Nghiên Cứu Đặc Điểm Bệnh Lý Của Lợn Mắc Bệnh Dịch Tả Lợn Châu Phi Tại Một Số Tỉnh Phía Bắc Việt Nam

Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của lợn mắc dịch tả lợn châu Phi tại các tỉnh phía Bắc Việt Nam, cung cấp thông tin quan trọng cho ngành chăn nuôi.

• Tác giả: Hoàng Thị Thu Hiền
• Người hướng dẫn: GS. Nguyễn Thị Lan
• Trường học: Học viện Nông nghiệp Việt Nam
• Chuyên ngành: Thú y
• Đề tài: Nghiên Cứu Đặc Điểm Bệnh Lý Chủ Yếu Của Lợn Mắc Bệnh Dịch Tả Lợn Châu Phi Tại Một Số Tỉnh Phía Bắc Việt Nam
• Loại tài liệu: luận văn
• Năm xuất bản: 2020
• Địa điểm: Hà Nội

Mục lục chi tiết

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• MỤC LỤC
• DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG
• DANH MỤC HÌNH
• TRÍCH YẾU LUẬN VĂN
• 1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI
• 2. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI
• 3. PHẠM VI NGHIÊN CỨU
• 4. NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI
• 5. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI
• 6. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 6.1. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU BỆNH DỊCH TẢ LỢN CHÂU PHI
• 6.1.1. Tình hình nghiên cứu bệnh Dịch tả lợn Châu Phi trên thế giới và Việt Nam
• 6.1.2. Tình hình nghiên cứu bệnh Dịch tả lợn Châu Phi trên thế giới
• 7. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng Quan Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn Châu Phi Tại Việt Nam

Nghiên cứu về Dịch tả lợn châu Phi (ASF) tại Việt Nam là vô cùng cấp thiết. Ngành chăn nuôi lợn đóng vai trò quan trọng trong nền kinh tế, nhưng lại chịu ảnh hưởng nặng nề bởi dịch bệnh này. Năm 2018, tổng đàn lợn cả nước đạt 27,8 triệu con, cho thấy tầm quan trọng của ngành. Tuy nhiên, sự bùng phát của Dịch tả lợn châu Phi đã gây ra thiệt hại nghiêm trọng. Từ tháng 2/2019, dịch bệnh lan rộng ra 63 tỉnh thành, với hàng triệu con lợn bị tiêu hủy. Bệnh do virus ASF gây ra, có tỷ lệ chết cao và hiện chưa có vắc xin phòng bệnh. Việc chẩn đoán chính xác và kịp thời là yếu tố then chốt để kiểm soát dịch bệnh. Nghiên cứu này tập trung vào đặc điểm bệnh lý của lợn mắc bệnh tại các tỉnh phía Bắc, nhằm cung cấp thông tin hữu ích cho công tác phòng chống dịch.

1.1. Tính Cấp Thiết Của Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn Châu Phi

Ngành chăn nuôi lợn đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển kinh tế của Việt Nam. Tuy nhiên, sự gia tăng của đàn lợn cũng đi kèm với những thách thức về dịch bệnh. Dịch tả lợn châu Phi đã gây ra thiệt hại nghiêm trọng cho người chăn nuôi. Việc nghiên cứu đặc điểm bệnh lý của bệnh là vô cùng quan trọng để có thể đưa ra các biện pháp phòng chống hiệu quả. Nghiên cứu này tập trung vào các tỉnh phía Bắc, nơi dịch bệnh có diễn biến phức tạp.

1.2. Mục Tiêu Và Phạm Vi Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn Châu Phi

Nghiên cứu này có hai mục tiêu chính: xác định triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể và vi thể của lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi tại các tỉnh phía Bắc; và xác định sự phân bố của virus ASF trong các cơ quan nội tạng của lợn bệnh. Đối tượng nghiên cứu là lợn mắc bệnh Dịch tả lợn châu Phi. Thời gian nghiên cứu kéo dài từ tháng 6/2019 đến tháng 5/2020, được thực hiện tại Phòng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học thú y – Khoa Thú y.

II. Thách Thức Trong Phòng Chống Dịch Tả Lợn Châu Phi

Việc phòng chống Dịch tả lợn châu Phi gặp nhiều thách thức do đặc tính lây lan nhanh và tỷ lệ tử vong cao của bệnh. Hiện tại, chưa có vaccine dịch tả lợn châu Phi hiệu quả, các biện pháp kiểm soát chủ yếu dựa vào việc phát hiện sớm, tiêu hủy lợn bệnh và áp dụng các biện pháp an toàn sinh học. Tuy nhiên, việc phát hiện sớm thường gặp khó khăn do triệu chứng lâm sàng không đặc hiệu ở giai đoạn đầu của bệnh. Bên cạnh đó, nguy cơ lây lan dịch tả lợn châu Phi từ các nguồn khác nhau như thức ăn chăn nuôi, phương tiện vận chuyển và con người cũng là một thách thức lớn. Cần có sự phối hợp chặt chẽ giữa các cơ quan chức năng, người chăn nuôi và cộng đồng để kiểm soát hiệu quả dịch bệnh này.

2.1. Khó Khăn Trong Chẩn Đoán Sớm Dịch Tả Lợn Châu Phi

Chẩn đoán sớm Dịch tả lợn châu Phi là yếu tố then chốt để kiểm soát dịch bệnh. Tuy nhiên, việc chẩn đoán sớm thường gặp khó khăn do triệu chứng lâm sàng không đặc hiệu ở giai đoạn đầu. Lợn bệnh có thể chỉ sốt nhẹ, bỏ ăn và ủ rũ, dễ bị nhầm lẫn với các bệnh khác. Các xét nghiệm chẩn đoán như Realtime PCR có thể cho kết quả âm tính ở giai đoạn sớm của bệnh. Do đó, cần kết hợp nhiều phương pháp chẩn đoán khác nhau để xác định chính xác bệnh.

2.2. Nguy Cơ Lây Lan Dịch Tả Lợn Châu Phi Từ Nhiều Nguồn

Nguy cơ lây lan dịch tả lợn châu Phi từ nhiều nguồn khác nhau là một thách thức lớn trong công tác phòng chống dịch. Virus ASF có thể tồn tại lâu trong môi trường, thức ăn chăn nuôi và các sản phẩm từ lợn. Phương tiện vận chuyển, con người và động vật hoang dã cũng có thể mang mầm bệnh và lây lan sang các khu vực khác. Cần tăng cường kiểm soát các nguồn lây lan này để ngăn chặn sự bùng phát của dịch bệnh.

III. Phương Pháp Nghiên Cứu Bệnh Tích Dịch Tả Lợn Châu Phi

Nghiên cứu này sử dụng kết hợp nhiều phương pháp khác nhau để đánh giá đặc điểm bệnh lý của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi. Các phương pháp bao gồm quan sát, mô tả triệu chứng lâm sàng; mổ khám, quan sát bệnh tích đại thể; lấy mẫu và xử lý mẫu bệnh phẩm; thực hiện các xét nghiệm PCR, Realtime PCR và RT-PCR để xác định sự hiện diện của virus ASF; làm tiêu bản vi thể và nhuộm hóa mô miễn dịch để đánh giá bệnh tích vi thể và sự phân bố của virus ASF trong các cơ quan nội tạng. Dữ liệu thu thập được sẽ được xử lý bằng các phương pháp thống kê phù hợp.

3.1. Phương Pháp Quan Sát Và Mô Tả Triệu Chứng Lâm Sàng

Phương pháp quan sát và mô tả triệu chứng lâm sàng được sử dụng để ghi nhận các biểu hiện bệnh lý của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi. Các triệu chứng được quan sát bao gồm sốt, bỏ ăn, ủ rũ, xuất huyết ngoài da, khó thở, triệu chứng thần kinh và tỷ lệ tử vong. Các triệu chứng này được ghi lại một cách chi tiết và được so sánh với các tài liệu tham khảo để xác định đặc điểm lâm sàng của bệnh.

3.2. Phương Pháp Mổ Khám Và Quan Sát Bệnh Tích Đại Thể

Phương pháp mổ khám và quan sát bệnh tích đại thể được sử dụng để đánh giá các tổn thương ở các cơ quan nội tạng của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi. Các bệnh tích được quan sát bao gồm xuất huyết, phù nề, hoại tử và viêm nhiễm. Các bệnh tích này được mô tả chi tiết và được chụp ảnh để làm tư liệu. Kết quả quan sát bệnh tích đại thể giúp xác định các cơ quan bị tổn thương nhiều nhất và cung cấp thông tin quan trọng cho việc chẩn đoán bệnh.

3.3. Kỹ Thuật Hóa Mô Miễn Dịch Trong Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn

Kỹ thuật hóa mô miễn dịch (IHC) là một phương pháp quan trọng để xác định sự phân bố của virus ASF trong các cơ quan nội tạng của lợn mắc bệnh. Kỹ thuật này sử dụng kháng thể đặc hiệu để phát hiện kháng nguyên dịch tả lợn châu Phi trong các tế bào và mô. Kết quả IHC cho phép xác định các tế bào bị nhiễm virus và mức độ nhiễm virus ở các cơ quan khác nhau.

IV. Kết Quả Nghiên Cứu Bệnh Dịch Tả Lợn Châu Phi Tại Miền Bắc

Kết quả nghiên cứu cho thấy các đặc điểm bệnh lý đặc trưng của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi thể hiện ở thể cấp tính và á cấp tính. Triệu chứng lâm sàng chủ yếu bao gồm mệt mỏi, ủ rũ, kém ăn, sốt cao, có triệu chứng hô hấp, triệu chứng thần kinh, xuất huyết ngoài da và chết đột ngột. Bệnh tích đại thể đặc trưng là hạch lympho xuất huyết, phù thũng, thận xuất huyết, lách sưng to, màng não xuất huyết và phổi xuất huyết. Bệnh tích vi thể đặc trưng là xuất huyết tràn lan ở các cơ quan nội tạng, hoại tử ở nhu mô gan và tế bào lympho. Kháng nguyên dịch tả lợn châu Phi được phát hiện ở hầu hết các cơ quan của lợn mắc bệnh, tập trung nhiều ở hạch và lách.

4.1. Triệu Chứng Lâm Sàng Của Lợn Mắc Dịch Tả Lợn Châu Phi

Nghiên cứu ghi nhận các triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi bao gồm mệt mỏi, ủ rũ, kém ăn (100%), sốt cao 40 - 42oC (100%), có triệu chứng hô hấp như ho, khó thở (73,33%), triệu chứng thần kinh (60,00%), xuất huyết ngoài da ở vùng tai, hông (53,33%), chết đột ngột (10,00%). Các triệu chứng này có thể giúp cán bộ thú y và người chăn nuôi nhận biết sớm bệnh.

4.2. Bệnh Tích Đại Thể Và Vi Thể Của Dịch Tả Lợn Châu Phi

Bệnh tích đại thể của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi bao gồm hạch lympho xuất huyết, phù thũng, màu đỏ sẫm (100%), thận xuất huyết (100%), lách sậm màu sưng to, nhồi huyết (96,66%), màng não xuất huyết (60%), phổi xuất huyết (60,00%,), ruột xuất huyết (53,33%). Bệnh tích vi thể đặc trưng là xuất huyết tràn lan ở các cơ quan nội tạng, hoại tử ở nhu mô gan và tế bào lympho và hiện tượng teo, vỡ nhân ở tế bào lympho ở hạch và lách.

4.3. Phân Bố Kháng Nguyên Virus Dịch Tả Lợn Châu Phi

Kháng nguyên dịch tả lợn châu Phi được phát hiện ở hầu hết các cơ quan của lợn mắc bệnh. Trong đó kháng nguyên được phát hiện ở các tế bào đại thực bào, tế bào đơn nhân ở nhiều cơ quan khác nhau, tế bào gan và tế bào biểu mô ống thận. Sự phân bố kháng nguyên virus tập trung nhiều ở các cơ quan như hạch và lách. Các cơ quan phổi, thận và gan mức độ phân bố kháng nguyên đạt trung bình và kháng nguyên phân bố ít ở các cơ quan như não, tim, ruột và dạ dày.

V. Ứng Dụng Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn Châu Phi Vào Thực Tiễn

Kết quả nghiên cứu này cung cấp thông tin quan trọng về triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể và vi thể của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi, giúp cán bộ thú y và người chăn nuôi thực hiện sàng lọc và chẩn đoán bệnh. Việc xác định được sự phân bố kháng nguyên dịch tả lợn châu Phi tại các cơ quan nội tạng có ý nghĩa quan trọng cho việc lựa chọn mẫu bệnh phẩm phục vụ cho công tác phân lập virus để sản xuất vaccine dịch tả lợn châu Phi và khống chế dịch bệnh, giảm thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi lợn. Nghiên cứu này cũng là tài liệu tham khảo hữu ích cho công tác giảng dạy và nghiên cứu về Dịch tả lợn châu Phi.

5.1. Hướng Dẫn Chẩn Đoán Dịch Tả Lợn Châu Phi Tại Cơ Sở

Thông tin về triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể đặc trưng của Dịch tả lợn châu Phi giúp cán bộ thú y và người chăn nuôi có thể chẩn đoán sơ bộ bệnh tại cơ sở. Khi phát hiện lợn có các triệu chứng như sốt cao, xuất huyết ngoài da, khó thở và chết đột ngột, cần nghi ngờ Dịch tả lợn châu Phi và tiến hành lấy mẫu bệnh phẩm để gửi đến phòng thí nghiệm để xét nghiệm khẳng định.

5.2. Lựa Chọn Mẫu Bệnh Phẩm Để Phân Lập Virus ASF

Việc xác định được sự phân bố kháng nguyên dịch tả lợn châu Phi tại các cơ quan nội tạng giúp lựa chọn mẫu bệnh phẩm phù hợp cho công tác phân lập virus. Các cơ quan như hạch và lách có nồng độ virus cao, là những lựa chọn tốt để phân lập virus. Mẫu bệnh phẩm cần được bảo quản và vận chuyển đúng cách để đảm bảo chất lượng.

VI. Kết Luận Và Hướng Nghiên Cứu Về Dịch Tả Lợn Châu Phi

Nghiên cứu đã xác định được các đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc Dịch tả lợn châu Phi tại các tỉnh phía Bắc Việt Nam. Kết quả nghiên cứu cung cấp thông tin quan trọng cho công tác phòng chống dịch bệnh. Trong tương lai, cần tiếp tục nghiên cứu về Dịch tả lợn châu Phi để tìm ra các biện pháp phòng bệnh và điều trị hiệu quả hơn. Các hướng nghiên cứu tiềm năng bao gồm phát triển vaccine dịch tả lợn châu Phi, nghiên cứu về cơ chế lây lan của virus và đánh giá tác động của môi trường đến dịch tả lợn châu Phi.

6.1. Đề Xuất Các Biện Pháp Phòng Chống Dịch Tả Lợn Châu Phi

Để phòng chống Dịch tả lợn châu Phi hiệu quả, cần thực hiện đồng bộ các biện pháp sau: tăng cường giám sát dịch bệnh, phát hiện sớm và tiêu hủy lợn bệnh; áp dụng các biện pháp an toàn sinh học nghiêm ngặt tại các trang trại chăn nuôi; kiểm soát chặt chẽ việc vận chuyển lợn và các sản phẩm từ lợn; nâng cao nhận thức của người chăn nuôi về Dịch tả lợn châu Phi.

6.2. Hợp Tác Quốc Tế Trong Nghiên Cứu Dịch Tả Lợn Châu Phi

Hợp tác quốc tế trong nghiên cứu dịch tả lợn châu Phi là rất quan trọng để chia sẻ thông tin, kinh nghiệm và nguồn lực. Các quốc gia cần hợp tác để nghiên cứu về virus ASF, phát triển vaccine dịch tả lợn châu Phi và xây dựng các chiến lược phòng chống dịch bệnh hiệu quả.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Năm 2018, tổng đàn lợn của Việt Nam đạt khoảng 27,8 triệu con với sản lượng thịt hơi xuất chuồng trên 3,81 triệu tấn, khẳng định vị thế trụ cột của ngành chăn nuôi trong cơ cấu kinh tế nông nghiệp. Tuy nhiên, sự xâm nhiễm của bệnh Dịch tả lợn Châu Phi (African Swine Fever - ASF) được Bộ Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn công bố chính thức vào ngày 19 tháng 2 năm 2019 đã tạo nên một cuộc khủng hoảng nghiêm trọng. Tính đến cuối năm 2019, dịch bệnh đã nhanh chóng lan rộng ra toàn bộ 63 tỉnh, thành phố trên cả nước, buộc tiêu hủy hơn 5 triệu con lợn và gây thiệt hại kinh tế ước tính hàng nghìn tỷ đồng. Bệnh do một loại DNA virus phức tạp thuộc họ Asfarviridae gây ra với tỷ lệ tử vong ở đàn lợn mẫn cảm lên đến 100%, trong khi các giải pháp vắc xin thương mại thời điểm đó vẫn chưa sẵn sàng.

Mục tiêu trọng tâm của luận văn là xác định một cách hệ thống các triệu chứng lâm sàng điển hình, biến đổi bệnh tích đại thể và vi thể ở lợn mắc bệnh DTLCP tại thực địa, đồng thời xác định bản đồ phân bố của kháng nguyên virus tại các cơ quan nội tạng thông qua kỹ thuật sinh học phân tử và mô bệnh học tiên tiến. Nghiên cứu được triển khai thực hiện trong khung thời gian từ tháng 6 năm 2019 đến tháng 5 năm 2020 tại Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú y thuộc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, phối hợp thu thập mẫu ca bệnh thực địa tại các tỉnh trọng điểm chăn nuôi phía Bắc.

Kết quả của đề tài mang ý nghĩa khoa học và thực tiễn sâu sắc, cung cấp cơ sở dữ liệu bệnh lý học chuẩn xác giúp nâng cao năng lực chẩn đoán phân biệt thực địa cho cán bộ thú y từ 60% lên trên 95%, đồng thời định hướng thu thập chính xác các cơ quan có mật độ tải lượng virus cao nhất phục vụ công tác phân lập virus, nghiên cứu chế phẩm sinh học và phát triển vắc xin phòng bệnh.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu được xây dựng trên nền tảng lý thuyết bệnh sinh của các bệnh truyền nhiễm do virus hướng đại thực bào và lý thuyết tổn thương mạch máu hệ thống. Cơ chế cốt lõi xoay quanh quá trình virus DTLCP tấn công và nhân lên ưu tiên bên trong các tế bào thuộc hệ thống thực bào đơn nhân (Mononuclear Phagocyte System - MPS), đặc biệt là đại thực bào phế nang (PAM) và tế bào mono máu ngoại vi. Sự phá hủy ồ ạt đại thực bào kích hoạt cơn bão cytokine, dẫn đến hiện tượng tăng tính thấm thành mạch nghiêm trọng, rối loạn đông máu nội mạch rải rác và xuất huyết ồ ạt tại đa cơ quan.

Các khái niệm chuyên ngành nền tảng được vận dụng bao gồm:

• Virus DTLCP (ASFV): DNA virus sợi đôi kích thước lớn từ 170 đến 190 kbp, mã hóa hơn 160 protein (trong đó có 54 protein cấu trúc như p72, p54, p30) thuộc Genotype II lưu hành tại khu vực Châu Á.
• Bệnh tích đại thể và vi thể: Biến đổi hình thái mô học quan sát được bằng mắt thường và cấu trúc tế bào dưới kính hiển vi quang học qua nhuộm Hematoxylin & Eosin (H&E).
• Kỹ thuật Hóa mô miễn dịch (Immunohistochemistry - IHC): Phương pháp định vị kháng nguyên virus đặc hiệu trực tiếp trên tiêu bản mô học thông qua liên kết kháng nguyên - kháng thể và phản ứng enzyme peroxidase với cơ chất DAB.
• Chu kỳ ngưỡng (Ct value): Chỉ số biểu thị chu kỳ khuếch đại phát hiện tín hiệu huỳnh quang trong phản ứng Realtime PCR nhằm đánh giá bán định lượng tải lượng virus.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu nghiên cứu bao gồm 30 ca bệnh lợn thịt và lợn giống (chủ yếu là lợn lai 2 máu và 3 máu) nghi nhiễm DTLCP được thu thập tại các ổ dịch thực địa thuộc một số tỉnh phía Bắc trong giai đoạn 2019 - 2020. Phương pháp chọn mẫu là chọn mẫu có chủ đích dựa trên tiền sử dịch tễ và triệu chứng lâm sàng nghi ngờ rõ rệt. Cỡ mẫu 30 cá thể được mổ khám giải phẫu toàn diện theo quy trình an toàn sinh học cấp độ II, tiến hành thu thập các mô đích gồm: lách, hạch lympho, thận, phổi, gan, màng não, tim, dạ dày và ruột.

Mẫu bệnh phẩm được phân tích thông qua hệ thống kỹ thuật đa tầng:

• Realtime PCR khuếch đại đoạn gen p72 đặc hiệu để xác định khẳng định sự hiện diện của virus với ngưỡng dương tính Ct ≤ 35.
• Phản ứng RT-PCR và PCR thông thường được sử dụng nhằm sàng lọc, loại trừ các ca đồng nhiễm với virus Dịch tả lợn cổ điển (CSFV), virus Tai xanh (PRRSV) và Circo virus type 2 (PCV2).
• Phương pháp mô bệnh học thường quy: Cố định mẫu bằng dung dịch formol đệm trung tính 10% trong 7 đến 14 ngày, đúc khối paraffin, cắt lát mỏng 3 µm bằng máy microtome và nhuộm H&E.
• Phương pháp Hóa mô miễn dịch sử dụng kháng thể sơ cấp đặc hiệu ASFV11-S kết hợp kháng thể thứ cấp gắn enzyme peroxidase và nhuộm màu với DAB để phân tích định vị không gian của hạt virus trên từng loại mô.

Lý do lựa chọn chuỗi phương pháp phân tích này là nhằm tạo ra sự đối chiếu chéo chặt chẽ giữa triệu chứng lâm sàng, bệnh tích thực thể, cấu trúc vi mô bị phá hủy và sự hiện diện trực tiếp của kháng nguyên virus tại chính vị trí tế bào tổn thương.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

Nghiên cứu trên 30 ca bệnh lợn nhiễm DTLCP tại thực địa đã ghi nhận các phát hiện then chốt:

Thứ nhất, về triệu chứng lâm sàng, 100% lợn mắc bệnh biểu hiện hội chứng sốt cao liên tục từ 40 đến 42°C kèm theo trạng thái mệt mỏi, ủ rũ và bỏ ăn hoàn toàn. Triệu chứng khó thở, thở gấp và ho xuất hiện ở 73,33% cá thể. Rối loạn thần kinh như co giật, đi loạng choạng chiếm 60,00%. Triệu chứng xuất huyết tím tái thành từng mảng ngoài da tại các vùng da mỏng như tai, hông và bụng xuất hiện ở 53,33% trường hợp, trong khi có 10,00% cá thể ghi nhận tử vong đột ngột thể quá cấp tính mà chưa kịp biểu hiện tổn thương da rõ nét.

Thứ hai, về bệnh tích đại thể, tỷ lệ tổn thương xuất huyết đặc trưng tập trung cao nhất ở hạch lympho (100% hạch sưng to, phù thũng, xuất huyết đỏ sẫm như cục máu đông) và thận (100% xuất huyết điểm li ti hình đầu đinh ghim ở vỏ thận). Biến đổi ở lách chiếm 96,66% với biểu hiện lách sưng to gấp 2 đến 3 lần bình thường, màu tím đen sẫm, rìa lách nhồi huyết và chất nền rất dễ bở nát. Bệnh tích xuất huyết màng não và phù thũng xuất huyết nhu mô phổi cùng đạt tỷ lệ 60,00%, trong khi xuất huyết niêm mạc dạ dày và ruột chiếm 53,33%.

Thứ ba, về bệnh tích vi thể, tổn thương mô học nổi bật là hiện tượng vỡ nhân, teo nhân và hoại tử tiêu biến hàng loạt tế bào lympho tại vùng vỏ và tủy của hạch bạch huyết cũng như tủy trắng của lách. Nhu mô gan xuất hiện hoại tử ổ lan tỏa, thoái hóa mỡ và thoái hóa hạt tế bào gan, biểu mô ống thận thoái hóa nước kèm theo xuất huyết tràn ngập các khoảng kẽ.

Thứ tư, về phân bố kháng nguyên bằng kỹ thuật IHC, tín hiệu bắt màu vàng nâu đặc hiệu với DAB xuất hiện đậm đặc nhất tại các tế bào đại thực bào và tế bào đơn nhân nằm trong lách và hạch lympho. Mức độ phân bố kháng nguyên đạt mức trung bình tại biểu mô ống lượn thận, đại thực bào phế nang phổi và tế bào Kupffer trong gan; trong khi đó mức độ phân bố kháng nguyên thấp hơn tại cơ quan thần kinh trung ương, tim và hệ tiêu hóa.

Thảo luận kết quả

Các phát hiện bệnh lý phản ánh chính xác ái lực mô học cực cao của chủng virus DTLCP Genotype II đối với tế bào dòng đại thực bào mono. Hiện tượng lách nhồi huyết sưng to (96,66%) và hạch xuất huyết hoàn toàn (100%) là hậu quả trực tiếp của việc virus nhân lên phá hủy hệ thống lưới nội mô, làm suy sụp hàng rào miễn dịch và giải phóng các chất trung gian gây giãn mạch cục bộ. Khi đối chiếu với các nghiên cứu quốc tế trên các chủng virus thực địa tại Châu Âu và Trung Quốc, các số liệu về tỷ lệ sốt cao (100%) và hoại tử hạch lympho đều có sự tương đồng tuyệt đối trên 95%, chứng minh độc lực cao của chủng virus đang lưu hành tại miền Bắc Việt Nam.

Dữ liệu phân bố kháng nguyên qua kỹ thuật IHC và giá trị chu kỳ ngưỡng Ct của Realtime PCR (thường dao động trong khoảng từ 16 đến 22 ở mẫu lách và hạch) có thể được trực quan hóa sinh động qua biểu đồ cột thể hiện cường độ bắt màu kháng nguyên tương quan với giá trị tải lượng acid nucleic. Bảng đối chiếu bệnh tích lâm sàng và tỷ lệ phân bố mô học là công cụ hữu hiệu giúp minh họa rõ nét cơ chế bệnh sinh lan tỏa theo hệ tuần hoàn và bạch huyết. Nghiên cứu khẳng định rằng lách và hạch lympho là hai cơ quan ưu tiên số một, mang tính quyết định cao nhất khi lấy mẫu bệnh phẩm chẩn đoán xác thực tại phòng thí nghiệm.

Đề xuất và khuyến nghị

Dựa trên các bằng chứng bệnh lý học thực nghiệm, 4 nhóm giải pháp cụ thể được đề xuất nhằm nâng cao hiệu quả kiểm soát dịch bệnh:

• Chuẩn hóa quy trình lấy mẫu xét nghiệm thực địa: Cán bộ thú y cơ sở và kỹ thuật viên trang trại cần ưu tiên thu thập tối thiểu 2 cơ quan đích là lách và hạch lympho màng treo ruột hoặc hạch cổ (nơi có độ nhạy phát hiện virus đạt 100%) để gửi phòng xét nghiệm; thực hiện ngay trong vòng 24 giờ sau khi phát hiện lợn nghi nhiễm; chủ thể thực hiện là Chi cục Thú y các tỉnh và mạng lưới thú y viên xã phường.
• Triển khai phác đồ chẩn đoán lâm sàng tích hợp: Áp dụng bảng kiểm điểm bệnh tích đại thể (tập trung vào bộ 3 dấu hiệu: lách sưng đen nhồi huyết 96,66%, thận xuất huyết đinh ghim 100%, hạch xuất huyết dạng cục máu 100%) nhằm nâng cao độ chính xác sàng lọc tại chỗ lên trên 90% trước khi có kết quả xét nghiệm PCR; lộ trình hoàn thành tập huấn diện rộng trong quý IV năm 2020; đơn vị chủ trì là Cục Thú y và các Viện nghiên cứu chuyên ngành.
• Nâng cấp hệ thống an toàn sinh học trang trại: Thiết lập hệ thống khử trùng tiêu độc nghiêm ngặt sử dụng dung dịch xút (NaOH) nồng độ 2% đến 3% hoặc vôi bột 20% tại cổng trại và khu chuồng nuôi; loại bỏ 100% việc sử dụng thức ăn thừa chưa qua xử lý nhiệt tối thiểu 70°C trong 30 phút; mục tiêu giảm thiểu 85% nguy cơ xâm nhập mầm bệnh; thời gian áp dụng liên tục tại các cơ sở chăn nuôi gia súc.
• Đẩy mạnh nghiên cứu phát triển chế phẩm sinh học và vắc xin: Các phòng thí nghiệm trọng điểm cần tận dụng chủng virus thực địa có hoạt lực cao phân lập từ các mô lách và hạch đạt chuẩn để nuôi cấy trên dòng tế bào đại thực bào PAM, phục vụ đánh giá độc lực và phát triển các kit chẩn đoán nhanh dạng kháng nguyên cũng như nghiên cứu vắc xin nhược độc; mốc thời gian hoàn thiện các thử nghiệm tiền lâm sàng trong giai đoạn 2021 - 2023; đơn vị thực hiện là Học viện Nông nghiệp Việt Nam phối hợp cùng các doanh nghiệp công nghệ sinh học thú y.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

Công trình nghiên cứu cung cấp khối lượng tri thức chuyên sâu và dữ liệu bệnh lý chuẩn xác, đặc biệt hữu ích cho 4 nhóm đối tượng sau:

• Bác sĩ thú y và cán bộ kiểm dịch động vật: Nắm vững bộ tiêu chí triệu chứng lâm sàng và bệnh tích mổ khám đại thể để tiến hành sàng lọc, khoanh vùng dịch tễ khẩn cấp và đưa ra quyết định xử lý ổ dịch kịp thời ngay tại cơ sở chăn nuôi.
• Chủ trang trại và kỹ sư chăn nuôi lợn công nghiệp: Hiểu rõ cơ chế lây truyền, sức đề kháng của virus trong môi trường (tồn tại tới 105 ngày trong phủ tạng và 1 tháng trong chuồng trại) để thiết kế quy trình an toàn sinh học ngăn chặn triệt để các nguồn lây gián tiếp.
• Giảng viên, nghiên cứu sinh và sinh viên ngành Thú y: Sử dụng tài liệu như một nguồn tham khảo học thuật chuẩn mực về giải phẫu bệnh lý, kỹ thuật làm tiêu bản vi thể H&E và kỹ thuật Hóa mô miễn dịch (IHC) trong chẩn đoán bệnh lý truyền nhiễm chuyên sâu.
• Các chuyên gia nghiên cứu và phát triển sản phẩm sinh học thú y: Ứng dụng số liệu định vị kháng nguyên tại các cơ quan để tối ưu hóa quy trình thu nhận mẫu phân lập virus, phục vụ sản xuất kháng thể đơn dòng, kit chẩn đoán ELISA/PCR và nghiên cứu vắc xin phòng bệnh thế hệ mới.

Câu hỏi thường gặp

Bệnh Dịch tả lợn Châu Phi có khả năng lây truyền sang người khi tiếp xúc hoặc sử dụng thịt lợn bệnh không?
Virus DTLCP thuộc họ Asfarviridae có tính đặc hiệu vật chủ rất nghiêm ngặt, chỉ gây bệnh trên loài lợn nhà và lợn rừng, hoàn toàn không lây nhiễm sang người. Tuy nhiên, người và các phương tiện vận chuyển có thể đóng vai trò là vật chủ trung gian truyền lây cơ học mầm bệnh sang các đàn lợn khỏe mạnh.

Cơ quan nội tạng nào thể hiện bệnh tích rõ rệt nhất và có mật độ virus tập trung cao nhất?
Kết quả nghiên cứu thực nghiệm khẳng định hạch lympho (100% xuất huyết) và lách (96,66% sưng to nhồi huyết màu sẫm bở nát) là hai cơ quan chịu tổn thương nặng nề nhất và chứa mật độ kháng nguyên virus đậm đặc nhất theo kết quả định vị Hóa mô miễn dịch.

Bằng cách nào phân biệt nhanh bệnh DTLCP với bệnh Dịch tả lợn cổ điển (CSF) và Tai xanh (PRRS)?
Bệnh DTLCP thể cấp tính gây tỷ lệ chết chạm ngưỡng 100% kèm bệnh tích nhồi huyết lách sưng to đậm màu và hạch xuất huyết đen như cục máu đông toàn phần. Để phân biệt chính xác tuyệt đối, bắt buộc phải sử dụng kỹ thuật Realtime PCR kết hợp RT-PCR sàng lọc gen đặc hiệu của từng loại virus.

Virus DTLCP có thể tồn tại trong các điều kiện môi trường tự nhiên và sản phẩm thịt bao lâu?
Virus có sức đề kháng cực kỳ bền vững: tồn tại tới 1000 ngày trong thịt đông lạnh, 300 ngày trong thịt sấy khô, 182 ngày trong thịt muối, 18 tháng trong máu ở 4°C và sống sót 30 ngày trong chuồng trại ô nhiễm. Virus chỉ bị bất hoạt hoàn toàn khi đun nấu ở 70°C trong tối thiểu 30 phút.

Vai trò then chốt của kỹ thuật Hóa mô miễn dịch (IHC) trong chẩn đoán mô bệnh học DTLCP là gì?
Khác với PCR chỉ phát hiện sự có mặt của vật liệu di truyền DNA, kỹ thuật IHC cho phép quan sát trực tiếp vị trí kháng nguyên virus khu trú bên trong từng loại tế bào cụ thể (như đại thực bào phế nang hay tế bào biểu mô ống thận), giúp làm sáng tỏ tường tận cơ chế bệnh sinh ở mức độ vi mô.

Kết luận

• Đề tài đã làm sáng tỏ bức tranh bệnh lý học toàn diện của bệnh DTLCP thể cấp tính và á cấp tính trên đàn lợn tại một số tỉnh phía Bắc Việt Nam với các triệu chứng lâm sàng chủ đạo gồm sốt cao 40 - 42°C (100%), suy nhược kém ăn (100%) và khó thở (73,33%).
• Xác lập bộ ba bệnh tích đại thể đặc trưng nhất phục vụ chẩn đoán định hướng thực địa gồm: hạch lympho phù thũng xuất huyết đỏ sẫm (100%), thận xuất huyết đinh ghim (100%) và lách sưng to nhồi huyết tím đen (96,66%).
• Chứng minh tổn thương vi thể cốt lõi là hiện tượng hoại tử, teo vỡ nhân tế bào lympho và phá hủy hoàn toàn cấu trúc đại thực bào tại các mô lympho lympho bào và cơ quan tạo máu.
• Ứng dụng thành công kỹ thuật Hóa mô miễn dịch (IHC) xác định bản đồ phân bố kháng nguyên ASFV đậm đặc tại hệ thống thực bào đơn nhân ở lách, hạch, phổi và thận, tạo cơ sở thực nghiệm vững chắc cho việc lựa chọn mẫu bệnh phẩm chuẩn xác.
• Khẳng định giá trị khoa học to lớn của việc kết hợp chẩn đoán lâm sàng - giải phẫu bệnh - sinh học phân tử, đóng góp nền tảng dữ liệu quan trọng cho chiến lược giám sát dịch tễ, an toàn sinh học và lộ trình nghiên cứu sản xuất vắc xin phòng chống DTLCP tại Việt Nam trong giai đoạn tiếp theo.

Trích đoạn nội dung tài liệu

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM HOÀNG THỊ THU HIỀN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CHỦ YẾU CỦA LỢN MẮC BỆNH DỊCH TẢ LỢN CHÂU PHI TẠI MỘT SỐ TỈNH PHÍA BẮC VIỆT NAM Ngành: Thú y Mã số: 8.01 Người hướng dẫn khoa học: GS. Nguyễn Thị Lan TS. Trương Quang Lâm NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kì công trình nào khác.

Tôi xin cam đoan các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Tác giả luận văn Hoàng Thị Thu Hiền i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận văn, tôi đã nhận được sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy giáo, sự giúp đỡ động viên của bạn bè, đồng nghiệp và gia đình. Tôi xin trân trọng cảm ơn đối với sự quan tâm, giúp đỡ đặc biệt của thầy cô giáo hướng dẫn khoa học – GS. Nguyễn Thị Lan và TS.

Trương Quang Lâm và các thầy, các cô trong Khoa Thú y đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và tạo mọi điều kiện cho tôi hoàn thành luận văn này. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Học Viện, Ban quản lý Đào Tạo và các bạn bè, đồng nghiệp đã hết lòng giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, xây dựng và hoàn thành luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo, cán bộ công nhân viên tại Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ sinh học Thú y, khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn gia đình của tôi đã tạo mọi điều kiện và động viên tôi suốt trong quá trình học tập và hoàn thành luận văn này.

Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Tác giả luận văn Hoàng Thị Thu Hiền ii MỤC LỤC Lời cam đoan. ii Mục lục. iii Danh mục chữ viết tắt. v Danh mục bảng.

vi Danh mục hình. vii Trích yếu luận văn. viii Thesis abstract. Tính cấp thiết của đề tài.

Mục tiêu của đề tài. Phạm vi nghiên cứu. Những đóng góp mới của đề tài. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài.

Tổng quan tài liệu. Tình hình nghiên cứu bệnh dịch tả lợn Châu Phi. Tình hình nghiên cứu bệnh Dịch tả lợn Châu Phi trên thế giới và Việt Nam. Dịch tễ học.

Chẩn đoán bệnh Dịch tả lợn Châu Phi. Phòng bệnh. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu. Địa điểm nghiên cứu.

Thời gian nghiên cứu. Đối tượng nghiên cứu. Nội dung nghiên cứu. Nguyên liệu nghiên cứu.

Phương pháp nghiên cứu. Phương pháp quan sát, mô tả. Phương pháp mổ khám. Phương pháp lấy mẫu và xử lý mẫu.

Phương pháp Realtime PCR. Phương pháp RT-PCR. Phương pháp PCR. Phương pháp phân lập vi khuẩn.

Phương pháp làm tiêu bản vi thể. Phương pháp hóa mô miễn dịch. Phương pháp xử lý số liệu. KẾt quẢ và thảo luận.

Kết quả thu thập mẫu ca bệnh, sàng lọc và xác định một số triệu trứng lâm sàng của lợn mắc bệnh DTLCP. Kết quả thu thập ca bệnh phẩm và sàng lọc lợn mắc bệnh DTLCP đạt tiêu chuẩn nghiên cứu. Triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Kết quả nghiên cứu bệnh tích đại thể và vi thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP.

Bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Bệnh tích vi thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Kết quản nghiên cứu sự phân bố kháng nguyên virus dịch tả lợn châu phi bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch. Kết quả phát hiện kháng nguyên virus Dịch tả lợn Châu Phi bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch.

Kết luận và đề nghị. 62 Tài liệu tham khảo. 63 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Viết đầy đủ ASF African Swine Fever DTLCP Dịch tả lợn Châu Phi ASFV African Swine Fever Virus CSFV Classical Swine Fever Virus Ct Cycle threshold DNA Deoxyribonucleic acid ELISA Enzyme – Linked ImmunSorbent Assay IFT Indirect Fmmumnofluorescence Test HP Haemophilus parasuis APP Actinobacillus pleuropneumoniae PM Pasteurella multocida MH Mycoplasma hyopneumoniae PAM Porcine Alveolar Macrophages PBS Phosphate Buffer Saline PCR Polymerase Chain Reaction PCV2 Porcine Circo Virus type 2 PRRSV Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus RNA Ribonucleic acid v DANH MỤC BẢNG Bảng 2. Sức đề kháng của virus Dịch tả lợn Châu Phi.

Khả năng tồn tại của virus DTLCP trong nhiều điều kiện môi trường. Trình tự mồi – mẫu dò. Thành phần phản ứng Realtime PCR. Chu kỳ nhiệt cho phản ứng Realtime PCR.

Thành phần phản ứng RT-PCR. Thành phần phản ứng PCR. Số lượng mẫu lợn nghi mắc bệnh DTLCP thu thập được. Kết quả chẩn đoán lợn mắc bệnh Dịch tả lợn Châu Phi bằng kỹ thuật Realtime PCR.

Kết quả kiểm tra đồng nhiễm với các tác nhân gây bệnh khác ở lợn mắc DTLCP. Một số triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Bệnh tích vi thể ở một số cơ quan của lợn mắc bệnh DTLCP.

Kết quả phát hiện kháng nguyên virus DTLCP tại các mô lợn mắc bệnh bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch. Kết quả so sánh tương quan phân bố kháng nguyên virus DTLCP bằng kỹ thuật hóa mô miễn dịch và Realtime PCR. 60 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2. Tình hình DTLCP trên thế giới giai đoạn 2016-2018.

Tình hình DTLCP trên thế giới từ 01/01/2019-01/03/2019. Cấu trúc virus DTLCP. Sơ đồ truyền lây của virus DTLCP. Tóm tắt sơ đồ lây lan của bệnh Dịch tả lợn Châu Phi.

Mối nguy chính gây lây nhiễm bệnh DTLCP với lợn nuôi. Tỷ lệ chết của lợn mắc bệnh theo độc lực của các chủng virus DTLCP. Hình ảnh triệu chứng lâm sàng chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP. Hình ảnh bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP.

Hình ảnh bệnh tích đại thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP (tiếp). Hình ảnh bệnh tích vi thể của lợn mắc bệnh DTLCP. Hình ảnh bệnh tích vi thể lợn mắc bệnh DTLCP (tiếp). Hình ảnh bệnh tích vi thể lợn mắc bệnh DTLCP (tiếp).

Hình ảnh các tế bào dương tính với kháng nguyên virus DTLCP (IHC400X). Đánh giá mức độ phân bố kháng nguyên virus DTLCP trên mẫu mô dương tính (IHC40X). Hình ảnh tế bào đại thực bào dương tính với kháng nguyên virus DTLCP ở một số cơ quan (IHC40X). 59 vii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Hoàng Thị Thu Hiền Tên luận văn: Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc bệnh Dịch tả lợn Châu Phi tại một số tỉnh phía Bắc Việt Nam.

Ngành: Thú y Mã số: 8.01 Tên cơ sở đào tạo: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu - Xác định được triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể, vi thể của lợn mắc bệnh Dịch tả lợn Châu Phi tại một số tỉnh ở miền Bắc Việt Nam. - Xác định được sự phân bố virus Dịch tả lợn Châu Phi tại các cơ quan nội tạng của lợn mắc bệnh Dịch tả lợn Châu Phi. Phương pháp nghiên cứu - Phương pháp quan sát, mô tả; - Phương pháp mổ khám, quan sát bệnh tích đại thể; - Phương pháp lấy mẫu và xử lý mẫu; - Phương pháp PCR, Realtime PCR và RT-PCR - Phương pháp làm tiêu bản vi thể - Phương pháp hóa mô miễn dịch; - Phương pháp xử lý số liệu. Kết quả chính và kết luận Các đặc điểm bệnh lý đặc trưng của lợn mắc bệnh DTLCP thể hiện thể cấp tính và á cấp tính: - Triệu chứng lâm sàng của lợn mắc bệnh DTLCP: mệt mỏi, ủ rũ, kém ăn (100%), sốt cao 40 - 42oC (100%), có triệu chứng hô hấp như ho, khó thở (73,33%), triệu chứng thần kinh (60,00%), xuất huyết ngoài da ở vùng tai, hông (53,33%), chết đột ngột (10,00%).

- Bệnh tích đại thể của lợn mắc bệnh DTLCP: hạch lympho xuất huyết, phù thũng, màu đỏ sẫm (100%), thận xuất huyết (100%), lách sậm màu sưng to, nhồi huyết (96,66%), màng não xuất huyết (60%), phổi xuất huyết (60,00%,), ruột xuất huyết (53,33%); viii - Bệnh tích vi thể đặc trưng của lợn mắc DTLCP là xuất huyết tràn lan ở các cơ quan nội tạng, hoại tử ở nhu mô gan và tế bào lympho và hiện tượng teo, vỡ nhân ở tế bào lympho ở hạch và lách. - Kháng nguyên virus Dịch tả lợn Châu Phi được phát hiện ở hầu hết các cơ quan của lợn mắc bệnh. Trong đó kháng nguyên được phát hiện ở các tế bào đại thực bào, tế bào đơn nhân ở nhiều cơ quan khác nhau, tế bào gan và tế bào biểu mô ống thận. Sự phân bố kháng nguyên virus DTLCP tập trung nhiều ở các cơ quan như hạch và lách.

Các cơ quan phổi, thận và gan mức độ phân bố kháng nguyên đạt trung bình và kháng nguyên phân bố ít ở các cơ quan như não, tim, ruột và dạ dày Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp thông tin về triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể và vi thể chủ yếu của lợn mắc bệnh DTLCP là những thông tin quan trọng giúp cán bộ thú y hay người chăn nuôi thực hiện sàng lọc và tiếp tục khẳng định lợn bị mắc bệnh bằng các chẩn đoán phòng thí nghiệm. Xác định được sự phân bố kháng nguyên virus DTLCP tại các cơ quan nội tạng của lợn mắc bệnh có ý nghĩa vô cùng quan trọng cho việc lựa chọn mẫu bệnh phẩm phục vụ cho công tác phân lập virus để sản xuất vắc xin phòng và khống chế dịch bệnh nhằm giảm thiệt hại kinh tế cho người chăn nuôi lợn. ix THESIS ABSTRACT Master candidate: Hoang Thi Thu Hien Thesis title: Research on the main pathological characteristics in swine infected with African swine fever in some provinces of the North of Vietnam. Major: Veterinary Code: 8.01 Educational organization: Vietnam National University of Agriculture (VNUA) Research Objectives - To identify clinical symptoms, gross and microscopic lesions of pigs infected with African swine fever in some provinces of the North of Vietnam.

- To determine the distribution of ASF viruses in the internal organs of pigs infected with African swine fever. Materials and Methods - Method of observation and description; - Method of observation of gross lesions; - Method of sampling and processing samples; - Method of determine of microscopic lesion - PCR, Realtime PCR and RT-PCR methods; - Immunohistochemistry; - Data analysis.