Phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương bằng sắc ký lỏng khối phổ

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT

DANH MỤC CÁC BẢNG

DANH MỤC CÁC HÌNH

MỤC LỤC

1. MỞ ĐẦU

2. TỔNG QUAN VỀ VILDAGLIPIN

2.1. Công thức cấu tạo và tính chất hoá lý

2.2. Dược động học

2.3. Một số phương pháp định lượng Vildagliptin

3. SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ

3.1. Nguyên lý hoạt động của thiết bị phân tích khối phổ

3.2. Thiết bị sắc ký lỏng khối phổ

3.3. Bộ phận nạp mẫu

3.4. Nguồn ion hoá

3.5. Bộ phận phân tích khối

3.6. Bộ phận phát hiện (detector)

3.7. Bộ xử lý dữ liệu

4. PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH THUỐC TRONG DỊCH SINH HỌC

4.1. Kỹ thuật xử lý mẫu

4.1.1. Kỹ thuật kết tủa protein (PPT)

4.1.2. Kỹ thuật chiết lỏng – lỏng (LLE)

4.1.3. Kỹ thuật chiết pha rắn (SPE)

4.2. Xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp phân tích thuốc trong dịch sinh học

4.3. Giới hạn định lượng dưới (LLOQ)

4.4. Đường chuẩn và khoảng tuyến tính

4.5. Ảnh hưởng của nền mẫu

4.6. Độ đúng, độ chính xác trong ngày và khác ngày

4.7. Độ ổn định của hoạt chất trong dịch sinh học

5. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

5.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

5.2. NGUYÊN VẬT LIỆU

5.2.1. Hoá chất, chất chuẩn

5.2.2. Mẫu huyết tương trắng

5.2.3. Dung môi, hoá chất. Dụng cụ, thiết bị

5.3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

5.3.1. Xây dựng và xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp phân tích trên hệ thống LC-MS/MS

5.3.2. Xây dựng điều kiện khối phổ xác định VDG và chuẩn nội

5.3.3. Khảo sát điều kiện sắc ký

5.3.4. Khảo sát quy trình xử lý mẫu huyết tương

5.3.5. Xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp phân tích

5.3.6. Phương pháp tính kết quả

5.3.7. Xác định nồng độ VDG trong mẫu huyết tương người tình nguyện

6. CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

6.1. KẾT QUẢ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH

6.1.1. Điều kiện khối phổ và lựa chọn chuẩn nội để định lượng Vildagliptin

6.1.2. Điều kiện khối phổ định lượng Vildagliptin

6.1.3. Khảo sát lựa chọn chuẩn nội

6.1.4. Tối ưu hóa các điều kiện khối phổ

6.1.5. Khảo sát điều kiện sắc ký

6.1.6. Nghiên cứu quy trình xử lý mẫu huyết tương

6.1.7. Xây dựng phương pháp định lượng VDG trong huyết tương

6.1.8. Quy trình xử lý mẫu huyết tương

6.1.9. Điều kiện khối phổ

6.1.10. Xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp

6.1.11. Sự phù hợp của hệ thống LC-MS/MS

6.1.12. Độ chọn lọc của phương pháp

6.1.13. Đường chuẩn và khoảng tuyến tính

6.1.14. Xác định giới hạn định lượng dưới (LLOQ)

6.1.15. Ảnh hưởng của nền mẫu

6.1.16. Độ đúng, độ chính xác trong ngày và khác ngày

6.1.17. Độ lặp lại khi tiêm lại

6.1.18. Độ đúng, độ chính xác khác khi pha loãng mẫu 2 lần

6.1.19. Xác định độ thu hồi của chất phân tích và chuẩn nội

6.1.20. Nghiên cứu độ ổn định

6.2. KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG VDG TRONG HUYẾT TƯƠNG NGƯỜI TÌNH NGUYỆN

6.3. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về Vildagliptin

Vildagliptin là một chất ức chế dipeptidyl-peptidase-4 (DPP-4) mạnh, có tác dụng cải thiện kiểm soát đường huyết ở bệnh nhân đái tháo đường type 2. Việc định lượng vildaglitin trong huyết tương là rất quan trọng để đánh giá hiệu quả điều trị và chất lượng thuốc. Nghiên cứu này nhằm xây dựng phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương bằng sắc ký lỏng khối phổ, một kỹ thuật hiện đại với độ nhạy và độ chọn lọc cao. Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp thông tin cần thiết cho việc đánh giá tương đương sinh học và sinh khả dụng của thuốc, từ đó hỗ trợ bác sĩ trong việc điều chỉnh liều dùng cho bệnh nhân.

II. Phương pháp định lượng Vildagliptin

Phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương được thực hiện thông qua kỹ thuật sắc ký lỏng khối phổ (LC-MS/MS). Quy trình này bao gồm các bước xử lý mẫu như chiết tách và phân tích. Kỹ thuật chiết tách lỏng-lỏng (LLE) và kết tủa protein (PPT) được áp dụng để loại bỏ tạp chất trong mẫu huyết tương. Đường chuẩn và khoảng tuyến tính được xác định để đảm bảo độ chính xác và độ nhạy của phương pháp. Kết quả cho thấy phương pháp này có thể đạt được giới hạn định lượng dưới (LLOQ) thấp, cho phép phát hiện nồng độ vildaglitin trong huyết tương một cách hiệu quả.

III. Kết quả và thảo luận

Kết quả nghiên cứu cho thấy phương pháp sắc ký lỏng khối phổ đã được tối ưu hóa với điều kiện khối phổ và sắc ký phù hợp. Độ chính xác và độ lặp lại của phương pháp được xác nhận thông qua các thử nghiệm thực nghiệm. Đặc biệt, ảnh hưởng của nền mẫu đến kết quả phân tích cũng được đánh giá kỹ lưỡng. Các kết quả này không chỉ khẳng định tính khả thi của phương pháp mà còn mở ra hướng đi mới cho việc nghiên cứu và phát triển các chế phẩm chứa vildaglitin tại Việt Nam. Việc áp dụng phương pháp này trong thực tiễn sẽ góp phần nâng cao chất lượng thuốc và đáp ứng nhu cầu điều trị cho bệnh nhân.

IV. Ứng dụng thực tiễn

Phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương bằng sắc ký lỏng khối phổ không chỉ có giá trị trong nghiên cứu mà còn có ứng dụng thực tiễn trong ngành dược phẩm. Kết quả nghiên cứu có thể được sử dụng để đánh giá tương đương sinh học của các chế phẩm chứa vildaglitin, từ đó giúp các bác sĩ lựa chọn thuốc phù hợp cho bệnh nhân. Hơn nữa, việc xác định nồng độ vildaglitin trong huyết tương sẽ hỗ trợ trong việc điều chỉnh liều dùng, đảm bảo hiệu quả điều trị tối ưu và giảm thiểu tác dụng phụ. Điều này đặc biệt quan trọng trong bối cảnh gia tăng số lượng bệnh nhân đái tháo đường type 2 tại Việt Nam.

Luận văn thạc sĩ: Phương pháp định lượng vildaglitin trong huyết tương người sử dụng sắc ký lỏng khối phổ