều trị nhiều bệnh. Người dân thường dùng lá, vỏ cây và rễ để làm thuốc. Các bài thuốc từ cây Trâm Bau được cho là có tác dụng kháng viêm, kháng khuẩn và giảm đau. Nghiên cứu hiện đại đang cố gắng chứng minh và giải thích cơ chế tác dụng của những bài thuốc này thông qua việc phân tích thành phần hóa học thực vật. Cây mang lại những ứng dụng y học quý giá trên thế giới nói chung và tại Việt Nam nói riêng.

1.2. Mục tiêu nghiên cứu thành phần hóa học lá Trâm Bau

Mục tiêu chính của các nghiên cứu về thành phần hóa học lá cây Trâm Bau là cô lập và xác định các hợp chất có hoạt tính sinh học. Các nhà khoa học sử dụng các phương pháp chiết xuất khác nhau, bao gồm sử dụng n-Hexane và Ethyl Acetate, để phân tách các hợp chất từ lá cây. Sau đó, các hợp chất được xác định bằng các kỹ thuật phân tích hiện đại như sắc ký khí khối phổ (GC-MS) và sắc ký lớp mỏng (TLC). Việc xác định các hợp chất này sẽ giúp hiểu rõ hơn về tác dụng dược lý của lá cây Trâm Bau.

II. Chiết Xuất Cao N Hexane Ethyl Acetate Lá Trâm Bau Cách Nào

Việc chiết xuất cao n-Hexane và cao Ethyl Acetate từ lá cây Trâm Bau là một bước quan trọng để phân tích thành phần hóa học của nó. Quá trình này thường bắt đầu bằng việc nghiền nhỏ lá cây khô. Sau đó, lá cây được ngâm trong dung môi, thường là methanol. Dịch chiết methanol sau đó được phân đoạn bằng các dung môi khác nhau, bao gồm n-Hexane và Ethyl Acetate. Mỗi phân đoạn này chứa một tập hợp các hợp chất khác nhau, cho phép các nhà khoa học tập trung vào các nhóm hợp chất cụ thể. TS. Dương Thúc Huy, người hướng dẫn luận văn, đã có nhiều đóng góp vào việc tối ưu hóa kỹ thuật chiết xuất cao thực vật trong nghiên cứu này.

2.1. Vai trò của dung môi N Hexane trong chiết xuất

N-Hexane là một dung môi không phân cực, có khả năng hòa tan các hợp chất không phân cực như lipid, carotenoid và một số triterpenoid. Việc sử dụng n-Hexane giúp loại bỏ các hợp chất này khỏi lá cây, tạo điều kiện thuận lợi cho việc phân tích các hợp chất phân cực hơn. Phân đoạn cao n-Hexane thường chứa các hợp chất có hoạt tính kháng khuẩn và chống oxy hóa. Độ tinh khiết n-Hexane ảnh hưởng lớn đến hiệu quả chiết xuất.

2.2. Vai trò của dung môi Ethyl Acetate trong chiết xuất

Ethyl Acetate là một dung môi phân cực trung bình, có khả năng hòa tan các hợp chất phân cực hơn so với n-Hexane, như flavonoid, alkaloid và saponin. Phân đoạn cao Ethyl Acetate thường chứa các hợp chất có hoạt tính chống viêm và chống ung thư. Việc sử dụng Ethyl Acetate giúp chiết xuất các hợp chất này từ lá cây, mở ra cơ hội nghiên cứu ứng dụng của cao Ethyl Acetate Trâm Bau. Tỉ lệ pha trộn n-Hexane: Ethyl Acetate cũng được sử dụng (ví dụ, 50:50) để chiết xuất các hợp chất có độ phân cực trung gian.

2.3. Quy trình cô lập hợp chất từ cao n hexane ethyl acetate

Sau khi có được cao phân đoạn n-hexane: ethyl acetate, quy trình cô lập các hợp chất bao gồm nhiều bước sắc ký khác nhau. Sơ đồ 2 trong tài liệu gốc mô tả chi tiết quy trình này. Các phương pháp sắc ký sử dụng silica gel pha thường, pha đảo, cột Sephadex LH-20 cùng với các dung môi thông thường trong phòng thí nghiệm như n-hexane, chloroform, ethyl acetate, acetone, methanol, nước. Mục tiêu là tách các hợp chất thành các phân đoạn tinh khiết hơn để phân tích cấu trúc.

III. Phân Tích Hóa Học Định Danh Hợp Chất Trong Lá Cây Trâm Bau

Sau khi chiết xuất và phân đoạn, các hợp chất trong cao n-Hexane và cao Ethyl Acetate được định danh bằng các phương pháp phân tích hóa học hiện đại. Các kỹ thuật phổ biến bao gồm sắc ký khí khối phổ (GC-MS), sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) và phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR). Phân tích hóa học thực vật này giúp xác định cấu trúc và hàm lượng của các hợp chất có trong lá cây. Thông tin này rất quan trọng để hiểu rõ hơn về hoạt tính sinh học của lá cây Trâm Bau.

3.1. Sắc ký khí khối phổ GC MS Nguyên tắc và ứng dụng

Sắc ký khí khối phổ (GC-MS) là một kỹ thuật phân tích mạnh mẽ được sử dụng để xác định các hợp chất bay hơi. Trong GC-MS, các hợp chất được tách ra dựa trên điểm sôi của chúng và sau đó được phát hiện bằng khối phổ kế. Khối phổ kế cung cấp thông tin về khối lượng phân tử và cấu trúc của các hợp chất, cho phép các nhà khoa học xác định chúng một cách chính xác. Dữ liệu GC-MS giúp định danh các thành phần chính trong cao n-Hexane và cao Ethyl Acetate.

3.2. Phổ cộng hưởng từ hạt nhân NMR Xác định cấu trúc phân tử

Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) là một kỹ thuật phân tích mạnh mẽ khác được sử dụng để xác định cấu trúc của các hợp chất hữu cơ. NMR dựa trên tương tác giữa hạt nhân nguyên tử và từ trường. Bằng cách phân tích các tín hiệu NMR, các nhà khoa học có thể xác định số lượng và vị trí của các nguyên tử khác nhau trong một phân tử. Dữ liệu NMR rất quan trọng để xác định cấu trúc của các hợp chất mới được cô lập từ lá cây Trâm Bau. Nghiên cứu sử dụng các phương pháp phổ nghiệm hiện đại (1D, 2D- NMR …) để dự đoán cấu trúc của các hợp chất cô lập.

3.3. Xác định cấu trúc hợp chất TB1 TB2 TB3 ... TB7

Luận văn của Đào Thị Bích Ngọc đã khảo sát cấu trúc của nhiều hợp chất, từ TB1 đến TB7, bằng các phương pháp phổ nghiệm. Các hình ảnh về cấu trúc hóa học của các hợp chất này, cũng như các hợp chất so sánh, được trình bày chi tiết trong tài liệu gốc. Ví dụ, hình 3 cho thấy cấu trúc hóa học của TB6 và các hợp chất so sánh. Bảng so sánh dữ liệu phổ 1H-NMR và 13C-NMR cũng được sử dụng để xác định cấu trúc.

IV. Ứng Dụng Dược Lý Hoạt Tính Sinh Học Lá Cây Trâm Bau Như Thế Nào

Sau khi xác định thành phần hóa học, bước tiếp theo là nghiên cứu hoạt tính sinh học của lá cây Trâm Bau. Các nghiên cứu in vitro và in vivo được thực hiện để đánh giá tiềm năng dược lý của các hợp chất được cô lập. Các hoạt tính sinh học được nghiên cứu bao gồm kháng khuẩn, chống viêm, chống oxy hóa và chống ung thư. Việc xác định tác dụng dược lý của lá cây Trâm Bau có thể dẫn đến việc phát triển các loại thuốc mới và các sản phẩm chăm sóc sức khỏe tự nhiên.

4.1. Hoạt tính ức chế enzyme alpha glucosidase

Một trong những hoạt tính sinh học được nghiên cứu trong luận văn là khả năng ức chế enzyme alpha-glucosidase. Enzyme alpha-glucosidase đóng vai trò quan trọng trong quá trình tiêu hóa carbohydrate. Ức chế enzyme này có thể giúp kiểm soát lượng đường trong máu, làm cho nó trở thành một mục tiêu tiềm năng cho việc điều trị bệnh tiểu đường. Bảng 2 trong tài liệu gốc trình bày giá trị IC50 của các cao phân đoạn đối với enzyme alpha-glucosidase.

4.2. Khả năng kháng khuẩn và chống oxy hóa của lá Trâm Bau

Nghiên cứu cho thấy lá cây Trâm Bau có khả năng kháng khuẩn đối với một số loại vi khuẩn gây bệnh. Các hợp chất phenolic và flavonoid trong lá cây có thể góp phần vào hoạt tính kháng khuẩn này. Ngoài ra, lá cây Trâm Bau cũng có hoạt tính chống oxy hóa, giúp bảo vệ tế bào khỏi tổn thương do các gốc tự do. Hoạt tính này có thể liên quan đến sự hiện diện của các hợp chất flavonoid và terpenoid.

4.3. Tiềm năng chống ung thư của chiết xuất từ lá cây Trâm Bau

Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng chiết xuất từ lá cây Trâm Bau có thể có tiềm năng chống ung thư. Các hợp chất trong lá cây có thể ức chế sự phát triển của tế bào ung thư và gây ra quá trình chết tế bào theo chương trình (apoptosis). Tuy nhiên, cần có thêm nhiều nghiên cứu để xác định các hợp chất chịu trách nhiệm cho hoạt tính chống ung thư và để đánh giá hiệu quả của chúng trong các mô hình in vivo.

V. Kết Luận Hướng Phát Triển Nghiên Cứu Lá Trâm Bau Tới Đâu

Nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của lá cây Trâm Bau đã đạt được những tiến bộ đáng kể. Việc xác định các hợp chất trong cao n-Hexane và cao Ethyl Acetate đã cung cấp những hiểu biết sâu sắc hơn về tiềm năng dược lý của cây này. Tuy nhiên, vẫn còn nhiều lĩnh vực cần được khám phá thêm. Các nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào việc đánh giá hiệu quả của các hợp chất cô lập trong các mô hình in vivo và tiến hành các thử nghiệm lâm sàng để đánh giá tính an toàn và hiệu quả của chúng ở người. Ngoài ra, cần có thêm nghiên cứu để xác định các cơ chế tác dụng của các hợp chất này và để phát triển các phương pháp chiết xuất và tinh chế hiệu quả hơn.

5.1. Đánh giá toàn diện hoạt tính sinh học in vivo

Nhiều nghiên cứu hiện tại chủ yếu tập trung vào các thử nghiệm in vitro. Bước tiếp theo quan trọng là đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất cô lập trong các mô hình in vivo. Điều này sẽ giúp xác định hiệu quả của chúng trong một môi trường sinh học phức tạp hơn và cung cấp thông tin về dược động học và dược lực học của chúng.

5.2. Nghiên cứu cơ chế tác dụng ở cấp độ phân tử

Để hiểu rõ hơn về tác dụng dược lý của lá cây Trâm Bau, cần có các nghiên cứu để xác định cơ chế tác dụng của các hợp chất cô lập ở cấp độ phân tử. Điều này sẽ giúp xác định các mục tiêu phân tử mà các hợp chất này tác động vào và cung cấp thông tin về các con đường tín hiệu mà chúng tham gia vào.

5.3. Phát triển phương pháp chiết xuất và tinh chế hiệu quả hơn

Việc phát triển các phương pháp chiết xuất và tinh chế hiệu quả hơn sẽ giúp tăng năng suất của các hợp chất mong muốn và giảm chi phí sản xuất. Các phương pháp mới như chiết xuất bằng chất lỏng siêu tới hạn và sắc ký lỏng hiệu năng siêu cao có thể được sử dụng để cải thiện hiệu quả của quá trình chiết xuất và tinh chế.