ĐẶT VẤN ĐỀ 7 CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LỆU 9 1. Chất lƣợng lúa gạo và thị trƣờng lúa gạo 9 1. Phẩm chất xay chà 11 1.
Lúa gạo là thực phẩm của toàn cầu 12 1. Các loại lúa gạo trên thị trƣờng 12 1. Chất lƣợng dinh dƣỡng của lúa gạo 13 1. Hàm lƣợng Protein trong lúa gạo 13 1.
Ảnh hƣởng của yếu tố giống đến hàm lƣợng Protein 14 1. Ảnh hƣởng của phân bón đến hàm lƣợng Protein 15 1. Ảnh hƣởng của các điều kiện ngoại cảnh đến đời sống cây lúa 16 1. Nghiên cứu di truyền số lƣợng liên quan đến hàm lƣợng Protein trong hạt lúa 17 1.
Gen qui định hàm lƣợng Protein ở lúa 17 1. Hiệu quả gen qui định tính trạng hàm lƣợng Protein ở lúa 18 1. Tính trạng GPC ( Grain Protein Conten) ở lúa 21 1. Chỉ thị phân tử và ứng dụng trong nghiên cứu về di truyền hàm lƣợng Protein ở lúa 23 1.
Chỉ thị phân tử 23 1. Chỉ thị RAPD 24 1. Chỉ thị AFLP 24 1. Chỉ thị SSR 25 1.
Ứng dụng chỉ thị phân tử trong nghiên cứu về chất lƣợng 25 1. Bản đồ di truyền tính trở hồ 26 1. Bản đồ di truyền hàm lƣợng Amylose 27 Nguyễn Thị Thu Hương -2- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học 1. Bản đồ di truyền hàm lƣợng protein 27 1.
Bản đồ di truyền tính trạng mùi thơm 28 1.Một số kết quả nghiên cứu về di truyền hàm lƣợng protein 30 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2. Vật liệu nghiên cứu 35 2. Phƣơng pháp nghiên cứu 40 2. Xác định hàm lƣợng Protein và thành phần các acid amine trong hạt gạo 40 2.
Đánh giá sự liện quan ở mức độ phân tử giữa bố, mẹ và con lai 42 2. Phƣơng pháp nghiên cứu di truyền số lƣợng liên quan đến hàm lƣợng Protein ở lúa. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 50 3. Acid amine trong Protein của bố mẹ và con lai 50 3.
Sự liên quan di truyền ở mức độ phân tử giữa bố, mẹ và con lai 52 3. Nghiên cứu di truyền số lƣợng liên quan đến hàm lƣợng Protein cao ở lúa 55 3. Phân tích hiệu quả gen tham gia qui định hàm lƣợng Protein ở lúa 55 3. Phân tích các tham số di truyền tính trạng GPC 59 3.
Các kiểu tác động của gen lên hàm lƣợng Protein trong hạt lúa 65 3. Tƣơng quan giữa một số biểu hiện hình thái với hàm lƣợng Protein ở hạt lúa 67 3. Tƣơng quan giữa một số tính trạng chất lƣợng khác với hàm lƣợng Protein ở 72 hạt lúa 3. Xác định chỉ số chọn lọc trong chọn tạo giống lúa có hàm lƣơng Protein cao 76 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 80 1.
Đề nghị 80 TÀI LIỆU THAM KHẢO 82 A. Tài liệu Tiếng Việt 81 B. Tài liệu Tiếng Anh 83 Nguyễn Thị Thu Hương -3- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC HÌNH ẢNH, BẢNG BIỂU Hình Trang 2. Hình ảnh nhận dạng ADN bằng mồi SSR.
Cấu trúc hình cây thể hiện tƣơng đồng di truyền giữa các giống lúa 39 3. Hình ảnh ADN của bố mẹ và các con lai sử dụng chỉ thị SSR(locus RM 5625) 52 3. Hình ảnh ADN của cây bố mẹ và các con lai sử dụng chỉ thị SSR (locus 53 RM 4499) 3. Hình ảnh ADN của cây bố mẹ và các con lai sử dụng chỉ thị SSR (locus 53 RM 6836) Bảng 2.
Danh sách mồi SSR 35 2. Mô ̣t số đă ̣c tin 37 ́ h nông ho ̣c của các giố ng lúa sƣ̉ du ̣ng trong nghiên cƣ́u 2. Hệ số tƣơng đồng di truyền giữa các giống lúa bố mẹ 39 2. Các tổ hợp lai giữa các giống lúa sử dụng trong nghiên cứu 40 3.
Thành phần và hàm lƣợng acid amine trong protein của giống bố, mẹ và 51 hạt F2 (% so với protein) 3. Ma trận tƣơng đồng của các giống lúa đem phân tích khi sử dụng SSR 52 3. Hàm lƣợng protein và sự biến động qua các thế hệ của các tố hợp lai 56 3. Mức độ trội của gen qui định hàm lƣợng Protein cao ở các giống lúa 58 3.
Phƣơng sai thành phần của quần thể bố, mẹ và F2 59 3. Phƣơng sai chung của quần thể bố, mẹ và F2 60 3. Phân tích phƣơng sai một nhân tố 62 3. Phƣơng sai hai nhân tố ( chiều cao cây, thời gian sinh trƣởng) ảnh 63 hƣởng tới hàm lƣợng Protein 3.
Bảng phân tích phƣơng sai ba nhân tố (chiều cao, thời gian sinh 64 trƣởng, trọng lƣơng 1000 hạt) ảnh hƣởng tới hàm lƣợng Protein 3. Hàm lƣợng Protein và sự biến động di truyền trên các thế hệ 66 3. Thiết lập hệ số di truyền trên các tổ hợp lai 67 3. Một vài tính trạng nông học của các cây lúa F2 và bố, mẹ 70 Nguyễn Thị Thu Hương -4- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học 3.
Hệ số tƣơng quan giữa Protein và một vài đặc điểm hình thái 71 3. Hàm lƣợng Protein tổng số của một vài dòng/giống lúa đang nghiên cứu 73 3. Hệ số tƣơng quan giữa hàm lƣợng Protein và Amylose tổng số của bố, mẹ 74 3. Hệ số tƣơng quan giữa hàm lƣợng Protein và Amylose tổng số của con lai F1 75 3.
Hệ số tƣơng quan giữa hàm lƣợng Protein và Amylose tổng số của 75 con lai F2. Hệ số tƣơng quan giữa hàm lƣợng Protein và Amylose tổng số của 75 con lai BC1 F1. Tiêu chuẩn chọn lọc, tính trạng của các giống tham gia thí nghiệm 76 3. Tiêu chuẩn chọn lọc, tính trạng của các giống tham gia thí nghiệm 77 3.Chỉ số chọn lọc các giống phù hợp với mục tiêu chọn lọc 78 3.
Chỉ số chọn lọc các giống phù hợp với mục tiêu chọn lọc 78 Nguyễn Thị Thu Hương -5- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AE : (Additive interaction effect): Ảnh hƣởng tƣơng tác cộng tính AFLP : (Amplified Frament length polymorphism): Đa hình chiều dài các đoạn ADN đƣợc nhân bản chọn lọc BC : (Backcross): Lai ngƣợc Bp : Base pair Cs., : Cộng sự CTAB : Cetytrimethyl Amonium Bromide dNTP : Deoxyribonucleotide EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acid GPC : Grain Protein Content Kb : Kilo base MAS : (Marker Assitsed Selection): Chọn lọc có sự trợ giúp của chỉ thị phân tử QTLs : (Quantitative Trait Loci) : Locut kiểm soát tính trạng số lƣợng RAPD : (Random Amplyfied polymorphic DNA): Đa hình chiều dài các đoạn ADN đƣợc nhân bản ngẫu nhiên RFLP : (Restriction Fragment Length Polymorphism): đa hình chiều dài các đoạn phân cắt TBE : Tris-Boric Acid and EDTA TE : Tris-EDTA Nguyễn Thị Thu Hương -6- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học ĐẶT VẤN ĐỀ Tính cấp thiết và ý nghĩa của đề tài: Lúa gạo là loại cây lƣơng thực quan trọng trên thế giới nói chung và Việt Nam nói riêng. Lúa gạo đƣợc trồng rộng khắp ở 112 nƣớc trên thế giới; là nguồn cung cấp lƣơng thực chủ yếu của hơn 54% dân số thế giới (Nguyễn Minh Công và cs. Ở một số nƣớc nhƣ Ấn Độ, Trung Quốc, Indonesia, Nhật Bản, Việt Nam,.lúa gạo là cây lƣơng thực chính. Về mặt diện tích gieo trồng, lúa gạo là cây lƣơng thực có diện tích lớn thứ hai đứng sau lúa mì; Về sản lƣợng hàng năm, lúa gạo đứng thứ ba sau lúa mì và ngô (Nguyễn Minh Công và cs.
Về giá trị kinh tế, lúa gạo là nguồn thu nhập chính của nông dân nhiều nơi trên thế giới và là một trong những mặt hàng xuất khẩu quan trọng của một số quốc gia trong đó có Việt Nam (hàng năm Việt Nam xuất khẩu khoảng 4,5 triệu tấn gạo sang các thị trƣờng khác nhau trên thế giới). Vì vậy việc đầu tƣ nghiên cứu nhằm nâng cao năng suất,chất lƣợng lúa gạo tại Việt Nam luôn đƣợc Chính phủ quan tâm,đặc biệt là chất lƣợng gạo xuất khẩu luôn là vấn đề thách thức đối với các nhà chọn giống trong nhiều năm qua. Ở Việt Nam trong những năm gần đây,việc chọn tạo giống lúa đã đƣợc đẩy mạnh, nhiều giống lúa mới năng suất, chất lƣợng đã đƣợc tạo ra và chuyển giao vào sản xuất. Tuy nhiên ,về chất lƣợng gạo nói chung vẫn chƣa đƣợc cải thiện rõ rệt .Để đánh giá về chất lƣợng dinh dƣỡng của lúa gạo có rất nhiều chỉ tiêu khác nhau, một trong những chỉ tiêu quan trọng là hàm lƣợng Protein trong hạt gạo.
Protein là nguồ n cung cấp dinh dƣỡng và năng lƣơ ̣ng chủ yếu hàng ngày ; Là một trong những loại hợp chất hữu cơ rấ t quan trọng và không thể thiếu đố i với mỗi cơ thể sống ; nó cung cấp từ 10 đến 15% năng lƣợng sống giúp cơ thể sinh trƣởng và phát triển tốt. Theo tính toán, đối với một cơ thể trƣởng thành là nam giới lƣợng protein thiết yếu mỗi ngày cần khoảng 55,5g và phụ nữ là 45g. So với những loại cây trồng khác nuôi sống con ngƣời, cây lúa là một trong những loại cây trồng có hàm lƣợng protein thấp hơn cả (6-12%). Ở Việt Nam , hiện nay các giố ng lúa đang đƣơ ̣c trồ ng và sƣ̉ du ̣ng phổ biế n là Khang dân 18, Q5, CR203.
lại đều là các giống lúa có hàm lƣơ ̣ng protein ở mức khá thấp , trung bin ̀ h chỉ đạt khoảng 7% (các giống đƣợc cho là có hàm lƣợng protein cao có hàm lƣợng Nguyễn Thị Thu Hương -7- TIEU LUAN MOI download : skknchat@gmail.com Luận văn thạc sĩ khoa học trung bình đạt từ 9 đến 10%) (Vũ Tuyên Hoàng và cs.Vì vậy việc “Nghiên cứu di truyền hàm lƣợng protein cao ở lúa” là việc làm cần thiết góp phần cung cấp thông tin,cơ sở dữ liệu phục vụ cho việc tuyển chọn vật liệu lai tạo nhằm chọn giống lúa chất lƣợng cao phục vụ sản xuất. Mục tiêu nghiên cứu: -Phân tích và xác định đƣợc sự di truyền hàm lƣợng protein trong hạt lúa - Phân tích hiệu quả gen tham gia qui định hàm lƣợng protein ở lúa. -Phân tích các tham số di truyền tính trạng GPC ở một số giống lúa đang trồng tại Việt Nam -Xác định chỉ số chọn lọc trong chọn giống lúa có hàm lƣợng protein caonhằm định hƣớng chọn giống lúa chất lƣợng gạo tốt phục vụ sản xuất.