Hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào trong nghiên cứu tái sinh và nhân giống vô tính cây hoa thu hải đường begonia tuberous

Nghiên cứu hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào để tái sinh và nhân giống vô tính cây hoa Thu Hải Đường (Begonia tuberous). Giải pháp nhân giống hiệu quả.

• Tác giả: Mai Xuân Phán
• Người hướng dẫn: TS. Dương Tấn Nhựt
• Trường học: Trường Đại học Mở - Bán Công TP. HCM
• Chuyên ngành: Môi trường – Nông nghiệp
• Đề tài: Hệ Thống Nuôi Cấy Lớp Mỏng Tế Bào Trong Nghiên Cứu Tái Sinh Và Nhân Giống Vô Tính Cây Hoa Thu Hải Đường (Begonia Tuberous)
• Loại tài liệu: Luận văn tốt nghiệp
• Năm xuất bản: 2001 - 2005
• Địa điểm: Đà Lạt

Mục lục chi tiết

• LÔØI CAÛM ÔN
• DANH MUÏC HÌNH AÛNH
• DANH MUÏC BAÛNG
• DANH MUÏC BIEÅU ÑOÀ
• DANH MUÏC CHÖÕ VIEÁT TAÉT
• 1. PHAÀN MOÄT: TOÅNG QUAN
• 1.1. KHAÙI QUAÙT VEÀ PHÖÔNG PHAÙP VI NHAÂN GIOÁNG THÖÏC VAÄT, HÖÔÙNG NGHIEÂN CÖÙU VAØ YÙ NGHÓA THÖÏC TIEÃN
• 1.1.1. Sô löôïc lòch söû phaùt trieån vaø thaønh töïu ñaït ñöôïc trong vi nhaân gioáng thöïc vaät
• 1.1.2. Caùc kyõ thuaät vi nhaân gioáng thöïc vaät
• 1.1.2.1. Nuoâi caáy moâ vaø cô quan taùch rôøi
• 1.1.2.2. Nuoâi caáy moâ phaân sinh
• 1.1.2.3. Nuoâi caáy moâ seïo (callus)
• 1.1.2.4. Nuoâi caáy phoâi
• 1.1.2.5. Nuoâi caáy bao phaán vaø haït phaán
• 1.1.2.6. Nuoâi caáy teá baøo ñôn vaø teá baøo traàn
• 1.1.2.7. Nuoâi caáy huyeàn phuø teá baøo
• 1.1.2.8. Nuoâi caáy baàu nhuïy vaø noaõn
• 1.1.2.9. Haït gioáng nhaân taïo
• 1.1.2.10. Phöông phaùp nuoâi caáy laéc vaø Bioreactor
• 1.1.3. Söï phaùt trieån cuûa nuoâi caáy moâ teá baøo thöïc vaät ôû Vieät Nam
• 1.1.4. YÙ nghóa cuûa phöông phaùp
• 1.1.5. Caùc nhöôïc ñieåm cuûa vi nhaân gioáng
• 2. PHAÀN HAI: VAÄT LIEÄU & PHÖÔNG PHAÙP
• 2.1. ÑÒA ÑIEÅM THÖÏC HIEÄN ÑEÀ TAØI
• 2.2. VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP
• 2.2.1. Ñoái töôïng nghieân cöùu
• 2.2.2. Maãu caáy vaø muïc ñích
• 2.2.3. Moâi tröôøng nuoâi caáy
• 2.2.4. Phöông phaùp
• 2.2.4.1. Thieát laäp heä thoáng
• 2.2.4.2. Khöû truøng heä thoáng
• 2.2.4.3. Khöû truøng maãu
• 2.2.4.4. Ñieàu kieån thí nghieäm
• 2.3. THIEÁT KEÁ THÍ NGHIEÄM
• 3. PHAÀN BA: KEÁT QUAÛ & THAÛO LUAÄN
• 3.1. Khöû truøng maãu
• 3.2. Thí nghieäm 1: Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa BA, NAA leân khaû naêng taïo choài cuûa maãu tTCL
• 3.3. Thí nghieäm 2: Khaûo saùt aûnh höôûng ñoä daøy maãu caáy tTCL leân khaû naêng taïo choài
• 3.4. Thí nghieäm 3: Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa TDZ leân khaû naêng
• 3.5. Thí nghieäm 4: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài cuûa maãu tTCL treân moâi tröôøng ñaëc
• 3.6. Thí nghieäm 5: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài cuûa maãu treân moâi tröôøng loûng tónh
• 3.7. Thí nghieäm 6: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài baèng Bioreactor
• 3.8. Thí nghieäm 7: Khaûo saùt söï ra reã cuûa choài treân moâi tröôøng ñaëc
• 3.9. Chuyeån caây ra vöôøn öôm
• 3.10. AÛnh höôûng cuûa chaát ñieàu hoøa sinh tröôûng BA vaø NAA
• 3.11. AÛnh höôûng cuûa chaát ñieàu hoøa sinh tröôûng TDZ
• 3.12. AÛnh höôûng cuûa ñoä daøy maãu caáy
• 3.13. AÛnh höôûng cuûa moâi tröôøng nuoâi caáy
• 3.14. AÛnh höôûng cuûa heä thoáng nuoâi caáy Bioreactor
• 4. PHAÀN BOÁN: KEÁT LUAÄN & KIEÁN NGHÒ
• 5. PHAÀN NAÊM: TAØI LIEÄU THAM KHAÛO
• 5.1. TAØI LIEÄU TIEÁNG VIEÄT
• 5.2. TAØI LIEÄU TIEÁNG NÖÔÙC NGOAØI
• Phuï luïc

Tóm tắt

I. Tổng Quan Về Nghiên Cứu Nhân Giống Vô Tính Thu Hải Đường

Bài viết này đi sâu vào nghiên cứu nhân giống vô tính cây thu hải đường bằng hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào. Mục tiêu là tối ưu hóa quy trình nhân giống, khắc phục những hạn chế của các phương pháp truyền thống và mở ra hướng đi mới trong sản xuất giống cây trồng quy mô lớn. Cây thu hải đường (Begonia spp.) là một loài hoa đẹp, được ưa chuộng trên thị trường vì màu sắc đa dạng, kiểu dáng độc đáo và thời gian chơi hoa kéo dài. Tuy nhiên, việc nhân giống loài hoa này còn gặp nhiều khó khăn, đặc biệt là chi phí nhập hạt giống cao và tỷ lệ nảy mầm thấp. Các phương pháp nhân giống truyền thống như cắt lá, cắt chồi đỉnh cũng cho hệ số nhân giống thấp và cây con yếu, dễ nhiễm bệnh. Vi nhân giống thu hải đường mở ra tiềm năng lớn cho việc sản xuất giống cây chất lượng cao, sạch bệnh và đồng nhất về di truyền. Nghiên cứu này tập trung vào hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL), một kỹ thuật tiên tiến hứa hẹn mang lại hiệu quả cao trong nhân giống in vitro.

1.1. Lịch Sử và Thành Tựu Của Vi Nhân Giống Thực Vật

Ý tưởng về nuôi cấy mô tế bào thực vật bắt đầu từ đầu thế kỷ 20, với những nghiên cứu tiên phong của Haberlandt. White (1934) đã thành công trong việc nuôi cấy rễ cà chua. Những năm 50 chứng kiến sự ra đời của các chất kích thích sinh trưởng quan trọng như kinetin, cytokinin và gibberellin. Môi trường MS (Murashige và Skoog) (1962) và LS (Linsmaier và Skoog) (1965) trở thành nền tảng cho nhiều nghiên cứu và ứng dụng. Thuật ngữ “Micropropagation” (vi nhân giống) ra đời, đánh dấu một bước tiến quan trọng trong lĩnh vực này. Kỹ thuật nuôi cấy mô được ứng dụng rộng rãi để tạo ra cây giống sạch bệnh, đặc biệt là khoai tây và hoa lan.

1.2. Các Kỹ Thuật Vi Nhân Giống Thực Vật Phổ Biến Hiện Nay

Nhiều kỹ thuật vi nhân giống khác nhau đã được phát triển, bao gồm nuôi cấy mô và cơ quan tách rời, nuôi cấy mô phân sinh, nuôi cấy mô sẹo (callus), nuôi cấy phôi, nuôi cấy bao phấn và hạt phấn, nuôi cấy tế bào đơn và tế bào trần, nuôi cấy huyền phù tế bào, nuôi cấy bầu nhụy và noãn, và tạo hạt giống nhân tạo. Mỗi kỹ thuật có ưu điểm và hạn chế riêng, phù hợp với từng loại cây trồng và mục đích nghiên cứu khác nhau. Nghiên cứu này tập trung vào việc ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy lớp mỏng tế bào để nhân giống vô tính cây thu hải đường.

II. Vấn Đề Trong Nhân Giống Thu Hải Đường Giải Pháp Mới

Việc nhân giống cây thu hải đường hiện nay đối mặt với nhiều thách thức, bao gồm giá thành hạt giống cao, tỷ lệ nảy mầm thấp và sự phụ thuộc vào mùa vụ của các phương pháp truyền thống. Các phương pháp nhân giống vô tính như giâm lá, giâm cành cho hệ số nhân giống thấp và cây con dễ nhiễm bệnh. Do đó, nhu cầu về một phương pháp nhân giống hiệu quả, nhanh chóng và cho cây con khỏe mạnh là rất cấp thiết. Hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL) được xem là một giải pháp tiềm năng. TCL cho phép sử dụng các mẫu mô nhỏ từ các cơ quan khác nhau của cây, có đặc điểm là rất mỏng, tạo điều kiện thuận lợi cho sự biệt hóa tế bào và hấp thụ chất dinh dưỡng. Phương pháp này hứa hẹn mang lại hiệu quả nhân giống cao, rút ngắn thời gian và giảm chi phí sản xuất.

2.1. Giới Thiệu Chi Tiết Về Cây Thu Hải Đường Begonia spp.

Cây thu hải đường thuộc chi Begonia, là một chi thực vật lớn với nhiều loài khác nhau. Chúng được ưa chuộng vì vẻ đẹp của lá và hoa, sự đa dạng về màu sắc và hình dáng. Thu hải đường có giá trị kinh tế cao trong ngành công nghiệp hoa cảnh. Tuy nhiên, việc nhân giống và sản xuất cây giống chất lượng cao vẫn còn nhiều khó khăn. Các yếu tố như độ ẩm, ánh sáng, nhiệt độ và dinh dưỡng cần được kiểm soát chặt chẽ để đảm bảo sự sinh trưởng và phát triển tốt của cây thu hải đường.

2.2. Các Bệnh Hại Thường Gặp Ở Cây Thu Hải Đường

Cây thu hải đường dễ bị tấn công bởi nhiều loại bệnh hại, bao gồm bệnh khảm do virus, bệnh phấn trắng do nấm Erysiphe chichoracearum, bệnh mốc xám do nấm Botrytis cinerea, bệnh do vi khuẩn Corynebacterium fascian và Xanthomonas begoniae, và bệnh thối thân và rễ do nấm Rhizoctonia solani, Pythium spp, Fusarium solani. Việc phòng ngừa và kiểm soát bệnh hại là rất quan trọng để đảm bảo năng suất và chất lượng cây trồng. Các biện pháp như sử dụng giống sạch bệnh, kiểm soát độ ẩm, thông gió tốt và sử dụng thuốc bảo vệ thực vật hợp lý cần được áp dụng.

III. Phương Pháp Nuôi Cấy Lớp Mỏng Tế Bào TCL Trong Nhân Giống

Phương pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL) là một kỹ thuật nhân giống in vitro tiên tiến, sử dụng các mẫu mô mỏng (vài lớp tế bào) từ các bộ phận khác nhau của cây. Ưu điểm của TCL là khả năng tiếp xúc tối ưu với môi trường nuôi cấy, giúp tăng cường sự hấp thụ chất dinh dưỡng và kích thích sự biệt hóa tế bào. TCL cũng cho phép kiểm soát chặt chẽ các yếu tố ảnh hưởng đến sự phát triển của cây, như hormone tăng trưởng, ánh sáng và nhiệt độ. Kỹ thuật này đã được ứng dụng thành công trong nhân giống nhiều loại cây trồng, bao gồm cả thu hải đường. Trong nghiên cứu này, chúng tôi tập trung vào việc tối ưu hóa quy trình TCL để đạt được hiệu quả nhân giống thu hải đường cao nhất.

3.1. Định Nghĩa và Đặc Trưng Của Hệ Thống Nuôi Cấy TCL

Hệ thống TCL sử dụng các mẫu mô có kích thước nhỏ và mỏng, thường được cắt ngang (tTCL) hoặc dọc (lTCL) so với trục của cơ quan. Đặc trưng quan trọng của mẫu TCL là độ mỏng, cho phép các phân tử đánh dấu quá trình biệt hóa định vị độc lập trong tế bào mục tiêu. Điều này giới hạn các tế bào cảm ứng không mong muốn (Traần Thanh Vân, 2003). Quá trình cắt mẫu gây tổn thương, kích thích sản sinh enzyme và polysaccharide cần thiết cho sự cảm ứng sinh trưởng và phát triển (Traần Thanh Vân và Mutaftschiew, 1990).

3.2. Ưu Điểm Vượt Trội Của Phương Pháp TCL Trong Vi Nhân Giống

Phương pháp TCL có nhiều ưu điểm so với các phương pháp nhân giống khác, bao gồm thời gian phát sinh hình thái tương đối ngắn (khoảng 14 ngày), tần số cao (gần 100%) và diện tích tiếp xúc lớn giữa mẫu và môi trường nuôi cấy. Điều này giúp mẫu dễ dàng hấp thụ chất dinh dưỡng và phát triển nhanh chóng. TCL cũng cho phép tạo ra số lượng lớn cây con từ một mẫu mô nhỏ, giúp tăng hiệu quả nhân giống và giảm chi phí sản xuất. Ngoài ra, TCL còn có tiềm năng ứng dụng trong kỹ thuật di truyền để tạo ra các giống cây trồng mới với các đặc tính ưu việt.

IV. Ứng Dụng Bioreactor Trong Nuôi Cấy Lớp Mỏng Tế Bào Thu Hải Đường

Để tăng cường hiệu quả nhân giống và sản xuất cây con quy mô lớn, nghiên cứu này sử dụng Bioreactor kết hợp với nuôi cấy lớp mỏng tế bào. Bioreactor là một hệ thống nuôi cấy tự động, cung cấp môi trường kiểm soát chặt chẽ về nhiệt độ, pH, oxy và chất dinh dưỡng. Việc sử dụng Bioreactor giúp tối ưu hóa sự sinh trưởng và phát triển của cây thu hải đường in vitro, đồng thời giảm thiểu nguy cơ nhiễm bệnh và các yếu tố bất lợi khác. Quy trình nhân sinh khối thực vật bằng Bioreactor hứa hẹn mang lại năng suất cao và chất lượng cây con đồng đều.

4.1. Cấu Trúc Và Nguyên Lý Hoạt Động Của Bioreactor

Bioreactor là một hệ thống nuôi cấy kín, bao gồm bình chứa, hệ thống thông khí, hệ thống điều khiển nhiệt độ, pH và oxy, và hệ thống cung cấp chất dinh dưỡng. Bioreactor hoạt động dựa trên nguyên lý cung cấp môi trường tối ưu cho sự sinh trưởng và phát triển của tế bào thực vật. Các yếu tố như nhiệt độ, pH, oxy và chất dinh dưỡng được kiểm soát chặt chẽ để đảm bảo sự sinh trưởng và phát triển tốt nhất. Bioreactor có thể được sử dụng để nuôi cấy nhiều loại tế bào thực vật khác nhau, bao gồm cả tế bào thu hải đường.

4.2. Quy Trình Nhân Sinh Khối Thực Vật Bằng Bioreactor Hiệu Quả

Quy trình nhân sinh khối thực vật bằng Bioreactor bao gồm các bước chính sau: chuẩn bị môi trường nuôi cấy, khử trùng Bioreactor và môi trường, cấy mẫu TCL vào Bioreactor, điều chỉnh các thông số môi trường (nhiệt độ, pH, oxy, ánh sáng), theo dõi sự sinh trưởng và phát triển của cây, và thu hoạch cây con. Quá trình này cần được thực hiện cẩn thận và chính xác để đảm bảo hiệu quả nhân sinh khối cao và chất lượng cây con tốt. Việc tối ưu hóa các thông số môi trường và quy trình nuôi cấy là rất quan trọng để đạt được kết quả tốt nhất.

V. Kết Quả Nghiên Cứu Ảnh Hưởng Của Hormone Tăng Trưởng

Nghiên cứu đã khảo sát ảnh hưởng của các loại hormone tăng trưởng như BA (Benzyladenine), NAA (α-Naphthaleneacetic acid) và TDZ (Thidiazuron) lên khả năng tạo chồi của mẫu tTCL (transverse thin cell layer). Kết quả cho thấy, sự kết hợp giữa BA và NAA có tác động tích cực đến quá trình tái sinh chồi. TDZ cũng cho thấy hiệu quả trong việc kích thích tạo chồi. Độ dày của mẫu cấy tTCL cũng ảnh hưởng đến khả năng tạo chồi. Việc lựa chọn môi trường nuôi cấy và hệ thống nuôi cấy Bioreactor cũng đóng vai trò quan trọng trong quá trình nhân giống.

5.1. Ảnh Hưởng Của BA Và NAA Đến Quá Trình Tái Sinh Chồi

Nghiên cứu cho thấy nồng độ BA và NAA khác nhau có ảnh hưởng đáng kể đến khả năng tái sinh chồi của mẫu cấy tTCL. Một sự kết hợp tối ưu giữa hai loại hormone này sẽ kích thích sự phân chia tế bào và tạo chồi một cách hiệu quả. Việc xác định nồng độ BA và NAA phù hợp là rất quan trọng để tối ưu hóa quy trình nhân giống vô tính.

5.2. Tác Động Của TDZ Đến Khả Năng Tạo Chồi Của Mẫu tTCL

TDZ là một loại hormone có tác dụng kích thích mạnh mẽ quá trình tạo chồi. Nghiên cứu đã chứng minh rằng TDZ có thể thúc đẩy sự hình thành chồi từ mẫu cấy tTCL, ngay cả khi không có sự hiện diện của BA và NAA. Tuy nhiên, việc sử dụng TDZ cần được kiểm soát cẩn thận, vì nồng độ quá cao có thể gây ra các hiệu ứng không mong muốn, chẳng hạn như sự hình thành callus không mong muốn.

VI. Kết Luận Triển Vọng Của Nhân Giống Vô Tính Thu Hải Đường

Nghiên cứu này đã chứng minh tính hiệu quả của hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL) trong nhân giống vô tính cây thu hải đường. Việc kết hợp TCL với Bioreactor và tối ưu hóa các yếu tố môi trường, đặc biệt là nồng độ hormone tăng trưởng, hứa hẹn mang lại hiệu quả nhân giống cao và sản xuất cây con quy mô lớn. Trong tương lai, cần tiếp tục nghiên cứu để hoàn thiện quy trình TCL và ứng dụng vào nhân giống các giống thu hải đường quý hiếm, góp phần phát triển ngành công nghiệp hoa cảnh.

6.1. Tóm Tắt Các Kết Quả Nghiên Cứu Chính Đã Đạt Được

Nghiên cứu đã thành công trong việc xây dựng quy trình nhân giống vô tính cây thu hải đường bằng hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình tái sinh chồi đã được xác định, bao gồm nồng độ BA, NAA, TDZ và độ dày của mẫu cấy tTCL. Việc sử dụng Bioreactor đã giúp tăng cường hiệu quả nhân giống và sản xuất cây con quy mô lớn.

6.2. Hướng Nghiên Cứu Tiếp Theo Để Tối Ưu Hóa Quy Trình

Trong tương lai, cần tập trung vào việc nghiên cứu ảnh hưởng của các yếu tố khác như ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm và thành phần môi trường nuôi cấy đến quá trình nhân giống. Nghiên cứu cũng cần tập trung vào việc ứng dụng TCL để nhân giống các giống thu hải đường quý hiếm và tạo ra các giống cây trồng mới với các đặc tính ưu việt. Việc kết hợp TCL với các kỹ thuật di truyền cũng hứa hẹn mang lại nhiều tiềm năng trong cải thiện giống cây trồng.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Trong bối cảnh xã hội ngày càng phát triển, nhu cầu về hoa và cây cảnh ngày càng tăng cao, đặc biệt là các loại hoa có giá trị thẩm mỹ và kinh tế như hoa Thu hải đường (Begonia spp.). Tại Việt Nam, ngành sản xuất và kinh doanh hoa, cây cảnh đang phát triển mạnh mẽ, với các vùng sản xuất lớn như Đà Lạt, Gò Vấp (TP. HCM), Sa Đéc (Đồng Tháp), Cái Mơn (Bến Tre) và Hà Nội. Tuy nhiên, việc nhân giống truyền thống gặp nhiều hạn chế như tỷ lệ nảy mầm thấp, thời gian gieo hạt kéo dài từ 2 đến 3,5 tháng, chi phí cao do phải nhập hạt giống từ nước ngoài. Đặc biệt, hoa Thu hải đường hiện vẫn phải nhập khẩu hạt giống với giá thành cao, chưa được nhân giống phổ biến trong nước.

Luận văn tập trung nghiên cứu hệ thống nuôi cấy lớp mỏng tế bào (Thin Cell Layer, TCL) trong nhân giống vô tính cây hoa Thu hải đường nhằm tạo ra nguồn giống sạch bệnh, đồng nhất về mặt di truyền và giảm thiểu thời gian nhân giống. Nghiên cứu được thực hiện trong giai đoạn 2001-2005 tại Phân Viện Sinh học Đà Lạt, với mục tiêu phát triển quy trình nhân giống in vitro hiệu quả, phù hợp với điều kiện sinh thái và công nghệ của Việt Nam. Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa quan trọng trong việc nâng cao năng suất, chất lượng giống hoa Thu hải đường, góp phần phát triển ngành hoa cây cảnh trong nước và giảm sự phụ thuộc vào nguồn giống nhập khẩu.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình về vi nhân giống thực vật, đặc biệt là phương pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL). Lý thuyết totipotency của tế bào thực vật cho phép mỗi tế bào có khả năng phát triển thành cây hoàn chỉnh nếu được cung cấp điều kiện thuận lợi. Phương pháp TCL bao gồm việc lấy các mẫu mô mỏng từ các cơ quan khác nhau của cây (thân, rễ, lá, cuống hoa) với kích thước nhỏ, giúp tăng diện tích tiếp xúc với môi trường dinh dưỡng, hạn chế tế bào cảm ứng không mong muốn và tăng hiệu quả sinh trưởng.

Các khái niệm chính bao gồm:

• Totipotency: Khả năng phát triển thành cây hoàn chỉnh của tế bào thực vật.
• Thin Cell Layer (TCL): Mẫu mô mỏng có kích thước nhỏ, được cắt theo chiều dọc (lTCL) hoặc chiều ngang (tTCL).
• Plant Growth Regulators (PGRs): Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật như BA (Benzyladenine), NAA (α-naphthalenacetic acid), TDZ (Thidiazuron) được sử dụng để kích thích sự phát triển và phân hóa mô.
• Bioreactor: Thiết bị nuôi cấy tế bào thực vật trong môi trường lỏng, giúp tăng quy mô sản xuất và đồng nhất chất lượng cây con.

Phương pháp nghiên cứu

Nguồn dữ liệu chính là các mẫu cây Thu hải đường lấy từ các cơ quan như thân, rễ, lá, cuống hoa được nuôi cấy in vitro tại Phân Viện Sinh học Đà Lạt. Cỡ mẫu TCL được chuẩn hóa trong khoảng 0,2-1 mm tùy theo loại mô và mục đích thí nghiệm.

Phương pháp phân tích bao gồm:

• Thiết lập môi trường nuôi cấy MS (Murashige và Skoog, 1962) với các nồng độ khác nhau của PGRs như BA, NAA, TDZ để khảo sát ảnh hưởng đến khả năng tái sinh chồi, hình thành rễ và sinh trưởng cây con.
• So sánh hiệu quả nuôi cấy trên môi trường rắn (agar) và môi trường lỏng trong Bioreactor.
• Đánh giá tỷ lệ nảy mầm, tỷ lệ hình thành chồi, rễ và cây con khỏe mạnh qua các thí nghiệm kéo dài từ 14 ngày đến 2 tháng.
• Thời gian nghiên cứu từ 2001 đến 2005, với các giai đoạn khảo sát ảnh hưởng của các yếu tố môi trường (ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm) và các chất điều hòa sinh trưởng.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Ảnh hưởng của PGRs đến khả năng tái sinh chồi: Nồng độ BA/NAA trong môi trường MS ảnh hưởng rõ rệt đến tỷ lệ tái sinh chồi từ mẫu tTCL. Ở nồng độ BA 0,2 mg/l và NAA 0,09 mg/l, tỷ lệ tái sinh chồi đạt gần 90%, cao hơn so với các nồng độ khác (Bảng 1, Biểu đồ 1).

2. Ảnh hưởng độ dày mẫu TCL: Mẫu tTCL có độ dày 0,2-0,5 mm cho tỷ lệ tái sinh chồi cao nhất, gần 95%, trong khi mẫu dày hơn giảm hiệu quả tái sinh (Bảng 2, Biểu đồ 2).

3. Hiệu quả nuôi cấy trong Bioreactor: Nuôi cấy trong Bioreactor giúp tăng kích thước và số lượng chồi lên gấp 3 lần so với môi trường rắn, với tỷ lệ sống cây con đạt trên 85% sau 30 ngày (Bảng 8, Biểu đồ 4).

4. Ảnh hưởng của TDZ: TDZ ở nồng độ 0,7 mg/l kích thích mạnh mẽ sự hình thành chồi và rễ, tỷ lệ tái sinh chồi đạt 92%, đồng thời giảm thời gian sinh trưởng so với các PGRs khác (Bảng 6, Biểu đồ 3).

Thảo luận kết quả

Nguyên nhân của các phát hiện trên liên quan đến vai trò điều hòa sinh trưởng của các PGRs trong việc kích thích phân chia tế bào và biệt hóa mô. BA và NAA phối hợp tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển chồi và rễ, trong khi TDZ có tác dụng mạnh mẽ hơn trong việc kích thích tái sinh chồi và rễ từ mẫu TCL.

So sánh với các nghiên cứu trước đây trên các loại hoa khác như hoa Lily, hoa Cúc, phương pháp TCL cũng cho thấy hiệu quả cao trong việc tạo giống sạch bệnh, đồng nhất về mặt di truyền và rút ngắn thời gian nhân giống. Việc ứng dụng Bioreactor trong nuôi cấy tế bào thực vật đã được chứng minh là giải pháp tối ưu để tăng quy mô sản xuất, giảm chi phí và nâng cao chất lượng cây giống.

Dữ liệu có thể được trình bày qua các bảng số liệu về tỷ lệ tái sinh chồi, tỷ lệ sống cây con và biểu đồ thể hiện ảnh hưởng của các nồng độ PGRs và độ dày mẫu TCL đến hiệu quả nhân giống.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Áp dụng quy trình nuôi cấy TCL với nồng độ BA 0,2 mg/l và NAA 0,09 mg/l để tối ưu hóa tỷ lệ tái sinh chồi, giảm thời gian nhân giống, áp dụng trong vòng 6 tháng, do các phòng thí nghiệm sinh học thực vật thực hiện.

2. Sử dụng Bioreactor trong giai đoạn nuôi cấy chồi nhằm tăng số lượng cây con và đồng nhất chất lượng, giảm chi phí sản xuất, triển khai trong 12 tháng, phối hợp giữa viện nghiên cứu và doanh nghiệp sản xuất giống.

3. Đào tạo kỹ thuật viên và cán bộ kỹ thuật về phương pháp nuôi cấy TCL và vận hành Bioreactor để đảm bảo quy trình được thực hiện chính xác, nâng cao năng suất, thực hiện trong 3 tháng đầu của dự án.

4. Xây dựng ngân hàng giống sạch bệnh in vitro nhằm bảo tồn nguồn gen và cung cấp giống chất lượng cao cho thị trường, thực hiện trong 18 tháng, do các viện nghiên cứu phối hợp với các trung tâm giống cây trồng.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Các nhà nghiên cứu và sinh viên ngành công nghệ sinh học thực vật: Nghiên cứu phương pháp nhân giống vô tính, ứng dụng công nghệ sinh học trong sản xuất giống cây cảnh.

2. Doanh nghiệp sản xuất và kinh doanh hoa, cây cảnh: Áp dụng quy trình nhân giống in vitro để nâng cao chất lượng và số lượng giống, giảm chi phí nhập khẩu.

3. Các trung tâm giống cây trồng và viện nghiên cứu nông nghiệp: Phát triển nguồn giống sạch bệnh, đồng nhất về mặt di truyền, phục vụ cho công tác bảo tồn và phát triển giống cây trồng.

4. Cán bộ kỹ thuật và quản lý trong lĩnh vực nông nghiệp công nghệ cao: Nắm bắt công nghệ mới, triển khai quy trình nhân giống hiện đại, nâng cao hiệu quả sản xuất.

Câu hỏi thường gặp

1. Phương pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL) là gì?
   Phương pháp TCL là kỹ thuật lấy các mẫu mô mỏng từ các cơ quan thực vật với kích thước nhỏ (0,2-1 mm) để nuôi cấy in vitro, giúp tăng diện tích tiếp xúc với môi trường dinh dưỡng và hạn chế tế bào cảm ứng không mong muốn, từ đó nâng cao hiệu quả nhân giống.

2. Tại sao sử dụng PGRs như BA, NAA và TDZ trong nuôi cấy?
   Các chất điều hòa sinh trưởng này kích thích phân chia tế bào, biệt hóa mô, hình thành chồi và rễ. BA và NAA phối hợp giúp tái sinh chồi hiệu quả, trong khi TDZ có tác dụng mạnh mẽ hơn trong việc kích thích tái sinh và rút ngắn thời gian sinh trưởng.

3. Bioreactor có vai trò gì trong nhân giống in vitro?
   Bioreactor là thiết bị nuôi cấy tế bào thực vật trong môi trường lỏng, giúp tăng quy mô sản xuất, đồng nhất chất lượng cây con, tăng tỷ lệ sống và giảm chi phí so với nuôi cấy trên môi trường rắn.

4. Lợi ích của việc nhân giống vô tính bằng phương pháp TCL so với nhân giống truyền thống?
   Phương pháp TCL tạo ra giống sạch bệnh, đồng nhất về mặt di truyền, rút ngắn thời gian nhân giống, không phụ thuộc vào điều kiện thời tiết và giảm chi phí nhập khẩu hạt giống.

5. Thời gian trung bình để tạo ra cây con từ mẫu TCL là bao lâu?
   Thời gian trung bình để hình thành cây con từ mẫu TCL khoảng 14 ngày đến 2 tháng, tùy thuộc vào loại mô, nồng độ PGRs và điều kiện nuôi cấy.

Kết luận

• Phương pháp nuôi cấy lớp mỏng tế bào (TCL) là giải pháp hiệu quả trong nhân giống vô tính cây hoa Thu hải đường, giúp tạo ra giống sạch bệnh, đồng nhất và rút ngắn thời gian nhân giống.
• Nồng độ PGRs tối ưu là BA 0,2 mg/l và NAA 0,09 mg/l, hoặc TDZ 0,7 mg/l, giúp tăng tỷ lệ tái sinh chồi và rễ lên trên 90%.
• Ứng dụng Bioreactor trong nuôi cấy tế bào thực vật giúp tăng quy mô sản xuất và chất lượng cây con, tỷ lệ sống đạt trên 85%.
• Kết quả nghiên cứu phù hợp với điều kiện sinh thái và công nghệ của Việt Nam, có thể triển khai trong các phòng thí nghiệm và doanh nghiệp sản xuất giống.
• Đề xuất xây dựng ngân hàng giống sạch bệnh và đào tạo kỹ thuật viên để phát triển bền vững ngành hoa cây cảnh trong nước.

Áp dụng quy trình nuôi cấy TCL và Bioreactor vào sản xuất thử nghiệm, đồng thời mở rộng nghiên cứu ứng dụng cho các loại hoa và cây cảnh khác nhằm nâng cao giá trị kinh tế và phát triển ngành công nghiệp hoa Việt Nam.

Trích đoạn nội dung tài liệu

BOÄ GIAÙO DUÏC VAØ ÑAØO TAÏO TRÖÔØNG ÑAÏI HOÏC MÔÛ − BAÙN COÂNG TP. HCM KHOA COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC Ñeà taøi: HEÄ THOÁNG NUOÂI CAÁY LÔÙP MOÛNG TEÁ BAØO TRONG NGHIEÂN CÖÙU TAÙI SINH VAØ NHAÂN GIOÁNG VOÂ TÍNH CAÂY HOA THU HAÛI ÑÖÔØNG (Begonia tuberous) LUAÄN VAÊN TOÁT NGHIEÄP CÖÛ NHAÂN KHOA HOÏC CHUYEÂN NGAØNH: MOÂI TRÖÔØNG – NOÂNG NGHIEÄP GIAÛNG VIEÂN HÖÔÙNG DAÃN: TS. DÖÔNG TAÁN NHÖÏT SINH VIEÂN THÖÏC HIEÄN: MAI XUAÂN PHAÙN KHOÙA HOÏC: 2001 − 2005 Tieáp xuùc vôùi moâi tröôøng laøm vieäc nghieân cöùu khoa hoïc laàn ñaàu, toâi ñaõ mang caû nieàm tin, nieàm say meâ laãn huy voïng cuûa mình nhöng vaãn chöa ñuû ñeå thaønh coâng neáu toâi khoâng gaëp vaø ñöôïc thaày, tieán só Döông Taán Nhöït giuùp ñôõ, höôùng daãn. Thaày ñaõ taïo ñieàu kieän ñeå toâi ñöôïc thöïc hieän ñeà taøi taïi Phaân Vieän sinh hoïc taïi Ñaø Laït.

Ñaït ñöôïc keát quaû nhö hoâm nay beân caïnh söï coá gaéng cuûa baûn thaân toâi, coøn coù nhöõng ngöôøi xung quanh luoân giuùp ñôõ ñeå toâi hoaøn thaønh ñeà taøi nghieân cöùu khoa hoïc naøy. Toâi xin gôûi lôøi caûm ôn ñeán: Toâi traân troïng tri aân thaày, tieán só Döông Taán Nhöït ñaõ giuùp ñôõ, ñoäng vieân vaø ñònh höôùng cho toâi trong suoát thôøi gian toâi thöïc hieän ñeà taøi khoa hoïc naøy. Thaày ñaõ truyeàn ñaït cho toâi kieán thöùc, kinh nghieäm nghieân cöùu khoa hoïc. Beân caïnh ñoù, thaày cuõng chæ baûo vaø daïy toâi nhöõng baøi hoïc laøm ngöôøi.

Thaày ñaõ daét toâi ñi nhöõng böôùc ñi ñaàu tieân vaø truyeàn cho toâi nhieät huyeát treân con ñöôøng nghieân cöùu khoa hoïc. Toâi chaân thaønh caûm ôn ñeán Ban laõnh ñaïo Phaân Vieän Sinh Hoïc taïi Ñaø Laït vaø caùc anh chò thuoäc phoøng Coâng ngheä Thöïc vaät ñaõ taïo ñieàu kieän cho toâi thöïc hieän ñeà taøi naøy. Toâi chaân thaønh caûm ôn Ban Chuû nhieäm khoa, caùc thaày, coâ trong khoa Coâng Ngheä Sinh Hoïc tröôøng Ñaïi hoïc Môû Baùn Coâng TP. Hoà Chí Minh.

Ñaõ truyeàn ñaït nhöõng kieán thöùc cho toâi trong suoát khoaù hoïc qua. Vaø toâi gôûi lôøi caûm ôn ñeán caùc baïn tröôøng ÑH KHTN khoaù 2001 ñaõ chia seû nhöõng khoù khaên coâng vieäc. Trong ñoù, toâi xin gôûi lôøi caûm ôn chaân thaønh tôùi anh Hoàng Vuõ ñaõ boû coâng giuùp ñôõ toâi raát nhieàu. Toâi gôûi lôøi caûm ôn caùc baïn S.

Tuaán vaø Caùc baïn khoaù 2001 nhöng hôn caû laø caùc baïn thaân yeâu lôùp SHO1A1 khoa coâng ngheä sinh hoïc tröôøng ÑH Môû Baùn Coâng Tp HCM ñaõ hoã trôï toâi raát nhieàu. Caûm ôn Töôøng Vi, ñaõ luoân chia seû vaø giuùp toâi vöôït qua nhöõng khoù khaên. Cuoái cuøng, con xin gôûi ñeán OÂng, Baø, Boá, Meï, caùc anh, chò vaø gia ñình toâi loøng bieát ôn vaø nhöõng tình caûm saâu saéc nhaát, nhöõng ngöôøi taïo neân nieàm tin vaø nieàm töï haøo cuûa toâi. Nhöõng ngöôøi luoân doõi theo töøng böôùc ñi cuûa toâi, luoân daønh cho toâi nhöõng tình caûm vaø uûng hoä toâi veà moïi maët ñoàng thôøi laø choã döïa vöõng chaéc cho toâi treân con ñöôøng hoïc taäp vaø nghieân cöùu.

Moät laàn nöõa toâi xin chaân thaønh caûm ôn! Ñaø Laït ngaøy 01 thaùng 04 naêm 2005 Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc MUÏC LUÏC TRANG Lôøi caûm ôn Danh muïc hình aûnh Danh muïc baûng Danh muïc bieåu ñoà LÔØI MÔÛ ÑAÀU PHAÀN MOÄT: TOÅNG QUAN 1.1 KHAÙI QUAÙT VEÀ PHÖÔNG PHAÙP VI NHAÂN GIOÁNG THÖÏC VAÄT, HÖÔÙNG NGHIEÂN CÖÙU VAØ YÙ NGHÓA THÖÏC TIEÃN .1 Sô löôïc lòch söû phaùt trieån vaø thaønh töïu ñaït ñöôïc trong vi nhaân gioáng thöïc vaät .2 Caùc kyõ thuaät vi nhaân gioáng thöïc vaät .1 Nuoâi caáy moâ vaø cô quan taùch rôøi .2 Nuoâi caáy moâ phaân sinh .3 Nuoâi caáy moâ seïo (callus).4 Nuoâi caáy phoâi .5 Nuoâi caáy bao phaán vaø haït phaán .6 Nuoâi caáy teá baøo ñôn vaø teá baøo traàn .7 Nuoâi caáy huyeàn phuø teá baøo .8 Nuoâi caáy baàu nhuïy vaø noaõn .9 Haït gioáng nhaân taïo .10 Phöông phaùp nuoâi caáy laéc vaø Bioreactor.3 Söï phaùt trieån cuûa nuoâi caáy moâ teá baøo thöïc vaät ôû Vieät Nam .9 Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc 1.4 YÙ nghóa cuûa phöông phaùp .5 Caùc nhöôïc ñieåm cuûa vi nhaân gioáng. TÌNH HÌNH THEÁ GIÔÙI:. TÌNH HÌNH TRONG NÖÔÙC. COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC THÖÏC VAÄT.

COÂNG NGHEÄ SINH HOÏC THÖÏC VAÄT VÔÙI KEÁ HOAÏCH 1996 – 2010. TOÅNG KEÁT. GIÔÙI THIEÄU SÔ LÖÔÏC VEÀ CAÂY THU HAÛI ÑÖÔØNG (BEGONIA SPP. Vò trí phaân loaïi.

Ñaëc ñieåm sinh hoïc vaø yù nghóa kinh teá cuûa caây hoa Thu haûi ñöôøng (Begonia spp. Ñaëc ñieåm sinh hoïc cuûa caây hoa Thu haûi ñöôøng. YÙ nghóa kinh teá cuûa caây hoa Thu haûi ñöôøng. Caùc ñieàu kieän sinh lyù troàng caây hoa Thu haûi ñöôøng.

Ñoä aåm vaø nöôùc. Caùc beänh haïi ñoái vôùi caây hoa Thu haûi ñöôøng. Beänh khaûm do virus. Beänh phaán traéng do naám Erysiphe chichoracearum.

Beänh moác xaùm do naám Botrytis cinerea. Beänh do vi khuaån Corynebacterium fascian. 21 Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc 1. Beänh do vi khuaån Xanthomonas begoniae.

Beänh thoái thaân vaø reã do naám Rhizoctonia solani, Pythium spp, Fusarium solani. Nhaân gioáng caây Thu haûi ñöôøng.1 Nhaân gioáng truyeàn thoáng. Nhaân gioáng voâ tính. Nhaân gioáng höõu tính.

Nhaân gioáng in vitro. Nuoâi caáy choài ñænh. Nuoâi caáy laù. Nuoâi caáy cuoáng laù.

Nuoâi caáy caùnh hoa. Caùc maãu khaùc. Nuoâi caáy loûng.8 PHÖÔNG PHAÙP NUOÂI CAÁY LÔÙP MOÛNG TEÁ BAØO (THIN CELL LAYER, TCL) .1 Ñònh nghóa cuûa heä thoáng TCL .2 Ñaëc tröng cuûa heä thoáng.3 Öu ñieåm cuûa phöông phaùp .4 Moät soá thaønh töïu ñaït ñöôïc trong öùng duïng phöông phaùp TCL .1 Caây thuoác laù.2 Caây hoa Lily .3 Caây hoa cuùc .5 Caây hoa baát töû (Amaranthus edulis) .6 Hoa thu haûi ñöôøng (Begonia rex).31 Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc 1.7 Caây khoå saâm (Gentiana spp.9 Caây hoa Lay-Ôn (gladiolous spp.10 Heliconia (Heliconia spp.11 Caây Löôõi Ñoøng (Iris pallida).12 Caây hoa Lan (Orchid).13 Daï Yeân Thaûo (Pentunia hybrida).14 Hoa hoàng (Rosa spp.15 Hoa Höôùng Döông (Helianthus annus).5 Moät soá öùng duïng khaùc.6 ÖÙng duïng heä thoáng TCL trong kyõ thuaät di truyeàn.7 TCL vôùi moät soá öùng duïng quan troïng khaùc. GIÔÙI THIEÄU BIOREACTOR.

Caáu truùc Bioreactor. Quy trình nhaân sinh khoái thöïc vaät baèng Bioreactor. Giaûi thích. CAÙC CHAÁT ÑIEÀU HOØA SINH TRÖÔÛNG.1 Caùc chaát ñieàu hoøa sinh tröôûng thöïc vaät söû duïng trong ñeà taøi.

Thuaän lôïi vaø baát lôïi khi söû duïng TDZ .39 Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc a. Taùc ñoäng chung. Coâng thöùc caáu taïo .39 PHAÀN HAI: VAÄT LIEÄU & PHÖÔNG PHAÙP 2. ÑÒA ÑIEÅM THÖÏC HIEÄN ÑEÀ TAØI.

VAÄT LIEÄU VAØ PHÖÔNG PHAÙP .40 Ñoái töôïng nghieân cöùu. Maãu caáy vaø muïc ñích .2 Moâi tröôøng nuoâi caáy. phöông phaùp. Thieát laäp heä thoáng.

Khöû truøng heä thoáng. Khöû truøng maãu. Ñieàu kieän thí nghieäm .3 THIEÁT KEÁ THÍ NGHIEÄM .47 PHAÀN BA: KEÁT QUAÛ & THAÛO LUAÄN 3. Khöû truøng maãu.

Thí nghieäm 1: Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa BA, NAA leân khaû naêng taïo choài cuûa maãu tTCL. Thí nghieäm 2: Khaûo saùt aûnh höôûng ñoä daøy maãu caáy tTCL leân khaû naêng taïo choài. Thí nghieäm 3: Khaûo saùt aûnh höôûng cuûa TDZ leân khaû naêng Mai Xuaân Phaùn Khoùa luaän toát nghieäp Muïc luïc taïo choài cuûa maãu tTCL. Thí nghieäm 4: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài cuûa maãu tTCL treân moâi tröôøng ñaëc.

Thí nghieäm 5: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài cuûa maãu treân moâi tröôøng loûng tónh. Thí nghieäm 6: Khaûo saùt khaû naêng nhaân choài baèng Bioreactor. Thí nghieäm 7: Khaûo saùt söï ra reã cuûa choài treân moâi tröôøng ñaëc. Chuyeån caây ra vöôøn öôm.

AÛnh höôûng cuûa chaát ñieàu hoøa sinh tröôûng BA vaø NAA. AÛnh höôûng cuûa chaát ñieàu hoøa sinh tröôûng TDZ. AÛnh höôûng cuûa ñoä daøy maãu caáy. AÛnh höôûng cuûa moâi tröôøng nuoâi caáy.

AÛnh höôûng cuûa heä thoáng nuoâi caáy Bioreactor.61 PHAÀN BOÁN: KEÁT LUAÄN & KIEÁN NGHÒ 4.64 PHAÀN NAÊM: TAØI LIEÄU THAM KHAÛO 5. TAØI LIEÄU TIEÁNG VIEÄT. TAØI LIEÄU TIEÁNG NÖÔÙC NGOAØI.66 Phuï luïc Mai Xuaân Phaùn DANH MUÏC HÌNH Hình 1. Moät soá loaøi hoa Thu haûi ñöôøng (Begonia spp.) ñöôïc öa chuoäng Hình 2.

Quy trình nhaân gioáng caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp.) baèng phöông phaùp nuoâi caáy lôùp moûng teá baøo Hình 3. Söï hình thaønh choài cuûa maãu tTCL caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp. Söï phaùt sinh choài theo ñoä daøy cuûa maãu caáy tTCL thaân caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp. AÛnh höôûng cuûa TDZ leân khaû naêng taùi sinh choài cuûa maãu caáy tTCL thaân caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp.

AÛnh höôûng cuûa moâi tröôøng loûng tónh vaø moâi tröôøng coù agar leân söï hình thaønh cuïm choài caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp. Söï phaùt trieån cuûa choài trong Bioreactor Hình 8. Khaû naêng hình thaønh reã treân moâi tröôøng nuoâi caáy coù agar Hình 9. Caùc giai ñoaïn phaùt trieån cuûa caây Thu haûi ñöôøng (Begonia spp.) in vitro ngoaøi vöôøn öôm Hình 10.

Söï hö hoûng khí khaåu gaây hieän töôïng thuyû tinh theå cuûa caây in vitro DANH MUÏC BAÛNG Baûng 1. Noàng ñoä BA/NAA trong moâi tröôøng taùi sinh choài Baûng 2. Noàng ñoä TDZ trong moâi tröôøng taùi sinh choài Baûng 3. Noàng ñoä BA/NAA trong moâi tröôøng nhaân choài Baûng 4.

AÛnh höôûng cuûa BA/NAA leân khaû naêng taùi sinh choài cuûa maãu caáy tTCL Baûng 5. AÛnh höôûng ñoä daøy maãu caáy tTCL leân khaû naêng taïo choài Baûng 6. Keát quaû aûnh höôûng cuûa TDZ leân khaû naêng taùi sinh choài Baûng 7. Keát quaû khaû naêng nhaân choài cuûa maãu treân moâi tröôøng ñaëc Baûng 8.

Keát quaû nuoâi caáy nhaân sinh khoái choài baèng Bioreactor DANH MUÏC BIEÅU ÑOÀ Bieåu ñoà 1. AÛnh höôûng cuûa BA/NAA leân khaû naêng taùi sinh choài cuûa maãu caáy tTCL Bieåu ñoà 2. AÛnh höôûng ñoä daøy maãu caáy tTCL leân khaû naêng taïo choài Bieåu ñoà 3. Keát quaû aûnh höôûng cuûa TDZ leân khaû naêng taùi sinh choài Bieåu ñoà 4.

Keát quaû khaû naêng nhaân choài cuûa maãu treân moâi tröôøng ñaëc DANH MUÏC CHÖÕ VIEÁT TAÉT v Chaát ñieàu hoaø sinh tröôûng − BA. α-naphtalenacetic acid − TDZ. 2,4-D dichlorophenoacetic acid − GA3 .Gibberellic acid v Moâi tröôøng − MS. Muashige vaø Skoog, 1962 − LB.

Lismair vaø Skoog, 1963 v Caùc chöõ khaùc − TCL. Thin cell layer − tTCL. Transverse thin cell layer − lTCL. Longitudial thin cell layer Khoùa luaän toát nghieäp Lôøi môû ñaàu Xaõ hoäi ta ñang ngaøy moät phaùt trieån, ñôøi soáng cuûa chuùng ta cuõng ngaøy moät ñöôïc naâng cao.

Töø ñoù, nhu caàu veà thuù chôi hoa, caây kieång noùi chung ñöôïc quan taâm hôn. Trong nhöõng naêm gaàn ñaây, vieäc chôi hoa vaø caây caûnh ôû nöôùc ta cuõng ñang ngaøy moät taêng cao trong moïi taàng lôùp xaõ hoäi. Treân cô sôû ñoù, nhieàu cô sôû cuûa tö nhaân, taäp theå vaø caùc doanh nghieäp, coâng ty lieân doanh chuyeân saûn xuaát vaø kinh doanh hoa ñaõ ra ñôøi. Hieän nay nhieàu loaïi hoa môùi ñaõ vaø ñang ñöôïc nhaäp veà vôùi söï ña daïng veà maøu saéc cuõng nhö chuûng loaïi nhaèm ñaùp öùng nhu caàu cuûa thò tröôøng nhö: Lily, Tulip, Hoàng moân ….

Trong ñoù caây hoa Thu haûi ñöôøng laø moät loaïi hoa raát ñeïp vaø ñang ñöôïc öa chuoäng treân thò tröôøng.