Nghiên cứu nhân giống cây sói rừng Sarcandra glabra bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro

LỜI CAM ĐOAN

LỜI CẢM ƠN

1. MỞ ĐẦU

1.1. Mục tiêu nghiên cứu

2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Giới thiệu về Chi Sói rừng và loài cây Sói rừng (Sarcandra glabra (Thunb.)

2.2. Phân loại, phân bố

2.3. Đặc điểm thực vật học

2.4. Giá trị của cây Sói rừng (Sarcandra glabra (Thunb.)

2.5. Cơ sở việc định danh loài và xác định quan hệ di truyền

2.6. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng

2.6.1. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng trên thế giới

2.6.2. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây Sói rừng ở nước ta

2.7. Cơ sở phương pháp nhân giống in vitro (vi nhân giống)

2.7.1. Ưu điểm của phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

2.7.2. Nhược điểm của phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

2.7.3. Các phương pháp nuôi cấy mô

2.7.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô thực vật

2.7.5. Các giai đoạn trong nhân giống invitro

3. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu

3.1.1. Đối tượng nghiên cứu

3.1.2. Phạm vi nghiên cứu

3.2. Nội dung nghiên cứu

3.3. Phương pháp nghiên cứu

3.3.1. Điều tra đánh giá thực trạng phân bố và thu thập mẫu nghiên cứu

3.3.2. Phương pháp nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng đặc điểm hình thái

3.3.3. Phương pháp nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng chỉ thị DNA

3.3.4. Phương pháp nhân giống in vitro cây Sói rừng

3.3.5. Phương pháp xử lý số liệu

4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

4.1. Điều tra, đánh giá thực trạng phân bố, giá trị sử dụng của của loài Sói rừng và thu thập mẫu

4.2. Kết quả nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng đặc điểm hình thái

4.2.1. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Xín Mần

4.2.2. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Mèo Vạc

4.2.3. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Quản Bạ

4.2.4. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Hoàng Su Phì

4.2.5. Đặc điểm mẫu cây Sói rừng thu thập được tại huyện Vị Xuyên

4.3. Kết quả nhận dạng mẫu nguồn gen cây Sói rừng bằng chỉ thị DNA

4.3.1. Kết quả tách chiết DNA tổng số của mẫu Sói rừng nghiên cứu

4.3.2. Kết quả PCR của mẫu Sói rừng nghiên cứu

4.3.3. Kết quả giải trình tự vùng ITS-rDNA của mẫu Sói rừng nghiên cứu

4.3.4. Kết quả phân tích đa dạng di truyền, xác định mối quan hệ di truyền giữa 15 mẫu Sói rừng nghiên cứu

4.4. Kết quả nghiên cứu nhân giống in vitro cây Sói rừng

4.4.1. Chọn vật liệu khởi đầu

4.4.2. Ảnh hưởng của thời gian khử trùng bằng HgCl2 0,1% đến khả năng tạo mẫu vô trùng

4.4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh trưởng đến khả năng nhân nhanh chồi Sói rừng

4.4.4. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của các chất kích thích sinh đến khả năng ra rễ chồi Sói rừng

4.4.5. Nghiên cứu đưa cây ra nhà kính

4.4.6. Chăm sóc cây giai đoạn in vitro

5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về cây sói rừng Sarcandra glabra

Cây sói rừng, có tên khoa học là Sarcandra glabra, thuộc họ Chloranthaceae. Loài cây này được biết đến với nhiều tên gọi khác nhau như cây sói nhẵn, cây cửu tiết trà. Sarcandra glabra phân bố rộng rãi ở nhiều quốc gia, bao gồm Trung Quốc, Triều Tiên, Nhật Bản, Ấn Độ và Việt Nam. Tại Việt Nam, cây mọc chủ yếu ở các tỉnh miền núi như Hà Giang, Yên Bái, và Phú Thọ. Cây sói rừng có chiều cao từ 1 đến 2 mét, với thân nhẵn và lá mọc đối. Đặc điểm thực vật học của cây cho thấy nó có giá trị dược liệu cao, được sử dụng trong nhiều bài thuốc Đông y. Theo nghiên cứu, cây có tác dụng kháng khuẩn, tiêu viêm và hỗ trợ điều trị nhiều bệnh lý như viêm phổi, viêm khớp và gãy xương.

II. Tình hình nghiên cứu nhân giống cây sói rừng

Nghiên cứu về nhân giống cây sói rừng Sarcandra glabra đã được thực hiện ở nhiều nơi trên thế giới. Tuy nhiên, tại Việt Nam, công tác bảo tồn và phát triển giống cây này còn nhiều hạn chế. Việc nhân giống truyền thống không đảm bảo chất lượng và số lượng. Do đó, việc áp dụng công nghệ sinh học, đặc biệt là kỹ thuật nuôi cấy in vitro, trở thành một giải pháp hiệu quả. Kỹ thuật này không chỉ giúp tăng cường khả năng nhân giống mà còn bảo tồn nguồn gen quý hiếm của cây. Theo báo cáo, việc áp dụng công nghệ sinh học trong nhân giống cây thuốc quý đang được xem là một nhiệm vụ cấp bách.

III. Phương pháp nhân giống in vitro

Phương pháp nuôi cấy in vitro là một kỹ thuật tiên tiến trong nhân giống cây trồng, bao gồm việc sử dụng mô tế bào để tạo ra cây con. Kỹ thuật này giúp tạo ra số lượng lớn cây giống trong thời gian ngắn và đảm bảo chất lượng. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy mô bao gồm chất dinh dưỡng, ánh sáng, và điều kiện môi trường. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc lựa chọn chất kích thích sinh trưởng phù hợp là rất quan trọng để đạt được tỷ lệ nhân giống cao. Các chất như BAP và NAA đã được thử nghiệm và cho thấy hiệu quả tích cực trong việc kích thích sự phát triển của chồi và rễ cây sói rừng.

IV. Kết quả nghiên cứu và ứng dụng thực tiễn

Kết quả nghiên cứu cho thấy việc áp dụng kỹ thuật nuôi cấy in vitro đã mang lại thành công trong việc nhân giống cây sói rừng Sarcandra glabra. Tỷ lệ mẫu vô trùng cao và khả năng ra rễ tốt đã được ghi nhận. Những cây giống được sản xuất từ phương pháp này có thể được sử dụng để phục vụ cho công tác bảo tồn và phát triển cây thuốc quý. Việc nhân giống thành công không chỉ giúp bảo tồn nguồn gen mà còn tạo ra nguồn nguyên liệu dồi dào cho ngành dược liệu, góp phần vào phát triển kinh tế địa phương và bảo vệ môi trường.

Luận văn tốt nghiệp: Nghiên cứu nhân giống cây sói rừng Sarcandra glabra bằng kỹ thuật nuôi cấy in vitro