Luận Văn Thạc Sĩ: Xác Định Nhanh Các Loại Carbapenemase Trong Enterobacteriaceae Và Pseudomonas Spp Bằng Thử Nghiệm Sinh Hóa

• Tác giả: Lê Hoài Cường
• Người hướng dẫn: PGS. Võ Thị Chi Mai
• Trường học: Đại học Bách Khoa - Đại học Quốc gia TP. Hồ Chí Minh
• Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học
• Đề tài: Xác định nhanh các loại carbapenemase trong Enterobacteriaceae và Pseudomonas spp. bằng thử nghiệm sinh hóa
• Loại tài liệu: Luận văn thạc sĩ
• Năm xuất bản: 2016
• Địa điểm: TP. Hồ Chí Minh

• LỜI CẢM ƠN
• TÓM TẮT LUẬN VĂN
• 1. CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
• 1.1. Tổng quan về đối tượng vi sinh vật nghiên cứu
• 1.2. Họ vi khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae
• 1.3. Vi khuẩn Pseudomonas
• 1.4. Hiện tượng kháng kháng sinh
• 1.5. Tổng quan sự kháng thuốc
• 1.6. Nguồn gốc của việc kháng thuốc
• 1.7. Cơ chế đề kháng kháng sinh của vi khuẩn
• 1.7.1. Vi khuẩn sản xuất enzym để ức chế hoặc phá hủy hoạt tính của thuốc
• 1.7.2. Vi khuẩn thay đổi khả năng thẩm thấu của màng tế bào đối với thuốc
• 1.7.3. Vi khuẩn làm thay đổi điểm tác động của thuốc
• 1.7.4. Vi khuẩn thay đổi đường biến dưỡng làm mất tác dụng của thuốc
• 1.8. Carbapenem và cơ chế kháng carbapenem
• 1.8.1. Cơ chế kháng carbapenem
• 1.9. Phát hiện và điều trị nhiễm khuẩn kháng carbapenem
• 1.9.1. Một số phương pháp phát hiện carbapenemase
• 1.9.2. Điều trị nhiễm trùng gây ra bởi vi khuẩn sản xuất carbapenemase
• 1.10. Nghiên cứu trong nước và ngoài nước về tình hình đề kháng kháng sinh
• 2. CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
• 2.1. Đối tượng nghiên cứu
• 2.2. Vi khuẩn kiểm tra chất lượng
• 2.3. Vật liệu nghiên cứu
• 2.4. Thiết bị và dụng cụ
• 2.5. Quy trình thực hiện
• 2.6. Cách tiến hành
• 2.6.1. Chủng vi khuẩn
• 2.6.2. Thử nghiệm Blue – Carba
• 2.7. Xử lý số liệu
• 3. CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
• 3.1. Kết quả khảo sát đối với các chủng họ đường ruột Enterobacteriaceae
• 3.1.1. Tỉ lệ các loại vi khuẩn họ đường ruột Enterobacteriaceae phân lập được trong các loại bệnh phẩm
• 3.1.2. Mức độ đề kháng kháng sinh của vi khuẩn họ Enterobacteriaceae
• 3.1.3. Tỉ lệ họ vi khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae sản xuất carbapenemase bằng thử nghiệm Blue - Carba
• 3.1.3.1. Kết quả Blue – Carba của họ Enterobacteriaceae biết trước kháng carbapenem
• 3.1.3.2. Kết quả Blue – Carba của họ Enterobacteriaceae chọn mù
• 3.2. Kết quả khảo sát đối với các chủng Pseudomonas spp.
• 3.2.1. Tỉ lệ các loại bệnh phẩm phân lập được từ Pseudomonas spp.
• 3.2.2. Mức độ đề kháng kháng sinh của các chủng vi khuẩn Pseudomonas
• 3.2.3. Tỉ lệ Pseudomonas spp. sản xuất carbapenemase bằng Blue – Carba
• 3.2.3.1. Kết quả Blue – Carba của Pseudomonas aeruginosa biết trước kháng carbapenem
• 3.2.3.2. Kết quả Blue – Carba cho Pseudomonas chọn mù
• KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
• TÀI LIỆU THAM KHẢO
• PHỤ LỤC

I. Phương pháp xác định nhanh Carbapenemase

Phương pháp xác định nhanh Carbapenemase là một kỹ thuật quan trọng trong việc phát hiện sớm các vi khuẩn kháng kháng sinh, đặc biệt là trong Enterobacteriaceae và Pseudomonas spp. Nghiên cứu này tập trung vào việc ứng dụng thử nghiệm sinh hóa Blue-Carba để xác định nhanh các loại Carbapenemase. Kỹ thuật này đơn giản, chi phí thấp và có độ nhạy và độ đặc hiệu cao (100%), phù hợp với các phòng thí nghiệm thông thường.

1.1. Cơ sở lý thuyết

Carbapenemase là enzyme được sản xuất bởi vi khuẩn, giúp chúng kháng lại các kháng sinh nhóm carbapenem. Việc phát hiện enzyme này sớm giúp xác định phương án điều trị thích hợp và kiểm soát nhiễm khuẩn. Thử nghiệm sinh hóa Blue-Carba dựa trên nguyên lý phản ứng màu, cho phép xác định nhanh sự hiện diện của Carbapenemase trong các chủng vi khuẩn.

1.2. Quy trình thực hiện

Quy trình thực hiện bao gồm các bước: phân lập vi khuẩn từ bệnh phẩm, định danh vi khuẩn bằng hệ thống tự động VITEK 2, và thực hiện thử nghiệm sinh hóa Blue-Carba. Kết quả được đánh giá dựa trên sự thay đổi màu sắc của môi trường, cho phép xác định nhanh sự hiện diện của Carbapenemase.

II. Ứng dụng trong vi sinh lâm sàng

Nghiên cứu này có ý nghĩa quan trọng trong vi sinh lâm sàng, đặc biệt là trong việc kiểm soát nhiễm khuẩn bệnh viện. Việc phát hiện nhanh Carbapenemase giúp các bác sĩ đưa ra phác đồ điều trị kháng sinh phù hợp, giảm thiểu nguy cơ lây lan các chủng vi khuẩn kháng thuốc.

2.1. Kiểm soát nhiễm khuẩn

Việc phát hiện enzyme Carbapenemase sớm giúp thực hiện các biện pháp kiểm soát nhiễm khuẩn hiệu quả. Điều này đặc biệt quan trọng trong các bệnh viện, nơi có nguy cơ cao lây lan các chủng vi khuẩn kháng thuốc.

2.2. Điều trị kháng sinh

Kết quả từ thử nghiệm sinh hóa Blue-Carba giúp xác định các chủng vi khuẩn kháng carbapenem, từ đó lựa chọn kháng sinh phù hợp. Điều này giúp tăng hiệu quả điều trị và giảm thiểu nguy cơ kháng thuốc.

III. Kết quả và đánh giá

Nghiên cứu đã chứng minh hiệu quả của phương pháp xác định nhanh Carbapenemase bằng thử nghiệm sinh hóa Blue-Carba. Kết quả cho thấy tỷ lệ kháng carbapenem ở Enterobacteriaceae và Pseudomonas spp rất cao, và Blue-Carba là một công cụ đáng tin cậy để phát hiện sớm các chủng vi khuẩn này.

3.1. Độ nhạy và độ đặc hiệu

Blue-Carba có độ nhạy và độ đặc hiệu 100%, đảm bảo kết quả chính xác trong việc phát hiện enzyme Carbapenemase. Điều này làm cho kỹ thuật này trở thành một công cụ quan trọng trong vi sinh lâm sàng.

3.2. Ứng dụng thực tế

Nghiên cứu này là báo cáo đầu tiên tại Việt Nam về việc sử dụng Blue-Carba để phát hiện nhanh Carbapenemase. Kỹ thuật này có thể được áp dụng rộng rãi trong các phòng thí nghiệm, kể cả ở tuyến quận, huyện.