Luận văn tốt nghiệp: Đánh giá tính đa dạng di truyền của Ralstonia solanacearum gây bệnh héo xanh tại Đà Nẵng

• Tác giả: Nguyễn Tấn Phát
• Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Minh Lý
• Trường học: Đại học Đà Nẵng
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Đánh Giá Đa Dạng Di Truyền Vi Khuẩn Ralstonia Solanacearum Gây Bệnh Héo Xanh Tại Đà Nẵng
• Loại tài liệu: khóa luận tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2018
• Địa điểm: Đà Nẵng

• LỜI CAM ĐOAN
• LỜI CẢM ƠN
• DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
• DANH MỤC BẢNG BIỂU
• DANH MỤC HÌNH ẢNH
• MỞ ĐẦU
• 0.1. Tính cấp thiết của đề tài
• 0.2. Mục tiêu đề tài
• 0.3. Ý nghĩa khoa học của đề tài
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Tổng quan về vi khuẩn
• 1.2. Phân loại vi khuẩn
• 1.3. Đặc điểm hình thái, sinh hóa, sinh thái của vi khuẩn Ralstonia solanacearum
• 1.3.1. Đặc điểm hình thái, cấu tạo Vi khuẩn R.
• 1.3.2. Đặc tính sinh hóa của vi khuẩn R.
• 1.4. Phương thức tồn tại, xâm nhập và lan truyền của vi khuẩn R.
• 1.5. Ảnh hưởng của điều kiện ngoại cảnh đến sự phát sinh, phát triển của bệnh héo xanh vi khuẩn hại lạc
• 1.6. Chuẩn đoán bệnh héo xanh vi khuẩn và phân lập vi khuẩn gây bệnh
• 2. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Vật liệu nghiên cứu
• 2.2. Nội dung nghiên cứu
• 2.3. Địa điểm, thời gian và phạm vi nghiên cứu
• 2.3.1. Địa điểm nghiên cứu
• 2.3.2. Thời gian nghiên cứu: từ tháng 04/2017 đến 04/2018
• 2.4. Phƣơng pháp nghiên cứu
• 2.4.1. Phƣơng pháp thu mẫu
• 2.4.2. Phƣơng pháp phân lập
• 2.4.3. Mẫu cây bệnh
• 2.4.4. Phƣơng pháp xác định biovar của dòng vi khuẩn phân lập
• 2.4.5. Phƣơng pháp phân tích DNA
• 2.4.5.1. Phương pháp tách chiết DNA từ vi khuẩn
• 2.4.5.2. Kỹ thuật PCR
• 2.4.5.3. Phƣơng pháp điện di trên gel agarose
• 2.4.6. Nghiên cứu đa dạng di truyền một số chủng vi khuẩn R. solanacearum bằng phân tích DNA
• 2.4.7. Phƣơng pháp bảo quản giống vi sinh vật
• 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Phân lập vi khuẩn héo xanh tại địa bàn Đà Nẵng
• 3.2. Xác định biovar của các chủng vi khuẩn R.
• 3.3. Nghiên cứu đa dạng di truyền một số chủng vi khuẩn R. solanacearum bằng phân tích DNA
• 3.4. Kết quả tách chiết DNA vi khuẩn R.
• 3.5. Kết quả phân tích các chủng vi khuẩn với các mồi RAPD
• 3.6. Kết quả phân tích mối quan hệ di truyền giữa các chủng VKHX
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về vi khuẩn Ralstonia solanacearum

Vi khuẩn Ralstonia solanacearum là tác nhân chính gây ra bệnh héo xanh ở nhiều loại cây trồng, đặc biệt là cây họ cà. Bệnh này đã được phát hiện lần đầu tiên vào năm 1896 và hiện nay đã lan rộng ra nhiều quốc gia, trong đó có Việt Nam. Tại Đà Nẵng, bệnh héo xanh gây thiệt hại lớn cho sản xuất nông nghiệp, đặc biệt là đối với cây cà chua và lạc. Vi khuẩn này có khả năng sống lâu trong đất và lây lan nhanh chóng, gây ra những thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho nông dân. Việc hiểu rõ về đa dạng di truyền của các chủng vi khuẩn này là rất cần thiết để phát triển các biện pháp phòng ngừa hiệu quả.

1.1. Đặc điểm sinh học của Ralstonia solanacearum

Vi khuẩn Ralstonia solanacearum có hình dạng oval, gram âm và thường tồn tại dưới dạng đơn hoặc ghép đôi. Chúng có khả năng sinh sản nhanh chóng trong điều kiện ẩm ướt và nhiệt độ từ 25°C đến 35°C. Vi khuẩn này có thể xâm nhập vào rễ cây qua các vết thương và lây lan qua hệ thống mạch xylem, dẫn đến triệu chứng héo úa và chết nhanh chóng của cây. Đặc biệt, vi khuẩn này có khả năng tồn tại lâu trong đất, ngay cả khi không có cây trồng, làm cho việc kiểm soát bệnh trở nên khó khăn hơn.

II. Tình hình bệnh héo xanh tại Đà Nẵng

Tại Đà Nẵng, bệnh héo xanh do Ralstonia solanacearum gây ra đã trở thành một vấn đề nghiêm trọng trong sản xuất nông nghiệp. Tỷ lệ nhiễm bệnh có thể lên đến 35% ở một số vùng trồng cây chủ lực như cà chua và lạc. Việc phát hiện sớm và phân lập các chủng vi khuẩn gây bệnh là rất quan trọng để có biện pháp phòng ngừa kịp thời. Nghiên cứu cho thấy rằng các chủng vi khuẩn ở Đà Nẵng có sự đa dạng di truyền cao, điều này có thể ảnh hưởng đến khả năng kháng bệnh của các giống cây trồng. Việc hiểu rõ về đa dạng di truyền này sẽ giúp trong việc phát triển các giống cây trồng kháng bệnh hiệu quả hơn.

2.1. Các biện pháp phòng ngừa bệnh héo xanh

Để kiểm soát bệnh héo xanh, nông dân thường áp dụng các biện pháp như luân canh cây trồng, sử dụng giống kháng bệnh và các chế phẩm sinh học. Tuy nhiên, hiệu quả của các biện pháp này còn hạn chế do sự biến đổi của các chủng vi khuẩn. Việc nghiên cứu và đánh giá đa dạng di truyền của các chủng vi khuẩn sẽ cung cấp thông tin quan trọng để phát triển các biện pháp phòng ngừa hiệu quả hơn, từ đó giảm thiểu thiệt hại cho nông dân.

III. Phương pháp nghiên cứu đa dạng di truyền

Nghiên cứu đa dạng di truyền của vi khuẩn Ralstonia solanacearum được thực hiện thông qua các phương pháp sinh học phân tử như PCR và RAPD. Các mẫu vi khuẩn được thu thập từ các vùng trồng cây khác nhau tại Đà Nẵng và được phân lập để phân tích. Kết quả cho thấy sự khác biệt rõ rệt giữa các chủng vi khuẩn, điều này cho thấy sự đa dạng di truyền cao của chúng. Việc phân tích này không chỉ giúp hiểu rõ hơn về tính chất của vi khuẩn mà còn cung cấp cơ sở cho việc phát triển các giống cây trồng kháng bệnh.

3.1. Kết quả phân tích di truyền

Kết quả phân tích cho thấy rằng các chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum có sự khác biệt về mặt di truyền, điều này có thể ảnh hưởng đến khả năng gây bệnh và độc tính của chúng. Các chủng vi khuẩn được phân lập từ các vùng khác nhau có thể có các đặc điểm sinh học khác nhau, từ đó ảnh hưởng đến khả năng kháng bệnh của cây trồng. Việc hiểu rõ về đa dạng di truyền này sẽ giúp trong việc phát triển các biện pháp phòng ngừa và điều trị bệnh hiệu quả hơn.