Luận văn thạc sĩ kỹ thuật hóa học xây dựng phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên nền gạo và hồ tiêu

Luận văn thạc sĩ kỹ thuật hóa học trình bày phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên gạo và hồ tiêu, đảm bảo an toàn thực phẩm.

• Tác giả: Đỗ Ngọc Vy Vy
• Người hướng dẫn: PGS.TS. Huỳnh Khánh Duy
• Trường học: Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Kỹ thuật hóa học
• Đề tài: Phương Pháp Định Lượng Thuốc Bảo Vệ Thực Vật Nhóm Nereistoxin Trên Gạo Và Hồ Tiêu
• Loại tài liệu: luận văn
• Năm xuất bản: 2022
• Địa điểm: Thành phố Hồ Chí Minh

Mục lục chi tiết

• LỜI CẢM ƠN
• TÓM TẮT
• 1. CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ
• 2. CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN VỀ THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT NHÓM NEREISTOXIN
• 2.1. Phân loại thuốc bảo vệ thực vật
• 2.2. Nguyên nhân tồn dư thuốc bảo vệ thực vật trong nông sản
• 3. CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 3.1. Sắc ký lắng kết hợp để phát hiện
• 3.2. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất
• 4. CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 4.1. Điều kiện vận hành thiết bị sắc ký
• 4.2. Kết quả khảo sát thời gian ổn định dung dịch chuẩn
• 5. CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

Tóm tắt

I. Giới thiệu

Bài viết tập trung vào phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên hai nền mẫu là gạo và hồ tiêu. Phương pháp định lượng này sử dụng kỹ thuật sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ (LC-MS/MS) để xác định dư lượng các chất thuộc nhóm nereistoxin, bao gồm nereistoxin, cartap, thiocyclam và thiosultap. Phương pháp này được phát triển nhằm đáp ứng nhu cầu kiểm soát dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong nông sản, đặc biệt là trong bối cảnh an toàn thực phẩm ngày càng được quan tâm.

1.1. Bối cảnh nghiên cứu

Việc sử dụng thuốc bảo vệ thực vật trong nông nghiệp đã gây ra nhiều hậu quả nghiêm trọng, bao gồm ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng đến sức khỏe con người và mất cân bằng sinh thái. Nhóm nereistoxin là một trong những nhóm thuốc được sử dụng phổ biến tại Việt Nam, nhưng việc kiểm soát dư lượng của chúng vẫn còn nhiều hạn chế. Do đó, việc phát triển phương pháp định lượng chính xác và hiệu quả là cần thiết.

1.2. Mục tiêu nghiên cứu

Mục tiêu chính của nghiên cứu là xây dựng và tối ưu hóa phương pháp định lượng dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên hai nền mẫu là gạo và hồ tiêu. Phương pháp này nhằm đảm bảo độ chính xác, độ nhạy và khả năng áp dụng trong thực tế, đặc biệt là trong việc kiểm soát chất lượng nông sản xuất khẩu và nội địa.

II. Phương pháp nghiên cứu

Nghiên cứu sử dụng kỹ thuật sắc ký lỏng ghép đầu dò khối phổ (LC-MS/MS) để định lượng dư lượng các chất thuộc nhóm nereistoxin. Phương pháp này được thực hiện trên cột sắc ký EC 125/2 NUCLEODUR HILIC (3 µm, 125 x 2 mm) với hệ pha động gồm ACN, dung dịch 5mM amonium format và 0,1% axit formic. Mẫu được chiết bằng dung dịch ACN:H2O (1:1) chứa 1% axit formic và làm sạch bằng cột chiết pha rắn GCB-500 PJ.

2.1. Quy trình chiết mẫu

Mẫu được chiết bằng dung dịch ACN:H2O (1:1) chứa 1% axit formic, sau đó làm sạch bằng cột chiết pha rắn GCB-500 PJ. Quy trình này đảm bảo loại bỏ các tạp chất gây nhiễu, giúp tăng độ chính xác của phương pháp định lượng.

2.2. Điều kiện sắc ký

Phân tích được thực hiện trên cột sắc ký EC 125/2 NUCLEODUR HILIC (3 µm, 125 x 2 mm) với hệ pha động gồm ACN, dung dịch 5mM amonium format và 0,1% axit formic. Điều kiện này được tối ưu hóa để đảm bảo độ phân giải cao và độ nhạy tốt cho các chất thuộc nhóm nereistoxin.

III. Kết quả và thảo luận

Phương pháp định lượng đã được kiểm chứng về độ chọn lọc, đường chuẩn, giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ), độ chính xác và độ lặp lại. Kết quả cho thấy độ thu hồi của các chất nằm trong khoảng 70-120%, độ lặp lại từ 2-16%, và độ tái lặp nội bộ từ 10-15%. Giới hạn phát hiện và định lượng lần lượt là 0,003 và 0,01 mg/kg.

3.1. Độ chính xác và độ lặp lại

Phương pháp đạt độ chính xác cao với độ thu hồi trong khoảng 70-120% và độ lặp lại từ 2-16%. Điều này cho thấy phương pháp có khả năng áp dụng trong thực tế để kiểm soát dư lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin.

3.2. Giới hạn phát hiện và định lượng

Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp lần lượt là 0,003 và 0,01 mg/kg. Điều này cho thấy phương pháp có độ nhạy cao, phù hợp để phát hiện và định lượng dư lượng các chất thuộc nhóm nereistoxin ở mức thấp.

IV. Kết luận và kiến nghị

Phương pháp định lượng thuốc bảo vệ thực vật nhóm nereistoxin trên gạo và hồ tiêu đã được phát triển và kiểm chứng thành công. Phương pháp này có độ chính xác, độ nhạy và khả năng áp dụng cao trong thực tế, đặc biệt là trong việc kiểm soát chất lượng nông sản xuất khẩu và nội địa. Nghiên cứu này góp phần quan trọng vào việc đảm bảo an toàn thực phẩm và bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng.

4.1. Ứng dụng thực tế

Phương pháp có thể được áp dụng để phân tích các mẫu xuất nhập khẩu cũng như trong chương trình giám sát an toàn thực phẩm nội địa. Điều này giúp kiểm soát chặt chẽ dư lượng thuốc bảo vệ thực vật trong nông sản, đảm bảo an toàn cho người tiêu dùng.

4.2. Hướng phát triển

Trong tương lai, nghiên cứu có thể mở rộng để áp dụng phương pháp này cho các loại nông sản khác, đồng thời tối ưu hóa quy trình để giảm chi phí và thời gian phân tích.

Nội dung chính

Tổng quan nghiên cứu

Việt Nam là một trong những quốc gia xuất khẩu gạo lớn trên thế giới, đóng góp quan trọng vào nền kinh tế quốc dân. Tuy nhiên, việc sử dụng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) trong sản xuất nông nghiệp, đặc biệt là nhóm thuốc nereistoxin, đang đặt ra nhiều thách thức về an toàn thực phẩm và môi trường. Thuốc BVTV nhóm nereistoxin gồm các hoạt chất như nereistoxin, cartap, thiocyclam và thiosultap, được sử dụng phổ biến để phòng trừ sâu hại trên cây lúa và hồ tiêu. Theo báo cáo của ngành, việc tồn dư các hoạt chất này trong nông sản có thể vượt quá giới hạn cho phép, gây ảnh hưởng đến sức khỏe người tiêu dùng và uy tín xuất khẩu.

Mục tiêu nghiên cứu là xây dựng phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC-MS/MS) để định lượng định lượng chính xác các hoạt chất nhóm nereistoxin trên nền mẫu gạo và hồ tiêu, đồng thời khảo sát các thông số kỹ thuật như độ chọn lọc, giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ), độ chính xác và độ thu hồi. Nghiên cứu được thực hiện trong khoảng thời gian từ tháng 9 đến tháng 12 năm 2021 tại Thành phố Hồ Chí Minh, nhằm phục vụ cho chương trình giám sát an toàn thực phẩm và kiểm soát chất lượng sản phẩm xuất khẩu.

Ý nghĩa của nghiên cứu thể hiện qua việc cung cấp công cụ phân tích hiện đại, chính xác, giúp phát hiện tồn dư thuốc BVTV nhóm nereistoxin với giới hạn phát hiện thấp (LOD từ 0,003 mg/kg), đảm bảo an toàn thực phẩm, nâng cao chất lượng sản phẩm nông nghiệp và đáp ứng các tiêu chuẩn xuất khẩu quốc tế.

Cơ sở lý thuyết và phương pháp nghiên cứu

Khung lý thuyết áp dụng

Nghiên cứu dựa trên các lý thuyết và mô hình phân tích hóa học hiện đại, trong đó:

• Phương pháp sắc ký lỏng ghép khối phổ (LC-MS/MS): Kỹ thuật phân tích dựa trên sự tách chiết các hợp chất trong mẫu bằng sắc ký lỏng, kết hợp với phát hiện và định lượng bằng khối phổ, cho phép xác định chính xác các hoạt chất với độ nhạy cao và khả năng phân biệt các chất có cấu trúc tương tự.

• Khái niệm về giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ): LOD là nồng độ thấp nhất của chất phân tích có thể phát hiện được nhưng chưa chắc định lượng chính xác, trong khi LOQ là nồng độ thấp nhất có thể định lượng với độ chính xác và độ tin cậy cao.

• Độ thu hồi và độ chính xác: Độ thu hồi thể hiện khả năng thu hồi hoạt chất từ mẫu sau quá trình chiết tách và xử lý mẫu, trong khi độ chính xác phản ánh sự lặp lại của kết quả phân tích trong các điều kiện thử nghiệm tương tự.

• Khái niệm về ma trận mẫu: Ma trận mẫu (gạo, hồ tiêu) có thể ảnh hưởng đến hiệu quả phân tích do các thành phần phức tạp, đòi hỏi quy trình xử lý mẫu và làm sạch phù hợp để giảm thiểu ảnh hưởng ma trận.

Phương pháp nghiên cứu

• Nguồn dữ liệu: Mẫu gạo và hồ tiêu được thu thập từ các vùng sản xuất và xuất khẩu tại Việt Nam. Các hoạt chất nereistoxin, cartap, thiocyclam và thiosultap được chuẩn bị dưới dạng dung dịch chuẩn với nồng độ chính xác.

• Phương pháp phân tích: Mẫu được chiết xuất bằng dung dịch axetonitril và axit formic 1% theo tỷ lệ 1:1, sử dụng siêu âm để tăng hiệu quả chiết. Sau đó, mẫu được làm sạch bằng chiết pha rắn (SPE) sử dụng cacbon đồ họa (GCB) để loại bỏ tạp chất. Phân tích được thực hiện trên hệ thống LC-MS/MS với cột EC 125/2 NUCLEODUR HILIC (3 µm, 125 x 2 mm), pha động gồm acetonitril và dung dịch amonium formate 5 mM có 0,1% axit formic.

• Cỡ mẫu và chọn mẫu: Nghiên cứu sử dụng khoảng 10-15 mẫu gạo và hồ tiêu đại diện cho các vùng sản xuất chính. Phương pháp chọn mẫu ngẫu nhiên có chủ đích nhằm đảm bảo tính đại diện và độ tin cậy của kết quả.

• Timeline nghiên cứu: Thực hiện từ tháng 9 đến tháng 12 năm 2021, bao gồm các bước chuẩn bị mẫu, xây dựng phương pháp, hiệu chuẩn thiết bị, phân tích mẫu và xử lý dữ liệu.

• Kiểm định và hiệu chuẩn: Phương pháp được kiểm định về độ chọn lọc, tuyến tính, LOD, LOQ, độ thu hồi (70-120%), độ lặp lại (2-16%) và độ tái lập nội bộ (10-15%). Giới hạn phát hiện và định lượng lần lượt là 0,003 mg/kg và 0,01 mg/kg.

Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Những phát hiện chính

1. Hiệu quả chiết tách và làm sạch mẫu: Phương pháp chiết xuất bằng dung dịch axetonitril:axit formic (1:1) kết hợp với làm sạch bằng chiết pha rắn GCB cho độ thu hồi các hoạt chất trong khoảng 70-120%, đảm bảo hiệu quả loại bỏ tạp chất và giữ lại hoạt chất cần phân tích.

2. Giới hạn phát hiện và định lượng: LOD đạt 0,003 mg/kg và LOQ đạt 0,01 mg/kg cho cả bốn hoạt chất, đáp ứng yêu cầu giám sát tồn dư thuốc BVTV trong thực phẩm theo tiêu chuẩn quốc tế.

3. Độ chính xác và độ lặp lại: Độ lặp lại trong khoảng 2-16%, độ tái lập nội bộ 10-15%, cho thấy phương pháp có tính ổn định và độ tin cậy cao khi áp dụng phân tích mẫu thực tế.

4. Tỷ lệ mở rộng không chắc chắn (expanded uncertainty): Đối với các hoạt chất nereistoxin, cartap, thiocyclam và thiosultap lần lượt là 40%, 40%, 36% và 42%, phù hợp với các tiêu chuẩn phân tích hóa học hiện đại.

Thảo luận kết quả

Kết quả nghiên cứu cho thấy phương pháp LC-MS/MS kết hợp với quy trình chiết xuất và làm sạch mẫu được tối ưu hóa có khả năng phát hiện tồn dư thuốc BVTV nhóm nereistoxin trên nền mẫu gạo và hồ tiêu với độ nhạy và độ chính xác cao. So sánh với các nghiên cứu trước đây, giới hạn phát hiện và định lượng của phương pháp này thấp hơn hoặc tương đương, đáp ứng tốt yêu cầu giám sát an toàn thực phẩm.

Việc sử dụng cột HILIC giúp cải thiện khả năng tách các hoạt chất phân cực trong nhóm nereistoxin, đồng thời giảm thiểu ảnh hưởng của ma trận mẫu phức tạp. Quy trình làm sạch bằng GCB hiệu quả trong việc loại bỏ các tạp chất hữu cơ và sắc tố, nâng cao độ chọn lọc của phương pháp.

Biểu đồ thể hiện độ thu hồi và độ lặp lại của từng hoạt chất trên nền mẫu gạo và hồ tiêu minh họa sự ổn định và hiệu quả của phương pháp. Bảng so sánh LOD, LOQ với các tiêu chuẩn quốc tế chứng minh tính phù hợp của phương pháp trong giám sát tồn dư thuốc BVTV.

Kết quả này có ý nghĩa quan trọng trong việc hỗ trợ các cơ quan quản lý thực phẩm và nông nghiệp kiểm soát chất lượng sản phẩm, bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng và nâng cao giá trị xuất khẩu nông sản Việt Nam.

Đề xuất và khuyến nghị

1. Áp dụng rộng rãi phương pháp LC-MS/MS trong giám sát tồn dư thuốc BVTV: Khuyến khích các phòng thí nghiệm kiểm nghiệm thực phẩm và nông sản áp dụng phương pháp đã xây dựng để nâng cao độ chính xác và độ tin cậy trong phát hiện nhóm thuốc nereistoxin, nhằm đảm bảo an toàn thực phẩm.

2. Tăng cường đào tạo và trang bị thiết bị hiện đại: Đào tạo chuyên sâu cho cán bộ kỹ thuật về kỹ thuật LC-MS/MS và quy trình xử lý mẫu, đồng thời đầu tư trang thiết bị phân tích hiện đại tại các trung tâm kiểm nghiệm để đáp ứng nhu cầu giám sát ngày càng cao.

3. Xây dựng chương trình giám sát định kỳ: Thiết lập các chương trình giám sát tồn dư thuốc BVTV nhóm nereistoxin trên các sản phẩm gạo và hồ tiêu xuất khẩu, với tần suất phù hợp nhằm phát hiện sớm và xử lý kịp thời các trường hợp vượt ngưỡng cho phép.

4. Tuyên truyền nâng cao nhận thức người sản xuất: Hướng dẫn nông dân và doanh nghiệp sản xuất, chế biến nông sản về việc sử dụng thuốc BVTV đúng liều lượng, đúng thời gian cách ly, tránh sử dụng quá mức để giảm thiểu tồn dư thuốc trong sản phẩm.

Đối tượng nên tham khảo luận văn

1. Các cơ quan quản lý nhà nước về an toàn thực phẩm và nông nghiệp: Sử dụng kết quả nghiên cứu để xây dựng chính sách, quy định và chương trình giám sát tồn dư thuốc BVTV, đảm bảo chất lượng nông sản xuất khẩu.

2. Phòng thí nghiệm kiểm nghiệm thực phẩm và nông sản: Áp dụng phương pháp phân tích LC-MS/MS đã được hiệu chuẩn để nâng cao năng lực phân tích, đáp ứng yêu cầu kiểm soát chất lượng sản phẩm.

3. Doanh nghiệp xuất khẩu gạo và hồ tiêu: Tham khảo để kiểm soát chất lượng sản phẩm, đảm bảo tuân thủ các tiêu chuẩn quốc tế, nâng cao uy tín và khả năng cạnh tranh trên thị trường quốc tế.

4. Các nhà nghiên cứu và sinh viên chuyên ngành kỹ thuật hóa học, công nghệ thực phẩm: Học hỏi quy trình xây dựng và hiệu chuẩn phương pháp phân tích hiện đại, phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo về an toàn thực phẩm và phân tích hóa học.

Câu hỏi thường gặp

1. Phương pháp LC-MS/MS có ưu điểm gì trong phân tích thuốc BVTV nhóm nereistoxin?
   Phương pháp LC-MS/MS cho độ nhạy cao, khả năng phân biệt các hoạt chất tương tự, giới hạn phát hiện thấp (0,003 mg/kg), phù hợp với yêu cầu giám sát an toàn thực phẩm hiện đại.

2. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của phương pháp là bao nhiêu?
   LOD là 0,003 mg/kg và LOQ là 0,01 mg/kg, đáp ứng tiêu chuẩn quốc tế về giám sát tồn dư thuốc BVTV trong thực phẩm.

3. Phương pháp xử lý mẫu có những bước nào?
   Mẫu được chiết xuất bằng dung dịch axetonitril và axit formic 1% (1:1), làm sạch bằng chiết pha rắn sử dụng cacbon đồ họa (GCB), sau đó phân tích bằng LC-MS/MS.

4. Độ chính xác và độ thu hồi của phương pháp như thế nào?
   Độ thu hồi đạt 70-120%, độ lặp lại 2-16%, độ tái lập nội bộ 10-15%, cho thấy phương pháp ổn định và tin cậy.

5. Phương pháp này có thể áp dụng cho các loại mẫu nào?
   Phương pháp phù hợp để phân tích tồn dư thuốc BVTV nhóm nereistoxin trên nền mẫu gạo và hồ tiêu, có thể mở rộng cho các loại nông sản khác với quy trình xử lý mẫu thích hợp.

Kết luận

• Đã xây dựng thành công phương pháp LC-MS/MS định lượng nhóm thuốc BVTV nereistoxin trên nền mẫu gạo và hồ tiêu với độ nhạy và độ chính xác cao.
• Phương pháp có giới hạn phát hiện 0,003 mg/kg và giới hạn định lượng 0,01 mg/kg, phù hợp với tiêu chuẩn an toàn thực phẩm quốc tế.
• Độ thu hồi và độ lặp lại của phương pháp đảm bảo tính ổn định và tin cậy trong phân tích thực tế.
• Nghiên cứu góp phần nâng cao năng lực giám sát tồn dư thuốc BVTV, bảo vệ sức khỏe người tiêu dùng và nâng cao giá trị xuất khẩu nông sản Việt Nam.
• Đề xuất áp dụng phương pháp trong các chương trình giám sát định kỳ và đào tạo kỹ thuật viên, đồng thời tăng cường tuyên truyền sử dụng thuốc BVTV hợp lý.

Các cơ quan quản lý và phòng thí nghiệm nên triển khai áp dụng phương pháp này rộng rãi, đồng thời tiếp tục nghiên cứu mở rộng cho các loại mẫu nông sản khác nhằm đảm bảo an toàn thực phẩm toàn diện.

Trích đoạn nội dung tài liệu

CHƯƠNG 1. 5-5-6 tt TEEkEEEE E111 1111111111111 tkrrker 2 1. THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬTT. Thuốc bảo vệ thực VẬT.

Phan loại thuốc BVTV. THUOC BẢO VỆ THỰC VẬT NHÓM NEREISTOXIN. ch TH TT HT nh TH TH nh TH Hà TH Hà nành rè 9 1. NGUYÊN NHÂN TÒN DƯ THUỐC BVTV TRONG NÔNG SẢN.

Dư lượng thuốc BVTV trong nông sản có nguồn gốc thực vật. Nguyên nhân tồn dư thuốc BVTV trong nông sản. MỘT SỐ NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT ));(9) 82397194) 07. PHƯƠNG PHAP PHAN TICH SAC KY LONG KET HOP DAU DO 4:08:00.

Đầu dò khối phổ.------2-©e+©+++E+++Ek+SEEEEEkEEEkkEEkEEkkerkkerkkerkrerkrerkree 15 vi 1. Thông số đánh giá hiệu quả phương pháp sắc ký. THÁM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP. - Tính đặc hiệu.

Khoảng tuyến tính, khoảng làm việc và đường chuân. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ). ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHÔNG ĐẢM BẢO ĐO. Định lượng độ không đảm bảo đo từ dữ liệu phê duyệt phương pháp.

Nghiên cứu độ chum- Tinh uprecision. Nghiên cứu độ đúng- Tính t¡as. ó5 S13 St EsEsEEereeeersreererree 29 CHƯƠNG 2. NOI DUNG VA PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.

ĐÓI TƯỢNG VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU. THIẾT BỊ, DỤNG CỤ VÀ HÓA CHÁTT. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM. Khảo sát điều kiện thực hiện sắc kí lỏng ghép detector khối phổ.

Tối ưu mảnh khối các hoạt chất. Khảo sát thời gian ôn định của dung dịch chuẩn. Khảo sát điều kiện xử lí mẫu .--- ckSk‡EE£EE+EE+EEEEEEEEEEEEkEEkerkrkerkerkrrk 39 2. Khảo sát dung môi chiẾt.

Khảo sát phương pháp làm sạch. THẢM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP. Tinh Chom loc. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng định lượng (LOQ).

ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHÔNG ĐẢM BẢO ĐO. Độ không đảm bảo đo của độ chụm-Uprecision. Độ không đảm bảo đo của độ đúng-Ubias. Độ chệch của độ thu hồi.

Độ không đảm bảo đo của thê tích thêm chuẩn. Độ không đảm bảo đo của nồng độ chuẩn .---¿-c5z©cse5csc+: 50 CHUONG 3. KET QUA VA BAN LUAN. DIEU KIEN VAN HANH THIET BI SAC KY GHEP KHOI PHO.

Tdi wu manh kh6i cdc hoat Chat. Pha tinh oo. KET QUA KHAO SAT THOI GIAN ON DINH CUA DUNG DICH 0:10. Dung dịch chuẩn làm việc, 1 IIg/mÌL.

Dung dịch chuân trung gian, 10 tig/mlL. KHẢO SÁT ĐIÊU KIỆN XỬ LÝ MẪU. Dung môi chiết mẫu.------2-©e£©+++++++t+++tx++rx+erkeerxesrkesrxerrkrerkrrrrree 65 3. Tỉ lệ dung môi chiết và lượng mẫu.

Quy trình làm sạch mẫu. -- ¿2-5 ©+++++xt+ESEEeEEt+Eerxerxerreerxerxrrrrrrx 78 3. - Cột chiết pha rắn. Chiết pha rắn phân tán.

PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ MẪU. THẢM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng. cv tt 22 2H11 re 99 3.

Độ tái lặp nội bộ. ƯỚC LƯỢNG ĐỘ KHÔNG ĐẢM BẢO ĐO. Dod không đảm bảo đo của độ chụm-Uprecision. Độ không đảm bảo đo của độ đúng-Ubias.

_ Độ chệch của độ thu hồi. Độ không đảm bảo đo của thê tích thêm chuân. Độ không đảm bảo đo của nồng độ chuẩn. KÉT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ,.

113 ix DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Công thức cu tao nereistonin c.2: Công thức CẤU lẠO CArtAp cessssesssssesssssesssssssssssssssssssssssssssssssssssesssisessssscssisesasisesssecessseces 8 Hình 1.3: Công thức cấu tạo thiocy clam .4: Cong thitc ctu tao thiosultap cescssccsssssssssssssssssssssscsssssssssssssssssssssisesssssessssesasicesssecessseees 9 Hình 1.5: Hình mình họa pedk kéO đÏMÔÌ. - + tk nh Hàn nh HH rệt 17 Hình 2.1: Cầu trúc trên bề mặt cột HILIC.2: Cơ chế tương tác của các hợp chất có độ phân cực cao với cột hypercarb.3: Cơ chế tương tác của các hợp chất kém phân cực với cột hypercarb.4: Quy trình chung xử lý mẫu Hình 2.5: Nhóm chức trên bê mặt cột chiết pha rắn InertSep PRÑS.6: Nhóm chức trên bé mặt cột chiết pha rắn Strdta CI8-E.-cc-cccckcsrirrrerseei 43 Hình 2.7: Nhóm chức trên bé mặt cột chiết pha rắn Bond Elut-SAX.------ecse+ccecseei 44 Hình 3.I: Phân mảnh dự đoán của cartdp, I/%4= Ì ŠU. se cà sksksekkekskrserkerrrerre 52 Hình 3.2: Phân mảnh dự đoán của nereistfoxin, I/%= ÏŠ. c5 se xk+vESseekeseeesseesse 53 Hình 3.3: Phân mảnh dự đoán của thioCyClam, /%= Ì Ÿ7.4: Phân mảnh dự đoán của thiosuÌfqp, Im/%= IS .- cc« xe sekskrseekerserree 54 Hình 3.5: Phân mảnh dự đoán của thiosulfap, m/Z=2 3 ().

«se sekserseeekeerserres 54 Hình 3.6: Sắc kí đô của 4 hoạt chất sử sử dụng cột HILIC để phân FÍCH.ằàcĂSĂSssesexs 55 Hình 3.7: Sắc kí đô của 4 hoạt chất sử sử dung cot C18 dé phan ẨÍCỈ,. cà ĂĂSeSSEsekeeeevrs 55 Hình 3.8: Sắc kí đề của 4 hoạt chất sử sử dụng cột C8 để phân tích Hình 3.9: Sắc kí đô của 4 hoạt chất sử dụng cột hypercarb để phân tích.10: Kết quả khảo sát hệ dung môi chiét E1-E3 vescessccsssesssssssssessssssssesssssssesssssessesssscesses 68 Hình 3.11: Kết quả khảo sát hệ dung môi chiết E.12: Kết quả khảo sát hé dung mOi chiét E7-E9 cescesscssssesssssssssessssssssessssssssesssscsssesssseesses 73 Hình 3.13: So sánh các hệ dung môi Hình 3.14: Dịch chiết mẫu với các tỉ lệ dung môi:lượng mẫu lần lượt là R1, R2, R3, R4.15: Dịch chiết mẫu với các tỉ lệ dung môi:lượng mẫu khác nha.-e-ce-cccsecccs 77 Hinh 3.16: Dich chiét mau không làm sạch và làm sạch theo các quy trinh C1,C2,C3,C4 va C5 (từ trái qua phải) đối với nền MAU TOU ceesseeccseesssssssssssssssssssssssssssssssssssecsssssessisesssisessiseessisees 78 Hình 3.17: Độ thu hôi khi sử dụng các quy trình làm sạch C1-C5.18: Độ thu hôi khi sử dụng các quy trình chiết pha rắn bằng PSA.19: Độ thu hôi khi sử dụng các quy trình chiết pha rắn bằng GCB.20: Độ thu hôi khi sử dụng các quy trình chiết pha rắn bằng C18.21: Dịch chiết mẫu không làm sạch và làm sạch theo các quy trình D4, D5 và D6 (từ trái qua phải) đối Voi NEN MAU THOU ceeseecsecsssesssessssessssesssessssssssesssssessesssssessesssseessesssseessesssseeasesess 83 Hinh 3.22: Quy trinh xtt ly mau Phan th CM ecccsecssscssseesssessssesssscsssesssussssesssscsssesssssessesssseeasesssveesses 84 Hình 3.23: Sắc ký đô đánh gid d6 chon loc ctia cartap trong NEN QO cessesssssisssssessssesessiesssvecs 86 Hình 3.24: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của nereistoxin trong nỄn gạo.25: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của thiocyclam trong nỄỀN gạo.26: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của thiosultap trong nỀn gạo .27: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của cartap trong nên tiêu .28: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của nereistoxin trong nễn tiêu.29: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của thiocyclam trong nên tiêu.30: Sắc ký đô đánh giá độ chọn lọc của thiosultap trong nên tiêu .31: Đường chuẩn cartap trong dung môi và nên mẫu .----¿©ccc©ccecccccccse+ 90 Hình 3.32: Đường chuẩn nereistoxin trong dung môi và nên mẫM .33: Đường chuẩn thiocyclam trong dung môi và nễn mẫu .---c©ccccc5cccsc+ 91 Hình 3.34: Đường chuẩn thiocyclam trong dung môi và nễn mẫu .-----©csccc5c5csc+ 91 Hình 3.35: Gid tri S/N tai mức thêm chuẩn 0,001 mg/kg trên nền mẫu gạo.36: Gid tri S/N tai mức thêm chudn 0,001 mg/kg trên nền mẫu tiêu.37: Gid tri S/N tai mức thêm chuẩn 0,003 mg/kg trên nền mẫu gạo.38: Gid tri S/N tai mức thêm chudn 0,003 mg/kg trên nền mẫu tiêu.39: Gid tri S/N tai mức thêm chuẩn 0,01 mg/kg, nên mẫu gạo .40: Giá tri S/N tai mirc thêm chuẩn 0,01 mg/kg, NEN MGU TEU veescesecsersereereeseesessesseseees 96 Hình 3.41: Gid tri S/N tai mức thém chudn 0,05 mg/kg, nen MGU BGO essecscssesssssesssssessssesssvecs 97 Hình 3.42: Giá tri S/N tai mirc thêm chuẩn 0,05 mg/kg, NEN MGU TEU veescesecsersereereeseesessesseseees 98 x1 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Phân loại độ độc thuốc bảo vệ thực vật dựa vào giá trị LD50 (mg/&g) .2: Tính chất hóa lý của một số loại dung môi.-----©cce©ccccxeccrteerxerrrseerxerrrvee 15 Bảng 1.3: Độ lệch chuẩn tương đối chấp nhận được (AOAC).-~««<<cc<cxxsexeeexeexee 24 Bảng 1.4: Độ thu hồi chấp nhận được (AOAC) .- -«c- c xxx tk khiến 25 Bảng 2.1: Hệ số chuyển đổi giữa hoạt chất thương mại và hoạt chất phân tích .2: Nông độ dung dich CHUGN QOC cssessesssssssssesssessssesssucsssessssssssesssssessesssssessessssesasesssseesses 34 Bang 2.3: Pha dung dich chuẩn trung gian nông độ 10 gh.4: Các mảnh ion mẹ và ion CON KhổO Sắt. SE E*E*kEEEESEEkEEESESkEkEkErkrkrkrke 35 Bảng 2.5: Các hệ dung môi chiết mẫu khảo sát .6: Khảo sát tỉ lệ dung môi và lượng HHẪM.-- 22-552 ©5S©ce+cxe+Etecxeerxezreerxesrxrrrs 41 Bảng 2.7: Các hệ chiết pha rắn khảo SGt csscecsssesssssssssssssssssssssssssssisesssssssssssessicssssucssssecesssssssees 45 Bảng 2.8: Các hệ chiết pha rắn phân tán khảo sát .9: Cách pha các dung dịch chuẩn trong dung môï.-ccc+©cccccccvecsccxeesccvee2 46 Bảng 3.1: Kết quả tối tru mảnh KO iscecseessscssssssssesssessssssssesssssessessssssssesssssessesssssessessssesssesssseenses 52 Bảng 3.2: Kết quá khảo sát độ bên dung dịch chuẩn làm việc 1 ug/mL, hoạt chất cartap.3: Kết quả khảo sát độ bên dung dịch chuẩn làm việc 1 g/mL, hoạt chất nereistoxin Bảng 3.5: Kết quá khảo sát độ bên dung dịch chuẩn làm việc I ug/mL, hoạt chất thiosultap 59 Bảng 3.6: Kết quá khảo sát độ bên dung dịch chuẩn trung gian 10 g/mL, hoat chất cartap 60 Bảng 3.7: Kết quá độ bên cúa dụng dịch chuẩn làm việc 10 g/mL, hoat chất nereistoxin.8: Kết quá độ bên cúa dung dịch chuẩn làm việc 10 g/mL, hoat chất thiocyclam .9: Kết quá độ bên của dụng dịch chuẩn làm việc 10 g/mL, hoat chất thiosultap.10: Độ thu hôi khi chiết bằng hệ dung môi E1: HaQ.11: Độ thu hôi khi chiết bằng hệ dung môi E2: H›O 0,1% axit [ortmic.12: Độ thu hôi khi chiết bằng hệ dung môi E3: HaO 1% axit formic.38: Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E4: MeOH.--ccc5cccccccscceei 68 Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E5: MeOH 0,1% axit forHmic. 69 Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E5: MeOH 1% axit fortmic.

69 Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E7: ACN .--cccccccccccceerreere 71 Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E8: ACN 0,1% axit forimie. 72 Độ thu hồi khi chiết bằng hệ dung môi E9: ACN 1% axit formic. 73 Độ thu hôi khi chiết bằng hệ dung môi E10: ACN:HaO tỉ lệ 1:1 chứa 1%F.74 Độ thu hồi khi chiết với tỉ lệ dung môi: lượng mẫu RÑÌ .-----c©cccccss 76 Độ thu hồi khi chiết với tỉ lệ dung môi: lượng mẫu R2 .----cc©ccccc5+ 76 Độ thu hồi khi chiết với tỉ lệ dung môi: lượng mẫu R3.----cc©ccccc5+ 76 Độ thu hồi khi chiết với tỉ lệ dung môi: lượng mẫu Ñ44.-ccccccccccs2 77 Đường chuẩn và ảnh hưởng nên mẫu của 4 chất phân tích.----:-----c-+ 92 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,01 mg/kg (LOQ) trên nền mẫu gạo. 99 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,05 mg/kg (5LOQ) trên nền mẫu gạo.

99 Độ thu hôi ở mức thêm chuẩn 0,01 mg/kg (LOQ) trén nên mẫu tiêu.- 99 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,05 mg/kg (SLOQ) trén nên mẫu tiêu. 100 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,01 mg/kg trên nên mẫu gạo trong 3 ngày. 101 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,05 mg/kg trên nên mẫu gạo trong 3 ngày. 101 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,01 mg/kg trên nên mẫu tiêu, 3 ngày.

101 Độ thu hồi ở mức thêm chuẩn 0,05 mg/kg trên nên mẫu tiêu, 3 ngày. 102 Độ tái lặp nội bộ của phương pháp đối với từng nền mẫu RSDpoại.- 102 Độ không đảm bảo đo dO đỘ CÏHHIHI .- 539k *EESkEskeekkekskreeserrkree 103 Độ chệch của độ thu hồi.-- tri 103 Độ không đảm bao do của nông độ chuẩn. 55c cccecccccccxeerxerrrseerreee 104 Độ không đảm bảo đo của độ HD. «vi Eikrkreeskrekree 104 Độ không đảm bảo do của phương pÌÁ|.