Nghiên cứu đặc điểm sinh học và chẩn đoán potyvirus gây bệnh trên chanh leo

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. PHẦN 1: MỞ ĐẦU

1.1. Mục đích và yêu cầu

2. PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Cây chanh leo

2.2. Giới thiệu sơ lược về cây chanh leo

2.3. Tình hình sản xuất chanh leo trên thế giới

2.4. Tình hình nghiên cứu trong nước

2.5. Thành phần bệnh hại chanh leo

2.5.1. Bệnh do nấm

2.5.2. Bệnh do vi khuẩn

2.5.3. Bệnh do tuyến trùng

2.6. Đặc điểm chung

3. PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1. Địa điểm nghiên cứu

3.2. Thời gian nghiên cứu

3.3. Đối tượng nghiên cứu

3.4. Vật liệu nghiên cứu

3.4.1. Cây nguồn bệnh

3.4.2. Đệm lây nhiễm bằng tiếp xúc cơ học

3.4.3. Vật liệu Elisa

3.4.4. Vật liệu PCR/RT-PCR

3.5. Phương pháp nghiên cứu

3.5.1. Phương pháp lây nhiễm nhân tạo virus bằng tiếp xúc cơ học

3.5.2. Phương pháp lây nhiễm nhân tạo virus bằng rệp theo kiểu truyền không bền vững

3.5.3. Phương pháp chiết RNA

3.5.4. Phương pháp RT-PCR two steps phát hiện potyvirus

3.5.5. Điện di sản phẩm PCR trên gel Agarose 1%

4. PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1. NGHIÊN CỨU đặc điểm sinh học của PaMoV

4.1.1. Kết quả lây nhiễm nhân tạo PaMoV trên cây chỉ thị rau muối bằng tiếp xúc cơ học

4.1.2. Kết quả lây nhiễm nhân tạo PaMoV trên cây chỉ thị thuốc lá bằng tiếp xúc cơ học

4.1.3. Kết quả lây nhiễm nhân tạo PaMoV trên một số cây trồng bằng tiếp xúc cơ học

4.1.4. Kết quả lây nhiễm nhân tạo PaMoV trên chanh leo bằng tiếp xúc cơ học

4.1.5. Kết quả lây nhiễm nhân tạo PaMoV trên chanh leo bằng rệp muội

4.2. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của TELOSMA MOSAIC VIRUS (TelMoV)

4.2.1. Kết quả lây nhiễm nhân tạo TelMV trên cây chỉ thị rau muối

4.2.2. Kết quả lây nhiễm nhân tạo TelMV trên cây chỉ thị thuốc lá bằng tiếp xúc cơ học

4.2.3. Kết quả lây nhiễm nhân tạo TelMV trên một số cây trồng bằng tiếp xúc cơ học

4.2.4. Kết quả lây nhiễm nhân tạo TelMV trên chanh leo bằng rệp muội và tiếp xúc cơ học

4.3. Nghiên cứu đặc điểm sinh học của East Asion Passiflora virus chủng IB (EAPV-IB)

4.3.1. Kết quả lây nhiễm nhân tạo EAPV-IB trên cây chỉ thị bằng tiếp xúc cơ học

4.3.2. Kết quả lây nhiễm nhân tạo EAPV-IB trên một số cây trồng bằng tiếp xúc cơ học

4.3.3. Kết quả lây nhiễm EAPV trên chanh leo bằng rệp muội

4.4. Đánh giá ảnh hưởng lây nhiễm chéo potyvirus trên chanh leo bằng tiếp xúc cơ học

4.5. Chẩn đoán potyvirus hại chanh leo tại Việt Nam bằng ELISA và RT-PCR

5. PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu và mục đích nghiên cứu

Nghiên cứu tập trung vào đặc điểm sinh học và chẩn đoán các loại potyvirus gây bệnh trên cây chanh leo. Mục tiêu chính là xác định tính gây bệnh của các potyvirus như PaMoV, TelMV, và EAPV-IB, đồng thời đánh giá hiệu quả của các phương pháp chẩn đoán dựa trên kháng thể và RT-PCR. Nghiên cứu này nhằm cung cấp cơ sở khoa học để phát triển các biện pháp phòng trừ hiệu quả, góp phần bảo vệ sản xuất nông nghiệp và nâng cao chất lượng cây trồng.

1.1. Đặt vấn đề

Chan leo là cây trồng có giá trị kinh tế cao, nhưng thường bị ảnh hưởng bởi các bệnh do virus thực vật, đặc biệt là potyvirus. Các bệnh này gây thiệt hại nghiêm trọng đến năng suất và chất lượng quả. Việc nghiên cứu đặc điểm sinh học và phát triển phương pháp chẩn đoán virus là cần thiết để kiểm soát dịch bệnh.

1.2. Mục tiêu và yêu cầu

Nghiên cứu nhằm xác định đặc điểm virus và đánh giá hiệu quả của các kỹ thuật chẩn đoán như ELISA và RT-PCR. Yêu cầu bao gồm đánh giá tính gây bệnh của các potyvirus trên cây chỉ thị và khả năng lan truyền qua rệp muội.

II. Tổng quan về cây chanh leo và bệnh hại

Cây chanh leo (Passiflora edulis) là cây trồng quan trọng trong nông nghiệp, đặc biệt ở vùng nhiệt đới. Tuy nhiên, cây thường bị ảnh hưởng bởi nhiều loại bệnh, bao gồm bệnh cây trồng do nấm, vi khuẩn, và virus. Trong đó, potyvirus là tác nhân gây bệnh nghiêm trọng, ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng quả.

2.1. Đặc điểm thực vật học

Cây chanh leo là cây leo thân gỗ, có nguồn gốc từ Nam Mỹ. Cây phát triển tốt ở vùng khí hậu nhiệt đới và cận nhiệt đới. Quả chanh leo có giá trị dinh dưỡng cao, được sử dụng rộng rãi trong công nghiệp thực phẩm.

2.2. Bệnh hại trên cây chanh leo

Các bệnh hại chính bao gồm bệnh do nấm như Alternaria passiflorae, bệnh do vi khuẩn như Xanthomonas campestris, và bệnh do virus như potyvirus. Các bệnh này gây thiệt hại nghiêm trọng đến năng suất và chất lượng quả.

III. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng các phương pháp lây nhiễm nhân tạo bằng tiếp xúc cơ học và qua rệp muội, kết hợp với kỹ thuật RT-PCR và ELISA để chẩn đoán potyvirus. Các phương pháp này giúp xác định đặc điểm sinh học và khả năng gây bệnh của các loại virus.

3.1. Lây nhiễm nhân tạo

Phương pháp lây nhiễm nhân tạo được thực hiện trên các cây chỉ thị như rau muối và thuốc lá để đánh giá tính gây bệnh của PaMoV, TelMV, và EAPV-IB.

3.2. Chẩn đoán virus

Kỹ thuật RT-PCR và ELISA được sử dụng để phát hiện và xác định sự hiện diện của potyvirus trên cây chanh leo. Các phương pháp này cho kết quả chính xác và nhanh chóng.

IV. Kết quả và thảo luận

Nghiên cứu đã xác định được đặc điểm sinh học của các loại potyvirus như PaMoV, TelMV, và EAPV-IB. Kết quả cho thấy các virus này có khả năng gây bệnh trên cây chanh leo và lan truyền qua rệp muội. Phương pháp ELISA và RT-PCR đều hiệu quả trong việc chẩn đoán bệnh lý cây chanh leo.

4.1. Đặc điểm sinh học của PaMoV

PaMoV gây bệnh cục bộ trên cây rau muối đỏ và không gây bệnh trên cây rau muối trắng. Virus này không lây nhiễm qua rệp đậu nhưng có thể lây nhiễm qua tiếp xúc cơ học.

4.2. So sánh phương pháp chẩn đoán

Phương pháp ELISA sử dụng kháng huyết thanh PaMoV cho kết quả nhạy và ổn định hơn so với RT-PCR trong việc phát hiện potyvirus trên cây chanh leo.

V. Kết luận và kiến nghị

Nghiên cứu đã cung cấp cái nhìn toàn diện về đặc điểm sinh học và phương pháp chẩn đoán các loại potyvirus gây bệnh trên cây chanh leo. Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các biện pháp bảo vệ thực vật và điều trị bệnh cây.

5.1. Kết luận

Các loại potyvirus như PaMoV, TelMV, và EAPV-IB có khả năng gây bệnh nghiêm trọng trên cây chanh leo. Phương pháp ELISA và RT-PCR là công cụ hiệu quả trong chẩn đoán và kiểm soát bệnh.

5.2. Kiến nghị

Cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về cơ chế gây bệnh của potyvirus và phát triển các biện pháp phòng trừ hiệu quả, đặc biệt là sử dụng giống cây kháng bệnh và kiểm soát vector truyền bệnh.

Khóa Luận Tốt Nghiệp: Nghiên Cứu Đặc Điểm Sinh Học Và Chẩn Đoán Potyvirus Gây Bệnh Trên Chanh Leo