Khảo sát ảnh hưởng của các chất auxin đến khả năng tạo mô sẹo phôi hóa ở giống sắn Manihot esculenta Crantz

• Tác giả: Nguyễn Thị Huyền
• Người hướng dẫn: Nguyễn Anh Vũ, Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam
• Trường học: Đại học Nông Lâm Thái Nguyên
• Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
• Đề tài: Khảo sát ảnh hưởng của một số chất thuộc nhóm auxin đến khả năng tạo mô sẹo phôi hóa phục vụ chuyển gen của một số giống sắn (Manihot esculenta Crantz)
• Loại tài liệu: Khóa luận tốt nghiệp đại học
• Năm xuất bản: 2014
• Địa điểm: Thái Nguyên

• LỜI CẢM ƠN
• 1. MỞ ĐẦU
• 1.1. Mục đích và mục tiêu nghiên cứu
• 1.2. Ý nghĩa của đề tài
• 1.2.1. Ý nghĩa khoa học
• 1.2.2. Ý nghĩa thực tiễn
• 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 2.1. Tổng quan chung về cây sắn
• 2.2. Nguồn gốc và phân loại
• 2.3. Đặc điểm thực vật học
• 2.4. Đặc điểm một số giống sắn nghiên cứu
• 2.4.1. Giống KM98 – 7
• 2.4.2. Giống TMS 60444
• 2.5. Thành phần dinh dưỡng và giá trị sử dụng
• 2.6. Tình hình sản xuất và tiêu thụ
• 2.6.1. Trên thế giới
• 2.6.2. Việt Nam
• 2.7. Nhu cầu sắn cho nhiên liệu sinh học
• 3. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu
• 3.2. Môi trường nuôi cấy
• 3.3. Dụng cụ, thiết bị và hóa chất
• 3.4. Địa điểm và thời gian tiến hành nghiên cứu
• 3.5. Nội dung nghiên cứu
• 3.5.1. Phương pháp nghiên cứu
• 3.5.2. Nội dung 1: Nghiên cứu sự ảnh hưởng của auxin (NAA, 2,4-D, picloram) tới khả năng tạo mô sẹo
• 3.5.3. Nội dung 2: Nghiên cứu sự ảnh hưởng của auxin (NAA, 2,4-D, picloram) tới khả năng tạo mô sẹo phôi hóa
• 4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
• 4.1. Kết quả ảnh hưởng của auxin (NAA, 2,4-D, picloram) tới khả năng tạo mô sẹo
• 4.2. Kết quả ảnh hưởng của auxin (NAA, 2,4-D, picloram) tới khả năng tạo mô sẹo phôi hóa
• 4.3. Kết quả ảnh hưởng của picloram tới khả năng tạo mô sẹo phôi hóa
• 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO

I. Giới thiệu về nghiên cứu

Nghiên cứu 'Khảo sát ảnh hưởng của auxin đến tạo mô sẹo phôi hóa ở sắn Manihot esculenta Crantz' tập trung vào việc đánh giá tác động của các chất thuộc nhóm auxin như NAA, 2,4-D và picloram lên quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa ở cây sắn. Mục tiêu chính là xác định loại auxin và nồng độ tối ưu để tạo mô sẹo phôi hóa, phục vụ cho các nghiên cứu chuyển gen nhằm cải thiện năng suất và chất lượng cây sắn. Nghiên cứu này có ý nghĩa quan trọng trong công nghệ sinh học thực vật, đặc biệt là trong việc phát triển các giống sắn có khả năng kháng bệnh và hàm lượng tinh bột cao.

1.1. Mục đích và mục tiêu

Mục đích của nghiên cứu là khảo sát ảnh hưởng của auxin (NAA, 2,4-D và picloram) lên khả năng tạo mô sẹo và phôi hóa ở hai giống sắn KM98-7 và TMS60444. Yêu cầu cụ thể bao gồm xác định nồng độ tối ưu của các chất auxin để kích thích sự hình thành mô sẹo và mô sẹo phôi hóa, từ đó tạo tiền đề cho các nghiên cứu chuyển gen trong tương lai.

1.2. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

Nghiên cứu có ý nghĩa khoa học lớn trong việc hiểu rõ cơ chế tác động của auxin lên quá trình phôi hóa ở cây sắn. Về mặt thực tiễn, kết quả nghiên cứu sẽ giúp xây dựng quy trình nuôi cấy mô hiệu quả, phục vụ cho việc chuyển gen và tạo giống sắn mới có năng suất cao, kháng bệnh tốt, đáp ứng nhu cầu sản xuất nhiên liệu sinh học và các ứng dụng công nghiệp khác.

II. Tổng quan về cây sắn và auxin

Cây sắn (Manihot esculenta Crantz) là một loại cây lương thực quan trọng ở các nước nhiệt đới và cận nhiệt đới. Sắn được sử dụng rộng rãi trong sản xuất tinh bột, nhiên liệu sinh học và các sản phẩm công nghiệp khác. Auxin là một nhóm hormone thực vật có vai trò quan trọng trong quá trình sinh trưởng và phát triển của thực vật, đặc biệt là trong việc kích thích sự hình thành mô sẹo và phôi hóa.

2.1. Đặc điểm thực vật học của cây sắn

Cây sắn có thời gian sinh trưởng từ 6 đến 12 tháng, thích hợp với nhiệt độ từ 20-30°C. Rễ củ của sắn chứa hàm lượng tinh bột cao, chiếm khoảng 84-87% trọng lượng khô. Sắn cũng chứa một số chất dinh dưỡng khác như protein, chất béo và vitamin, nhưng hàm lượng thấp. Sắn dễ trồng, ít kén đất, phù hợp với điều kiện kinh tế của nhiều hộ nông dân.

2.2. Vai trò của auxin trong tạo mô sẹo và phôi hóa

Auxin đóng vai trò quan trọng trong việc kích thích sự phân chia tế bào và hình thành mô sẹo. Các chất thuộc nhóm auxin như NAA, 2,4-D và picloram được sử dụng rộng rãi trong nuôi cấy mô để cảm ứng mô sẹo và phôi hóa. Tuy nhiên, hiệu quả của các chất này phụ thuộc vào nồng độ và loại giống sắn được nghiên cứu.

III. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng phương pháp nuôi cấy mô để đánh giá ảnh hưởng của các chất auxin (NAA, 2,4-D và picloram) lên quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa ở hai giống sắn KM98-7 và TMS60444. Các mẫu mô được nuôi cấy trong môi trường chứa các nồng độ khác nhau của auxin, sau đó theo dõi và đánh giá sự hình thành mô sẹo và phôi hóa.

3.1. Đối tượng và vật liệu nghiên cứu

Hai giống sắn được sử dụng trong nghiên cứu là KM98-7 và TMS60444. Các chất auxin bao gồm NAA, 2,4-D và picloram được sử dụng ở các nồng độ khác nhau để đánh giá hiệu quả tạo mô sẹo và phôi hóa.

3.2. Quy trình nuôi cấy mô

Mẫu mô sắn được nuôi cấy trong môi trường MS có bổ sung các chất auxin. Quá trình nuôi cấy được thực hiện trong điều kiện vô trùng, nhiệt độ 25-28°C và ánh sáng 16 giờ/ngày. Sự hình thành mô sẹo và phôi hóa được theo dõi và đánh giá sau 28 ngày nuôi cấy.

IV. Kết quả và thảo luận

Kết quả nghiên cứu cho thấy auxin có ảnh hưởng đáng kể đến quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa ở cây sắn. Trong đó, 2,4-D cho hiệu quả cao nhất trong việc kích thích sự hình thành mô sẹo, trong khi picloram lại có hiệu quả tốt hơn trong quá trình phôi hóa. Nồng độ tối ưu của các chất auxin cũng được xác định, tạo cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo.

4.1. Ảnh hưởng của NAA 2 4 D và picloram

Kết quả cho thấy 2,4-D ở nồng độ 2 mg/l kích thích sự hình thành mô sẹo tốt nhất, trong khi picloram ở nồng độ 1 mg/l lại có hiệu quả cao trong quá trình phôi hóa. NAA cũng cho kết quả khả quan nhưng không vượt trội so với hai chất còn lại.

4.2. So sánh hiệu quả giữa các giống sắn

Giống TMS60444 cho kết quả tốt hơn so với KM98-7 trong cả quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa. Điều này cho thấy sự khác biệt về khả năng đáp ứng với auxin giữa các giống sắn, cần được xem xét trong các nghiên cứu tiếp theo.

V. Kết luận và kiến nghị

Nghiên cứu đã xác định được ảnh hưởng của các chất auxin lên quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa ở cây sắn. 2,4-D và picloram là hai chất có hiệu quả cao nhất, với nồng độ tối ưu được xác định. Kết quả nghiên cứu mở ra hướng đi mới trong việc ứng dụng công nghệ sinh học để cải thiện năng suất và chất lượng cây sắn, đặc biệt là trong bối cảnh nhu cầu nhiên liệu sinh học ngày càng tăng.

5.1. Kết luận

Nghiên cứu đã thành công trong việc xác định ảnh hưởng của auxin lên quá trình tạo mô sẹo và phôi hóa ở cây sắn. Kết quả này có ý nghĩa quan trọng trong việc phát triển các giống sắn mới có năng suất cao và kháng bệnh tốt.

5.2. Kiến nghị

Cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn về cơ chế tác động của auxin lên quá trình phôi hóa, đồng thời mở rộng nghiên cứu trên nhiều giống sắn khác để tìm ra phương pháp tối ưu nhất.