Luận văn tốt nghiệp: Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật RAPD PCR để đánh giá đa dạng di truyền của cam bố hạ

• Tác giả: Trần Anh Phương
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Văn Duy
• Trường học: Đại học Thái Nguyên
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Nghiên Cứu Đa Dạng Di Truyền Cam Bố Hạ Bằng Kỹ Thuật RAPD PCR
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2021
• Địa điểm: Thái Nguyên

• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỤC LỤC
• 1.1. DANH MỤC BẢNG
• 1.2. DANH MỤC HÌNH
• 1.3. DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
• 1.4. Mục tiêu của đề tài
• 1.4.1. Mục tiêu tổng quát
• 1.4.2. Mục tiêu cụ thể
• 1.5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn
• 1.5.1. Ý nghĩa khoa học của đề tài
• 1.5.2. Ý nghĩa thực tiễn của đề tài
• 1.6. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.6.1. Nguồn gốc và phân loại cam, quýt
• 1.6.2. Giá trị cây cam, quýt
• 1.6.3. Tình hình sản xuất và tiêu thụ cam quýt trên thế giới và trong nước
• 1.6.4. Các kĩ thuật sinh học phân tử trong đánh giá đa dạng di truyền
• 1.6.4.1. Kỹ thuật RAPD
• 1.6.4.2. Một số kỹ thuật khác
• 1.6.5. Tình hình nghiên cứu về đa dạng di truyền ở trên thế giới và trong nước
• 1.6.5.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới
• 1.6.5.2. Tình hình nghiên cứu trong nước
• 1.7. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 1.7.1. Đối tượng nghiên cứu và phạm vi nghiên cứu
• 1.7.1.1. Đối tượng nghiên cứu
• 1.7.1.2. Phạm vi nghiên cứu
• 1.7.2. Vật liệu, thiết bị và hóa chất nghiên cứu
• 1.7.2.1. Vật liệu nghiên cứu
• 1.7.2.2. Thiết bị nghiên cứu
• 1.7.3. Nội dung nghiên cứu
• 1.7.4. Phương pháp nghiên cứu
• 1.7.4.1. Phương pháp đánh giá hình thái
• 1.7.4.2. Phương pháp tách chiết DNA tổng số
• 1.7.4.3. Phương điện di trên gel
• 1.7.4.4. Phương pháp RAPD
• 1.7.4.5. Phương pháp phân tích đa hình
• 1.7.5. Các phương pháp xử lý số liệu
• 1.8. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 1.8.1. Kết quả mô tả hình thái của các dòng cam, quýt
• 1.8.1.1. Hình thái hoa
• 1.8.1.2. Hình thái quả
• 1.8.2. Kết quả đánh giá đa dạng di truyền của các dòng/giống cam nghiên cứu bằng chỉ thị phân tử RAPD và ISSR
• 1.8.2.1. Kết quả tách chiết DNA tổng số từ lá cam, quýt
• 1.8.2.2. Kết quả phân tích đa hình các dòng/giống cam sử dụng các chỉ thị mồi ISSR và RAPD
• 1.8.2.3. Xác định mối quan hệ di truyền giữa các giống cam, quýt dựa trên giản đồ phả hệ DNA
• 2. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về cam Bố Hạ

Cam Bố Hạ (Citrus sinensis) là một trong những giống cam nổi tiếng tại Việt Nam, đặc biệt ở Bắc Giang. Với diện tích trồng lên tới 120 nghìn ha vào năm 2019, cam Bố Hạ không chỉ có giá trị dinh dưỡng cao mà còn mang lại giá trị kinh tế lớn cho người trồng. Đặc điểm nổi bật của cam Bố Hạ là màu vàng rực rỡ khi chín, cùi dày và vị ngọt đậm. Tuy nhiên, giống cam này đang đứng trước nguy cơ mai một do dịch bệnh. Việc nghiên cứu đa dạng di truyền của cam Bố Hạ là cần thiết để bảo tồn và phát triển giống cây này. Kỹ thuật RAPD PCR được áp dụng để đánh giá mối quan hệ di truyền giữa cam Bố Hạ và các giống cam khác, từ đó giúp xác định các biện pháp bảo tồn hiệu quả.

1.1. Tình hình sản xuất cam Bố Hạ

Tình hình sản xuất cam Bố Hạ tại Bắc Giang đã có sự phát triển mạnh mẽ trong những năm qua. Tuy nhiên, do sự xuất hiện của nhiều giống cam mới và dịch bệnh, sản lượng cam Bố Hạ có xu hướng giảm. Việc áp dụng các kỹ thuật sinh học phân tử như kỹ thuật RAPD PCR sẽ giúp xác định chính xác nguồn gốc và tính đa dạng di truyền của giống cam này. Điều này không chỉ giúp bảo tồn giống cam Bố Hạ mà còn tạo cơ sở cho việc phát triển các giống cam mới có chất lượng cao hơn.

II. Kỹ thuật RAPD PCR trong nghiên cứu di truyền

Kỹ thuật RAPD PCR (Random Amplified Polymorphic DNA) là một phương pháp mạnh mẽ trong việc phân tích đa dạng di truyền. Kỹ thuật này sử dụng các đoạn mồi ngẫu nhiên để khuếch đại các đoạn DNA, từ đó tạo ra các mẫu DNA khác nhau tùy thuộc vào trình tự DNA đích. RAPD PCR có nhiều ưu điểm như thao tác đơn giản, chi phí thấp và không yêu cầu nhiều thiết bị phức tạp. Tuy nhiên, kỹ thuật này cũng có những hạn chế như độ ổn định của sản phẩm PCR không cao. Việc áp dụng RAPD PCR trong nghiên cứu di truyền cam Bố Hạ sẽ giúp xác định mối quan hệ di truyền giữa các giống cam, từ đó cung cấp thông tin quan trọng cho công tác bảo tồn và phát triển giống cây này.

2.1. Quy trình thực hiện kỹ thuật RAPD PCR

Quy trình thực hiện kỹ thuật RAPD PCR bao gồm ba bước chính: tách chiết DNA tổng số, nhân bản DNA bằng phương pháp PCR và điện di trên gel agarose. Đầu tiên, DNA được tách chiết từ mẫu lá cam, sau đó sử dụng các đoạn mồi ngẫu nhiên để khuếch đại các đoạn DNA. Kết quả khuếch đại sẽ được phân tích bằng điện di trên gel agarose để xác định tính đa dạng di truyền. Kỹ thuật này đã được áp dụng thành công trong nhiều nghiên cứu trước đây, cho thấy khả năng phân loại và đánh giá mối quan hệ di truyền giữa các loài thực vật.

III. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của nghiên cứu

Nghiên cứu đa dạng di truyền của cam Bố Hạ bằng kỹ thuật RAPD PCR không chỉ có ý nghĩa khoa học mà còn mang lại giá trị thực tiễn cao. Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp các dữ liệu khoa học quan trọng về mối quan hệ di truyền giữa cam Bố Hạ và các giống cam khác. Điều này sẽ hỗ trợ cho công tác bảo tồn và phát triển giống cam Bố Hạ, giúp khôi phục lại thương hiệu cam nổi tiếng. Hơn nữa, việc xác định tính đa dạng di truyền sẽ tạo cơ sở cho việc lai tạo giống cam mới có chất lượng tốt hơn, đáp ứng nhu cầu thị trường.

3.1. Ứng dụng trong bảo tồn giống cam

Kết quả từ nghiên cứu sẽ giúp xác định các biện pháp bảo tồn hiệu quả cho giống cam Bố Hạ. Việc hiểu rõ về tính trạng di truyền và mối quan hệ giữa các giống cam sẽ giúp các nhà khoa học và nông dân có những quyết định đúng đắn trong việc bảo tồn và phát triển giống cây này. Bên cạnh đó, nghiên cứu cũng sẽ góp phần nâng cao nhận thức của cộng đồng về giá trị của giống cam Bố Hạ, từ đó thúc đẩy các hoạt động bảo tồn và phát triển bền vững.