Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá hoạt tính kháng viêm của cây dây quai bị tetrastigma strumarum planch gagnep ở việt nam

Nghiên cứu cây Dây Quai Bị (Tetrastigma strumarum) tại Việt Nam: Thành phần hóa học, hoạt tính kháng viêm. Tìm hiểu tiềm năng dược liệu quý giá.

• Tác giả: Dinh Duy Hung
• Người hướng dẫn: PTS. Phan Tứ Quý
• Trường học: Học Viện Khoa Học Và Công Nghệ
• Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ
• Đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá hoạt tính kháng viêm của cây Dây Quai Bị (Tetrastigma strumarium (Planch.)) ở Việt Nam
• Loại tài liệu: Luận Văn Thạc Sĩ
• Năm xuất bản: 2024
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CÁC BẢNG
• DANH MỤC CÁC HÌNH
• DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT
• ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
• 1.1. Đặc điểm thực vật và công dụng của các thực vật chi Tetrastigma
• 1.1.1. Đặc điểm thực vật
• 1.1.2. Công dụng
• 1.2. Thành phần hóa học của các thực vật chi Tetrastigma
• 1.2.1. Flavonoid
• 1.2.2. Polysaccharides và monosaccharide
• 1.2.3. Terpenoid
• 1.2.4. Steroid
• 1.2.5. Phenylpropanoid
• 1.2.6. Các hợp chất khác
• 1.3. Hoạt tính sinh học
• 1.3.1. Hoạt tính chống ung thư
• 1.3.2. Hoạt tính chống oxi hóa
• 1.3.3. Hoạt tính kháng viêm và giảm đau
• 1.3.4. Hoạt tính bảo vệ gan
• 1.3.5. Hoạt tính chống tiểu đường
• 1.3.6. Hoạt tính kháng virus
• 1.3.7. Hoạt tính khác
• 1.4. Giới thiệu về Dây Quai bị
• 2. CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Phương pháp nghiên cứu
• 2.2.1. Phương pháp chiết xuất
• 2.2.2. Phương pháp phân lập hợp chất
• 2.2.3. Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất
• 2.2.4. Phương pháp thử nghiệm hoạt tính kháng viêm
• 2.2.5. Đánh giá hoạt tính chống oxi hóa in vitro
• 2.3. Thu nhận các dịch chiết từ dây quai bị
• 2.4. Phân lập và tinh chế các chất từ cặn ethyl acetate của dây quai bị
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong dây quai bị
• 3.1.1. Hợp chất flavonoid
• 3.1.2. Hợp chất triterpenoid: fagarasterol (1)
• 3.1.3. Hợp chất steroid: daucosterol (5)
• 3.2. Kết quả về thử hoạt tính chống oxi hóa
• 3.3. Kết quả về thử hoạt tính kháng viêm
• KẾT LUẬN
• DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Dây Quai Bị Tiềm Năng Dược Liệu Việt Nam Tổng Quan

Dây Quai Bị, với tên khoa học Tetrastigma strūmarium, là một chi thuộc họ Vitaceae, sở hữu tiềm năng lớn về dược liệu tại Việt Nam. Chi Tetrastigma có hơn 100 loài phân bố rộng khắp châu Á và châu Đại Dương, trong đó có 39 loài được tìm thấy ở Việt Nam. Các nghiên cứu trước đây đã chứng minh chi này có thành phần hóa học thú vị và dược tính tiềm năng, có thể sử dụng làm thực phẩm và phát triển thành các thuốc mới. Nghiên cứu về thành phần hóa học Dây Quai Bị và các hoạt tính sinh học, đặc biệt là hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị, đang được quan tâm để khai thác tối đa giá trị dược liệu quý giá này. Việc tìm hiểu sâu hơn về dược tính của Dây Quai Bị không chỉ góp phần bảo tồn nguồn gen quý hiếm mà còn mở ra cơ hội phát triển các sản phẩm chăm sóc sức khỏe từ thiên nhiên.

1.1. Phân Bố và Đặc Điểm Thực Vật của Dây Quai Bị

Các loài thực vật chi Tetrastigma dạng dây leo, lá chét 3-7, không lông và mỏng. Cụm hoa mọc ở nách lá, hoa đơn tính. Quả thường hình cầu hoặc bầu dục, chứa đến 2 hạt. Tại Việt Nam, Dây Quai Bị Việt Nam phân bố chủ yếu ở các tỉnh miền núi phía Bắc. Việc xác định đúng loài và khu vực phân bố rất quan trọng cho công tác thu hái và bảo tồn nguồn dược liệu. Theo ghi nhận, mẫu dây quai (7erasfigma strumarium) được thu ở Tuyên Quang vào tháng 09 năm 2022.

1.2. Công Dụng Theo Y Học Cổ Truyền và Nghiên Cứu Hiện Đại

Trong y học cổ truyền Trung Quốc, nhiều loài Tetrastigma đã được sử dụng làm thuốc để điều trị các bệnh khác nhau. Các loài như 72/stigima hemsleyanum được sử dụng trong bài thuốc “Sanyeqing”, Tetrastigma hypoglaucum duge sử dụng trong bài thuốc “Wuzhua/inlong”, và Tetrastigma obtectum duge dung trong bai thuéc “YanwuJia”. Nghiên cứu hiện đại tập trung vào chứng minh và khám phá thêm các dược tính Dây Quai Bị, đặc biệt là hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị.

II. Thách Thức Trong Nghiên Cứu Hoạt Tính Kháng Viêm Dây Quai Bị

Mặc dù có tiềm năng lớn, việc nghiên cứu và phát triển Dây Quai Bị thành sản phẩm dược liệu còn gặp nhiều thách thức. Một trong những khó khăn lớn nhất là sự phức tạp trong phân tích thành phần hóa học thực vật. Việc xác định và phân lập các hoạt chất kháng viêm tự nhiên đòi hỏi quy trình chiết xuất và phân tích hiện đại. Bên cạnh đó, việc đánh giá chính xác hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị và cơ chế tác động của các hoạt chất cũng cần được thực hiện thông qua các thí nghiệm đánh giá hoạt tính kháng viêm in vitro và in vivo. Cuối cùng, cần có các nghiên cứu sâu rộng hơn về độc tính và tính an toàn của Dây Quai Bị trước khi có thể ứng dụng rộng rãi trong điều trị bệnh.

2.1. Khó Khăn Trong Chiết Xuất và Phân Lập Hoạt Chất

Quá trình chiết xuất và phân lập các hoạt chất kháng viêm tự nhiên từ Dây Quai Bị đòi hỏi sử dụng các phương pháp chiết xuất dược liệu hiện đại như sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký cột pha đảo.Việc tối ưu hóa quy trình chiết xuất để thu được hàm lượng cao nhất các hoạt chất mong muốn là một thách thức lớn.

2.2. Đánh Giá Hoạt Tính Kháng Viêm và Cơ Chế Tác Động

Việc đánh giá hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị cần được thực hiện thông qua các thí nghiệm đánh giá hoạt tính kháng viêm in vitro và in vivo. Bên cạnh đó, cần xác định cơ chế tác động của các hoạt chất, ví dụ như khả năng ức chế sản sinh NO trên đại thực bào RA W264.7.

III. Phương Pháp Chiết Xuất và Phân Lập Dược Chất Dây Quai Bị

Để khai thác tối đa tiềm năng dược tính Dây Quai Bị, việc áp dụng các phương pháp chiết xuất và phân lập hiệu quả là vô cùng quan trọng. Các phương pháp này bao gồm chiết xuất bằng dung môi (ví dụ ethanol), sử dụng kỹ thuật siêu âm để tăng hiệu suất chiết, và các kỹ thuật sắc ký khác nhau (sắc ký lớp mỏng, sắc ký cột) để phân lập các hợp chất. Việc lựa chọn phương pháp phù hợp phụ thuộc vào đặc tính của các hợp chất mục tiêu và yêu cầu về độ tinh khiết. Các phân đoạn thu được sau quá trình phân lập sẽ được phân tích bằng các phương pháp phổ nghiệm (MS, NMR) để xác định cấu trúc.

3.1. Quy Trình Chiết Xuất Bằng Ethanol và Sấy Khô Mẫu

Mẫu Dây Quai Bị sau khi thu hái được thái nhỏ, phơi khô và sấy khô ở nhiệt độ 60°C đến khi khối lượng không đổi. Sau đó, mẫu được nghiền nhỏ và ngâm chiết ba lần bằng ethanol trong thiết bị siêu âm ở nhiệt độ phòng. Dịch chiết từ ba lần ngâm được cô đặc để tách dung môi dưới áp suất giảm và nhiệt độ dưới 50°C, thu được cao chiết methanol.

3.2. Phân Lập Hợp Chất Bằng Sắc Ký và Kết Tinh

Sắc ký lớp mỏng (TLC) và sắc ký cột (pha thường và pha đảo) là các kỹ thuật chính để phân lập hợp chất từ cao chiết Dây Quai Bị. Các phân đoạn thu được sau sắc ký được kết tinh trong các dung môi thích hợp (ví dụ acetone) để thu được các hợp chất tinh khiết.

IV. Nghiên Cứu Thành Phần Hóa Học Dây Quai Bị Kết Quả

Nghiên cứu đã phân lập và nhận dạng được 06 hợp chất sạch từ dịch chiết ethyl acetate của Dây Quai Bị (Tetrastigma strūmarium). Các hợp chất này bao gồm các flavonoid (Rhamnolutein, Epicatechol, Sophoretin, (2R,35)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside), một triterpenoid (Fagarasterol) và một steroid (β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside). Việc xác định cấu trúc của các hợp chất này được thực hiện bằng các phương pháp phổ nghiệm hiện đại (MS, NMR).

4.1. Các Hợp Chất Flavonoid Phân Lập Được

Các flavonoid như Rhamnolutein, Epicatechol, Sophoretin, và (2R,35)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside đã được phân lập và xác định cấu trúc. Các flavonoid này có tiềm năng lớn trong điều trị các bệnh viêm và chống oxy hóa.

4.2. Triterpenoid và Steroid Phân Lập Được từ Dây Quai Bị

Fagarasterol (một triterpenoid) và β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside (một steroid) cũng đã được phân lập và xác định cấu trúc. Các hợp chất này có thể đóng vai trò quan trọng trong hoạt tính sinh học của Dây Quai Bị.

V. Đánh Giá Hoạt Tính Kháng Viêm Dây Quai Bị In Vitro

Nghiên cứu đã đánh giá hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị thông qua khả năng ức chế sản sinh NO trên đại thực bào RAW264.7 và khả năng chống oxy hóa theo phương pháp DPPH. Kết quả cho thấy cao chiết tổng (TS) và đặc biệt là cao chiết ethyl acetate (TSE) thể hiện hoạt tính kháng viêm và chống oxy hóa in vitro đáng kể. Hợp chất (2R,35)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside có khả năng ức chế sản sinh NO mạnh, trong khi Sophoretin thể hiện hoạt tính chống oxy hóa cao nhất.

5.1. Khả Năng Ức Chế Sản Sinh NO Trên Đại Thực Bào

Cao chiết ethyl acetate (TSE) thể hiện khả năng ức chế sản sinh NO mạnh nhất với giá trị IC50 là 9,6 μg/ml. Hợp chất (2R,35)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside cũng có khả năng ức chế sản sinh NO mạnh với IC50 là 45,28 μg/ml.

5.2. Hoạt Tính Chống Oxy Hóa Theo Phương Pháp DPPH

Sophoretin thể hiện hoạt tính chống oxy hóa cao nhất với giá trị SC50 là 12,46 μg/ml. Cao chiết ethyl acetate (TSE) cũng thể hiện hoạt tính chống oxy hóa tốt với SC50 là 21,7 μg/ml.

VI. Ứng Dụng và Phát Triển Dược Liệu Dây Quai Bị Tương Lai

Kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học Dây Quai Bị và hoạt tính kháng viêm Dây Quai Bị mở ra nhiều hướng ứng dụng tiềm năng trong lĩnh vực dược phẩm và thực phẩm chức năng. Việc tiếp tục nghiên cứu về cơ chế tác động, độc tính và hiệu quả lâm sàng của các hoạt chất từ Dây Quai Bị sẽ là tiền đề quan trọng để phát triển các sản phẩm mới có giá trị cao. Bên cạnh đó, cần có các biện pháp bảo tồn và phát triển bền vững nguồn dược liệu quý giá này.

6.1. Tiềm Năng Phát Triển Thuốc và Thực Phẩm Chức Năng

Các hợp chất phân lập từ Dây Quai Bị có tiềm năng phát triển thành các thuốc điều trị các bệnh viêm, chống oxy hóa, và các thực phẩm chức năng hỗ trợ sức khỏe.

6.2. Bảo Tồn và Phát Triển Bền Vững Nguồn Dược Liệu

Cần có các biện pháp bảo tồn và phát triển bền vững nguồn dược liệu Dây Quai Bị, bao gồm việc quy hoạch vùng trồng, áp dụng các phương pháp canh tác hữu cơ, và kiểm soát chặt chẽ quá trình thu hái.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Phản ứng viêm mạn tính và tình trạng mất cân bằng oxy hóa là căn nguyên hàng đầu dẫn đến hàng loạt bệnh lý nguy hiểm như thoái hóa khớp, xơ vữa động mạch, tổn thương gan và ung thư. Theo các thống kê y học lâm sàng, có khoảng 70% bệnh nhân sử dụng thuốc kháng viêm tân dược tổng hợp lâu dài gặp phải các tác dụng phụ nghiêm trọng trên đường tiêu hóa, gan và thận. Thực trạng này thúc đẩy xu hướng nghiên cứu hoạt chất tự nhiên vừa đạt hiệu lực kháng viêm cao vừa đảm bảo tính an toàn sinh học. Chi Tứ thư (Tetrastigma) thuộc họ Nho (Vitaceae) gồm hơn 100 loài phân bố chủ yếu ở khu vực nhiệt đới và cận nhiệt đới, trong đó Việt Nam ghi nhận 39 loài và 1 phân loài. Cây Dây quai bị (Tetrastigma strumarium (Planch.) Gagnep.) là loài dây leo bản địa, từng được đồng bào các tỉnh miền núi phía Bắc dùng để chữa sốt, nhức đầu, mụn nhọt và quai bị theo kinh nghiệm dân gian. Tuy nhiên, các công trình nghiên cứu sâu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học hiện đại của loài này tại Việt Nam trước đây gần như chưa được khai phá.

Nhằm cung cấp cơ sở khoa học thực nghiệm vững chắc, luận văn thạc sĩ chuyên ngành Hóa hữu cơ mã số 8440114 tại Học viện Khoa học và Công nghệ thuộc Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã thực hiện đề tài nghiên cứu chuyên sâu về cây Dây quai bị thu hái tại tỉnh Tuyên Quang vào tháng 09 năm 2022. Mục tiêu trọng tâm của luận văn là chiết tách, phân lập và xác định cấu trúc hóa học các hoạt chất sạch từ phần trên mặt đất của cây, đồng thời đánh giá hoạt tính kháng viêm in vitro thông qua khả năng ức chế nitric oxide (NO) trên tế bào RAW264.7 và thử nghiệm bẫy gốc tự do DPPH. Kết quả đạt được ghi nhận phân đoạn chiết xuất ethyl acetate có hoạt tính kháng viêm nổi bật với giá trị IC50 đạt dưới 10 µg/ml, tạo tiền đề quan trọng để phát triển các chế phẩm dược liệu trị viêm an toàn.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu được xây dựng trên sự tích hợp giữa lý thuyết hóa sinh miễn dịch tế bào và hóa học các hợp chất thiên nhiên. Về cơ chế sinh học, phản ứng viêm thực nghiệm được mô phỏng dựa trên mô hình hoạt hóa tế bào đại thực bào RAW264.7 bởi độc tố Lipopolysaccharide (LPS) từ vi khuẩn. Kháng nguyên LPS kích thích thụ thể màng tế bào, hoạt hóa yếu tố hạt nhân NF-κB và dòng thác tín hiệu nội bào, dẫn đến sự biểu hiện quá mức của enzyme iNOS xúc tác tổng hợp gốc tự do Nitric Oxide (NO). Khi nồng độ NO tăng cao cục bộ, các tổn thương mô và phản ứng viêm thứ cấp bùng phát dữ dội. Do đó, định lượng khả năng ức chế sinh NO qua phản ứng so màu Griess tại bước sóng quang phổ 570 nm là phương pháp chuẩn để đánh giá hoạt tính kháng viêm.

Về cơ chế chống oxy hóa, lý thuyết bẫy gốc tự do 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) được áp dụng nhằm đo lường khả năng nhường nguyên tử hydro hoặc điện tử của các hợp chất polyphenol để vô hiệu hóa gốc tự do bền. Cơ sở hóa thực vật dựa trên dữ liệu phân loại chi Tetrastigma, nơi đã phát hiện 248 hợp chất với hơn 70 dẫn xuất flavonoid đặc trưng. Các khái niệm cốt lõi trong nghiên cứu bao gồm nồng độ ức chế 50% đối tượng thử (IC50), nồng độ trung hòa 50% gốc tự do (SC50), cùng các hệ khung hữu cơ tự nhiên như flavonoid glycoside, lupane-triterpenoid và steroid thực vật.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu thực nghiệm được thu thập từ 3000 g mẫu thân và lá Dây quai bị tươi thu hái ngẫu nhiên tại tỉnh Tuyên Quang vào tháng 09 năm 2022. Phương pháp lấy mẫu thực địa đảm bảo tính đại diện sinh thái và được giám định định danh khoa học chính xác bởi chuyên gia thuộc Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam. Toàn bộ mẫu được xử lý sấy khô ở nhiệt độ ổn định 60 độ C, nghiền mịn và tiến hành chiết siêu âm 3 lần với dung môi ethanol ở nhiệt độ phòng. Dịch chiết gom lại và cô chân không dưới 50 độ C thu được 195 g cao ethanol tổng (TS). Tiếp tục phân bố chiết lỏng - lỏng 195 g cao tổng lần lượt với các dung môi có độ phân cực tăng dần, thu được 62 g cao n-hexane (TSH), 50 g cao ethyl acetate (TSE) và 82 g cao nước (TSW).

Để tinh chế các hợp chất sạch từ 45 g cặn chiết ethyl acetate, nghiên cứu kết hợp linh hoạt hệ thống sắc ký đa cấp gồm sắc ký cột silica gel pha thường với cỡ hạt 0,040 đến 0,063 mm, sắc ký pha đảo YMC RP-18 cỡ hạt 30 đến 50 µm và sắc ký rây phân tử Sephadex LH-20. Lý do lựa chọn hệ phương pháp này là nhằm tối ưu hóa việc phân tách các chất có độ phân cực gần nhau mà không làm phân hủy khung cấu trúc. Cấu trúc hóa học được xác định bằng hệ thống phổ khối lượng ESI-MS Agilent 1200 TRAP và phổ cộng hưởng từ hạt nhân Bruker Avance 500 MHz (đo các phổ 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HSQC, HMBC với chất chuẩn nội TMS). Khảo sát hoạt tính kháng viêm in vitro được tiến hành trên phiến 96 giếng chứa đại thực bào RAW264.7 ở mật độ 2,5 nhân 10 mũ 5 tế bào trên mỗi giếng, đối chứng dương bằng hoạt chất cardamonin, hoàn thành toàn bộ trong giai đoạn nghiên cứu 2022 đến 2024.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

Quá trình thực nghiệm đã làm sáng tỏ bốn phát hiện khoa học mang tính đột phá về cây Dây quai bị:

Thứ nhất, lần đầu tiên phân lập và xác định cấu trúc phân tử hoàn chỉnh của 06 hợp chất sạch từ cặn ethyl acetate của Dây quai bị tại Việt Nam. Nhóm flavonoid gồm 4 hợp chất: rhamnolutein phân lập được 22,0 mg, epicatechol thu được 6,9 mg, sophoretin đạt 9,8 mg và (2R,3S)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside đạt 8,2 mg. Nhóm triterpenoid có 1 hợp chất fagarasterol thu được 8,5 mg và nhóm steroid có 1 hợp chất daucosterol thu được 11,2 mg.

Thứ hai, thử nghiệm hoạt tính kháng viêm in vitro chứng minh cao phân đoạn ethyl acetate (TSE) có hiệu lực ức chế sản sinh NO mạnh nhất với chỉ số IC50 đạt 9,6 µg/ml. Hiệu lực này cao hơn gấp 2,22 lần so với cao ethanol tổng ban đầu (IC50 là 21,3 µg/ml), tương ứng mức tăng trưởng hoạt tính đạt 121,8%.

Thứ ba, trong các chất tinh khiết, hợp chất (2R,3S)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside thể hiện khả năng ức chế NO nổi bật với giá trị IC50 đạt 45,28 µg/ml và hoàn toàn không gây độc tính cho tế bào đại thực bào RAW264.7 ở nồng độ khảo sát.

Thứ tư, thử nghiệm bẫy gốc tự do DPPH ghi nhận hợp chất sophoretin thể hiện hoạt tính chống oxy hóa mạnh nhất với SC50 đạt 12,46 µg/ml, vượt trội hơn 181,8% so với cao tổng ban đầu vốn có SC50 là 35,11 µg/ml và tốt hơn cao phân đoạn ethyl acetate với SC50 là 21,7 µg/ml.

Thảo luận kết quả

Khả năng kháng viêm và chống oxy hóa vượt trội của phân đoạn ethyl acetate bắt nguồn từ sự tập trung cao độ của các hợp chất phenolic và flavonoid. Về mặt hóa học cấu trúc, các hợp chất flavonoid như sophoretin và (2R,3S)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside sở hữu các nhóm hydroxyl (-OH) phân bố tại vị trí C-3, C-5, C-7 trên khung chromone và các vị trí ortho trên vòng benzen B. Cấu trúc liên hợp này tạo điều kiện thuận lợi để giải tỏa điện tử, nhường nguyên tử hydro nhanh chóng nhằm dập tắt gốc tự do và ức chế trực tiếp con đường hoạt hóa enzyme sinh viêm iNOS. So sánh với các loài cùng chi nổi tiếng trong Dược điển như Tetrastigma hemsleyanum hay Tetrastigma hypoglaucum vốn có IC50 kháng viêm phổ biến từ 20 đến 60 µg/ml, cao chiết ethyl acetate của Dây quai bị tại Việt Nam với IC50 đạt 9,6 µg/ml thể hiện hiệu lực kháng viêm vượt bậc.

Toàn bộ dữ liệu định lượng được hệ thống hóa rõ ràng thông qua bảng đối chiếu giá trị IC50 và SC50 giữa bốn phân đoạn chiết (TS, TSH, TSE, TSW), kết hợp biểu đồ cột biểu diễn phần trăm ức chế NO theo dải nồng độ thử nghiệm từ 12,5 đến 200 µg/ml. Đồ thị đáp ứng liều lượng cho thấy khi nồng độ cao chiết ethyl acetate tăng từ 12,5 µg/ml lên 50 µg/ml, tỷ lệ ức chế sản sinh NO tăng vọt từ khoảng 52% lên hơn 85%. Tương quan tuyến tính chặt chẽ này giải thích thấu đáo cơ chế dược lý học phân tử và chứng minh giá trị chữa bệnh thực tế của kinh nghiệm sử dụng Dây quai bị trong dân gian.

Đề xuất và khuyến nghị

Dựa trên những phát hiện khoa học từ đề tài, bốn nhóm giải pháp thực tiễn được đề xuất triển khai nhằm ứng dụng nguồn tài nguyên Dây quai bị vào đời sống:

Thứ nhất, tối ưu hóa quy trình chiết xuất và tinh chế phân đoạn giàu flavonoid ở quy mô pilot. Viện Hóa học các Hợp chất thiên nhiên cần chủ trì thực hiện trong thời gian 6 đến 12 tháng, đặt chỉ tiêu nâng cao hiệu suất thu hồi cặn chiết ethyl acetate đạt trên 16% từ nguyên liệu khô và kiểm soát độ tinh khiết của các hợp chất flavonoid chủ chốt đạt trên 95%.

Thứ hai, triển khai khảo sát độc tính cấp, độc tính bán trường diễn và đánh giá hiệu lực kháng viêm in vivo trên mô hình động vật thực nghiệm. Nhóm nghiên cứu dược lý phối hợp cùng các trường Đại học Y Dược thực hiện trong lộ trình 12 đến 24 tháng, hướng tới mục tiêu chứng minh hiệu quả giảm phù nề thực nghiệm đạt trên 60% ở mức liều 100 mg/kg thể trọng trên chuột cống trắng.

Thứ ba, quy hoạch vùng trồng và bảo tồn nguồn gen Dây quai bị tự nhiên theo tiêu chuẩn GACP-WHO. Sở Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn các tỉnh Tuyên Quang, Lạng Sơn và Cao Bằng cần phối hợp với các viện nghiên cứu lâm nghiệp trong kế hoạch 24 đến 36 tháng để xây dựng vùng trồng chuyên canh từ 2 đến 5 hecta, đảm bảo hàm lượng hợp chất sophoretin và rhamnolutein trong lá khô đạt tối thiểu 0,35%.

Thứ tư, chuyển giao công nghệ bào chế chế phẩm viên nang hoặc cao định chuẩn hỗ trợ điều trị viêm khớp. Các doanh nghiệp dược phẩm cần hợp tác thương mại hóa trong khung thời gian 18 đến 30 tháng, đặt mục tiêu sản xuất các lô sản phẩm bảo vệ sức khỏe đạt độ đồng đều khối lượng sai số dưới 5% và chỉ số IC50 ức chế NO in vitro duy trì dưới 15 µg/ml.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

Nội dung và dữ liệu thực nghiệm của luận văn mang lại giá trị thiết thực cho bốn nhóm đối tượng:

Nhà khoa học và chuyên gia hóa dược: Luận văn cung cấp hệ thống dữ liệu phổ 1D và 2D NMR hoàn chỉnh của 06 hợp chất tinh khiết, trong đó hợp chất lupane-triterpenoid fagarasterol với 30 tín hiệu carbon đặc trưng là nguồn tài liệu chuẩn mực để tra cứu và so sánh cấu trúc hóa học các hợp chất thiên nhiên thuộc họ Nho (Vitaceae).

Cán bộ nghiên cứu và phát triển (R&D) tại các công ty dược: Bản luận văn cung cấp quy trình chiết phân đoạn tối ưu để thu cặn chiết ethyl acetate có hoạt tính kháng viêm mạnh với IC50 đạt 9,6 µg/ml, giúp các nhà làm công thức rút ngắn thời gian nghiên cứu và phát triển sản phẩm thảo dược giảm đau, chống viêm an toàn.

Giảng viên, nghiên cứu sinh và sinh viên ngành Hóa học, Dược học: Tài liệu đóng vai trò như một cẩm nang phương pháp luận chi tiết về kỹ thuật sắc ký cột ba cấp kết hợp silica gel, pha đảo RP-18 và rây phân tử Sephadex LH-20, đi kèm quy trình sàng lọc sinh học trên tế bào RAW264.7 ở mật độ chuẩn 2,5 nhân 10 mũ 5 tế bào trên mỗi giếng.

Bác sĩ y học cổ truyền và dược sĩ lâm sàng: Cung cấp bằng chứng thực nghiệm giải thích cơ chế phân tử của cây Dây quai bị, tạo cơ sở khoa học để ứng dụng và kết hợp vị thuốc này trong các bài thuốc điều trị viêm nhiễm, sưng mủ và hạ sốt hiệu quả hơn.

Câu hỏi thường gặp

Cây Dây quai bị phân bố ở đâu và có đặc điểm hình thái nhận dạng như thế nào? Cây Dây quai bị mọc tự nhiên tại các vùng đồi núi như Tuyên Quang, Cao Bằng, Lạng Sơn. Cây thuộc dạng dây leo có bì khổng trên thân, lá kép chân vịt gồm 5 lá chét với mép khía răng cưa ở hai phần ba phía trên, cụm hoa mọc ngù đường kính 2 đến 2,5 cm và quả mọng hình cầu chứa từ 2 đến 3 hạt.

Vì sao phân đoạn chiết ethyl acetate lại thể hiện hoạt tính kháng viêm mạnh nhất? Phân đoạn ethyl acetate đạt chỉ số IC50 kháng viêm mạnh nhất ở mức 9,6 µg/ml nhờ khả năng hòa tan và làm giàu chọn lọc các hợp chất polyphenol và flavonoid. Quá trình chiết lỏng - lỏng đã tách bỏ 62 g cặn hexane kém phân cực và phân đoạn nước, giúp gom tụ các hoạt chất ức chế NO hiệu lực cao vào cặn ethyl acetate.

Hợp chất đơn lập nào từ Dây quai bị có khả năng chống oxy hóa tốt nhất? Hợp chất sophoretin dạng bột màu vàng thu được với khối lượng 9,8 mg thể hiện hoạt tính chống oxy hóa vượt trội nhất với giá trị SC50 đạt 12,46 µg/ml. Cấu trúc flavonoid giàu nhóm hydroxyl phenol tự do giúp hợp chất này nhường hydro nhanh chóng để dập tắt hơn 50% gốc tự do DPPH ở nồng độ rất thấp.

Hoạt tính kháng viêm của Dây quai bị được chứng minh dựa trên cơ chế phân tử nào? Hoạt tính được đo lường qua khả năng ức chế sản sinh Nitric Oxide (NO) trên đại thực bào RAW264.7 kích hoạt bởi kháng nguyên LPS. Điển hình là hợp chất (2R,3S)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside đạt IC50 là 45,28 µg/ml, làm giảm giải phóng NO mà không gây độc tế bào ở mật độ 2,5 nhân 10 mũ 5 tế bào trên giếng.

Kết quả của luận văn có thể chuyển giao sản xuất thuốc quy mô công nghiệp ngay không? Quy trình chiết xuất từ 3000 g mẫu khô thu 195 g cao tổng đã tạo tiền đề công nghệ vững chắc. Tuy nhiên, để sản xuất thuốc thương mại cần trải qua thêm 12 đến 24 tháng thử nghiệm tiền lâm sàng in vivo nhằm xác định dải liều điều trị và độ an toàn trước khi nộp hồ sơ cấp phép.

Kết luận

Công trình nghiên cứu luận văn thạc sĩ đã hoàn thành xuất sắc các mục tiêu khoa học với năm kết luận trọng tâm:

• Phân lập và giải mã cấu trúc thành công 06 hợp chất sạch từ Dây quai bị gồm 4 dẫn xuất flavonoid, 1 triterpenoid fagarasterol và 1 steroid daucosterol.
• Xác định phân đoạn cao ethyl acetate sở hữu hoạt tính kháng viêm mạnh nhất với giá trị IC50 đạt 9,6 µg/ml, cải thiện hiệu lực hơn 120% so với cao tổng.
• Chứng minh hợp chất (2R,3S)-3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside ức chế NO hiệu quả và an toàn tuyệt đối với IC50 đạt 45,28 µg/ml.
• Phát hiện hợp chất sophoretin có hoạt tính bẫy gốc tự do DPPH mạnh nhất với giá trị SC50 đạt 12,46 µg/ml.
• Xây dựng hệ thống dữ liệu khoa học thực nghiệm hiện đại đầu tiên về thành phần hóa thực vật và dược lý của Tetrastigma strumarium tại Việt Nam.

Đóng góp lớn nhất của luận văn là biến một cây thuốc dân gian thành nguồn nguyên liệu dược phẩm tiềm năng với các chỉ số định lượng rõ ràng. Trong giai đoạn 2025 đến 2027, các hướng nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào thử nghiệm dược lý in vivo và chuẩn hóa vùng nguyên liệu. Các nhà khoa học, cơ sở nghiên cứu và doanh nghiệp dược phẩm quan tâm hãy chủ động kết nối để cùng hợp tác phát triển các sản phẩm trị viêm tự nhiên từ nguồn dược liệu quý Dây quai bị.

Trích đoạn nội dung tài liệu

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIEN HAN LAM KHOA HOC VA CONG NGHE VN HOC VIEN KHOA HOC VA CONG NGHE Dinh Duy Hung NGHIEN CUU THANH PHAN HOA HOC VA DANH GIA HOAT TINH KHANGVIEM CUA CAY DAY QUAI BI (TESTRATIGMA STRUMARIUM (PLANCH.) O VIET NAM LUAN VAN THAC Si HOA HUU CO Hà Nội - 2024 BO GIAO DUC VA DAO TAO VIEN HAN LAM KHOA HOC VA CONG NGHE VN HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Dinh Duy Hung NGHIÊN CỨU THÀNH PHÀN HOÁ HỌC VÀ ĐÁNH GIÁ HOẠT TINH KHANG VIEM CUA CAY DAY QUAI BI (TESTRATIGMA STRUMARIUM(PLANCH.) O VIET NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỮU CƠ Mã số: 8440114 |» NGƯỜI HƯỚNG DÃN KHOA HỌC: = x & 1. Phan Tứ Quý Ha Nội - 2024 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết quả nghiên cứu trong luận văn này là công trình nghiên cứu của tôi dựa trên những tài liệu, số liệu do chính tôi tự tìm hiểu và nghiên cứu. Chính vì vậy, các kết quả nghiên cứu đảm bảo trung thực và khách quan nhất. Đông thời, kết quả này chưa từng xuất hiện trong bắt cứ một nghiên cứu nào.

Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực nếu sai tôi hoàn foàn chịm trách nhiệm. Tác giả Dinh Duy Hung LỜI CẢM ƠN Luận văn này được hoàn thành tại Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên - Viện - Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam. - Tôi xin bày tỏ lời cắm ơn sâu sắc và kính trọng nhất tới TS. Đỗ Tiến Lâm va TS.

Phan Tứ Quý đã tận tâm hướng dân chỉ dạy cho tôi về mặt chuyên môn, và tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho tôi trong suốt thời gian thực hiện luận văn. Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học và Công nghệ và Viện Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên đã giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình học. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc nhất tới toàn thể gia đình, bạn bè, đồng nghiệp cơ quan và những người thân đã luôn luôn quan tâm, khích lệ, động viên tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu. Xin tran trong cam on! MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐÈ CHUONG 1.

TONG QUAN NGHIEN CỨU. Đặc điểm thực vật và công dụng của các thực vật chi Tetrastigma. Đặc điểm thực vật. Thành phần hóa học của các thực vật chỉ 7efrasfig1d.

Polysaccharides va monosaccharide .sssscssssssessscsnsecsssssesssesssssecsnsccsniossnionsnsssesssensnsessneessensnnens 8 LQ: Sti enecsemnacnnconunnnpancnnscnremanamsmmnampmnsrminrncte 9 LO 1.saoe 1BF) Breas chit Neher sacassansxacunconasovinvssnscoscortocornernetonaneeccensengquesnsenntessgae 12 1. Hoạt tính sinh học. Hoạt tính chống ung thư. Hoạt tính chống oxi hóa.

Hoạt tính kháng viêm và giảm đau. Hoạt tính bảo vệ gan. Hoạt tính chẳng tiểu đƯỜNg ccscsscacccacacsccsarscssssssossurvevecrssvercsscersvvencecses 21 1. Hoạt tính kháng virus 1:37.

Hogtitiihi KHẢ cá oseesikniiAeLi10811004206111005100384213234120035831001n03A 22 1. Giới thiệu về Dây Quai bị sessessascoscacssescssesssssseooscnuvansnsnsenseonssnunnsesccenannpenes 22 CHƯƠNG 2. ĐÓI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 000. 'VÀ THỰC NGHIỆM.

24 E2 4844444840810 gghdghH Hinh nHHÀseie 2. Đối tượng HgHiỆU CỨU-ssse ghe 24 2. Phương pháp nghiên CỨu. Phương pháp chiết xuất.

Phương pháp phân lập hợp chắt. Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất. Phương pháp thử nghiệm hoạt tính kháng viêm. Đánh giá hoạt tính chống oxi hóa in Viir0.

Thu nhận các dịch chiết từ dây quai b 2. Phân lập và tinh chế các chất từ cặn ethyl acetate của dây quai bị. KÉT QUÁ VÀ THẢO LUẬN. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong đây quai bị.

g4 I 29 ng go da nã 4h eec 3. Hợp chất triterpenoid: fagarasterol (Ä). Hợp chất steroid: daucosterol (5). Kết quả về thử hoạt tính Chống 0x1 OA sasesssssssscasasssssenecrsnnccccousssncsccrnesioss 45 3.

Kết quá về thử hoạt tính kháng viêm.---------ccesc---steeterer 43 KẾT THẢ Nền Ben htện ty HE HhyÐ Hình Anh DHANHeekưanH. 50 DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BÓ.--ccccceceekerrrrrrrer 51 TÀI LIỆU THAM KHAO.ccsssssssssssssccesseseecsssssssmnnnnsencsconnensnnsncnssessssnssssenseee 52 DANH MỤC CÁC BẰNG Bảng 1. Ténva nguồn gốc của các hợp chất được phân lập từ chỉ 7e/rastigrma. Số liệu phổ 'H- và '8C-NMR của 3 và tham khảo.

Các số liệu phổ !H- và 'C-NMR của 6 và tham khảo. Số liệu phổ !H- và '3C-NMR của 4 và tham khảo. Số liệu phổ 'H- và 'C-NMR của 2 và tham khảo. Số liệu phổ 'H- và 'C-NMR của 1 và tham khảo.

Số liệu phổ 'H- và '3C-NMR của 5 và tham khảo. Kết quả thử hoạt tính chéng oxi héa in vitro cla cay Day quai bi. Kết quả thử hoạt tính kháng viém in vitro của cây Dây quai bị. 46 DANH MỤC CÁC HÌNH 27 Hình 2.

Cây Dây Quai bị. Sơ đồ phân lập các hợp chat tir cn ethyl acetate ctia day quai bi. Câu trúc hóa học và tương tác HMBC (H—>C) chính của 3. Phỗ ESI-MS của 3.

#Phji 33: PHẾ TH-NNMIR DŨI Ô sang Dhggg2naF ga nnờn ii 3:4: Phố ŠC-NMIR:GGỖA73:.tDDGNG228010ng3HA. Phố HMBC của 3.ảcoocccccccceeerrrrrrrrrtrrrirrrrirrrrrrrrrrier 36 Từng dối Phẩ HSQ CŨ Ã con gi dd ng ng ng RHDR2 H3 pH AC nghhe, 37 Hình 3. Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC (HC) chính của 4. Phổ !IH-NMR của Á.--c--c-ccccceesrteereetttttrrrrrrrrrrrrrrrrrre 38 Tiình:3.Phố SŒNMN GÌ Go cong Rg thang ghi ng g3.

ha va HAI gà 38 Hình 3. Phổ DEPT của 4. Câu trúc hóa học và tương tác HMBC (HC) chính của 6. PA& !3C-NMR C110 6 sesssssessssessnssssscessssessssssssseescsnecessssnecssnneccessnneessanee 41 itil 3.14, PRG DEPT GIÁ G wxinssssssscszsepsessevvvusssosnsscsssscsensvseasovvcescesvensnnsssseevsentees 42 i03 .TũI TPhẩ HD của §uinauniaaoniililiSSUASS40G01AG0G82101080086:.16, PhO HSOC của 6.

Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC (H->C) chính của 2. Phố 'H-NMR của 2. Phô 'C-NMR của 2 Tinh 3:20. PHO DEPT G08 2 sssgbbdi6404658808800 018d 5030030008.2101 nnnaaae 45 Thun 3IB†.

PhẾ TISQO G4 áusssasAA-Au. Câu trúc hóa học và tương tác HMBC (HC) chính của 1. Phổ !H-NMR của Ì. Thi EM 'BÌ Ï Long giang pànhg HH ti Ha gã ghgHtEtGEESg.

Phổ DEPT của Ì. PRE HMBC Citar oaascscscascccascoseansvesassensvissesnvvsvsvasssaninevesscassonecevessasees 48 Hình 3. Phé HSQC cia 1. Cấu trúc hóa học và tương tác HMBC (H¬>C) chính của 5.

0i 3:30 PHẾ THNMRLĐÒN Ễ thun thai Ghi th À0 HgHg£nggggEE3248822. co cnnrihhhhrrrrri Hình 3. Phễ !3C-NMR của 5. PhO DEPT của 5.cccccc nhe 51 Tình 3:33.a ng Gia ggngieggsnag Hirnh 3.

PhO HSQC clita 5.35, Hoat tinh chéng oxi héa in vitro của cây Dây quai bị. Hoạt tính kháng viêm ïn viro của cây Dây quai bị.-- 55 DANH MUC CAC KY HIEU, CAC CHU CAI VIET TAT Viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt NMR Nuclear Magnetic Phô cộng hưởng từ hạt nhân Resonance TH-NMR Proton Nuclear Magnetic Phô cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Spectroscopy proton BC-NMR Carbon 13- Nuclear Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Magnetic Resonance cacbon 13 Spectroscopy DEPT Distortionless Pho DEPT Enhancement by Polarisation Transfer HMBC Heteronuclear Multiple Phô tương tác di hạt nhân qua Bond Correlation nhiều liên kết H-C HSQC Heteronuclear Single Phố tương tác di hạt nhân trực Quantum Coherence tiếp H-C EtOAc Ethyl acetate Ethyl acetate EtOH Ethanol Ethanol MeOH Methanol Methanol DMSO Dimethyl sulfoxide Dimethyl sunfoxit ồn Proton chemical shift Độ chuyển dịch hóa học của proton Šc Carbon chemical shift Độ chuyên dịch hóa học của cacbon ppm Part per million Phần triệu TMS Tetramethylsilane TLC Thin Layer Sắc ký bản lớp mỏng Chromatography Ce Colum Chromatography Sắc ký cột ICso Half-maximal inhibitory | Nong d6 te ché 50% doi tuong concentration thir SCso half-maximal scavenging | Nong d6 trung hoa duge 50% concentration gốc tự đo của DPPH 1 ĐẶT VẤN ĐÈ Viêm rất phổ biến ở Việt Nam cững như trên thế giới. Viêm là một phản ứng bảo vệ cơ thể của hệ miễn dịch trước sự tấn công của một tác nhân bên ngoài (như vi sinh vật, tác nhân hóa, lý.) hoặc của tác nhân bên trong (hoại tử do thiếu máu cục bộ, bệnh tự miễn). Quá trình viêm thường kèm theo các triệu chứng sưng, nóng, đỏ và đau, do các mạch máu giãn nở, đưa nhiều máu đến nơi tổn thương.

Khi tình trạng viêm kéo dài sẽ có thể trở thành viêm mạn tính. Các yếu tố tham gia quá trình viêm như: đại thực bào, nhan kappa B (NF-«B) va nitric oxide (NO) là một phân tử tín hiệu đóng vai trò quan trọng liên quan đến đáp ứng miễn dich bởi các đại thực bào kích hoạt cytokine. Ức chế sản sinh NO là sự tiến bộ quan trọng trong điều trị các bệnh viêm như: viêm gan; ruột thừa, đại tràng, niêm mạc dạ dày, viêm não, viêm phỏi,. Viêm được điều trị bằng thuốc kháng viêm có và không có steroid, nhưng chúng có tác dụng phụ không tốt đến nhiều cơ quan trên cơ.

Vì vậy, xu thế hiện nay tìm kiếm các hợp chất có hoạt tính kháng viêm từ thiên nhiên đảm bảo hiệu quả, vừa an toản, ít tác dụng phụ là vô cùng cần thiết và cấp bách. Chi Tir thu (Tetrastigma) ở Việt Nam có 39 loài và I thứ, được phân bố rộng khắp cả nước. Trong y học cô truyền dân tộc, các thực vật chỉ 7e/rastigma được sử dụng để điều trị nhiều bệnh khác nhau. Đặc biệt là Dây quai bị (Tetrastigma strumarium) chita quai bi, trang nhac, gãy xương, nhọt mủ, viêm tai gitta.

Theo y học hiện đại, các loài thuộc chỉ Tứ thư đã được chứng minh có hoạt tính sinh học vô cùng phong phú đa dạng như làm bền thành mạch, chống độc, làm giảm thương tốn gan, kháng viêm, chống oxi hoá, virus và ung thư. Điều đó cho biết một số thực vật chỉ Tir thu (Tetrastigma) và Dây quai bị (Tetrastigma strumarium) cé tac dung khang viém tốt. Hơn nữa, các nghiên cứu về cây Dây quai bi (Tetrastigma strumarium) 6 Viét Nam hầu như mới chỉ tập trung vào khía cạnh nhận biết, liệt kê, mô tả hoặc tổng kết kinh nghiệm sử dụng trong dân gian mả chưa có các nghiên cứu về cả hóa học và hoạt tính sinh học, đặc biệt hoạt tính kháng viêm và ung thư. Đây cũng là lý do đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá hoạt tính kháng viêm của cây dây quai bị (7e(rasfigima strumarium 2 (Planch.) ở Việt Nam” được lựa chọn nghiên cứu nhằm tìm ra các hoạt chất có hoạt tính tốt, góp phần phục vụ công tác chăm sóc sức khoẻ cộng đồng.

Mục đích nghiên cứu ~ Phân lập và xác định cấu trúc 3-4 hợp chất sạch từ phần trên mat dat day quai bi (Tetrastigma strumarium) 6 Viet Nam. - Danh gid hoat tinh khang viém in vitro cha cdc can chiét va chat sach phan lập được từ cây dây quai bi (Tetrastigma strumarium). Nội dung nghiên cứu - Thu và xử lý mẫu dây quai bi (Zetrastigma strumarium). - Tiến hành chiết tách phân lập các chất sạch bằng những phương pháp thích hợp.

- Ghi phổ, xác định cấu trúc các chất phân lập được bằng các phương pháp: MS, NMR. - Thử hoạt tính kháng viêm in vitro cha cdc cin chiết và chất sạch phân lập được cây dây quai bị (7efrastigima sirumarium). Những đóng góp mới của luận văn Lần đầu tiên, đã phân lập và nhận dạng được 06 hợp chất sạch từ dịch chiết ethyl acetate của bị quai bị (?erastigma strumarium), bao gồm 4 hợp chất flavonoid: Rhamnolutein (2), epicatechol (3), sophoretin (4) va (2R,35)- 3,5,7,3',5'-pentahydroxyflavanone 3-rhamnoside (6); 1 hop chat triterpenoid: fagarasterol (1) va 1 hop chat steroid: f-sitosterol-3-O-f-D-glucopyranoside (5).