Luận văn thạc sĩ hay nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn xanthomonas oryzae pv oryzae

Luận văn thạc sĩ nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn xanthomonas oryzae pv oryzae, góp phần bảo vệ cây lúa.

• Tác giả: Ngô Bích Ngọc
• Người hướng dẫn: Ts. Nguyễn Thị Hòa
• Trường học: Viện Sinh Thái Và Tài Nguyên Sinh Vật
• Chuyên ngành: Động vật học
• Đề tài: Nghiên cứu sản xuất chế phẩm vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv.oryzae gây bệnh bạc lá trên cây lúa
• Loại tài liệu: Luận văn thạc sỹ
• Năm xuất bản: 2017
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• 1. Phần 1: Đặt vấn đề
• 1.1. Mục tiêu và nội dung nghiên cứu
• 2. Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Bệnh bạc lá lúa
• 2.2. Tác nhân gây bệnh bạc lá lúa
• 2.3. Các biện pháp phòng trừ bệnh bạc lá lúa
• 2.3.1. Sử dụng thuốc hóa học
• 2.3.2. Chọn giống lúa kháng bệnh
• 2.3.3. Biện pháp sinh học
• 2.3.3.1. Sử dụng vi sinh vật đối kháng trong phòng trừ bệnh bạc lá trên cây lúa
• 2.3.3.2. Giới thiệu chung về xạ khuẩn
• 2.3.3.3. Khả năng sinh chất kháng sinh của xạ khuẩn
• 2.3.3.4. Vi khuẩn Bacillus
• 2.3.3.4.1. Giới thiệu chung về vi khuẩn Bacillus
• 2.3.3.4.2. Khả năng sinh hoạt chất của vi khuẩn
• 3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Vật liệu và hóa chất
• 3.2. Hóa chất và dụng cụ
• 3.3. Môi trường nghiên cứu
• 3.4. Phương pháp nghiên cứu
• 3.4.1. Phương pháp phân lập Bacillus
• 3.4.2. Phương pháp thử hoạt tính kháng vi sinh vật
• 3.4.3. Phương pháp đánh giá khả năng đồng sinh trưởng của các chủng vi sinh vật được tuyển chọn
• 3.4.4. Nghiên cứu các điều kiện nuôi cấy các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 3.4.4.1. Ảnh hưởng của nguồn dinh dưỡng đến sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 3.4.4.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 3.4.4.3. Ảnh hưởng của pH đến sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 3.4.5. Bố trí thí nghiệm
• 3.4.6. Đánh giá khả năng đối kháng của chế phẩm với các chủng vi khuẩn Xoo
• 3.4.7. Đánh giá khả năng phòng trừ bệnh bạc lá trên lúa
• 3.4.8. Đánh giá độc tính của chế phẩm
• 3.4.8.1. Phương pháp thử độc cấp
• 3.4.8.2. Phương pháp thử độc tính bán trường diễn
• 3.4.9. Sản xuất chế phẩm
• 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 4.1. Tuyển chọn các chủng vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv.
• 4.2. Đánh giá tính kháng Xanthomonas oryzae pv. oryzae của các chủng vi khuẩn, xạ khuẩn
• 4.2.1. Đặc điểm sinh học của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.2.2. Đặc điểm hình thái các chủng xạ khuẩn tuyển chọn
• 4.2.3. Đặc điểm hình thái các chủng Bacillus tuyển chọn
• 4.2.4. Đánh giá khả năng đồng sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.2.5. Nghiên cứu các điều kiện nuôi cấy các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3. Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.1. Ảnh hưởng của pH
• 4.3.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ
• 4.3.3. Khả năng chịu mặn
• 4.3.4. Ảnh hưởng của nguồn dinh dưỡng đến sinh trưởng và sinh chất đối kháng vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.1. Ảnh hưởng của nguồn cacbon đến sự sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.2. Xác định nồng độ cacbon cần thiết cho các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.3. Ảnh hưởng của nguồn nitơ đến sự sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.4. Xác định nồng độ nitơ cần thiết cho các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.5. Nguồn khoáng
• 4.3.4.6. Ảnh hưởng của nguồn khoáng đến sự sinh trưởng của các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.3.4.7. Xác định nồng độ khoáng cần thiết cho các chủng vi sinh vật tuyển chọn
• 4.4. Sản xuất và ứng dụng chế phẩm phòng trừ bệnh bạc lá qui mô phòng thí nghiệm
• 4.4.1. Sản xuất chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae pv.
• 4.4.2. Đánh giá độc tính cấp và độc tính bán trường diễn của sản phẩm
• 4.4.3. Đánh giá hiệu quả phòng trừ bệnh bạc lá của chế phẩm ở qui mô phòng thí nghiệm
• 4.4.4. Đánh giá khả năng đối kháng của chế phẩm với vi khuẩn Xoo trong môi trường lỏng
• 4.4.5. Đánh giá khả năng phòng trừ bệnh bạc lá trên lúa ở quy mô phòng thí nghiệm
• 5. Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae

Nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae trên cây lúa là một lĩnh vực quan trọng trong nông nghiệp hiện đại. Bệnh bạc lá lúa do vi khuẩn Xanthomonas oryzae gây ra đã trở thành một trong những vấn đề nghiêm trọng nhất đối với sản xuất lúa gạo. Việc phát triển các chế phẩm vi sinh vật kháng bệnh không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn giảm thiểu việc sử dụng hóa chất độc hại trong nông nghiệp.

1.1. Tầm quan trọng của cây lúa trong nông nghiệp Việt Nam

Cây lúa là nguồn thực phẩm chính cho hơn một nửa dân số thế giới. Tại Việt Nam, lúa gạo không chỉ là nguồn thực phẩm mà còn là nguồn thu ngoại tệ lớn cho nền kinh tế.

1.2. Bệnh bạc lá lúa và tác động của Xanthomonas oryzae

Bệnh bạc lá lúa do vi khuẩn Xanthomonas oryzae gây ra có thể làm giảm năng suất lúa từ 25-50%. Việc kiểm soát bệnh này là rất cần thiết để đảm bảo an ninh lương thực.

II. Thách thức trong việc kiểm soát bệnh bạc lá lúa

Việc kiểm soát bệnh bạc lá lúa gặp nhiều thách thức, bao gồm sự phát triển nhanh chóng của các chủng vi khuẩn kháng thuốc và sự phụ thuộc vào hóa chất. Các biện pháp truyền thống như sử dụng thuốc hóa học không còn hiệu quả như trước, dẫn đến nhu cầu tìm kiếm các giải pháp bền vững hơn.

2.1. Sự phát triển của các chủng vi khuẩn kháng thuốc

Các chủng vi khuẩn Xanthomonas oryzae đã phát triển khả năng kháng thuốc, làm cho việc điều trị bằng hóa chất trở nên khó khăn hơn.

2.2. Tác động của biến đổi khí hậu đến bệnh bạc lá

Biến đổi khí hậu đã làm thay đổi điều kiện môi trường, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của bệnh bạc lá lúa.

III. Phương pháp nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật kháng bệnh

Nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae bao gồm nhiều phương pháp khác nhau, từ việc phân lập các chủng vi sinh vật đến thử nghiệm khả năng kháng bệnh. Các phương pháp này giúp xác định hiệu quả của các chế phẩm trong việc phòng trừ bệnh bạc lá.

3.1. Phân lập và tuyển chọn các chủng vi sinh vật

Quá trình phân lập các chủng vi sinh vật kháng bệnh từ môi trường tự nhiên là bước đầu tiên trong nghiên cứu chế phẩm.

3.2. Thử nghiệm khả năng kháng bệnh của chế phẩm

Các thử nghiệm được thực hiện để đánh giá khả năng kháng bệnh của các chế phẩm vi sinh vật đối với vi khuẩn Xanthomonas oryzae.

IV. Ứng dụng thực tiễn của chế phẩm vi sinh vật kháng bệnh

Chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae đã được ứng dụng trong thực tiễn và cho thấy hiệu quả cao trong việc phòng trừ bệnh bạc lá lúa. Việc sử dụng chế phẩm này không chỉ giúp bảo vệ cây trồng mà còn góp phần bảo vệ môi trường.

4.1. Kết quả nghiên cứu tại các địa phương

Nghiên cứu cho thấy chế phẩm vi sinh vật kháng bệnh đã giúp giảm thiểu đáng kể tỷ lệ nhiễm bệnh bạc lá lúa tại nhiều địa phương.

4.2. Lợi ích kinh tế từ việc sử dụng chế phẩm

Việc sử dụng chế phẩm vi sinh vật không chỉ giúp tăng năng suất lúa mà còn giảm chi phí cho nông dân.

V. Kết luận và triển vọng tương lai của nghiên cứu

Nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật kháng Xanthomonas oryzae trên cây lúa mở ra nhiều triển vọng cho ngành nông nghiệp bền vững. Việc phát triển các chế phẩm này sẽ giúp giảm thiểu tác động của bệnh bạc lá lúa và bảo vệ môi trường.

5.1. Tương lai của nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật

Nghiên cứu sẽ tiếp tục mở rộng để tìm kiếm các chủng vi sinh vật mới có khả năng kháng bệnh cao hơn.

5.2. Định hướng phát triển nông nghiệp bền vững

Việc áp dụng các chế phẩm vi sinh vật kháng bệnh sẽ góp phần vào việc phát triển nông nghiệp bền vững và bảo vệ môi trường.

Trích đoạn nội dung tài liệu

mở đầu bằng việc gieo trồng các giống lúa cải tiến, chịu phân, cho năng suất cao, kết hợp với việc sử dụng nhiều phân bón, đặc biệt là phân đạm thì bệnh bạc lá thực sự trở nên nghiêm trọng và thường xuyên gây hại trong vụ mùa. Bệnh đã phát triển thành dịch lớn ở một số tỉnh Đồng bằng sông hồng trong vòng từ năm 1968 - 1975 [43]. Những năm gần đây, bệnh bạc lá có xu hướng tăng lên và gây hại ở cả vụ xuân. Điều này do nhiều nguyên nhân gây 14 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc nên, trong đó phải kể đến việc gieo trồng và sử dụng rộng rãi các giống lúa nhập nội từ Trung Quốc, chưa qua khâu đánh giá tính chống bệnh.

Phần lớn các giống này có phản ứng nhiễm vừa đến nhiễm nặng đối với các chủng vi khuẩn gây bệnh bạc lá ở Việt Nam. Theo số liệu thống kê của cục Bảo vệ Thực vật, từ năm 1999 - 2003 diện tích lúa bị hại do bệnh bạc lá gây ra trong cả nước là 108.691,4 ha (miền Bắc là 86.429,2 ha; miền Nam là 22.262,2 ha), trong đó diện tích bị hại nặng nhất là 156,76 ha và diện tích mất trắng là 80 ha. Từ năm 2010 đến năm 2011 diện tích cây mắc bệnh tăng nhẹ và đột ngột tăng cao trong giai đoạn từ năm 2011 đến năm 2012. Diện tích lúa bị mắc bệnh năm 2012 là 90,543 nghìn ha, cao gấp gần 4 lần so với năm 2011 (26 nghìn ha) đến năm 2013 diện tích lúa bị mắc bệnh đã tăng đến 135,4 nghìn ha.

Trong đó diện tích lúa bị nhiễm nặng là hơn 9,5 nghìn ha. Bệnh bạc lá phát sinh trong suốt thời kỳ lúa chín nhưng các triệu chứng bệnh điển hình thường xuất hiện từ thời kỳ đẻ nhánh đến thời kỳ trổ và chín, đạt đỉnh ở giai đoạn ra hoa [17]. Nếu xảy ra trong thời kỳ đẻ nhánh sớm sẽ dẫn đến mất mùa một phần hoặc hoàn toàn, bệnh lây lan dễ dàng hơn ở vùng khí hậu ấm áp và ẩm. Lúa bị nhiễm bệnh bạc lá do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv.

oryzae 15 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc 1. Tác nhân gây bệnh bạc lá lúa Tác nhân gây bệnh bạc lá lúa là vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. Trước đây, vi khuẩn này còn được gọi bằng rất nhiều tên khác như: Bacillus Oryzae Hori et Boruka, Pseudomonas Oryzae Uyeda et Ishiyama, Xathomonas Oryzae, Dowson [42]. Vi khuẩn này có tế bào hình que với đầu tròn, với chiều dài từ 0,8 - 1 µm chiều rộng 0,4 đến 0,7 μm, bao quanh tế bào là một màng nhầy.

Đây là loại vi khuẩn Gram âm và không sinh bào tử, khuẩn lạc hình tròn, lồi, bề mặt nhẵn, màu vàng [3]. Vi khuẩn này chủ yếu xâm nhập vào hệ thống mạch dẫn rồi dẫn đến nhiễm trùng toàn thân cây lúa. Những chất dinh dưỡng ở dạng phức tạp sẽ được chuyển thành dạng đơn giản, nhờ hệ thống men của vi khuẩn trước khi được hấp thụ [35]. Ngoài ra vi khuẩn còn có thể xâm nhập qua lỗ thùy khổng ở mép lá, đầu mút lá dễ dàng gây tổn thương dọc theo gân lá [23,48].

Khuẩn lạc và tế bào của vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae Xoo là một loại vi khuẩn Gram âm sản sinh lượng lớn polysaccharide ngoại bào (EPS). Các chủng đột biến thiếu EPS không có khả năng gây bệnh bạc lá lúa [30]. Xoo chỉ có thể tồn tại trong đất từ một đến hai tháng, ngoài ra Xoo có thể tồn 16 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc tại trong hạt giống của các cây lúa bị nhiễm, hay trong rơm rạ.

Các vi khuẩn gây bệnh bạc lá xâm nhập vào cây qua các vết thương xây xát ở trên lá do mưa bão gây ra và qua các lỗ khí khổng, sau đó sẽ gây bệnh trên các mô và từ đó sẽ nhân và lây lan toàn bộ cây dẫn đến nhiễm trùng toàn thân [14]. Vi khuẩn lây lan thông qua nước tưới, mưa và gió. Ở một số nước nhiệt đới, do thói quen xén đầu lá mạ trước khi cấy vô tình đã tạo điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn xâm nhập vào bên trong và gây hại [38]. Ngoài con đường xâm nhập qua lá, vi khuẩn còn có thể xâm nhập vào hệ thống mạch nhựa ở rễ qua phần rễ bị đứt trong quá trình nhổ mạ cấy.

Khi vi khuẩn xâm nhập qua rễ, cây lúa thường biểu hiện triệu chứng Kresek, làm lá và toàn bộ cây bị héo rũ. Sự sinh sản độc tố của vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae: Theo Ogawa và cộng tác viên (1996) lần đầu tiên đã tách, chiết được Phenylacetic axit thô trên môi trường Wakimoto nuôi cấy vi khuẩn sau đó sử dụng dịch chiết để xử lí mạ. Kết quả cho thấy Phenylacetic axit có khả năng gây héo mạ non, ức chế sự phát triển của cây mạ sau 3 ngày xử lí.

Puruthosaman và Prasad (1972) đã tách chiết được phenolic trong môi trường nuôi cấy vi khuẩn Xoo sau đó xử lý lá lúa non và cho kết quả lá bị héo rất nhanh chỉ sau 12h, trong khi đó, đối chứng xử lí bằng nước cât vô trùng sau 4 ngày lá lúa mới bắt đầu vàng úa nhưng không có hiện tượng héo như khi xử lý dịch chiết vi khuẩn Xoo[39]. Các biện pháp phòng trừ bệnh bạc lá lúa Bệnh bạc lá lúa gây tổn thất nặng nề và ảnh hưởng nghiêm trọng đến sản xuất lúa gạo, do vậy đòi hỏi phải có chiến lược quản lý nhằm chống lại sự bùng phát của dịch bệnh. Bước đầu cần thực hiện để kiểm soát bệnh bạc lá lúa là làm 17 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc giảm tác nhân gây bệnh và ngăn chặn phát triển của tác nhân gây bệnh trên cây chủ. Điều này có thể được thực hiện thông qua việc sử dụng các hóa chất, giống kháng bệnh, và tác nhân sinh học.

Sử dụng thuốc hóa học Thuốc hóa học được sử dụng để giết chết hoặc ức chế sự nhân lên của các tác nhân gây bệnh bằng cách ngăn chặn con đường trao đổi chất của vi khuẩn. Một số hóa chất được sử dụng để kiểm soát bệnh bạc lá lúa như Bordeaux có hoặc không có đường, hỗn hợp đồng xà phòng, thuốc diệt nấm và đồng thủy ngân, dịch phun oxychloride. Ở Ấn Độ, sử dụng bột Clo trong xử lý nước cũng làm giảm bệnh [5]. Một số chất hữu cơ tổng hợp diệt khuẩn cũng đã được sử dụng như niken dimethyl dithiocarbamate, dithianone, phenazine và phenazine N- oxit.

Ngoài ra, thuốc diệt nấm dithiocarbamate cũng ức chế sự phát triển của Xoo bằng cách ngăn chặn quá trình sinh tổng hợp acid béo và lipid [33]. Một vài loại thuốc kháng sinh như streptocycline và các thuốc diệt nấm như zineb, carbendazim cũng được chứng minh là có khả năng ức chế vi khuẩn gây bệnh in vitro. Một số chất diệt khuẩn như kagucamycin, phenazin và streptomycin có thể ngăn chặn được các vi khuẩn gây bạc lá lúa, nhưng lại có nhược điểm là giá thành đắt và không thân thiện với môi trường. Việc sử dụng các thuốc hóa học luôn mang lại hậu quả rất nặng nề đối với môi trường.

Đồng thời, cũng chưa có phương thức kiểm soát bằng hóa chất nào mang lại hiệu quả cao bởi vì khả năng tồn tại và phát triển của các chủng kháng thuốc. Chọn giống lúa kháng bệnh Chọn giống lúa kháng bệnh hiện nay cũng là phương pháp đang được quan tâm, không gây ô nhiễm môi trường và được coi là biện pháp chiến lược trong bất kỳ chương trình phòng chống bệnh nào. Hiện nay, 23 gen kháng bệnh bạc lá lúa 18 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc (Xa) đã được công bố (bảng 2. Các đoạn mồi cũng đã được thiết kế để phát hiện các gen Xa trên các giống lúa khác nhau (bảng 2.

Đặc điểm và nguồn gốc của các gen Xa kháng bệnh bạc lá lúa Tên gen Tên gen Nhiễm Giống, dòng Xa mớiXa1 Xa cũ Xa1 sắc thể4 NST lúa đại diện Kogyoku Xa1-h Xa-1h NST 4 IR28, IR29, IR30 Xa2 Xa2 NST 4 Rentai Emas2, tẻ tép Xa3 Xa-w NST11 Wase Aikoku3 Xa-4b NST11 Semora Mangga Xa-6 NST-5 Zenith Xa-9 NST-6 Sateng Xa4 Xa-4 NST11 TKM6, IR20, UR22 Xa5 Xa-5 NST 4 DZ192,IR1545-339 Xa7 Xa-7 NST 4 DV85, DZ78 Xa8 Xa-8 NST 4 PI231129 Xa10 Xa-10 NST11 Cas 209 Xa11 Xa-11 RP 9-3, IR8 Xa12 Xa-kg NST4 Kogyoku, Java14 Xa12-h Xa-kgh NST 4 IR28, IR29, IR30 Xa13 Xa-13 NST 5 BJ1, Chinsura Boro II Xa14 Xa-14 Tai chung Native 1 Xa15 (t) Xa-nm (t) M41 Xa16 Xa-16 Tẻ tép 19 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc Xa17 Xa-as(t) NST 4 Asominori Xa18 Xa-18 IR24, Milyang 23 Xa19 Xa19 Đột biến XM5 Xa20 Xa-20 Đột biến M6 Xa21 Xa-21 NST 11 IRBB21 Xa22 (t)b Xa-22 (t) NST 11 Zachanglong Xa23 (t)b Xa-23 (t) NST 11 WBB1 Bảng 2. Trình tự các đoạn mồi đặc hiệu để phát hiện gen Xa trên lúa Mồi Trình tự nucleotide Xa-gen MP1 5'-ATC-GAT-CGA-TCT-TCA-CGA-GG-3' Xa-4 MP2 5'-dTG-CTA-TAA-AAG-GCA-TTC-GGG-3' RG 56 F 5'-TAG-CTG-CTG-CCG-TGC-TGT-GC-3' Xa-5 RG556 R 5'-AAT-ATT-TCA-GTG-TGC-ATC-3' P3 F 5'-CAG-CAA-TTC-ACT-GGA-GTA-GTG-GTT-3' Xa-7 P3 R 5'-CAT-CAC-GGT-CAC-CGC-CAT-ATC-GGA-3' Xa21F 5'-ATA-GCA-ACT-GAT-TGC-TTT-GC-3' Xa-21 Xa 21 R 5'- CGA - TCG - GTA - TAA- CAG-CAA-AAC-3' RG136 F 5' - TCC-CAG-AAA-GCT - ACA-GC-3' Xa-13 RG136 R 5' - GCA-GAC-TCC-AGT=TTG-ACT-TC-3' Gen Xa21 lần đầu tiên được phát hiện trong một giống lúa hoang dại Oryza longistaminata và đã được chuyển vào giống lúa IR24 để tạo ra giống lúa kháng 20 LUAN VAN CHAT LUONG download : add [e-mail] Khóa luận tốt nghiệp Ngô Bích Ngọc bệnh IRBB21 [11]. Ở Ấn Độ và Philippin, giống lúa này đã được chứng minh là có khả năng kháng với hầu hết các chủng Xoo. Trong công tác chọn tạo giống, chiến lược chọn tạo giống lúa chống bệnh bạc lá ở Miền Bắc của Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội dùng phương pháp thu thập mẫu bệnh, ứng dụng công nghệ sinh học để phân lập, nuôi cấy và phân biệt gen kháng bệnh bằng PCR đã xác định 16 chủng vi khuẩn Xoo gây bệnh khác nhau.

Các dòng chỉ thị IRBB5 (Xa5), IRBB7 (Xa7), IRBB21 (Xa2) có tính kháng đa số các chủng vi khuẩn gây bệnh. Viện nghiên cứu lúa Đồng bằng sông Cửu Long dùng phương pháp chỉ thị marker kết hợp với chọn giống truyền thống, thanh lọc và đánh giá kiểu hình, kiểu gen các giống lúa mùa địa phương xác định gen kháng bạc lá Xa5, Xa13 trên nhiểm sắc thể số 5, 8 và việc liên kết các gen mục tiêu làm tăng tính kháng rộng của giống lúa [21].