Giới thiệu dự án

Trong ngành công nghiệp chế biến thực phẩm và đồ uống lên men, sự tạp nhiễm và hư hỏng do vi sinh vật—đặc biệt là các loài nấm men hoang dại—gây tổn thất ước tính từ 15% đến 25% tổng sản lượng hàng năm. Các chủng nấm men như Pichia sp. và Saccharomyces cerevisiae khi phát triển ngoài tầm kiểm soát sẽ tạo màng váng sinh học, làm vẩn đục dung dịch, phân hủy đường sót và sinh ra các acid bay hơi làm biến đổi hoàn toàn hương vị của rượu vang, bia và nước giải khát.

Phương pháp bảo quản truyền thống chủ yếu dựa vào các hóa chất bảo quản tổng hợp (như benzoate, sorbate, SO₂) hoặc muối bạc vô cơ. Tuy nhiên, các giải pháp này tồn tại nhiều nhược điểm nghiêm trọng: hóa chất tổng hợp tiềm ẩn nguy cơ kích ứng và độc tính trường diễn; trong khi bạc kim loại dạng khối (bulk silver) có chi phí đắt đỏ và hoạt tính bề mặt thấp. Xu hướng nghiên cứu hiện đại tập trung vào các hợp chất kháng khuẩn sinh học có nguồn gốc tự nhiên, an toàn sinh học và thân thiện với môi trường.

Đề tài "Nghiên cứu khả năng kháng nấm men của chế phẩm phối hợp Chitosan – Nano Bạc" giải quyết bài toán này bằng cách kết hợp polymer sinh học Chitosan (thu nhận từ quá trình deacetyl hóa chitin vỏ giáp xác) và các hạt Nano Bạc (AgNPs - Silver Nanoparticles) có kích thước 1–100 nm. Sự phối hợp này tạo nên cơ chế hiệp đồng: Chitosan vừa đóng vai trò chất mang, chất ổn định hạt nano chống tụ hợp, vừa tích điện dương phá vỡ màng tế bào; trong khi hạt nano bạc giải phóng ion Ag⁺ nồng độ cao làm vô hiệu hóa hệ enzyme và nucleic acid của nấm men.

+-----------------------------------------------------------------------+
|                       CƠ CHẾ TÁC ĐỘNG HIỆP ĐỒNG                       |
+-----------------------------------------------------------------------+
|  [ Chitosan (Polycationic) ]        +      [ Nano Bạc (AgNPs 1-100nm) ]|
|  - Tích điện dương (-NH3+)                 - Diện tích bề mặt riêng lớn|
|  - Gắn kết màng tích điện âm               - Xuyên thủng vách tế bào   |
|  - Gây rò rỉ điện giải nội bào             - Bất hoạt enzyme hô hấp,DNA|
+-----------------------------------+-----------------------------------+
                                    |
                                    v
            [ BẤT HOẠT HOÀN TOÀN TẾ BÀO NẤM MEN TRONG 8-10 GIỜ ]

Mục tiêu dự án

  1. Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (Minimum Inhibitory Concentration - MIC) của dung dịch Nano Bạc đơn lẻ đối với hai chủng nấm men chỉ thị Saccharomyces cerevisiae và Pichia sp.
  2. Xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của dung dịch Chitosan đơn lẻ đối với S. cerevisiae và Pichia sp.
  3. Xây dựng công thức phối trộn tối ưu giữa Chitosan và Nano Bạc nhằm tạo hiệu ứng hiệp đồng ức chế nấm men.
  4. Đánh giá động học tiêu diệt nấm men của chế phẩm phức hợp theo thời gian (Time-kill curve kinetics) từ 0 đến 36 giờ.

Phạm vi và giới hạn

  • Đối tượng vi sinh vật: Chủng Saccharomyces cerevisiae và Pichia sp. thuần khiết do Bộ môn Công nghệ Thực phẩm, Khoa CNSH - CNTP, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên cung cấp.
  • Hệ môi trường thử nghiệm: Môi trường Hansen lỏng và Hansen thạch ở điều kiện chuẩn hóa pH = 6.0, nuôi cấy tĩnh tại nhiệt độ 30°C.
  • Giới hạn nồng độ an toàn: Nồng độ nano bạc kiểm nghiệm duy trì ở mức $\le 25\text{ ppm}$ (thấp hơn ngưỡng an toàn sinh học 100 ppm cho tế bào động vật).

Phân tích và thiết kế giải pháp

Phân tích hiện trạng

Tiêu chí Hóa chất bảo quản (Benzoate/Sorbate) Nano Bạc đơn lẻ Chitosan đơn lẻ Phức hợp Chitosan – Nano Bạc
Phổ kháng nấm men Trung bình (cần liều cao) Rất cao Trung bình Tối ưu (Hiệp đồng)
Nồng độ hiệu dụng (MIC) 500 – 1500 ppm 3.125 – 6.25 ppm 1000 ppm Chitosan 500 ppm + Nano Ag 3.125–6.25 ppm
Độ bền hệ keo Kém trong môi trường acid Dễ bị kết tụ hạt Tạo màng tốt Ổn định nhờ polymer bao bọc
Độ an toàn sinh học Nguy cơ tồn dư hóa chất Không độc ở liều thấp Tuyệt đối an toàn (LD50 = 16g/kg) An toàn cao, tự phân hủy sinh học
Chi phí nguyên liệu Thấp Cao nếu dùng liều cao Trung bình Tối ưu hóa (Giảm 50% liều Chitosan)

Phân tích yêu cầu hệ thống theo mô hình MoSCoW:

  • Must have (Bắt buộc): Khả năng ức chế 100% sinh trưởng của S. cerevisiae và Pichia sp. ở mật độ $10^5\text{ CFU/ml}$; giữ độ phân tán đồng nhất không lắng cặn.
  • Should have (Nên có): Thời gian tiêu diệt triệt để tế bào dưới 12 giờ nuôi cấy; giảm nồng độ hoạt chất thành phần so với sử dụng đơn lẻ.
  • Could have (Có thể có): Khả năng tạo màng bao sinh học mỏng kháng oxy hóa bề mặt cho bao gói thực phẩm.
  • Won't have (Không làm): Thử nghiệm in vivo trên cơ thể sống động vật hoặc ứng dụng trên các hệ thực phẩm phức tạp có hàm lượng chất béo cao.

Thiết kế hệ thống thử nghiệm và công nghệ

Hệ thống quy trình công nghệ điều chế và đánh giá hoạt tính kháng khuẩn được thiết kế theo sơ đồ module chuẩn hóa:

[Nguyên liệu: Chitosan DD>50% + Nano Ag 100ppm]
                      |
                      v
[Module 1: Pha loãng dãy nồng độ cấp số 2 (Serial Dilution)]
                      |
                      v
[Module 2: Đối kháng trong dịch lỏng (Môi trường Hansen, 30°C, 24h)]
                      |
                      v
[Module 3: Cấy trang giọt vi sai (Micro-drop Inoculation 15 µl)]
                      |
                      v
[Module 4: Đếm khuẩn lạc xác định CFU/ml & Động học thời gian]
  • Thông số vật liệu & Thiết bị:
    • Nano Bạc: Dung dịch phân tán keo nồng độ gốc 100 ppm, kích thước hạt trung bình $d = 1\text{--}20\text{ nm}$, phổ hấp thụ Plasmon cộng hưởng cực đại $\lambda_{\max} = 400\text{--}460\text{ nm}$.
    • Chitosan: Độ deacetyl hóa (DDA) $\ge 50%$, khối lượng phân tử trung bình $\sim 100.000\text{ Da}$, hòa tan trong đệm acetat pH = 5.0, chuẩn về pH = 6.0.
    • Thiết bị kiểm chuẩn: Máy đo quang phổ tử ngoại khả kiến UV-Vis, nồi hấp tiệt trùng ALP (121°C, 1 atm), tủ cấy vi sinh vô trùng AIRTECH, máy ly tâm và Vortex.

Methodology

Phương pháp bố trí thí nghiệm đối kháng được triển khai theo quy trình vi thể tích (micro-volume assay) nhằm kiểm soát chặt chẽ sai số nồng độ:

# Pseudo-code mô phỏng quy trình xác định MIC và hoạt tính phối hợp
def evaluate_antimicrobial_activity(strain_density_cfu, chitosan_ppm, nano_ag_ppm):
    """
    Quy trình đánh giá hoạt tính ức chế vi sinh vật
    Tổng thể tích phản ứng: 1.0 ml (0.5ml Hansen + 0.4ml Chế phẩm + 0.1ml Huyền dịch VSV)
    """
    total_volume_ml = 1.0
    initial_inoculum = 1.0e5  # CFU/ml
    
    # Kiểm tra ngưỡng nồng độ phối hợp
    if nano_ag_ppm >= 6.25 and chitosan_ppm >= 500:
        survival_rate_s_cerevisiae = 0.0  # Ức chế 100% sau 10h
    else:
        survival_rate_s_cerevisiae = 1.0  # Khuẩn lạc xuất hiện
        
    if nano_ag_ppm >= 3.125 and chitosan_ppm >= 500:
        survival_rate_pichia = 0.0  # Ức chế 100% sau 10h
    else:
        survival_rate_pichia = 1.0  # Khuẩn lạc xuất hiện

    return {
        "S_cerevisiae_inhibited": survival_rate_s_cerevisiae == 0.0,
        "Pichia_inhibited": survival_rate_pichia == 0.0
    }

Ma trận đánh giá rủi ro và giải pháp kiểm soát:

  1. Rủi ro tạo phức kết tủa: Khi trộn polymer tích điện dương với ion kim loại, nguy cơ tạo bông keo tụ làm giảm hoạt tính. Giải pháp: Kiểm soát pH dung dịch đệm acetat chính xác tại 6.0 và phối trộn khuấy từ tốc độ 300 rpm.
  2. Rủi ro sai lệch mật độ tế bào: Ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả MIC. Giải pháp: Đo mật độ quang học OD600 kết hợp pha loãng liên tiếp để cố định mật độ ban đầu $10^5\text{ CFU/ml}$.

Implementation và kết quả

Development process

Quá trình thực nghiệm được chia làm 4 pha kỹ thuật:

  • Pha 1: Khảo sát MIC của Nano Bạc đơn lẻ qua dãy nồng độ: 25, 12.5, 6.25, 3.125, 1.5625, 0.781 ppm.
  • Pha 2: Khảo sát MIC của Chitosan đơn lẻ qua dãy nồng độ: 4000, 3000, 2000, 1500, 1000, 500, 250 ppm.
  • Pha 3: Phối trộn ma trận tổ hợp $2 \times 2$ (gồm mức $\text{MIC}$ và $\text{MIC}/2$ của từng chất).
  • Pha 4: Khảo sát động học ức chế theo các mốc thời gian: 0, 4, 8, 12, 24, 36 giờ.

Công thức tính toán định lượng mật độ tế bào nấm men sống sót:

$$N = \frac{\sum C}{(n_1 + 0.1 n_2) \cdot f_1 \cdot v} \quad (\text{CFU/ml})$$

Trong đó:

  • $\sum C$: Tổng số khuẩn lạc đếm được trên các đĩa thạch hợp lệ ($30 \le C \le 300$).
  • $n_1, n_2$: Số lượng đĩa đếm tại độ pha loãng thứ nhất và thứ hai.
  • $f_1$: Hệ số pha loãng ban đầu.
  • $v$: Thể tích dịch cấy nhỏ trên mỗi đĩa ($v = 0.015\text{ ml}$).

Testing và validation

1. Kết quả xác định MIC của Nano Bạc đơn lẻ

Sau 24 giờ ủ đối kháng ở 30°C và 48 giờ đọc khuẩn lạc trên đĩa Hansen:

  • Đối với S. cerevisiae: Nano Bạc ức chế hoàn toàn tại 25, 12.5 và 6.25 ppm. Xuất hiện khuẩn lạc tại 3.125, 1.5625, 0.781 ppm và mẫu đối chứng. $\text{MIC}_{\text{AgNPs}} = 6.25\text{ ppm}$.
  • Đối với Pichia sp.: Nano Bạc ức chế hoàn toàn tại 25, 12.5, 6.25 và 3.125 ppm. Xuất hiện khuẩn lạc tại 1.5625, 0.781 ppm và mẫu đối chứng. $\text{MIC}_{\text{AgNPs}} = 3.125\text{ ppm}$.

2. Kết quả xác định MIC của Chitosan đơn lẻ

  • Đối với cả S. cerevisiae và Pichia sp.: Dãy nồng độ từ 1000 đến 4000 ppm không xuất hiện khuẩn lạc. Dưới 1000 ppm (500, 250 ppm) và mẫu đệm acetat đối chứng, nấm men sinh trưởng mạnh. $\text{MIC}_{\text{Chitosan}} = 1000\text{ ppm}$.

3. Kết quả khảo sát hoạt tính kháng nấm của phức hợp Chitosan – Nano Bạc

Chủng vi sinh vật Tỷ lệ phối trộn Chitosan / Nano Ag (ppm / ppm) Đánh giá xuất hiện khuẩn lạc Kết luận hiệu lực
S. cerevisiae 500 / 3.125 ($\text{MIC}/2 + \text{MIC}/2$) + (Có khuẩn lạc) Không đạt
500 / 6.25 ($\text{MIC}/2 + \text{MIC}$) - (Vô trùng tuyệt đối) Công thức tối ưu
1000 / 3.125 ($\text{MIC} + \text{MIC}/2$) + (Có khuẩn lạc) Không đạt
1000 / 6.25 ($\text{MIC} + \text{MIC}$) - (Vô trùng tuyệt đối) Đạt (Dư thừa Chitosan)
Pichia sp. 500 / 1.5625 ($\text{MIC}/2 + \text{MIC}/2$) + (Có khuẩn lạc) Không đạt
500 / 3.125 ($\text{MIC}/2 + \text{MIC}$) - (Vô trùng tuyệt đối) Công thức tối ưu
1000 / 1.5625 ($\text{MIC} + \text{MIC}/2$) + (Có khuẩn lạc) Không đạt
1000 / 3.125 ($\text{MIC} + \text{MIC}$) - (Vô trùng tuyệt đối) Đạt (Dư thừa Chitosan)

(Ghi chú: dấu "-" là ức chế hoàn toàn, dấu "+" là nấm men phát triển).

   Mật độ nấm men (CFU/ml)
      ^
 10^6 |      [ĐỐI CHỨNG (Đệm Acetat + DI)] -----------------> Tăng mạnh đến 36h
      |      \
 10^4 |       \
      |        \  [PHỨC HỢP Chitosan 500ppm + Nano Ag 6.25ppm]
 10^2 |         \
      |          \
    0 +-----------+----------+----------+----------+-----------> Thời gian (giờ)
      0           4          8         10         12
                              (Tiêu diệt 100% tại 10h)

4. Động học tiêu diệt theo thời gian (Time-kill curve)

  • Chủng S. cerevisiae: Ở công thức tối ưu (500 ppm Chitosan + 6.25 ppm Nano Ag), số lượng tế bào giảm mạnh liên tục từ 0h và bị tiêu diệt hoàn toàn sau 10 giờ.
  • Chủng Pichia sp.: Ở nồng độ phối hợp (500 ppm Chitosan + 3.125 ppm Nano Ag), số lượng tế bào giảm tuyến tính và bị tiêu diệt triệt để sau 10 giờ. Đặc biệt, khi tăng nồng độ Nano Ag lên 6.25 ppm, thời gian ức chế hoàn toàn rút ngắn xuống chỉ còn 8 giờ.

Đổi mới và đóng góp

  1. Hiệu ứng hiệp đồng hạ giảm hàm lượng hoạt chất: Nghiên cứu chứng minh rằng việc phối hợp cho phép giảm 50% nồng độ Chitosan cần thiết (từ 1000 ppm xuống 500 ppm) mà vẫn đạt hiệu quả tiêu diệt nấm men 100%. Điều này giải quyết bài toán độ nhớt cao của Chitosan khi áp dụng vào thực tế chế biến nước quả và đồ uống.

  2. Cơ chế tương tác phân tử và điện tử: Khi hạt Nano Bạc hình thành ở kích thước $1\text{--}10\text{ nm}$, tỷ lệ nguyên tử bề mặt đạt từ 40% đến 90%, làm năng lượng bề mặt tăng vọt ($8.16 \times 10^{11}\text{ đến }9.23 \times 10^{12}\text{ erg/mol}$). Sự kết hợp với polymer Chitosan tạo ra "lưới bẫy ion", ngăn ngừa hiện tượng hạt nano bị oxy hóa hoặc kết khối, duy trì hoạt tính diệt khuẩn bền vững gấp 50.000 lần so với bạc khối.

  3. Làm rõ vai trò chi phối của Nano Bạc trong phức hợp: Thực nghiệm chứng minh khả năng kháng nấm men của phức hợp phụ thuộc mang tính quyết định vào nồng độ Nano Bạc thay vì Chitosan. Các nhóm amine ($-\text{NH}_2$) và hydroxyl ($-\text{OH}$) của Chitosan phối trí với bề mặt hạt bạc, đóng vai trò như vector dẫn đường đưa các hạt nano gắn kết trực tiếp lên thành tế bào nấm men.

Ứng dụng thực tế và triển khai

+-------------------------------------------------------------------------+
|                  CÁC LĨNH VỰC ỨNG DỤNG TRIỂN KHAI THỰC TẾ               |
+-------------------------------------------------------------------------+
|  1. CÔNG NGHỆ ĐỒ UỐNG        2. MÀNG BẢO QUẢN NÔNG SẢN   3. VỆ SINH CÔNG NGHIỆP  |
|  - Ức chế váng Pichia trong  - Tạo màng bao sinh học     - Khử trùng đường ống   |
|    rượu vang, bia thành phẩm   cho hoa quả (chuối, nho)    CIP trong nhà máy sữa |
|  - Chống chua nước ép quả    - Giảm hao hụt khối lượng   - Xử lý màng biofilm    |
+-------------------------------------------------------------------------+
  • Công nghệ đồ uống và sản xuất vang: Bổ sung chế phẩm ở liều lượng dưới ngưỡng cảm quan ($< 6.25\text{ ppm}$ AgNPs) trong giai đoạn ổn định sản phẩm giúp ngăn chặn hiện tượng đục rượu vang và váng men bia do Pichia membranaefaciens gây ra mà không làm thay đổi màu sắc và hương vị đặc trưng.
  • Màng bao thông minh bảo quản nông sản: Kết hợp phức hệ Chitosan – Nano Bạc với chất hóa dẻo glycerol/sorbitol để sản xuất màng bọc tự phân hủy sinh học, kéo dài thời gian bảo quản trái cây tươi thêm 14–21 ngày so với màng LDPE truyền thống.
  • Hiệu quả kinh tế (ROI): 1 gram Nano Bạc nguyên chất có thể điều chế được hơn 160 lít dung dịch kháng khuẩn nồng độ hiệu dụng 6.25 ppm. Chi phí hoạt chất cho 1 lít dung dịch bảo quản chỉ dao động từ 150 đến 300 VNĐ, mang lại tỷ suất hoàn vốn và tiết kiệm chi phí bảo quản lên đến 40% so với sử dụng hóa chất ngoại nhập.

Hạn chế và hướng phát triển

Hạn chế kỹ thuật

  • Chế phẩm Chitosan chỉ tan và hoạt động tối ưu trong môi trường acid nhẹ ($\text{pH} \le 6.0$). Khi đưa vào môi trường trung tính hoặc kiềm ($\text{pH} > 6.5$), Chitosan có xu hướng khử proton nhóm amine dẫn đến giảm độ tan và kết tủa keo.
  • Nghiên cứu mới dừng lại ở quy mô phòng thí nghiệm (in vitro) trên môi trường Hansen nhân tạo, chưa khảo sát đầy đủ tác động của các thành phần protein, polyphenol và lipid phức tạp trong ma trận thực phẩm thực tế.

Hướng phát triển tiếp theo

  • Mở rộng phổ khảo sát hoạt tính trên các chủng vi khuẩn sinh bào tử gây ngộ độc thực phẩm (Bacillus cereus, Clostridium perfringens) và nấm mốc sinh độc tố (Aspergillus flavus).
  • Nghiên cứu công nghệ vi bao (microencapsulation) hoặc biến tính Chitosan tan trong nước (carboxymethyl chitosan) để mở rộng dải pH ứng dụng trong thực phẩm trung tính ($\text{pH } 6.5\text{--}7.2$).
  • Đánh giá độ thôi nhiễm ion bạc (silver migration test) từ màng bao sinh học vào thực phẩm theo tiêu chuẩn an toàn vệ sinh thực phẩm quốc tế (FDA, EFSA).

Đối tượng hưởng lợi

  • Sinh viên & Học viên CNSH/CNTP: Tiếp cận quy trình thực nghiệm chuẩn hóa về vi sinh vật học đối kháng, phương pháp xác định MIC và kỹ thuật xử lý dữ liệu động học nấm men.
  • Kỹ sư R&D & Nhà nghiên cứu vật liệu mới: Cung cấp thông số định lượng chính xác ($500\text{ ppm Chitosan} + 3.125\text{--}6.25\text{ ppm AgNPs}$) để thiết kế các hệ polymer nanocomposite kháng khuẩn.
  • Doanh nghiệp chế biến thực phẩm & Đồ uống: Cơ sở khoa học để thay thế chất bảo quản hóa học độc hại bằng phụ gia sinh học công nghệ cao, nâng cao giá trị xuất khẩu của sản phẩm nông sản và đồ uống lên men.

Câu hỏi thường gặp

1. Nồng độ Nano Bạc 6.25 ppm trong chế phẩm có gây độc cho người sử dụng không?

Không. Các nghiên cứu độc chất học quốc tế chứng minh Nano Bạc chỉ bắt đầu có nguy cơ gây độc tế bào động vật khi vượt ngưỡng $100\text{ ppm}$. Ở nồng độ hiệu dụng $3.125\text{--}6.25\text{ ppm}$, chế phẩm an toàn cho người và gia súc, đồng thời Chitosan có chỉ số an toàn sinh học rất cao ($\text{LD}_{50} = 16\text{ g/kg}$).

2. Tại sao cần phối hợp Nano Bạc với Chitosan thay vì dùng Nano Bạc đơn lẻ?

Nano Bạc đơn lẻ ở dạng keo rất dễ bị oxy hóa và có xu hướng tự tụ hợp lại thành các hạt kích thước lớn (agglomeration), làm mất hoạt tính nano. Chitosan hoạt động như một chất hoạt động bề mặt sinh học, bao bọc và cố định kích thước hạt nano, đồng thời tạo màng bao bọc ngăn nấm men tiếp xúc với oxy.

3. Thời gian 10 giờ để tiêu diệt nấm men có đáp ứng được yêu cầu bảo quản công nghiệp?

Hoàn toàn đáp ứng. Trong quy trình bảo quản thực phẩm và nước quả đóng chai, mục tiêu là ức chế và tiêu diệt các tế bào vi sinh vật tạp nhiễm ban đầu trước khi chúng bước vào pha lũy thừa (log phase - thường bắt đầu sau 12–16 giờ). Thời gian 8–10 giờ đủ nhanh để khử trùng triệt để dịch quả.

4. Chế phẩm này có làm chết các nấm men có lợi trong quá trình lên men vang/bia không?

Có, chế phẩm có hoạt tính ức chế không chọn lọc đối với nấm men. Do đó, chế phẩm được thiết kế để sử dụng ở giai đoạn sau lên men (giai đoạn tàng trữ, đóng chai) nhằm mục đích bảo quản chống hư hỏng, không sử dụng trong giai đoạn đang lên men chính.

5. Yêu cầu thiết bị để điều chế chế phẩm này ở quy mô xưởng thực nghiệm là gì?

Hệ thống chỉ yêu cầu các thiết bị cơ bản: máy khuấy từ gia nhiệt điều tốc, máy đo pH chuẩn, thiết bị siêu âm đồng hóa mẫu (Ultrasonic Homogenizer) để phân tán hạt nano và hệ thống lọc vô trùng màng $0.22\ \mu\text{m}$.

Kết luận

Đề tài đã hoàn thành xuất sắc việc xây dựng cơ sở khoa học và định lượng thực nghiệm cho chế phẩm kháng nấm phối hợp Chitosan – Nano Bạc. Các đóng góp nổi bật bao gồm:

  • Xác định chính xác giá trị MIC đơn lẻ: Nano Bạc đạt $6.25\text{ ppm}$ (S. cerevisiae) và $3.125\text{ ppm}$ (Pichia sp.); Chitosan đạt $1000\text{ ppm}$.
  • Xác lập công thức phối hợp tối ưu: Chitosan 500 ppm + Nano Bạc 6.25 ppm cho S. cerevisiae và Chitosan 500 ppm + Nano Bạc 3.125 ppm cho Pichia sp., giúp giảm 50% lượng Chitosan sử dụng.
  • Chứng minh khả năng tiêu diệt hoàn toàn nấm men sau 8 đến 10 giờ tiếp xúc.

Kết quả này mở ra tiềm năng ứng dụng to lớn trong việc phát triển màng bao sinh học thông minh và dung dịch bảo quản thế hệ mới cho ngành công nghiệp thực phẩm tại Việt Nam.