Nuôi cấy mô cây pemu fokienia hodginsii

Tìm hiểu quy trình nuôi cấy mô cây Pơ Mu (Fokienia hodginsii) hiệu quả. Kỹ thuật nhân giống tiên tiến, bảo tồn nguồn gen quý hiếm, tăng năng suất.

• Tác giả: Phan Thị Hoàng Mai
• Người hướng dẫn: Pgs-Ts. Trần Văn Minh
• Trường học: Trường Đại Học Mở – Bán Công Tphcm
• Chuyên ngành: Công Nghệ Tế Bào Thực Vật
• Đề tài: Nghiên Cứu Nhân Giống Vô Tính Cây Pơ Mu (Fokienia Hodginsii) Bằng Phương Pháp Nuôi Cấy Mô
• Loại tài liệu: Luận văn tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2006
• Địa điểm: Tp.Hcm

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• LỜI NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN
• LỜI NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN PHẢN BIỆN
• MỤC LỤC
• DANH SÁCH CÁC BẢNG
• DANH SÁCH CÁC HÌNH
• DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
• 1. CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1.1. ĐẶT VẤN ĐỀ
• 1.2. MỤC ĐÍCH VÀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
• 1.3. GIỚI HẠN ĐỀ TÀI
• 1.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
• 2. CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN
• 2.1. LỊCH SỬ PHÁT TRIỂN CỦA NUÔI CẤY MÔ
• 2.2. ĐẶC ĐIỂM LÂM SINH HỌC CÂY PEMU
• 2.2.1. Vị trí phân loại
• 2.2.2. Đặc điểm sinh học
• 2.2.3. Đặc điểm sinh thái học
• 2.2.4. Giá trị kinh tế
• 2.3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.3.1. Vật liệu nghiên cứu
• 2.3.2. Mẫu nuôi cấy
• 2.3.3. Dụng cụ nuôi cấy
• 2.3.4. Môi trường nuôi cấy
• 2.3.5. Thể tích nuôi cấy
• 2.3.6. Chuẩn bị mẫu nuôi cấy
• 2.3.7. Điều kiện nuôi cấy
• 2.4. BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM NGHIÊN CỨU
• 2.4.1. Vô trùng mẫu nuôi cấy
• 2.4.2. Ảnh hưởng của các môi trường khoáng cơ bản đến khả năng tái sinh chồi cây pemu in vitro
• 2.4.3. Ảnh hưởng của BA, Ki và Cw đến khả năng nhân giống
• 2.4.4. Ảnh hưởng của BA và IBA đến khả năng nhân giống cây pemu in vitro
• 2.4.5. Ảnh hưởng của các chất hữu cơ đến khả năng nhân giống pemu in vitro
• 2.4.6. Ảnh hưởng của BA, IBA, Yeast extract và than đến khả năng vươn thân cây pemu in vitro
• 2.4.7. Ảnh hưởng của BA và Rib đến quá trình tạo rễ cây pemu in vitro
• 2.5. CÁC CHỈ TIÊU NGHIÊN CỨU
• 2.6. PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
• 3.1. VÔ TRÙNG MẪU NUÔI CẤY
• 3.2. THÍ NGHIỆM 1: ẢNH HƯỞNG CỦA HYPO-NA VÀ THỜI GIAN ĐẾN KHẢ NĂNG VÔ TRÙNG MẪU CÂY PEMU NUÔI CẤY MÔ
• 3.3. THÍ NGHIỆM 2: ẢNH HƯỞNG CỦA HGCL2 VÀ THỜI GIAN ĐẾN KHẢ NĂNG VÔ TRÙNG MẪU CÂY PEMU NUÔI CẤY MÔ
• 3.4. NUÔI CẤY CHOÀI ĐÍNH CÂY PEMU IN VITRO
• 3.5. NHÂN GIỐNG CÂY PEMU IN VITRO
• 3.6. THÍ NGHIỆM 4: ẢNH HƯỞNG BA, KI VÀ CW ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CÂY PEMU IN VITRO
• 3.7. THÍ NGHIỆM 5: ẢNH HƯỞNG BA VÀ IBA ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG CỦA CÂY PEMU IN VITRO
• 3.8. THÍ NGHIỆM 6: ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT HỮU CƠ ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG PEMU IN VITRO
• 3.9. NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG VƯƠN THÂN PEMU IN VITRO
• 3.10. NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG TẠO RỄ CÂY PEMU IN VITRO
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tóm tắt

I. Tổng quan về Nghiên cứu Nhân giống Vô tính Pơ Mu 55 Ký Tự

Cây Pơ Mu (Fokienia hodginsii), hay còn gọi là Ngọc Am, là loài cây gỗ quý có giá trị kinh tế cao. Gỗ Pơ Mu bền, đẹp, thơm, dễ cưa xẻ, được dùng làm đồ mỹ nghệ, điêu khắc, xây dựng và chiết xuất tinh dầu quý. Tuy nhiên, Pơ Mu đang bị khai thác quá mức, dẫn đến nguy cơ tuyệt chủng. Vì vậy, nhân giống Pơ Mu trở nên cấp thiết. Phương pháp nuôi cấy mô in vitro có thể tạo ra số lượng lớn cây giống nhanh chóng, hiệu quả, góp phần bảo tồn loài cây này. Luận văn này tập trung nghiên cứu quy trình nhân giống vô tính Pơ Mu bằng nuôi cấy mô nhằm cung cấp cây giống cho ngành lâm nghiệp Việt Nam, từ đó giảm áp lực lên quần thể tự nhiên và thúc đẩy trồng rừng bền vững. Theo Bộ Khoa học - Công nghệ - Môi trường (1996), Pơ Mu thuộc loại cây cần bảo vệ nghiêm ngặt.

1.1. Giá trị kinh tế và tầm quan trọng bảo tồn cây Pơ Mu

Pơ Mu có giá trị kinh tế cao nhờ gỗ quý, tinh dầu thơm và khả năng làm cây cảnh. Tinh dầu Pơ Mu được sử dụng trong công nghiệp nước hoa và dược liệu. Tuy nhiên, khai thác quá mức đã đẩy Pơ Mu vào danh sách các loài cần bảo tồn. Việc bảo tồn Pơ Mu không chỉ duy trì đa dạng sinh học mà còn mang lại lợi ích kinh tế và xã hội. Nghiên cứu nhân giống vô tính bằng nuôi cấy mô là một giải pháp hiệu quả để bảo tồn và phát triển loài cây này, giúp đáp ứng nhu cầu thị trường mà không gây hại đến quần thể tự nhiên.

1.2. Ưu điểm của phương pháp nhân giống vô tính bằng nuôi cấy mô

Phương pháp nhân giống vô tính bằng nuôi cấy mô có nhiều ưu điểm so với các phương pháp truyền thống. Nó cho phép nhân nhanh số lượng lớn cây giống từ một mẫu nhỏ, đảm bảo tính đồng nhất về mặt di truyền và rút ngắn thời gian sinh trưởng. Hơn nữa, phương pháp này có thể được áp dụng cho các loài cây khó nhân giống bằng hạt hoặc giâm cành, mở ra cơ hội bảo tồn và phát triển các loài cây quý hiếm như Pơ Mu.

II. Thách thức trong nhân giống Pơ Mu và Hướng giải quyết 58 Ký Tự

Nhân giống Pơ Mu gặp nhiều khó khăn do tỷ lệ nảy mầm thấp, cây con sinh trưởng chậm và khả năng tái sinh tự nhiên kém. Các phương pháp nhân giống truyền thống như gieo hạt, giâm cành không mang lại hiệu quả cao. Để giải quyết vấn đề này, nghiên cứu tập trung vào ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô, một phương pháp nhân giống invitro tiên tiến. Kỹ thuật này cho phép tạo ra số lượng lớn cây con trong thời gian ngắn, khắc phục những hạn chế của phương pháp truyền thống. Đồng thời, nghiên cứu cũng tìm kiếm các điều kiện nuôi cấy tối ưu để nâng cao hiệu quả nhân giống vô tính Pơ Mu.

2.1. Hạn chế của phương pháp nhân giống truyền thống Pơ Mu

Các phương pháp nhân giống truyền thống Pơ Mu như gieo hạt, giâm cành thường gặp nhiều hạn chế. Tỷ lệ nảy mầm thấp, cây con sinh trưởng chậm và khả năng tái sinh tự nhiên kém là những thách thức lớn. Ngoài ra, việc thu hái hạt Pơ Mu cũng gặp khó khăn do cây phân bố rải rác và số lượng cá thể ít. Do đó, cần thiết phải tìm ra một phương pháp nhân giống hiệu quả hơn để bảo tồn và phát triển loài cây này.

2.2. Tại sao nuôi cấy mô là giải pháp tiềm năng cho Pơ Mu

Nuôi cấy mô Pơ Mu là một giải pháp tiềm năng để vượt qua những hạn chế của phương pháp truyền thống. Phương pháp này cho phép nhân nhanh số lượng lớn cây con từ một mẫu nhỏ, đảm bảo tính đồng nhất về mặt di truyền và rút ngắn thời gian sinh trưởng. Ngoài ra, nuôi cấy mô còn giúp bảo tồn nguồn gen quý hiếm của Pơ Mu và tạo ra các giống cây có năng suất cao, kháng bệnh tốt.

2.3. Tối ưu hóa quy trình nhân giống in vitro cho Pơ Mu

Để tăng hiệu quả nhân giống Pơ Mu bằng phương pháp in vitro, cần tối ưu hóa các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy. Điều này bao gồm việc lựa chọn môi trường nuôi cấy phù hợp, điều chỉnh nồng độ chất kích thích sinh trưởng, kiểm soát điều kiện ánh sáng và nhiệt độ, và áp dụng các biện pháp phòng ngừa nhiễm bệnh. Việc nghiên cứu và tối ưu hóa quy trình nhân giống in vitro sẽ giúp nâng cao tỷ lệ thành công và giảm chi phí sản xuất cây giống.

III. Phương pháp Nhân giống Vô tính In Vitro Cây Pơ Mu 57 Ký Tự

Nghiên cứu này tập trung vào nhân giống vô tính cây Pơ Mu (Fokienia hodginsii) bằng phương pháp nuôi cấy mô. Quá trình bao gồm các bước: chọn mẫu, khử trùng, tạo callus, tái sinh chồi, ra rễ và huấn luyện cây. Các thí nghiệm được thực hiện để xác định môi trường nuôi cấy tối ưu, nồng độ chất kích thích sinh trưởng (BA, IBA, Kinetin) phù hợp và ảnh hưởng của các chất hữu cơ (Yeast extract, Glutamine) đến khả năng nhân giống Pơ Mu. Mục tiêu là xây dựng quy trình nhân giống Pơ Mu hiệu quả, tạo ra cây con khỏe mạnh, có khả năng thích nghi tốt với điều kiện tự nhiên.

3.1. Quy trình chuẩn bị mẫu và khử trùng trong nuôi cấy mô

Chuẩn bị mẫu và khử trùng là bước quan trọng để đảm bảo sự thành công của quá trình nuôi cấy mô. Mẫu Pơ Mu (chồi, lá non) được chọn từ cây mẹ khỏe mạnh và khử trùng bằng các chất như Hypochlorite Natri (Hypo-Na) hoặc Thủy ngân Chloride (HgCl2) trong thời gian thích hợp để loại bỏ vi sinh vật gây nhiễm. Việc xác định nồng độ và thời gian xử lý tối ưu là rất quan trọng để tránh gây hại cho mẫu.

3.2. Vai trò của chất kích thích sinh trưởng trong nhân giống Pơ Mu

Chất kích thích sinh trưởng đóng vai trò quan trọng trong quá trình nhân giống Pơ Mu bằng nuôi cấy mô. Auxin (ví dụ: IBA) kích thích ra rễ, Cytokinin (ví dụ: BA, Kinetin) kích thích tái sinh chồi. Tỷ lệ auxin/cytokinin ảnh hưởng đến sự phát triển của cây con. Nghiên cứu này đánh giá ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng khác nhau đến khả năng tạo chồi và rễ của Pơ Mu.

3.3. Nuôi cấy chồi đỉnh cây Pơ Mu in vitro các bước thực hiện

Nuôi cấy chồi đỉnh là một trong những phương pháp quan trọng để nhân nhanh giống Pơ Mu in vitro. Đầu tiên, chọn chồi đỉnh khỏe mạnh từ cây Pơ Mu mẹ. Sau đó, khử trùng cẩn thận để loại bỏ các tác nhân gây bệnh. Chồi đỉnh được đặt trong môi trường nuôi cấy phù hợp, giàu dinh dưỡng và chất điều hòa sinh trưởng. Theo dõi và điều chỉnh các điều kiện nuôi cấy (ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm) để chồi đỉnh phát triển thành cây hoàn chỉnh.

IV. Kết quả Nghiên cứu Nhân giống Pơ Mu bằng Nuôi cấy Mô 56 Ký Tự

Nghiên cứu đã xác định được môi trường nuôi cấy và nồng độ chất kích thích sinh trưởng tối ưu cho quá trình nhân giống vô tính Pơ Mu. Kết quả cho thấy môi trường WPM kết hợp với BA và IBA có hiệu quả cao trong việc tạo chồi và rễ. Tỷ lệ sống của cây Pơ Mu sau khi ra ngôi đạt mức khá. Nghiên cứu này cung cấp cơ sở khoa học cho việc ứng dụng rộng rãi phương pháp nuôi cấy mô trong nhân giống bảo tồn Pơ Mu và các loài cây gỗ quý khác.

4.1. Ảnh hưởng của môi trường WPM đến tái sinh chồi cây Pơ Mu

Môi trường WPM (Woody Plant Medium) là một môi trường nuôi cấy phổ biến được sử dụng cho các loài cây thân gỗ. Nghiên cứu cho thấy môi trường WPM có ảnh hưởng tích cực đến khả năng tái sinh chồi của cây Pơ Mu. Việc bổ sung thêm các chất dinh dưỡng và chất điều hòa sinh trưởng vào môi trường WPM có thể tăng cường hơn nữa hiệu quả tái sinh chồi.

4.2. Tối ưu hóa tỷ lệ BA và IBA để nhân nhanh cây Pơ Mu In Vitro

Tỷ lệ giữa BA (Benzyladenine) và IBA (Indole-3-butyric acid) là yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến quá trình nhân nhanh cây Pơ Mu In Vitro. Tỷ lệ này cần được điều chỉnh phù hợp để đạt được số lượng chồi và rễ tối đa. Nghiên cứu này đã xác định được tỷ lệ BA và IBA tối ưu cho việc nhân nhanh cây Pơ Mu In Vitro, giúp giảm chi phí và thời gian sản xuất cây giống.

4.3. Khả năng vươn thân và tạo rễ của cây Pơ Mu sau nuôi cấy mô

Sau quá trình nhân giống, khả năng vươn thân và tạo rễ là yếu tố quan trọng để đánh giá sự thành công của phương pháp nuôi cấy mô. Cây Pơ Mu sau khi được chuyển sang môi trường thích hợp cần có khả năng vươn thân tốt để phát triển thành cây trưởng thành. Đồng thời, hệ rễ khỏe mạnh là nền tảng để cây hấp thụ dinh dưỡng và nước từ môi trường, đảm bảo sự sinh trưởng và phát triển bền vững.

V. Ứng dụng Triển vọng Nhân giống Pơ Mu bằng Nuôi cấy Mô 59 Ký Tự

Phương pháp nuôi cấy mô mở ra triển vọng lớn trong việc nhân giống và bảo tồn cây Pơ Mu. Ứng dụng kết quả nghiên cứu vào sản xuất cây giống quy mô lớn sẽ góp phần phục hồi rừng Pơ Mu, cung cấp nguồn nguyên liệu gỗ quý bền vững. Đồng thời, kỹ thuật này có thể được áp dụng cho các loài cây gỗ quý hiếm khác, góp phần bảo tồn đa dạng sinh học và phát triển kinh tế lâm nghiệp bền vững. Nghiên cứu sâu hơn về môi trường nuôi cấy mô Pơ Mu và điều kiện thích nghi của cây con sẽ nâng cao hiệu quả ứng dụng.

5.1. Tiềm năng ứng dụng trong sản xuất cây giống Pơ Mu quy mô lớn

Phương pháp nuôi cấy mô có tiềm năng lớn trong việc sản xuất cây giống Pơ Mu quy mô lớn. Điều này giúp đáp ứng nhu cầu trồng rừng và phục hồi các khu rừng Pơ Mu bị suy thoái. Việc sản xuất cây giống quy mô lớn cũng tạo ra cơ hội việc làm và thu nhập cho người dân địa phương, góp phần phát triển kinh tế xã hội.

5.2. Nhân giống bảo tồn các loài cây gỗ quý hiếm khác

Kỹ thuật nuôi cấy mô không chỉ có hiệu quả với Pơ Mu mà còn có thể được áp dụng cho các loài cây gỗ quý hiếm khác đang bị đe dọa tuyệt chủng. Việc bảo tồn các loài cây này là rất quan trọng để duy trì đa dạng sinh học và bảo vệ môi trường. Áp dụng phương pháp nuôi cấy mô là một giải pháp hiệu quả để bảo tồn và phát triển các loài cây gỗ quý hiếm này.

5.3. Hướng nghiên cứu tiếp theo về nuôi cấy mô cây Pơ Mu

Mặc dù đã có những thành công nhất định, vẫn còn nhiều hướng nghiên cứu tiếp theo cần được thực hiện để nâng cao hiệu quả nuôi cấy mô cây Pơ Mu. Một số hướng nghiên cứu tiềm năng bao gồm: tối ưu hóa thành phần môi trường nuôi cấy, nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố môi trường (ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm) đến quá trình sinh trưởng và phát triển của cây, và phát triển các kỹ thuật mới để tăng cường khả năng thích nghi của cây con sau khi ra ngôi.

VI. Kết luận Nuôi cấy mô Pơ Mu cho Tương lai Xanh 54 Ký Tự

Nghiên cứu nhân giống Pơ Mu bằng phương pháp nuôi cấy mô đã đạt được những thành công bước đầu, mở ra hướng đi mới trong công tác bảo tồn và phát triển loài cây gỗ quý này. Việc áp dụng kết quả nghiên cứu vào thực tiễn sẽ góp phần quan trọng vào việc phục hồi rừng Pơ Mu, đảm bảo nguồn cung gỗ bền vững và bảo vệ môi trường. Cần có sự đầu tư và hỗ trợ từ các cấp để phát triển phòng thí nghiệm nuôi cấy mô thực vật, nhân rộng mô hình nhân giống bảo tồn Pơ Mu trên cả nước.

6.1. Tầm quan trọng của đầu tư vào nghiên cứu và phát triển nuôi cấy mô

Để tiếp tục phát triển và ứng dụng hiệu quả phương pháp nuôi cấy mô, cần có sự đầu tư mạnh mẽ vào nghiên cứu và phát triển. Điều này bao gồm việc trang bị các phòng thí nghiệm hiện đại, đào tạo đội ngũ cán bộ khoa học kỹ thuật có trình độ cao, và hỗ trợ các dự án nghiên cứu có tính ứng dụng thực tiễn.

6.2. Chính sách hỗ trợ nhân rộng mô hình nhân giống bảo tồn Pơ Mu

Để nhân rộng mô hình nhân giống bảo tồn Pơ Mu bằng phương pháp nuôi cấy mô, cần có chính sách hỗ trợ từ các cấp chính quyền. Điều này bao gồm việc cung cấp vốn, kỹ thuật, và thị trường tiêu thụ cho các tổ chức và cá nhân tham gia vào hoạt động nhân giống. Đồng thời, cần tăng cường công tác tuyên truyền, nâng cao nhận thức của cộng đồng về tầm quan trọng của việc bảo tồn Pơ Mu.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Cây pemu (Fokienia hodginsii) là một loài cây gỗ quý hiếm, có giá trị kinh tế và khoa học cao, được sử dụng rộng rãi trong ngành công nghiệp gỗ, mỹ nghệ, xây dựng và sản xuất tinh dầu. Tại Việt Nam, pemu đang bị khai thác quá mức dẫn đến suy giảm nghiêm trọng về số lượng và khả năng tái sinh tự nhiên, khiến loài cây này được xếp vào danh mục cây cần bảo vệ nghiêm ngặt. Theo ước tính, diện tích rừng pemu tự nhiên ngày càng thu hẹp, sinh trưởng kém và khả năng tái sinh bằng hạt rất thấp, gây nguy cơ tuyệt chủng cao.

Mục tiêu nghiên cứu của luận văn là xây dựng quy trình nhân giống nhanh cây pemu bằng phương pháp nuôi cấy mô in vitro, nhằm cung cấp nguồn giống chất lượng cao phục vụ công tác bảo tồn và phát triển rừng. Nghiên cứu tập trung vào các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng vô trùng mẫu, sinh trưởng chồi, nhân giống và tạo rễ cây pemu in vitro. Thời gian nghiên cứu được thực hiện trong giai đoạn 2001-2005 tại Viện Sinh học Nhiệt đới, TP. Hồ Chí Minh, với phạm vi nghiên cứu chủ yếu là các mẫu cây pemu lấy từ trung tâm nghiên cứu Lâm sinh Lâm Đồng.

Ý nghĩa của nghiên cứu thể hiện qua việc phát triển thành công kỹ thuật nhân giống vô tính cây pemu, góp phần bảo tồn nguồn gen quý hiếm, giảm áp lực khai thác rừng tự nhiên, đồng thời tạo điều kiện phát triển kinh tế lâm nghiệp bền vững. Các chỉ số hiệu quả như tỷ lệ mẫu sống vô trùng đạt trên 50%, tỷ lệ sinh chồi và tạo rễ cao trên 80% cho thấy tiềm năng ứng dụng thực tiễn của quy trình nuôi cấy mô này.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình sinh học tế bào thực vật, đặc biệt là kỹ thuật nuôi cấy mô và nhân giống vô tính in vitro. Hai lý thuyết chính được áp dụng gồm:

1. Lý thuyết tế bào học của Schleiden và Schwann (1938): Mọi sinh vật đều được cấu tạo từ tế bào, tế bào là đơn vị cơ bản của sự sống và có khả năng phân chia, sinh trưởng, tạo thành các mô và cơ quan.

2. Mô hình điều hòa sinh trưởng thực vật qua các chất điều hòa sinh trưởng (auxin, cytokinin, gibberellin): Các hormone này điều khiển quá trình phân chia tế bào, sinh trưởng chồi, tạo rễ và phát triển cây con in vitro.

Các khái niệm chính bao gồm:

• Nuôi cấy mô in vitro: Kỹ thuật nuôi dưỡng tế bào, mô thực vật trong môi trường vô trùng, có kiểm soát các yếu tố dinh dưỡng và hormone để tạo cây con.

• Vô trùng mẫu: Quá trình xử lý mẫu cây để loại bỏ vi sinh vật gây hại, đảm bảo môi trường nuôi cấy sạch.

• Chất kích thích sinh trưởng (BA, IBA, Ki): Các hormone được bổ sung vào môi trường nuôi cấy để kích thích sinh chồi, tạo rễ và phát triển cây.

• Tái sinh chồi và tạo rễ: Quá trình phát triển chồi mới và rễ từ mô nuôi cấy, là bước quan trọng trong nhân giống vô tính.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu chính là các mẫu cây pemu lấy từ cây 1-1,5 tuổi tại trung tâm nghiên cứu Lâm sinh Lâm Đồng, được xử lý và nuôi cấy tại Viện Sinh học Nhiệt đới, TP. Hồ Chí Minh. Cỡ mẫu gồm nhiều mẫu choài định (mẫu mô) được xử lý vô trùng và nuôi cấy trong các ống nghiệm và bình tam giác chứa môi trường MS và WPM có bổ sung các chất dinh dưỡng và hormone.

Phương pháp phân tích sử dụng thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD) với 3 lần lặp lại, mỗi lần lặp 3 bình tam giác, mỗi bình chứa 5 mẫu, tổng cộng 20 ống nghiệm mỗi lần lặp. Các chỉ tiêu theo dõi gồm tỷ lệ mẫu sống vô trùng, số chồi/cụm, chiều cao chồi, số rễ/cây, chiều dài rễ, và khả năng tạo rễ.

Timeline nghiên cứu kéo dài từ 2001 đến 2005, bao gồm các giai đoạn: chuẩn bị mẫu, xử lý vô trùng, nuôi cấy mô, nhân giống chồi, tạo rễ và chuyển cây con ra vườn ươm. Phân tích số liệu được thực hiện bằng phần mềm Mstatc và Excel, sử dụng phương pháp phân tích phương sai và kiểm định LSD để đánh giá sự khác biệt có ý nghĩa thống kê.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Ảnh hưởng của dung dịch Hypo-Na và thời gian xử lý đến tỷ lệ vô trùng mẫu: Khi xử lý mẫu với Hypo-Na 10% trong 12 phút, tỷ lệ mẫu sống vô trùng đạt cao nhất là 50,63%. Ở nồng độ 5% trong 5 phút, toàn bộ mẫu còn sống nhưng tỷ lệ vô trùng thấp hơn. Tăng thời gian xử lý làm tăng khả năng vô trùng nhưng cũng làm tăng tỷ lệ mẫu bị hư hại.

2. Ảnh hưởng của dung dịch HgCl2 kết hợp với Hypo-Na đến tỷ lệ vô trùng: Kết hợp Hypo-Na 10% trong 12 phút với HgCl2 0,1% trong 7 phút cho tỷ lệ mẫu sống và vô trùng cao nhất là 87,33%, vượt trội so với chỉ dùng Hypo-Na đơn thuần.

3. Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng và các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng sinh chồi: Môi trường WPM bổ sung BA 0,1 mg/l và cytokinin Ki 0,1 mg/l cho tỷ lệ sinh chồi cao nhất, với số chồi trung bình đạt trên 5 chồi/cụm sau 45 ngày nuôi cấy.

4. Ảnh hưởng của tỷ lệ BA và IBA đến khả năng nhân giống và tạo rễ: Tỷ lệ BA 0,1 mg/l kết hợp IBA 0,3 mg/l kích thích sinh chồi và tạo rễ hiệu quả nhất, với tỷ lệ tạo rễ đạt trên 80% sau 60 ngày nuôi cấy.

Thảo luận kết quả

Kết quả cho thấy việc xử lý mẫu bằng dung dịch Hypo-Na và HgCl2 là bước quan trọng để đảm bảo vô trùng mẫu, giảm thiểu sự phát triển của nấm và vi khuẩn gây hại trong môi trường nuôi cấy. Sự kết hợp này giúp tăng tỷ lệ mẫu sống vô trùng lên gần 90%, phù hợp với các nghiên cứu về nuôi cấy mô thực vật khác.

Môi trường WPM được lựa chọn do có thành phần khoáng chất phù hợp với đặc điểm sinh học của cây pemu, giúp tăng cường sinh trưởng chồi và phát triển mô. Việc bổ sung các hormone BA và Ki kích thích phân chia tế bào và sinh chồi, đồng thời IBA hỗ trợ quá trình tạo rễ, phù hợp với cơ chế điều hòa sinh trưởng thực vật đã được công nhận.

So sánh với các nghiên cứu về nhân giống vô tính các loài cây gỗ quý khác, tỷ lệ sinh chồi và tạo rễ của cây pemu đạt mức cao, chứng tỏ quy trình nuôi cấy mô in vitro được xây dựng có hiệu quả và khả năng ứng dụng thực tiễn trong bảo tồn và phát triển nguồn gen cây pemu.

Dữ liệu có thể được trình bày qua biểu đồ tỷ lệ mẫu sống vô trùng theo nồng độ và thời gian xử lý Hypo-Na và HgCl2, bảng so sánh số chồi và tỷ lệ tạo rễ trên các môi trường và tỷ lệ hormone khác nhau, giúp minh họa rõ ràng hiệu quả từng yếu tố trong quy trình nhân giống.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Áp dụng quy trình xử lý mẫu bằng Hypo-Na 10% trong 12 phút kết hợp HgCl2 0,1% trong 7 phút để đảm bảo tỷ lệ vô trùng mẫu cao, giảm thiểu thất thoát vật liệu ban đầu. Thời gian thực hiện: ngay khi thu mẫu; Chủ thể thực hiện: các trung tâm nghiên cứu và cơ sở nhân giống.

2. Sử dụng môi trường WPM bổ sung BA 0,1 mg/l và Ki 0,1 mg/l cho giai đoạn sinh chồi nhằm tối ưu hóa tỷ lệ sinh trưởng và số lượng chồi. Thời gian áp dụng: trong suốt quá trình nuôi cấy; Chủ thể thực hiện: phòng thí nghiệm nuôi cấy mô.

3. Bổ sung IBA 0,3 mg/l trong giai đoạn tạo rễ để nâng cao hiệu quả tạo rễ, giúp cây con phát triển khỏe mạnh trước khi chuyển ra vườn ươm. Thời gian áp dụng: 45-60 ngày nuôi cấy; Chủ thể thực hiện: kỹ thuật viên nuôi cấy mô.

4. Xây dựng hệ thống vườn ươm với điều kiện ánh sáng, nhiệt độ và độ ẩm phù hợp (ánh sáng 3000 lux, nhiệt độ 26±2°C, độ ẩm cao) để đảm bảo cây con in vitro thích nghi tốt khi chuyển ra môi trường tự nhiên. Thời gian thực hiện: sau khi tạo rễ; Chủ thể thực hiện: các cơ sở sản xuất giống cây trồng.

5. Đào tạo nhân lực và chuyển giao công nghệ nuôi cấy mô cây pemu cho các đơn vị lâm nghiệp và bảo tồn rừng nhằm nhân rộng quy trình, góp phần bảo vệ nguồn gen quý hiếm. Thời gian: trong vòng 1-2 năm; Chủ thể thực hiện: viện nghiên cứu, trường đại học.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Các nhà nghiên cứu sinh học thực vật và công nghệ sinh học: Nghiên cứu về kỹ thuật nuôi cấy mô, nhân giống vô tính và bảo tồn nguồn gen cây gỗ quý hiếm.

2. Các cơ sở sản xuất giống cây trồng và lâm nghiệp: Áp dụng quy trình nhân giống nhanh cây pemu để cung cấp giống chất lượng, phục vụ trồng rừng và phát triển kinh tế lâm nghiệp.

3. Các tổ chức bảo tồn thiên nhiên và quản lý rừng: Sử dụng kết quả nghiên cứu để xây dựng kế hoạch bảo vệ và phục hồi rừng pemu tự nhiên, giảm áp lực khai thác.

4. Sinh viên và học viên cao học chuyên ngành công nghệ sinh học, lâm nghiệp: Tham khảo phương pháp nghiên cứu, kỹ thuật nuôi cấy mô và ứng dụng thực tiễn trong bảo tồn và phát triển cây trồng.

Câu hỏi thường gặp

1. Tại sao phải sử dụng kết hợp Hypo-Na và HgCl2 trong xử lý mẫu?
   Kết hợp hai dung dịch này giúp tăng hiệu quả vô trùng bằng cách loại bỏ nấm và vi khuẩn bám trên bề mặt mẫu, giảm thiểu tỷ lệ nhiễm khuẩn trong môi trường nuôi cấy, từ đó nâng cao tỷ lệ mẫu sống và phát triển.

2. Môi trường WPM có ưu điểm gì so với MS trong nuôi cấy cây pemu?
   WPM có thành phần khoáng chất phù hợp hơn với đặc điểm sinh học của cây pemu, giúp tăng cường sinh trưởng chồi và khả năng nhân giống, trong khi MS thường dùng cho nhiều loại cây khác nhưng không tối ưu bằng WPM cho pemu.

3. Vai trò của các hormone BA, Ki và IBA trong quá trình nuôi cấy mô là gì?
   BA và Ki là cytokinin kích thích phân chia tế bào và sinh chồi, còn IBA là auxin hỗ trợ quá trình tạo rễ, phối hợp hài hòa giúp cây con phát triển toàn diện trong môi trường in vitro.

4. Làm thế nào để chuyển cây con in vitro ra môi trường tự nhiên thành công?
   Cần thực hiện quá trình thích nghi dần dần trong vườn ươm với điều kiện ánh sáng, nhiệt độ và độ ẩm kiểm soát, đồng thời xử lý cây con để giảm stress, tránh sốc môi trường giúp cây phát triển khỏe mạnh.

5. Quy trình nhân giống vô tính cây pemu có thể áp dụng cho các loài cây gỗ quý khác không?
   Có thể áp dụng với điều chỉnh phù hợp về môi trường dinh dưỡng và hormone, vì nguyên lý nuôi cấy mô và nhân giống vô tính tương tự, tuy nhiên cần nghiên cứu đặc thù từng loài để tối ưu hiệu quả.

Kết luận

• Đã xây dựng thành công quy trình nuôi cấy mô in vitro nhân giống nhanh cây pemu với tỷ lệ vô trùng mẫu đạt trên 87% khi kết hợp Hypo-Na và HgCl2.
• Môi trường WPM bổ sung BA 0,1 mg/l và Ki 0,1 mg/l tối ưu cho sinh trưởng chồi, kết hợp IBA 0,3 mg/l hỗ trợ tạo rễ hiệu quả.
• Quy trình giúp tạo ra cây con khỏe mạnh, sạch bệnh, có khả năng thích nghi cao khi chuyển ra vườn ươm.
• Nghiên cứu góp phần bảo tồn nguồn gen quý hiếm, giảm áp lực khai thác rừng tự nhiên và phát triển kinh tế lâm nghiệp bền vững.
• Đề xuất triển khai áp dụng quy trình tại các trung tâm nhân giống và bảo tồn, đồng thời đào tạo nhân lực để nhân rộng mô hình trong thời gian tới.

Hãy hành động ngay để bảo vệ và phát triển nguồn gen cây pemu quý giá cho thế hệ tương lai!

Trích đoạn nội dung tài liệu

BOÄ GIAÙO DUÏC & ÑAØO TAÏO TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC MÔÛ – BAÙN COÂNG TPHCM KHOA COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC Ñeà taøi (FOKIENIA HODGINSII) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP CÖÛ NHAÂN KHOA HOÏC CHUYEÂN NGAØNH: COÂNG NGHEÄ TEÁ BAØO THÖÏC VAÄT GIAÛNG VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN : PGS-TS.TRAÀN VAÊN MINH SINH VIEÂN THÖÏC HIEÄN : PHAN THÒ HOAØNG MAI MSSV : 30100838 KHOAÙ HOÏC : 2001 – 2005 TP.HCM, 03 – 2006 LÔØI CAÛM ÔN Theá laø ñaõ keát thuùc nhöõng naêm hoïc taïi tröôøng vaø suoát nhöõng naêm hoïc qua em ñaõ ñöôïc söï chæ daãn taän tình cuûa caùc thaày coâ. Söï giuùp ñôõ cuûa baïn beø, söï hoã trôï vaø ñoäng vieân cuûa gia ñình, söï coá gaéng noå löïc cuûa baûn thaân. Suoát ñôøi em seõ khoâng bao giôø queân. Em xin gôûi lôøi caûm ôn chaân thaønh ñeán caùc thaày coâ, gia ñình vaø baïn beø ñaõ giuùp ñôõ em.

Em cuõng xin chaân thaønh caûm ôn söï chæ daãn raát nhieät tình vaø taän tình cuûa thaày Traàn Vaên Minh trong quaù trình thöïc hieän ñeà taøi naøy. Vaø em cuõng xin gôûi lôøi caûm ôn ñeán coâ Thu, anh Ñònh, chò Uyeân, chò Haûo vaø taát caû caùc anh chò phoøng caây aên traùi – Vieän Coâng ngheä Sinh Hoïc Nhieät Ñôùi ñaõ giuùp ñôõ vaø taïo ñieàu kieän cho em hoaøn thaønh ñöôïc ñeà taøi naøy. Ngöôøi thöïc hieän Phan Thò Hoaøng Mai NHAÄN XEÙT CUÛA GIAÙO VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN …. TP HCM, ngaøy thaùng naêm 2006 GVHD: PGS-TS TRAÀN VAÊN MINH NHAÄN XEÙT CUÛA GIAÙO VIEÂN PHAÛN BIEÄN ….

TP HCM, ngaøy thaùng naêm 2006 GVPB: MUÏC LUÏC Chöông. Trang LÔØI CAÛM ÔN. I LÔØI NHAÄN XEÙT CUÛA GIAÙO VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN .II LÔØI NHAÄN XEÙT CUÛA GIAÙO VIEÂN PHAÛN BIEÄN. III MUÏC LUÏC.

IV DANH SAÙCH CAÙC BAÛNG .V DANH SAÙCH CAÙC HÌNH. VI DANH MUÏC CAÙC CHÖÕ VIEÁT TAÉT. ÑAËT VAÁN ÑEÀ. ÑAËT VAÁN ÑEÀ.

MUÏC ÑÍCH VAØ MUÏC TIEÂU NGHIEÂN CÖÙU. Muïc ñích cuûa ñeà taøi. Muïc tieâu cuûa ñeà taøi. GIÔÙI HAÏN ÑEÀ TAØI.

NOÄI DUNG NGHIEÂN CÖÙU. TOÅNG QUAN. LÒCH SÖÛ PHAÙT TRIEÅN CUÛA NUOÂI CAÁY MOÂ. ÑAËT ÑIEÅM LAÂM SINH HOÏC CUÛA CAÂY PEMU.

Vò trí phaân loaïi. Ñaëc ñieåm sinh hoïc. Ñaëc ñieåm sinh thaùi hoïc. Giaù trò kinh teá.

Kyõ thuaät troàng röøng. Kyõ thuaät nhaân gioáng ñaõ söû duïng. NHAÂN GIOÁNG VOÂ TÍNH BAÈNG PHÖÔNG PHAÙP NUOÂI CAÁY MOÂ. Khaùi nieäm vaø öùng duïng.

Kyõ thuaät nhaân gioáng voâ tính in vitro. Caùc yeáu toá aûnh höôûng ñeán nuoâi caáy. Ñieàu kieän nuoâi caáy. VAI TROØ CHAÁT KÍCH THÍCH SINH TRÖÔÛNG.

VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP NGHIEÂN CÖÙU. VAÄT LIEÄU NGHIEÂN CÖÙU. Maãu nuoâi caáy. Duïng cuï nuoâi caáy.

Moâi tröôøng nuoâi caáy. Theå tích nuoâi caáy. Chuaån bò maãu nuoâi caáy. Ñieàu kieän nuoâi caáy.

BOÁ TRÍ THÍ NGHIEÄM NGHIEÂN CÖÙU .1 Voâ truøng maãu nuoâi caáy. AÛnh höôûng cuûa caùc moâi tröôøng khoaùng cô baûn ñeán khaû naêng taùi sinh choài caây pemu in vitro. Aûnh höôûng cuûa BA, Ki vaø Cw ñeán khaû naêng nhaân gioáng. Aûnh höôûng cuûa BA vaø IBA ñeán khaû naêng nhaân gioáng caây pemu in vitro.

Aûnh höôûng cuûa caùc chaát höõu cô ñeán khaû naêng nhaân gioáng pemu in vitro. Aûnh höôûng cuûa BA, IBA,Yeast extract vaø than ñeán khaû naêng vöôn thaân caây pemu in vitro. Aûnh höôûng cuûa BA vaø Rib ñeán quaù trình taïo reã caây pemu in vitro. CAÙC CHÆ TIEÂU NGHIEÂN CÖÙU.

PHÖÔNG PHAÙP XÖÛ LYÙ SOÁ LIEÄU. KEÁT QUAÛ VAØ THAÛO LUAÄN. VOÂ TRUØNG MAÃU NUOÂI CAÁY. Thí nghieäm 1: Aûnh höôûng cuûa Hypo- Na vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu caây pemu nuoâi caáy moâ.

Thí nghieäm 2: Aûnh höôûng cuûa HgCl2 vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu caây pemu nuoâi caáy moâ. NUOÂI CAÁY CHOÀI ÑÆNH CAÂY PEMU IN VITRO. NHAÂN GIOÁNG CAÂY PEMU INVITRO. Thí nghieäm 4: Aûnh höôûng BA, Ki vaø Cw ñeán khaû naêng nhaân gioáng caây pemu in vitro.

Thí nghieäm 5: Aûnh höôûng BA vaø IBA ñeán khaû naêng nhaân gioáng cuûa caây pemu in vitro. Thí nghieäm 6: Aûnh höôûng cuûa caùc chaát höõu cô ñeán khaû naêng nhaân gioáng pemu in vitro. NGHIEÂN CÖÙU KHAÛ NAÊNG VÖÔN THAÂN PEMU IN VITRO. NGHIEÂN CÖÙU KHAÛ NAÊNG TAÏO REÃ CAÂY PEMU IN VITRO.

KEÁT LUAÄN VAØ ÑEÀ NGHÒ. 55 TAØI LIEÄU THAM KHAÛO DANH SAÙCH CAÙC BAÛNG Baûng Trang Baûng 3.1: Aûnh höôûng cuûa Hypo-Na vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu.2: Aûnh höôûng cuûa HgCl2 vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu .3: Aûnh höôûng cuûa moâi tröôøng, noàng ñoä BA vaø nöôùc döøa ñeå taùi sinh choài .4: Aûnh höôûng BA, Ki vaø Cw ñeán khaû naêng phaùt sinh choài .5: Aûnh höôûng BA vaø IBA ñeán khaû naêng phaùt sinh choài .6: Aûnh höôûng cuûa löôïng BA , Yeast extract, glutamine vaø ngoâ ñeán khaû naêng phaùt sinh choài .7:Aûnh höôûng cuûa BA, IBA,Yeast extract vaø than ñeán khaû naêng vöôn thaân .8 :Aûnh höôûng cuûa IBA vaø Rib ñeán quaù trình taïo reã.1: Aûnh höôûng cuûa Hypo-Na vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu…38 Baûng 4.2: Aûnh höôûng cuûa HgCl2 vaø thôøi gian ñeán khaû naêng voâ truøng maãu .3: Aûnh höôûng cuûa caùc moâi tröôøng khoaùng cô baûn ñeán khaû naêng taùi sinh choài caây pemu in vitro .4: Aûnh höôûng BA, Ki vaø Cw ñeán khaû naêng nhaân gioáng .5: AÛnh höôûng BA vaø IBA ñeán khaû naêng nhaân gioáng.6:Aûnh höôûng cuûa caùc chaát höõu cô ñeán khaû naêng nhaân .7: Aûnh höôûng cuûa BA, IBA,Yeast extract vaø than ñeán khaû naêng vöôn thaân caây pemu invitro .8: Aûnh höôûng cuûa IBA vaø Rib ñeán quaù trình taïo reã caây pemu invitro.52 DANH SAÙCH CAÙC HÌNH Hình Trang Hình 4.1 :Maãu pemu thöïc sinh ñöôïc voâ truøng phaùt sinh treân moâi tröôøng nuoâi caáy .2 : Choài ñænh pemu taùi sinh treân caùc moâi tröôøng khoaùng cô baûn.3: Caây pemu in vitro nuoâi caáy nhaân gioáng treân moâi tröôøng WPM+ BA ( 0,1 mg/l) .4: Caây pemu in vitro nuoâi caáy nhaân gioáng treân moâi tröôøng WPM+ BA ( 0,1 mg/l)+ IBA( 0,3 mg/l).5: Caây pemu in vitro nuoâi caáy nhaân gioáng treân moâi tröôøng WPM+ IBA (0,1 mg/l) + Yeast extract ( g/l) .6 : Caây pemu in vitro nuoâi caáy nhaân gioáng treân moâi tröôøng WPM + IBA ( 0,3 mg/l) +Yeast extract (1 g/l) .7: Caây pemu in vitro ra reã toát treân moâi tröôøng kích thích reã .53 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Chöông 1 ÑAËT VAÁN ÑEÀ 1. ÑAËT VAÁN ÑEÀ Trong heä thoáng caây röøng coù giaù trò kinh teá cao phaûi noùi ñeán caây pemu. Caây pemu coøn goïi laø ngoïc am, maïy vaïc, maïy long lanh, thoâng hoâi, thoâng daàu, coù teân khoa hoïc laø Fokienia hodginsii.

Pemu laø loaïi caây goã quyù, beàn, ñeïp, thôm, thaân thaúng deã cöa xeû, ñöôïc duøng laøm ñoà myõ ngheä, ñieâu khaéc, duøng ñeå laøm caàu, duøng trong xaây döïng, caát tinh daàu laøm höông lieäu raát quyù vaø laøm döôïc lieäu. Ngoaøi ra noù coøn ñöôïc duøng ñeå laøm caây caûnh trang trí vaø caây troàng ñöôøng phoá. Laø loaïi caây goã coù giaù trò cao neân ñaõ ñöôïc xeáp vaøo loaïi goã quyù ôû Vieät Nam. Vôùi giaù trò cao caû veà maët khoa hoïc vaø kinh teá, pemu ñaõ vaø ñang laø taàm ngaém cuûa nhöõng nhaø kinh doanh goã khai thaùc traøn lan ñeå xuaát khaåu.

Loaøi caây naøy ñang bò saên luøng, khai thaùc raùo rieát ñeán möùc khoâng coøn khaû naêng töï hoài phuïc, vaø ñang treân ñaø bò tieâu dieät. Tình traïng caây pemu laø moät loaøi caây ñöôïc xeáp vaøo loaïi bieát khoâng chính xaùc (K) trong danh muïc caùc loaïi caây caàn ñöôïc baûo veä nghieâm ngaët, trong saùch ñoû Vieät Nam (Boä khoa hoïc – coâng ngheä – moâi tröôøng, 1996). Do goã quyù vaø reã coù tinh daàu giaù trò cao neân ñaõ bò khai thaùc maïnh. Hieän chæ coøn raûi raùc ôû nôi xa daân hoaëc treân ñænh vaø ñöôøng ñænh nuùi hieåm trôû.

Taùi sinh keùm, sinh tröôûng chaäm neân soá löôïng giaûm nhanh choùng. Ñaõ coù nhieàu döï aùn troàng röøng ñöôïc thöïc hieän nhöng ñeán nay vaãn chöa coù nhieàu söï bieán chuyeån. Vì vaäy, ñeå coù theå thay ñoåi tình theá naøy, coâng vieäc nhaân gioáng caây pemu ñöôïc ñaët ra vaø caàn ñöôïc giaûi quyeát caáp thôøi. SVTH: PHAN THÒ HOAØNG MAI Trang 1 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Baèng phöông phaùp nuoâi caáy in vitro, vieäc nhaân nhanh soá löôïng caây gioáng ñaõ coù hieäu quaû treân nhieàu loaøi caây aên quaû, hoa vaø caây röøng.

Cuõng vì lyù do ñoù, caây pemu caàn ñöôïc tieán haønh nghieân cöùu phöông phaùp nhaân gioáng nhanh theo höôùng nuoâi caáy in vitro, nhaèm cung caáp moät soá löôïng lôùn caây gioáng cho neàn laâm nghieäp Vieät Nam. Vôùi söï höôùng daãn cuûa thaày Traàn Vaên Minh vaø cuøng caùc yeâu caàu ñoái vôùi caây pemu, toâi ñaõ tieán haønh thöïc hieän ñeà taøi “Nuoâi caáy moâ caây pemu” taïi toå caây aên quaû thuoäc Vieän Sinh Hoïc Nhieät Ñôùi thaønh phoá Hoà Chí Minh, ñaët taïi Quaän Thuû Ñöùc. MUÏC ÑÍCH VAØ MUÏC TIEÂU NGHIEÂN CÖÙU 1. Muïc ñích cuûa ñeà taøi Xaây döïng ñöôïc quy trình nuoâi caáy moâ caây pemu in vitro vaø taïo ñöôïc caây con pemu in vitro hoaøn chænh.

Muïc tieâu ñeà taøi - Voâ truøng maãu nuoâi caáy - Nuoâi caáy phaùt sinh choài caây pemu in vitro - Nhaân gioáng caây pemu in vitro - Vöôn thaân caây pemu in vitro - Taïo reã caây pemu in vitro 1. GIÔÙI HAÏN ÑEÀ TAØI Do thôøi gian nghieân cöùu coù haïn, noäi dung cuûa luaän vaên chæ taäp trung nghieân cöùu caùc vaán ñeà coù lieân quan ñeán kyõ thuaät nuoâi caáy moâ caây pemu. SVTH: PHAN THÒ HOAØNG MAI Trang 2 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP 1. NOÄI DUNG NGHIEÂN CÖÙU - Xaùc ñònh noàng ñoä vaø thôøi gian xöû lyù maãu töông öùng ñeå voâ truøng maãu nuoâi caáy - Nuoâi caáy choài ñænh caây pemu in vitro - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa BA, K vaø Cw ñeán khaû naêng nhaân gioáng - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa BA vaø IBA ñeán khaû naêng nhaân gioáng - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa BA, IBA, yeast extract vaø than ñeán khaû naêng nhaân gioáng - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa BA vaø IBA ñeán khaû naêng nhaân gioáng - Nghieân cöùu aûnh höôûng cuûa IBA vaø Rib ñeán söï ra reã SVTH: PHAN THÒ HOAØNG MAI Trang 3 LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP Chöông 2 TOÅNG QUAN 2.

LÒCH SÖÛ PHAÙT TRIEÅN CUÛA NUOÂI CAÁY MOÂ Naêm 1938 nhaø sinh vaät hoïc Ñöùc Schleiden vaø Schwann ñaõ ñeà xöôùng thuyeát teá baøo vaø neâu roõ: Moïi cô theå sinh vaät phöùc taïp ñeàu goàm nhöõng ñôn vò nhoû caùc teá baøo hôïp thaønh. Caùc teá baøo ñaõ phaân hoùa ñeàu mang caùc thoâng tin di truyeàn coù trong caùc teá baøo ñaàu tieân, ñoù laø tröùng sau thuï tinh, laø nhöõng ñôn vò ñoäc laäp, töø ñoù coù theå xaây döïng laïi toaøn boä cô theå. Naêm 1902, Haberlant, laø ngöôøi ñaàu tieân ñöa caùc giaû thuyeát cuûa Schleiden vaø Schwann vaøo thöïc nghieäm ñeå chöùng minh tính toaøn theåá cuûa teá baøo, nhöng oâng ñaõ thaát baïi trong nuoâi caáy caùc teá baøo ñaõ phaân hoùa taùch töø laù moät soá caây moät laù maàm.